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苦荞麸皮多酚抑制人结肠癌细胞Caco-2增殖活性研究



全 文 :20 15 年 1 1 月中 国粮油学报V〇 1 . 30 , N〇 . l l
第30卷第1 1期 Journa loftheChine seCe realsan dOi lsAssoc iat i onNov .20 1 5
苦荞麸皮多酚抑制人结肠癌细胞
Caco-2 增殖活性研究
李 富华w 张小 利 1 明 建 1 3
(西南大学食品科学学院 、重庆 4007 1 5 )
(华南理工大学轻工与食品学院% 广州 5 10640 )
( 农业部农产品贮藏保鲜质量安全与风险评估重点实验室 3 ,重庆 4007 15 )
摘 要 研究 了 产 自 重庆 商 阳 的苦 荞 ( Fago/jynwntartar ic ii/nL.Gaerth , FG 1 ) 扶皮和 四 川 西 昌 的 苦荞
( Fagop;)Tumtartaricwm L.Gae rth , FG2 ) 扶皮 中 酚类化合物 的 含量、 抗氧化和抗增 殖活性 。 结 果表明 : FG1 和
[022 种苦荞麸皮总盼含量分别 为 ( 26 . 40 ± 0 . 4 1 )和 ( 27 . 00± 0 . 72 ) 11^ 0人£/8 0界 ,且游 离 态是其酚类化合物
的 主要存在形式 (约 占其总酚含量的 93% ); 2 种苦荞麸皮酚提取物均表现 出 一 定的抗氧化性 , 并且 FG2 的抗
氧化能力强于 FG1( P<0 . 05 ) , FG1 和 FG2 的 DPPH 自 由基清除能 力总 IC50值分别为 ( 39 . 56± 2 . 7 6 )和 ( 24_ 69±
0 . 33 ) 盹 - 11^
- 1

还原 力 总 £(: 50值分别 为 ( 9 7 . 92± 1 . 4 ) 和 ( 73 . 1 8 ± 4 . 32 ) 网 . 1111^ 1 ;在抗增殖试验 中 , 与 对照
组相比 , FG1 和 FG2 游 离酚提取物均 能明显抑制人结肠癌细 胞 Caco - 2 增殖 ( P < 0 . 05 ) 。 然 而 ,在不 产生细胞
毒性的浓度范 围 内 ,其结合酚提取物却表现 出 极弱 的抗增殖作用 。
关键词 苦荞麸皮 酚类化合物 抗氧化 人结肠癌细胞 Caco - 2 抗增殖
中图分类号 : S5 17文献标识码 :A文章编号 : 1 003- 0 174 ( 20 1 5 ) 1 1- 003 1- 06
荞麦为寥科一年生宿根性双子叶植物 , 常见的增殖的作用 [ 6 ] 。 另外 ,苹果皮 、葡萄籽 、草莓 、马铃薯
种植品种为甜荞 ( FagWramescuZmftw/iMaen ch ) 和等多酸能显著抑制肿瘤细胞肝癌细胞 HepG2 、结肠
苦荞 ( Fagopyrumtorta ricwmi .Gaerth ) ,荞麦不仅富含癌细胞 Cac o-2 、乳腺癌细胞 MCF-7 增殖 [ 7 4 ] 。 因
膳食纤维 、维生素及高生物价 的蛋 白质等营养元素 , 此 ,植物酿类化合物在抗肿瘤治疗药物研发方面 ,有
还含有芦丁 、槲皮素等功能性成分 [ 1 ] 。 研究发现 ,经很大的研究潜力和开发空间 。
常摄食荞麦或其他全谷物制品能有效降低心脑血管目前 ,对荞麦 中 酚类化合物的研究主要集 中在
疾病 、糖尿病 、某些癌症和死亡的发生率 ,此类保健酚类化合物提取工艺的优化 [ 1 °] ,荞麦酚类提取物化
功效 的 发挥 , 与 其 所含 的 酚 类化 合物 有 密 切关 学抗氧化活性⑴ ] 、含量分布等方面 [ 1 2 ] ,而对荞麦酚
系 [^ 3 ] 。 此外 ,酚类化合物能 明显抑制 肿瘤 细胞增 类化合物抑 制肿瘤细胞增殖活性的研究基本未涉
殖 。 I^e 等 [ 4 ]指出薏米麸皮 甲醇提取物乙酸乙酿浸 及 。 本研究 目 的包括 : 1 ) 以 产 自 重庆酉 阳 的苦荞
出部分的多酸化合物对 HT - 29 和 C0L0_ 2〇5 人体
( FG1 ) 麸皮和四川西昌 的苦荞 ( FG2 )麸皮为试验对结肠癌细脑麵離增殖細 。 蓝雜傭雜 象 ,翻棋誠細雜合态麵含量 ; 2 )通过 Dp _
^癌
HT_ 29 和 SW# 關制細主要題过 pH 自_職力雛原力试验 ,验证靜麸皮游离前恶性肿瘤细胞的比率 、促进肿瘤细胞凋亡来实现 5 。 酚和结合酚提取物 的抗氧化能力 ; 3 )评价苦荞麸皮葡萄多酸对肝癌 HePa l C l c7 细胞的抗增殖作用具有 游离酚和结合麵取物抑 制人结肠癌细胞 ( Cac〇_浓度剂量关系 ,荔枝皮多酚对肝癌细胞 SMMC- 772 1
有抑制作用 ,其机理主要体现在荔枝皮多酚能够诱S°
导癌细胞凋亡 ,并抑制癌细胞 DNA 的合成而起到抗4
1材料 与 方法
基金项 目 : 中央髙校基本科研业务费专项 ( XDJK20 1 2B0 14 ) , 863
计划 (20 1 1 AA 1 00805-  2 )

