全 文 ：HPLC法测定不同采收期苍耳草中苍耳亭含量①
徐圣秋1 ,雷雨2 ,李伟东2＊ ,蔡宝昌2
(1 江苏省徐州市第一人民医院药剂科 , 江苏 徐州　221002;南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室 ,江苏 南京　
210029)
摘要:目的　确定苍耳草的最佳采收期。方法　用高效液相色谱(HPLC)法测定不同生长采收期苍耳亭的含量。结果
苍耳亭的含量 6 月份最高 , 7 月份含量最低。结论　若以苍耳亭含量为指标 , 苍耳草的最佳采收期为 6 月份。
关键词:苍耳草;不同采收期;苍耳亭;高效液相色谱法;含量测定
中图号:R284.1 文献标志码:A 文章编号:1000-5005(2010)05-0394-02
　　苍耳草为菊科植物苍耳 Xanthium sibiricum
Patr.的全草 ,入药部位为地上干燥部分。苍耳草
别名为卷耳 、地葵 、常思 、进贤菜 、喝起草 、佛耳 、野
茄 、痴头婆 、粘粘葵 、苍子棵等 。具有祛风散热 ,除
湿解毒之功效;民间主要用于治疗感冒 、头风 、头
晕 、鼻渊 、目赤 、目翳 、风湿痹痛 、拘挛麻木 、风癞 、
疗疮 、疥癣 、皮肤骚痒 、痔疮 、痢疾等症[ 1] 。全草含
苍耳苷(strumaro side)、隐苍耳内酯(xanthinin)、
苍耳内酯(xanthumin)、8-(3-异戊烯基)-5 , 7 ,3 ,4-
四羟基黄酮 、咖啡酸 、1 , 4-二咖啡酰奎宁酸 、β-谷
甾醇 、豆甾醇 、二十八醇 、β-香树脂醇等[ 1] 。苍耳
全国均有分布 ,其主要产区有山东的荣城 、文登 、
荷泽 ,江西宜春 ,湖北黄岗 、孝感 ,江苏苏州 、徐州 ,
安徽等。笔者采购江苏徐州不同采收期的苍耳草
进行分析 。
苍耳亭(Xanthatin)属于倍半萜内酯化合物 ,
对该类化合物的研究目前主要集中在其生物活性
上。Favier LS[ 2] 等研究了天然苍耳倍半萜内酯
类及合成系列化合物的抗溃疡活性。其中 , Xan-
thatin 的活性最大 ,能有效抑制由于酸碱而引起
的溃疡。本文应用 HPLC 法对苍耳草不同采收
期苍耳亭含量进行测定 ,结果表明 ,本方法可以很
好的对苍耳亭进行定量。
1　材料
1.1　样品来源
苍耳草药材采自江苏徐州 ,经南京中医药大
学药学院陈建伟教授鉴定为菊科植物苍耳 Xant-
li iurn sihiricum Patr.的干燥全草。药材情况见
表 1:
表 1　样品情况
编号 产地 药材 采收时间
1 江苏徐州 茎叶 20080501
2 江苏徐州 茎叶 20080601
3 江苏徐州 茎叶 20080701
4 江苏徐州 茎叶 20080801
5 江苏徐州 茎叶 20080901
6 江苏徐州 茎叶带少量果实 20081001
1.2　仪器和试剂
Agilent1100 型高效液相色谱仪 , Mett ler
To ledo AG285十万分之一天平 ,医用超声清洗
器(KQ-500E型 ,昆山超声仪器有限公司),甲醇
为色谱纯(美国 Tedia 公司生产),水为娃哈哈纯
净水 ,苍耳亭标准品(由齐齐哈尔大学化工学院张
树军教授提供 ,纯度>98%)。
2　方法与结果
2.1　测定波长的选择
取苍耳亭标准品适量 ,加甲醇制成浓度为0.1
mg/mL 的溶液 ,在 200 ～ 400 nm 波长范围扫描 ,
测得苍耳亭的最大吸收波长λmax为 278 nm 。
2.2　色谱条件
色谱柱:A lltimaTM C18(4.6 mm×250 mm ,5
μm),流动相:甲醇-水(55∶45),流速:1.0 mL/
min ,柱温:25℃, 检测波长:278 nm ,进样量:20
μL。
2.3　对照品溶液的制备
精密称取苍耳亭对照品 10.00 mg 置 100 mL
—394— 南京中医药大学学报 2010 年 9月第 26 卷第 5 期JOURNALOF NANJING TCMUNIVERSITY Vol.26 No.5 Sept.2010
①收稿日期:20100517;修稿日期:20100620
基金项目:江苏省徐州市社会发展项目(XJ08063)
作者简介:徐圣秋(1968-),男 ,江苏徐州人 ,江苏省徐州市第一人民医院副主任中药师。＊通信作者:liweidong0801@163.com
DOI :10.14148/j.issn.1672-0482.2010.05.015
定量瓶中 , 加甲醇至刻度 ,得到浓度为0.100 0
mg/mL 的苍耳亭对照品溶液 。
