全 文 ：收稿日期:2013-01-01; 修订日期:2013-05-20
基金项目:国家自然科学基金(No． 21271089)
作者简介:宋琳琳(1982-) ，女(汉族) ，黑龙江佳木斯人，现任佳木斯大学
药学院讲师，硕士学位，主要从事天然药物研究与开发工作．
* 通讯作者简介:沙靖全(1975-) ，男(汉族) ，山东威海人，现任佳木斯大
学药学院副教授，博士学位，主要从事无机药物化学与配位药物化学研究
工作．
苍耳草中总酚酸的含量测定及其抗炎作用研究
宋琳琳，沙靖全* ，赵 宏，赵 岩
(佳木斯大学药学院，黑龙江 佳木斯 154007)
摘要:目的 建立苍耳草总酚酸的含量测定方法并探讨其抗炎作用。方法 用绿原酸做对照品，用 50%甲醇溶液定容，采
用紫外分光光度法在 426 nm处测定吸光度;以阿司匹林为阳性对照，采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法来观察苍耳草的抗
炎作用。结果 苍耳草药材的平均含量为 5． 22%，ＲSD = 0． 17%，并且能明显减轻二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀，与生理盐
水组比较有显著性差异(P ＜ 0． 01)。结论 实验中建立的方法方便准确，可用于苍耳草总酚酸的含量测定并显示具有明
显的抗炎作用。
关键词:苍耳草; 总酚酸; 紫外分光光度法; 抗炎
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2013． 10． 008
中图分类号:Ｒ284． 2;Ｒ285． 5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2013)10-2331-02
Determination of TPA content of Xanthium sibiricum Patrin exWidder and anti － inflam-
matory effect
SONG Lin-lin，SHA Jing-quan* ，ZHAO Hong，ZHAO Yan
(School of Pharmacological Sciences，Jiamusi University，Heilongjiang 154007，China)
Abstract:Objective A method for determination of total phenolic acid in Xanthium sibiricum Patrin exWidder is set up． And
discuss the anti － inflammatory effects of Xanthium sibiricum Patrin exWidder．Methods Total phenolic acid is determined by the
method of spectrophotometry at 426 nm with chlorogenic acid as reference material，and the solution is diluted to scale with 50%
carbinol． Ear swelling induced by xylene in mice edema induced was used to observe the anti － inflammatory effects of Xanthium
sibiricum Patrin exWidder． Ｒesults The contents of total phenolic acid are assayed as 5． 22% of Xanthium sibiricum Patrin ex-
Widder． The ＲSD is 0． 17% ． The ear edema induced by xylene in mice ankle swelling induced was remarkably inhibited by Xanth-
ium sibiricum Patrin exWidder． Conclusion The experimental method is convenient and accurate，and could be used for determi-
nation of total phenolic in Xanthium sibiricum Patrin exWidder and has anti － inflammatory effects．
Key words:Xanthium sibiricum Patrin exWidder; Total phenolic acids(TPA) ; Ultraviolet (UV)spectrophotometry;