1 . 1 材料和试剂
0^ : 20 14- 04 - 1 9 本试验选择 2 种产 自 重庆酉阳和四川西昌 的苦作者简介 : 李富华 ,女 , 1 986 年出 生 ,博士 ,食品化学与营养学 m
通讯作者 : 明建 ,男 , 1 972 年出生 , 教授 ,食 品化学与营养学荞作为试验材料 。 苦荞籽粒 (收获于 20 1 2 年 1 0 月 ,
32中 国粮油学报20 15 年第 1 1 期
抽真空包装 ) 粉碎 , 所得粉碎物过 40 目和 60 目筛 ,
收集位于 40 目  ̄ 60 目之间的荞麦麸皮样品 ,密封 ,置^AJ )°
于干燥器内备用 。 式中 :K 表示样品对 DPPH 自 由 基的清除率 ;也
三氯 乙酸 、DPPH 自 由基 :成都科龙化工试剂公 表示样品 的吸光度 ;4/表示作为对照的 DPPH. 溶液
司 ; 人结肠癌细胞 Cac o-2 : 美国菌种保藏 中心 ; Fo-的吸光度 。
l in- C iocalteu 福林酚试剂 、羟乙基哌嗪乙硫磺酸 ( N试验选择 IC S。值作为评价 DPPH 自 由基清除力
- 2-hyd roxye thylp iperazine-N-e thane-su lphon i-大小的标准 ,母个样 tm做 3 纟且平行 ,结果表 7K为平
cac id , H epe S ) 、青霉素与链霉素混合液 ( 1 00x) :美均值 ± 标准偏差 。
国 Sigma公司 ;胎牛血清 ( Fe talbov inese rum , FBS ) 、1 . 3 . 4 还原力试验
0 . 05 % 胰酶 - EDTA 消化液 ( Tryps in-ethylened i- 参考 Ferre ira 等 [ 1 6 ] 的方法 ,提取液的体积范围为
amin ete traace tieac id
,
EDTA ) 和 高糖 培养基 :美国〇 .2 ̄ 0 . 8mL。 以维生素 C 为对照品 ,其质量浓度范
Gibc o 公司 。围为 1 〇  ̄ 1〇〇|xg.mL _ l 。 每个样品做 3 组平行 ,结

1 . 2 仪器与设备 果表历为平均值 ±标准偏差 。
722 型分光光度计 :上海精科科学仪器厂 ; HERAL 3 . 5 细胞毒性试验
c ell240 型 C02 细 胞培养箱美 国 Thermo 公司 ; DM参考 Salawu 等 [ 1 7 ] 的方法 , 即取对数生长期 的
IRB 型荧光倒置显微镜 :德 国 Leica 仪器有 限公司 ; Caco- 2 细胞接于 9 6 孔白 板 ,使每孔细胞数约为 4x
SpectraM axM2 型连续光谱密度荧光检测仪 : 美 国 1〇
4 个 , 于 37T; ,5%C〇2 下培养 6h 后 ,移去残余培
M olecu lar公司 ; T25 、 T75 细胞培养瓶 : 美 国 Com ing 养基 , PBS 清洗 1 次 。 其中 ,样品孔中加人 1 00A 含
^=|样品 的培养基 , 控制孔中加入 1 〇〇的培养基 , 于
i3
°
方法 37t: ’5%C02 下培养 24h 后 , 开始测板 , 即移去 96
L3 .i 荞麦酚类化合物提取施1^JP 5 0
参照 Adorn 等 [ 1 3 ] 的方法 , 将游离酿和结合酿
风干 , 加 孔洗脱液 , 然后震荡至形成均匀 的