2.4　供试品溶液的制备
取不同采收期的苍耳草药材适量 , 20 ～ 22℃
自然风干 ,粉碎后过 3号目筛 ,精密称取药材粉末
100 mg ,置 50 mL 具塞锥形瓶中 ,精密加入氯仿
15 mL ,称重 ,室温放置过夜 ,然后超声 30 min ,补
足损失溶剂量 ,摇匀 ,滤过 ,弃去初滤液 ,精密吸取
续滤液 10 mL ,蒸发皿 70℃水浴至干 ,残渣加入
少许甲醇使溶解并转移至 5 mL 容量瓶中 ,放冷 ,
甲醇定容 ,摇匀 ,过 0.45 μm 滤膜 ,作为供试品溶
液。
2.5　线性关系考察
分别精密吸取 50 、100 、150 、200 、250 、300 、
350 、400 、450 μL 对照品溶液 ,置于 10 mL 量瓶
中 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 ,进样 20 μL ,记录色谱
图 ,见插页≫图 1 。
由上表可见 ,苍耳亭在 0.5 ～ 4.5 μg/mL 范
围内 ,其色谱峰面积(A)与浓度(C)呈线性关系 ,
回归方程为:A =104.54C-6.276 4(r =0.999 3)
2.6　精密度试验
取浓度 0.002 0 mg/mL 的苍耳草对照品溶
液按上述色谱条件连续进样 5 次 ,计算苍耳草峰
面积的 RSD 为 0.20%,说明仪器精密度良好。
2.7　稳定性试验
精密称取 2号药材粉末100 mg , 5份 ,按供试
品溶液的制备方法制备 ,分别在 0 、2 、4 、6 、8 、10 、
12 h按上述色谱条件进样 ,苍耳草峰面积的 RSD
为 2.84%,说明供试品在 12 h内基本稳定 。
2.8　重复性试验
取 2号药材粉末 ,按供试品溶液的制备方法 ,
制的 5份供试品溶液 ,分别精密进样 20.0 μL ,照
上述方法进行测定 , 计算苍耳草的平均含量为
0.019 1%,RSD 为 2.55%,说明本方法重复性良
好。
2.9　加样回收率试验
精密称取 2号药材粉末 100 mg ,共 5 份 ,置
于 50 mL具塞锥形瓶中 ,精密加入氯仿 15 mL ,
加入 2 μg/mL 苍耳亭标准溶液 2.5 mL ,按供试
品溶液制备方法操作 ,于 278 nm 处测定吸光度 ,
结果平均回收率为 102.84%, RSD 为 2.02%(n
=5),结果见表 2 。
表 2　苍耳亭加样回收率试验(n=5)
取样量/ mg 样品含量/μg 添加量/μg 测得量/μg 回收率/ % 平均回收率/ % RSD/ %
100.24 6.52 5.00 11.76 104.84
100.47 6.53 5.00 11.50 99.33
100.17 6.51 5.00 11.67 103.16 102.84 2.02
100.30 6.52 5.00 11.68 103.23
100.03 6.50 5.00 11.68 103.63
2.10　样品含量测定
精密称取 1 ～ 6号药材粉末各 100 mg ,按供
试品溶液制备方法操作 ,在以上色谱条件下进样 ,
结果见表 3。
表 3　样品苍耳亭含量测定(n=3)
编号 采收时间 平均含量/ % R SD/ %
1 20080501 0.018 4 1.25
2 20080601 0.019 5 2.42
3 20080701 0.006 8 2.26
4 20080801 0.016 9 0.68
5 20080901 0.012 4 1.40
6 20081001 0.014 2 1.78
3　结论
实验表明 ,采用高效液相色谱法测定苍耳草
中苍耳亭的含量 ,重复性好 ,灵敏可靠。苍耳草的
含量 6 月份最高 , 7 月份含量最低 , 含量在
0.006 8 ～ 0.019 5%之间 ,若以苍耳亭含量为指
标 ,最佳采收期为 6月份 。
参考文献:
[ 1] 南京中医药大学.中药大辞典:上册[ M] .2 版.上海:
上海科学技术出版社 , 2006:1 486.
[ 2] Favie r LS , Maria AOM , Wendel GH , et al.Anti-ul-
cerg enic activity of xanthano lide sesquite rpenes from
Xanthium cavanillesii in rats [ J] .J Ethnopharmaco l ,
2005 , 100:260-267.
(编辑:李伟东)
—395—徐圣秋 ,等:HPLC 法测定不同采收期苍耳草中苍耳亭含量　第 5 期