Content determination; Anti － inflammation
苍耳草为苍耳属植物苍耳 Xanthium sibiricum Patr 的全草，以
带总苞的果实和全草入药。苍耳草别名为卷耳、地葵、常思、苍子
棵等，具有祛风散热、解毒杀虫的功效，民间主要用于治疗感冒、
头风、头晕、风湿痹痛、皮肤癌、功能性子宫出血及皮肤、阴部瘙痒
症等症［1 ～ 3］。苍耳草其主要成分含挥发油、酚酸类化合物和倍半
菇内醋类化合物等。苍耳草全国均有分布，药用资源丰富、价廉;
被广泛用于六神曲、神曲、治癣、感冒制剂中。
近年来有研究报道［4］，酚酸类化合物在药理学方面可作为
利胆剂和中枢兴奋药，总酚酸具有抗炎、镇痛以及抗过敏作用等。
以绿原酸为代表的咖啡酞奎宁酸类化合物具有抗菌、抗病毒、抗
氧化、抗诱变等作用［5］。目前国内外对苍耳的地上茎叶部分尚
未进行全面地系统研究，对苍耳草的化学成分研究亦主要集中于
挥发油，其他成分研究相对较少。为了确保药用苍耳草质量的可
控、安全、有效，实验建立了苍耳草总酚酸的含量测定方法［6］，为
苍耳草药材的质量评价提供科学依据。
1 材料
1． 1 药材 苍耳草药材，购自佳木斯金天药店，经佳木斯大学药
学院鉴定为苍耳 Xantliiurn sihiricum Patr的干燥地上部分。
1． 2 仪器 FA2004 电子分析天平(上海恒平科学仪器有限公
司) ;756MC紫外可见光分光光度计(上海第三分析仪器厂) ;ＲE
－ 52A旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂) ;DZF － 150 型数显小
型恒温真空干燥箱(郑州长城科工贸有限公司) ;SHZ －Ⅲ循环水
真空泵(郑州长城科教仪器有限公司) ;KQ － 520 DE 医用数控超
声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司) ;试剂:化学试剂均为分
析纯;甲醇(哈尔滨新达化工厂) ;水为蒸馏水;绿原酸对照品(中
国药品生物制品检定所，批号:10753 － 201113) ;100%二甲苯(天
津市化学试剂二厂)。
1． 3 动物 昆明种小鼠 40 只(佳木斯大学动物实验中心提供) ，
体质量 18 ～ 20 g，雄雌各半。
2 方法与结果
2． 1 苍耳草总酚酸含量测定方法的建立
2． 1． 1 对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品 4． 4 mg置 10
ml量瓶中，用 50 %甲醇水溶液溶解，定容，摇匀，作为绿原酸对
照品溶液(0． 44 g /L)。
2． 1． 2 供试品溶液的制备 取苍耳草药材粉碎后过 50 目筛，精
密称取药材粉末 100 mg，置 250 ml圆底烧瓶中，加入 25 ml50 %
甲醇，称重，水浴回流加热 1 h，放置室温，用 50 %甲醇补足原重。
摇匀后过滤，取上清液 1 ml置于 10 ml棕色容量瓶中，定容，作为
供试品溶液。
2． 1． 3 检测波长的选择 将绿原酸对照品溶液和供试品溶液于
200 ～ 400 nm 进行扫描，对照品溶液和供试品溶液均在 326 nm
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATEＲIA MEDICA ＲESEAＲCH 2013 VOL． 24 NO． 10 时珍国医国药 2013 年第 24 卷第 10 期
处有最大吸收峰，故检测波长选择为 326 nm。
2． 1． 4 线性关系考察 精密吸取绿原酸对照品溶液 100，200，
300，400，500 μl 分别置于 10 ml 棕色容量瓶中，用 50%甲醇定
容，以 50%甲醇作空白对照，于 326 nm 处测定吸收值。以对照
品溶液浓度 C(μg /ml)为纵坐标，326 nm 测得的吸光度(A)为横
坐标，绘制标准曲线。得线性回归方程为 Y = 23． 795X － 1． 627，
Ｒ2 = 0． 998 9，绿原酸浓度在 1． 9 ～ 18． 2 μg /ml呈良好的线性关
系。见图 1 。
图 1 线性关系考察
2． 1． 5 精密度试验 取供试品溶液，于 326 nm处测定吸光度，连
续平行测定 5 次，结果 ＲSD为 0． 34%(n = 5) ，说明仪器的精密度
良好。
2． 1． 6 稳定性试验 取供试品溶液每隔 1 h 于 326 nm 处测定光
密度，结果供试品溶液在 5 h内稳定，ＲSD为 0． 70%(n = 5)。
2． 1． 7 重现性试验 精密称取药材粉末 100 mg，共 5 份，按供试
品溶液制备方法操作，于 326 nm测定光密度，结果 ＲSD为1． 08%
(n = 5) ，表明本方法重现性良好。