处备工 祕 to 也 丨 夂 七 吐矣去 w细胞悬浮液 , 于 5 7〇 nm 下读取各孔中染色细胞悬浮
^ [ 1 3 ]液的吸光度 。 与控制孔相 比 , 减 -^ 的 吸光度 = 04’根据浓度与 制的 到没食 时 , 即认为该样品浓度下具有细胞毒性 。■浓度与吸光度值的回归方程为 :L3 . 6_抗增殖试验
: 〇f-3 1=〇 1 6上11〇=)—参考 Wolfef 的方法 , 即取对数生长期 Cac。 -式中 :y 表75吸光度 ; * 表不没食子酸质里浓度/2 细胞接种于 % 孔 白板 使每孔细雜约为 2 . 5xH I ,根据该回归方程计算待检样品 中 ’酚类物
1 〇4 个 ,于 幻 c〇2 下 , 培养 6 11 后 ,移去残余
培养基 , PBS 清洗 1 次 。 其中 ,样品孔 中加人 100+L

荞麦样品 中酸类化合物含量检测 :取 〇 ?2mL 提 含样品 的培养基 , 控制孔 中加入 1 00pL 的培养基 ,職 (可作适当稀释 )并用去离子水补至 1mL ,后续 于打 r , 5%c〇2 下培养 72h 后开始臟 ,测板操作操作¥
■法 同 Adorn 等 [ 1 3 ] 。 每个样品做 3 组平行 , 结 同上述 1 . 3 _ 5 细胞毒性试验 。
果表示为平均值 土标准偏差 。細增麵制率 = ( 1- 样品组吸光度值/对照
1 . 3 . 3DPPH 自 由基清除力试验 组吸光度值 ) x1 00%
参考 丫4^ 等 [ 1 4 ] 的方法 , 根据本实验室条件稍1 . 4 数据处理
作修改 ,即将样品酚类化合物提取液做相应稀释 , 配每个样品至少 3 次重 复 , 试验结果表示 为平均
制成质量浓度梯度为 〇 _0 5 ̄1 .〇|xg.mL _ 1 的反应值 ±标准差 . 使用 MS Excel 软件计算 DPPH 自 由基
液 ,加入 5mL0 ?1mmol?L _ 1 的 DPPH. 溶液混勻 , 清除力试验的 IC 5。值和还原力试验的 EC5。值以及抗
于室温下避光静置 30min ,然后于 5 1 7nm 波长处 ,测增殖试验的 EC 5Q 值 ; SPSS 17 .0 软件计算差异性 ,在
其吸光度 。 以维生素 C 为对照 品 。 根据下式计算样P< 0 . 057JC平分析显著性差异 G 检验法 ) ; 图表采用
品清除 DPPH 自 由基的能力 :Sigmaplot 绘制 0
第 30 卷第 1 1 期李富华等 苦荞麸皮多酚抑制人结肠癌细胞 Caco-2 增殖活性研究

33
^
2结果 与分析 值 。 此处 EC 5。值的定义为 : 当细胞细胞增殖率下降
2 . 1 酎类化合物含量及抗氧化能力至 50% 时 ,所需样品 的浓度 , EC 5a值越低 , 则样品的
酚含量结果 以每克荞麦样品 中所含 的没食子。
酸当量 ( mggalli cac ideq uivalent/gdry-we ightba- 表 22 种苦荞鼓皮酿提取物对 2 细胞的 叫。值
s is

mgGAE/gDW ) 表 7K 〇 由表 1 可知 , 2 种 古荞鉄 游离酣结合酿皮游离态酸和结合态酸的含量分别约 占其总酚含细胞类型 样 品ec 5〇cc5 0ec50 cc 5〇
量 的 93% 和 6% ,也即游离态是苦荞麸皮 中 酚类化 FG122 . 3± 0 . 4 a 30 . 47 5 . 0 ± 0 . 9C64 . 3
合物的主要存在形式 , 该结论与 Guo 等 [叫 的报道C aC〇  ̄ 2FG21 4 . 5± 0 . 2 -2 1 . 97 1 . 7 ± 0 . 6d64 . 3
一致 〇2 种苦养鼓皮结合酔含量无显著差异 ,游离注 :标注字母不 同 , 表示不 同样品 的 ec 5 。值之间有 显著性差异
酚和总酚含量 在 P <〇 . 〇5 水平存在差异 。 这种差( P <a 〇i ) 。
异性可能是 由 于品种不 同所致 。 此外 ,植物酚类化
合物 的含量也受植物 的生长环境 、采摘期等因素 的FG 1 游离酿提取物对 Caco -2 细胞抗增殖作用的
影响 [ 2 ] 。£(^值( 22 _ 3± 0 . 4 ) mg.mL — 1 显著高于FG2 ( 14 . 5±
DPPli 自 由基清除能力试验中 , 2 种苦荞麸皮游OAmg - mLl P c O . OS ,表 2 ) ,说明 FG2 游离酚对
离和结合酚类化合物 的 IC 5。 值见表 1 。 FG2 游离酚Caco- 2 细胞增殖的抑制能力强于 FG1 。 与其他食

2 . 80jxg?mL ) 和结合酿 ( 2 1 .89(xg.mL _ 1 ) 的物相比 ,古养鼓皮 FG 1 和 FG2 游离酸提取物对 Caco
IC5。值均低于 FG 1 游离酚 ( 3 . 0 |xg.mL - 1 ) 和结合酚_ 2 细胞抗增殖作用的 EC 5。值明显低于马铃薯多酚
( 36 . 56|xg ?mL’ , 即苦荞麸皮游离酚提取物清除提取物 ( 30 _ 9± 8 . 8 ) ̄ ( 1 0 1±9 . 3 )mg. mL - 1 ) ,但低于
DPPH 自 由基能力强于其结合酚 ,甚至强于对照品维核桃 ( 1 . 8 ± 0 . 1 ) m g.mL'美 国山 胡桃 ( 2 _ 5 ± 0 _ 1 )
生素 C ( IC5 () , 8 . 39 网 ?mL— 1 ) , 此外 , 与苦荞麸皮mg.mL— 1 等某些坚果的 EC5 (^ [ 9 ’ 2() ] 。
FG 1 相 比 , FG2 清除 DPPH 自 由基的能力较强 ( P<2 种苦荞麸皮结合酚提取物对 Caco- 2 细胞抗
0 . 05 ) 〇增殖作用的 EC 5 () 值虽 然被计算 出 ( 见表 2 ) , 但该值
还原力试验 中 , 2 种苦荞麸皮游离和结合酚类化却大于其相应的 CC 5。 值 , 这可能是 由 于结合酚提取
合物的 EC^值见表 1 。 FG2 游离酚 ( 4 .72 网 . mL - 1 )物对结肠癌细胞增殖抑制作用不明显所致 。
和结合酸 ( 68 . 46 |xg .mL - 1 ) 的 EC5。值均低于 FG 1 游FG1 、FG2 苦荞麸皮游离酚提取物对 Caco - 2 细
离酚 ( 12 . 55 (xg?mL .和结合酚 ( 85 . 38 网 . mL - 1 ) , 胞增殖活性的影响 ,见图 丨 。 2 种苦荞麸皮游离酸样
根据 丘‘值的定义 ,该值越低则样品的还原力越强 。 即 的抗增殖[曲线 明?低于空 白 对
?照组 的抑制 曲线 ,
苦— :游离酚提_^的还原;^虽于其结合酚 ,甚至强 侧 FG1 、 FG2游离酸提取物具有抑制 CaC〇_ 2 细胞
于对照品维生素 〇 ( £(:% ,57 _ 63 网 . mL - 1 ) ,此外 ,与苦 增殖的能力 。 当苦荞麸皮 FG1 游离?的质量浓度 g
荞麸皮 FG 1 相 比 , F ! ; 2 麸皮酚提取物的还原力较强 14 . 29mg?mL 

1 时即可显著抑制 Caco_ 2 细胞的增
( P < 〇 . 〇5 ) 〇殖 (P < 〇 _ 〇 l ) ,并呈现一定的剂效关系 ( 图 l a ) , 当苦
2 . 2 抗肿瘤细胞增殖活性荞麸皮 FG1 游离 酚的质量浓度 为 28 .57mg?mL ?
表 2 列 出 了2 种苦荞麸皮游离酚和结合酚提取 时 , Caco_ 2 细胞的增殖率仅达到 3 3 .7% ,但当苦荞
物对 Caco - 2 细胞抗增殖作用 的半数有效剂量 EC 5Q 麸皮 FG 1 游离 酚的质量浓度 会 30 . 36mg.mL
- 1 时 ,

表 12 种苦荞鉄皮游离 酚和结合酚含量及其 D PPH 自 由 基清除力和还原力

酚含量/mg GAE/gDWDPPH 自 由基清除力/ I C50 /Vg ?mL— 1还原力/瓦(: 50 /閟 ?m L *" 1

游离酣

结合酌

总酚游离酚结合酚总酚游离酚结合酸

总酚
FG124 ,^± ? : 26 ° 26 . 40± 0 . 4 1 d2 . 98 ± 0 . 1 5 r3 6 . 59 ± 2 . 6 g39 . 56 ± 2 . 8 11 2 . 55 ± 3 - 1 18 5 . 3 8± l - 7 8n97 . 92 ± 1 . 40 p