2． 1． 8 加样回收率试验 精密称取药材粉末 50 mg，共 5 份，置
于 250 ml圆底烧瓶中，加 50%甲醇 25 ml 加入浓度为 4 mg /L 绿
原酸溶液 25 ml按供试品溶液制备方法操作，于 326 nm 处测定
光密度，结果平均回收率为 104． 75%，ＲSD 为 3． 21 %(n = 5)。
结果见表 1。
表 1 绿原酸加样回收率试验
取样量
/mg
样品含量
/mg
对照品添加量
/mg
测得量
回收率
(%)
ＲSD
(%)
50． 35 0． 86 0． 11 0． 975 104． 55
50． 29 0． 86 0． 11 0． 980 109． 09
50． 88 0． 86 0． 11 0． 976 105． 45 3． 21
50． 21 0． 86 0． 11 0． 971 100． 09
50． 15 0． 86 0． 11 0． 975 104． 55
n =5
2． 2 总酚酸的含量测定 精密称取药材粉末各 100 mg，按供试
品溶液制备方法操作，在 326 nm处测定光密度，将数据代入标准
曲线计算出药材中总酚酸的含量。结果见表 2。
表 2 样品总酚酸含量测定
取样量
/mg
吸光度
(A)
含量
(%)
平均含量
(%)
ＲSD
(%)
100． 29 0． 945 5． 21
100． 38 0． 983 5． 49
100． 07 0． 917 5． 05 5． 22 0． 17
100． 22 0． 930 5． 13
100． 31 0． 948 5． 23
n = 5
2． 3 苍耳草的抗炎作用研究
2． 3． 1 供试样品的制备 称取苍耳草药材干燥品 100 g，加入 12
倍量水浸泡，静置 1 h 后，加热至沸腾，保持微沸 1 h，过滤;继续
加入 10 倍量水，加热至沸腾，保持微沸 45 min，过滤;继续加入 8
倍量水，加热至沸腾，保持微沸 30 min，最后将滤液浓缩成高、中、
低剂量组，浓度分别为 0． 15，0． 075 g /ml的水煎液。
2． 3． 2 二甲苯致小鼠耳肿胀法观察苍耳草的抗炎作用研究 取
18 ～ 20 g小鼠 40 只，随机分为 4 组，每组 10 只，即正常模型对照
组(生理盐水组)、阳性对照阿司匹林组(给药浓度为 0． 3 mg /
ml)、苍耳草高剂量组和苍耳草低剂量组，即稀释浓度为 0． 15，
0． 075 g /ml的水煎液。各组灌胃给药每天 1 次，连续 3 d，在末次
给药 60 min后，将二甲苯均匀涂在小鼠右耳的前后两面，每只鼠
0． 02 ml，致炎 4 h后将小鼠处死，剪下左右两耳，用直径 9 mm打
孔器分别在两耳同一部位打下圆形耳片，再用分析天平称取耳片
的质量，以左右耳片重量之差为肿胀度。耳片肿胀度 =致炎侧耳
片质量(右耳)－对照侧耳片质量(左耳)。
按下式计算抑制率，并与对照组进行比较。
抑制率(%)=(对照组肿胀度 －给药组肿胀度)/对照组肿
胀度 × 100%
比较各给药组与对照组的差异。结果见表 3。
表 3 苍耳草对二甲苯致耳廓肿胀的抑制作用(珋x ± s)
组别
剂量 /
mg·ml －1
耳片肿胀度
/mg
抑制率
(%)
对照组 － 3． 71 ± 2． 22 －
模型组 0． 3 1． 64 ± 1． 56* 47． 71
低剂量组 75 6． 09 ± 1． 28＊＊ 64． 15
高剂量组 150 6． 37 ± 1． 45＊＊ 71． 70
与模型组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01
从表 3 可以看出，苍耳草水煎液高剂量组 0． 15 g /ml、低剂量
组 0． 075 g /ml，益母草高、低剂量组均能有效地抑制二甲苯所致
的小鼠耳廓肿胀，与生理盐水组比较，小鼠耳廓肿胀度差异均为
P ＜ 0． 01;说明益母草具有一定的抗炎作用。
3 讨论
本实验采用紫外分光光度法、以绿原酸为参照、在波长 326
nm处测定总酚酸量，其可行性分析结果证实:此方法的准确性、
精密度、稳定性、加样回收率、线性关系均较好。
从抗炎结果显示，苍耳草能抑制二甲苯诱发的小鼠耳廓肿
胀，证明苍耳草具有较好的抗炎作用。从以上实验结果分析，益
母草的抗炎作用可能与其改善局部血液循环，减少渗出，加速吸
收有关。进一步可以通过检测炎症局部的花生四烯酸、前列腺
素、缓激肽等的含量分析其抗炎作用是否与抑制环加氧酶有关。
苍耳草的抗炎作用及其作用机制有待于深入研究。
参考文献:
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时珍国医国药 2013 年第 24 卷第 10 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATEＲIA MEDICA ＲESEAＲCH 2013 VOL． 24 NO． 10