93 . 3 ) ( 〇 . / )
2S2S* 02^ ^17 S+ 〇1 7 °
FG2e \ 27. 00± 0 . 72e2 . 8 ± 0 . 09 f2 1 . 8 9 ± 0 . 43 h24 . 69 ± 0 . 33 j4 . 7 2 ± 0 . 06m6 8 . 46 ± 4 . 3 5 073 . 1 8 ± 4 . 1 2 ^
( 93 , 5 ) ( 6 . 5 )
VC 8 , 5 6 ± 0 . 2 9 k57 . 63± 0 . 3 5 r
注 : 同一列 的数值标注不 同的字母 ,表示数据在 P < 0 . 05 水平有显著差异 ,标注 相同字母则表示无显著差 异 ; 括 号内 的百分数表示游离或结
合酚占总酚含量 的比例 ( % ) 。
34中国粮油学报20 1 5 年第 1 1 期
则会产生细胞毒性 , 此时 的抗增殖作用可 能是 由 细
胞毒性作用引起 。 对于苦荞麸皮 FG2 而言 , 当其游g
离酚质量浓度 芎7 . 8mg ?ml, 时则可显著抑制 C ac o #80
'80J
- 2 细胞的增殖 ( P< 0 . 0 1 ) ,并呈现一定的剂效关系费 4。 ] 40*
( 图 l b ) , 当苦荞麸皮 FG2 游离酚的质量浓度为 20 .3 |20 ]\20J
mg?mL 
—  1
时 , Caco - 2细胞 的增殖率仅达到34 _ 3% ,

需指 出 的是 , 当苦荞麸皮 FG2 游离 酚的质量浓度 g-40 ] ̄ . ̄ , ̄ ■  ̄ ' ̄ ̄[ -40
_ 203040506070 80
2 1 . 9mg?mL
_ 时 , 其抗增殖作用可能王要 由细胞毒 FG2结合鼢质量浓度 / mg/mL
性作用引起 。b
图 22 种苦荞麸皮结合酚对 C ac〇 - 2 细胞 的
1 4〇

1 4〇抗增殖作用及毒性作 用
^:.
lZt细胞生长的作用 。 但当 FG 1 和 FG2 结合酚质量浓度
綦 80 .\ 80^ 迄 64 .3mg .mL _ l 时 ,其抗增殖作用可 能主要 由 细胞
I :# 毒性作用 引 起。 从整体趋势分析 , 可认为苦荞麸皮
i20 20B FG 1 和 FG2 结合酚样品 对 Cac o- 2 细胞增殖表现 出
dQ 二 Gd 极弱 的抑制作用 。
-20 ^-20
-40 J '' '-40
1 01 520253035〇U■ 、人
FG 1 游离酚质量浓度 /m g/mL 3 TT?&
本研究发现 , FG 1 和 FG22 种苦荞麸皮中的酚类

化合物的含量远高于黑米胚乳 、小麦胚乳和荞麦粉
51 00 1M^ 部位的 总酚 含量 1 "1 ' 1 4 ’ 2^ , 且 主要 以 游离态存在 。
5^ 壬■賴^i 但在其他谷物 中 , 如小麦 、黑麦 、玉米 、燕麦 及大米 中
S40 40f 的酚类化合物主要 以结合态存在 n4 ’ 2 3 ] 。 FG 1 和 FG2
120
' 20j 2 种苦荞麸皮酚类提取物均具有一定体外抗氧化能〇
_2〇 力 , 因此苦荞麸皮可作为天然抗氧化剂一酚类化
_4〇



 ̄ ̄

 ̄ ̄

 ̄ 40辦断錄源、 。 棚■中齡_ ±曽 歹直健 + , 2#
FG2游离酸质量浓度 / mg /m L . 游离酚提取物对 Caco-2 肿瘤细胞 的抑制率并不相
b同 , 类似的结论在坚果类多 酚提取物抗增殖活性 的
图 12 种苦荞麸皮游离 ?。 _ 2 细胞的研究 中也得到验证 [ 24 ] 。 2 种苦荞麸皮结合酚提取物抗增殖作 用及毒性作用
相反 ,在不产生细胞毒性的浓度范围 内 , 苦荞麸 二细
皮 FG 1 结合酚 ( 图 2 a ) 和苦荞麸皮 FG2 结合酚 ( 图人乔麦mn (U±tT活 14价?值 。 研
2_生长_臟视日娜日_比 ,并絲M
明显 的抑制趋 向 。 細胞培养孔中 , 当结合雜品质
量浓度低于 42 . 9mg ?m L i 时反而誠出促 Caco - 2 部位 ,最终被肠道微生物分 解产生小分子的 活性成8分 。 例如谷物麸皮 中 的二聚阿魏酸 , 其本身 以 酯键
140
1 f
140形式与植物细胞壁组分结合 ,经肠道微生物分解后 ,
^ 1 20 以游离态 的形式被肠道吸 收并进入机体 的循环 系

1: ^统 , 发挥其生物 活性 [ 3 2 ] 。 FG 1 和 FG22 种苦荞麸 皮
|60

J ill
*60I酸提取物抗 Caco - 2 细胞增殖作用的发挥 ,可能是酿
12〇 : 1 类化合物本身具有 的功效 ,也可能是 由 于酸类组分
=3 053与食品基质 中 的其他成分通过协同 、叠加亦或拮抗
一士 ̄2
!! 等综合作用的结果 [ 32 ] 。 苦荞麸皮中主要的 酚类化合
-40'11-40
—n
2〇30
a+
405〇607080物为黄酮和酸酸类 [ 25 ] ,这些?类化合物的含量及成
FG 1结合 酌质量浓度 /m g/mL r^
a 分组成与细胞抗增殖作用密切 相关 [ 34 ] 。 研究发现 ,
第 30 卷第 1 1 期李富华等 苦荞麸皮多酚抑制人结肠癌细胞 Caco-2 增殖活性研究

35
^
以单体形式存在的黄爾类化合物 ( 如 白黎芦醇 、懈皮 lyt icaim ethod s [ J ] ?Jou rnalofPh arma ceu ti cal and Bi omedi c-
素 、儿茶素和表儿茶素 ) 以及酚酸 (如没食子酸 、咖啡alfmlysi s , 2〇 1 2 , 62 :68- 7 8
酸和 阿魏酸 ) 能 有效 抑 制 肿 瘤 细 胞 的增殖 和 扩 [ 6 ] 左丽丽 . 狗¥称猴桃多酸 的抗氧化 与抗肿瘤效应研究
散 [ 26 ] 。 酚类化合物的化学结构也影响着其细胞抗增 20 1 3
殖活性 ,其中 ,经二羟基和三羟基丙酯化的咖啡酸和mMeKWu X Z ’li u H Hjntbxi damacui tyrf appk
没食子酸对義_■增麵性要强于经甲_27〇35 1609^4 〇f^F〇〇dChemi St I7 ,辛基化的咖啡酸和没食子酸 此外 , 可根据酿类
[ 8 ] SunUuRPLOanbeqPh_hem iealeX_S induee化合物的亲油性 、空间位阻效应和 ( 或 )抗氧化活性eell eydearrestan dap_ Si Si nh_nMe卜 7breas t
来预测其抗增殖能力 [ 28 ] 。 由此 ,可考虑对苦荞麸皮cancercell s [ J ] .Can cerLetters ,2006 ,24 1 :1 24 - 134
结合酚进行结构修饰以提高其肿瘤细胞抗增殖活性 。[ 9 ] 王全逸. 马铃薯多酚类化合物对结肠癌和肝癌细胞增殖
的影响及花色苷生物合成关键酶基因的研究 [ D ] . 南京 :
4南京农业大学 , 20 10
— [ 10 ] Inele ttGE ,ChenD ,Berh owaM ,etal .Anti oxidant act ivi ty研究发现 , 产 自 重庆酉 阳 ( FG l ) 和 四 川 西 昌L K^u"oicommerc ialbuckwheat 士loursandthei rtreeandbound
( FG2 ) 的2种苦荞麸皮 ,其总齡量分别为 ( 26 . 4〇 ±phen ol icc〇mp〇si tio? s [ J ] .F oo dChe^ ,20 1 1 , 125 :
0 ?4 1 ) 和 ( 27 ? 00 ±0 . 72 )mgGAE/gDW ,并且 ,游离态 923_929
是2种古乔鉄皮酸类化合物的王要存在形式 。[ 1 1 ] Sun T , HoCT.Anti oxidant ac ti vi tie sofbuckwheatextract s
DPPH 自 由基清除力试验和还原力试验结果均 [ J ] ,FoodChemi stry ,2005 , 90 :743- 749
表明 , FG1和FG22种苦养鉄皮酸提取物均具有一定[ 1 2]HolasovaM , FiedlerovaV , SmrcinovaH , e tal .Buck-
的抗氧化活性 ,并且游离酸提取物 的DPPH自 由基wh eat— thesource of ant i oxi dantac tivi ty infunc t ion alfoo ds
清除力和还原力均强于其结合态 的 , 甚至也强于对L J Lhod Heseareh Internatio nal , 2〇〇2 ,35:2〇7- 2 1 1
照品维生素C ( P < 0 . 〇5 ) 。 此外 ,产 自 四川西昌 的苦[ l3 ] Adom K K ’LiuR H .Ant ioxidant act ivityofgrai ns [ J ] _
荞麸皮 FG2 的抗氧化活性要强于产 自重庆酉阳 FGlJournalofAgriculturalandFoodChem ist ry ,2002 ,5 0
( P < 0 . 05 ) 〇 ( 2 1 ) : 6 1 82 - 6 1 8? .
「 14 lVah erM , Mat soK ,LevandiT , et al .Phenol iccompound s抑制人结肠癌细胞 Caco - 2 增殖活性试验结果^ t, tf?, , .andtheanti oxid an t act ivi tyoi thebran ,Hou randwholemm , fgim FGi —〇fdiferentwheatvarieties [ J ] .Pr〇cediaChemi stry ,
抑制人结肠癌细胞 Caco- 2 的增殖 ,并表现出一'定的20 10 ,2 :76_ 82
剂里 效应关系 。 [ 1 5 ]Sharma0P ,B hatTK.DPPHantioxidantass ayrevisi ted
[ J ] .FoodChem istry ,2009 , 1 1 3 :1 202 - 1205
[ 16 ] Ferre ira ICFR ,Bap ti staP ,Vilas- BoasM ?etal .Free-
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[ 2 ]LiuRH.Wholegrainp hy tochem ical sand h ealth [ J ] .Jour-1 5 16
na lofCerealSc ien ce ,2007 ,46( 3 ):207 - 2 19 [ 17 ] SalawuS0 ,Aki ndahuns iAA ,Sann iD M ,etal .Cel lu lar
[ 3 ]Schi eberA , S ti ntz ingFC , CarleR .By-prod uc tsofp lan tanti ox ida ntac ti viti es andcyto to xi cprop erti esof e than ol icex?
foodprocessi ngasasourceoffu nc ti onalcompoun ds - recen t trac tsof four tropi calgreenleafyvegetables[ J ] .Afri can
deve lopment s [ J ] .Tr en dsi nFoodSc ience&Technology ,Journ al ofFood Sc i ence ,20 1 1 ,5 :267- 27 5
200 1 ,12( 1 1 ) :40 1- 4 1 3[ 18 ]WolfeK L ,LiuRH.C ellul arant ioxi dan tact ivit y( CAA )
[4 ] LeeMY ,Tsa iSH ,Ku oYH ,et al .Ant i-tumorandant iassayforass essi ngant ioxi dant s ,food s ,andd ietarysupp le-

in flammatoryac tivi tyoftheme than oext rac ts fromad layment s[ J ] .JournalofAgricu lturalandFoodChemis try ,
bran [ J ] .FoodSc i enceandBio technology ,200 8 ,1 7( 6 ): 2007 ,5 5( 22 ):8 896—8907
1265 - 127 1 [ 1 9 ]Guo XD ,MaYJ ,JohnP ,e t al .Phenol icscont entandan-

5 ] Fli sS ,Jas tr 2eb skiZ ,Nam iesn ikJ ,etal .Evaluati on ofinh i-ti oxi dantac tivi tyoftartarybuckwheatfromdifferentl oca-
bit ionofcance rcel lp rol ifer at ioni nvi tro wi th d iferent berries ti ons [ J ] .Molecu les , 20 1 1 ,1 6 :9850 ^ 9 867
and corre lat ion withthei ran ti oxidant leve ls byadvan cedana-[ 20 ]YangJ ,LiuRH ,Ha l imL .Ant ioxidantandan ti prol ifera-
_36

中 国粮油学报

201 5 年第 1 1 期
tiveact ivit ies of common edi blenuts eeds [ J ] .LWT- Food[ 25 ] GuoXD ,WuCH ,MaYJ ,etal .Compari sonofmil ling
Sc ien ceandTechnology ,2009 ,42  :1 - 8frac ti onsof tar tarybuckwheatfor theirphenolicsandan tioxi -
[ 2 1 ] KongS ,LeeJ .An tioxidant sinm ill ingfrac ti on sofblackdantprop erti es[ J] .FoodResearchInternat ional ,20 1 2 ,
ri cecult ivars [ J ] .FoodChemi stry ,20 10 ,120 ( 1 )  :278-49 :5 3- 59
281 [ 26] GhasemzadehA ,Ghas emzadeh ,N .Flavonoi ds and phenol-
[ 22] LiFH ,YuanY ,YangXL ,  et al .Phenoli cprofi lesandan- icacids :roleandb iochemi calact ivity in plants andhuman
t ioxidantactivi tyofbuckwhe at(Fagopyrumes culentum[ J ] .Jou rnalofMedi ci nalPlantsResearch ,20 1 1 ,5 :
Moen ch andFagopyrumtartaricumL .Gaerth ) hul ls , brans 66 97 — 6703
andfl our s[ J ] .JournalofIn tegrativeAgriculture ,20 1 3 ,[ 27 ] FiuzaSM ,Gomes C ,Te ixeiraLJ ,et al.Phen oli cacidde-
1 2 ,1684 - 1 693 rivativeswi th potentialant icancerproperti es -astruc ture-
[ 23 ] Pereez- j imenezJ ,TorresJL .Analysi sofnon- extract -ac ti vityrelationship s tudy.Part1:Methyl ,propyandoctyl
ableph enoli ccompoundsinfoods :th ec urren tstateoftheester sofcaffeicandgall icac ids [J ] .Bioorgan ic&Medi c i-
art
[ J ] .JournalofAgricul turalandFoodChemi st ry ,20 1 1 ,nal Ch em istry ,2004 ,12 ;35 8 1- 3589
5 9 (24 ) :1 27 1 3— 1 2724[ 2 8 ] HarrisCS ,MigahedFML ,BennettS A L ,etal .Plan t
[ 24 ]XuB J ,ChangSKC .Comparati vestudyonan tiprol ifera-ph enolic sregulateneoplasticcellgrow thand survival :a
tion
properties and cellularan ti oxidan tac ti vi ti esofc ommon -quan ti tat ives tru cture-ac tivityandb iochemi calanalysi s
lycon sumedfoodlegumesagains t ninehumancancercel l [ J ] .Canad ianJournalofPhy siologyandPharmacology ,
lines [ J ] .FoodChemistry ,20 1 2 ,134 :1 287- 1 2962007 ,8 5 : 1 1 24 - 1 1 38 .
Anti-ProliferativeActiv ityTowardHumanCo lon
CancerCell(Caco-2 )ofPhenolicCompoundsin
FagopyrumTartaricum( L .)GaertnBrans
LiFuhua 1 ’2ZhangXiaoli 1M ingJian 1 ’ 3

CollegeofFoodScience ,Sou thwes tUniversity1 ,Chongqing4007 1 5 )
( C ollegeofL ightIndu strialandFoodSc ience , S outhChinaUnive rs ityofTechnol ogy 2 , Guangzhou5 1 0640 )
( KeyLabora to ryofAgriculturalProduct sQuali tySafetyandRiskAssessmentduringStorage ,
M in istryofAgr iculture3 ,Chongqing4007 15 )
AbstractTheex trac tsfromtwocategor iesofFagopyrum tartar icum( L.)Gaertnb ranfromYouyangCounty ,
Chongqing ( FG1 )andXichangCity ,Sichuan( FG2 )havebeenscreenedforfreeandboundphenoliccontentre ?
spective lyandtotalphenoliccontent (TPC ),aswe llasantioxidantandanti- pro liferativeactiv ityinthepaper .The
resultsshowedthatth eTPCofFG 1and FG2were(26 . 40± 0  ?4 1 )and(27 ■ 00±0 _72 )mgGAE/gDW respec tive -
ly.Thefreephenolic s ,which acc ountforabou t93%of theTPC ,we repredom inan t in th etwobu ckwheatbran .Phe -
nol iccompoundsofFG1andFG2bothexp re ssedanantioxidantac tiv itywiththetotalIC 50( 39 .56±2 .7 6 )and
( 24 _ 69 ± 0. 33 )|xg . mL
_ 1ofDPPHfreeradic alscavengingac tiv i tyre spective ly ;EC50 (97 . 92± 1 . 4 )and( 73 . 1 8 ±
4 . 32 ) jxg?mL


of reduc ingpowerre spective ly .In theanti-prol iferativeactivityassay , thefree phenolicextractsof
FG1andFG2showeds ignificantlyant i- pro life rativeact iv itytowardhum anco loncanc erce ll( Caco- 2)invitro
whencomparedtothecontro lgroup( P< 0 . 05 ) .However , theboundphenolicsofFG1andFG2showedextrem ely
weakinhibi torytowardCaco- 2 ce ll sw ithinnon-cy to toxicconcentra t ions .
KeywordsFagopyrumtartaricumL .gaertnbrans ,phen ol iccompounds ,antioxidantac t iv i ty ,humanco lon
cance rcells (Caco-2 ) ,anti-pro life ration