全 文 ：·论 著·
不同采收期地耳草的色谱图分析
顾国栋，刘训红
作者单位:225200 江苏省江都市药品检验所(顾国栋) ;210046
南京市，南京中医药大学(刘训红)
【摘 要】 目的 分析不同采收期地耳草的色谱图。方法 用高效液相色谱法(HPLC)和顶空气相色谱 －质谱
(HSGC-MS)技术对不同采收期地耳草进行分析，测定其色谱图。结果 不同采收期地耳草 HPLC、HSGC-MS 色谱图
的动态变化具有一定规律。结论 为确定地耳草的最佳采收期提供了依据。
【关键词】 地耳草;色谱图;PHLC;HSGC-MS
【中图分类号】 R 282 【文献标识码】 A 【文章编号】 1674 － 3296(2011)09B － 0035 － 03
Analysis of chromatograms of Hypericum japonicum Thumb from different harvest time GU Guo-dong* ，LIU Xun-
hong． * Institute for Drug Control of Jiangdu City，Jiangsu，Jiangdu 225200，China
【Abstract】 Objective To analysis the chromatograms of Hypericum japonicum Thumb from different harvest time．
Methods Hypericum japonicum Thumb from different harvest time were analyzed and the chromatograms of which were de-
termined by HPLC and HSGC-MS． Results The dynamic change of chromatogram of HPLC and HSGC-MS of Hypericum ja-
ponicum Thumb from different harvest time showed a regular pattern． Conclusion It provides scientific basis for determining
the best collecting time．
【Key words】 Hypericum japonicum Thumb;Chromatograms;HPLC;HSGC-MS
地耳草为较常用中药，系藤黄科植物地耳草 Hypericum ja-
ponicum Thunb．干燥全草，具有清热利湿、解毒消肿之功效，主
治湿热黄疸、泄泻、痢疾、疮痂痈肿、急性肾炎、血吸虫病等症，
其注射液已被广泛用于临床，治疗急、慢性肝炎，效果显著［1］。
现代药理研究表明，地耳草具有增强免疫和抗肿瘤的作用［2］。
地耳草中黄酮类化合物和挥发性成分为主要活性成分［3］。本
研究在地耳草品质鉴定［4 ～ 6］、指纹谱评价［7，8］、有效物质累积
动态分析［9，10］的基础上，用高效液相色谱法(HPLC)、顶空气相
色谱 －质谱(HSGC-MS)技术，测定不同采收期地耳草的色谱
图，并考察、分析 HPLC、HSGC-MS 色谱图的动态变化，为确定
药材的最佳采收期进一步提供依据。
1 仪器与试药
Waters 2965 高效液相色谱仪 (包括:四元泵、自动进样
器、在线脱气装置、柱温箱、2996 DAD 检测器) ，Empower 色谱
工作站;Agilent 6890 /5975B型气 －质联用分析仪，G1701DAD．
03． 00． 611 工作站，Agilent G1888 顶空自动进样器，NIST05 标
准质谱检索库。
山柰酚对照品(中国药品生物制品检定所提供，批号:
110861 － 200303) ;槲皮素对照品(中国药品生物制品检定所提
供，批号:10081 － 9905) ;芦丁对照品(中国药品生物制品检定
所提供，批号:0080-9705) ;异槲皮苷对照品(上海博蕴生物科
技有限公司，批号:21637-25-2) ;槲皮苷对照品(中国药品生物
制品检定所提供，批号:111538-200302) ;金丝桃苷对照品(中
国药品生物制品检定所提供，批号:111521-200303)。乙腈
(Merck KgaA试剂公司，HPLC级，批号:11-20 /21 /22-36) ;甲醇
(江苏汉邦科技有限公司，色谱纯，批号:200703102) ;甲醇(上
海实意化学试剂有限公司奥佳化工有限公司产品，批号:
20071018) ;蒸馏水为自制重蒸水。其余所有试剂均为分析纯。
地耳草不同采收时间(080513，080523，080603，080613，
080623，080703，080713，080723)样品采自福建省尤溪县台溪
乡台溪村第二洋，经笔者鉴定为藤黄科植物地耳草 Hypericum
japonicum Thunb．全草。留样凭证存放于南京中医药大学中药
鉴定实验室。
2 方法与结果
2． 1 分析条件
2． 1． 1 HPLC 色谱条件:色谱柱:Alltima C18(250 × 4． 6
mmid，5μm) ;柱温 50℃;流动相:A-0． 4%磷酸，B-乙腈;梯度洗
脱:0 ～ 10min，A∶B为 89∶11，10 ～ 18min，A:B线性改变到84∶16，
18 ～ 30min，A∶B 为 84∶16，30 ～ 35min，A:B 线性改变到 77∶23，
35 ～ 40min为 77∶23，40 ～ 55min，A∶B 线性改变到 60 ∶40，55 ～
65min，A∶B线性改变到 89∶11;65 ～ 70min，A∶B 为 89∶11;流速:
1ml /min;检测器:DAD;检测波长:254nm;进样量:10μl。
2． 1． 2 HSGC-MS:色谱条件:色谱柱:HP-5MS(5%苯甲基聚硅
氧烷弹性石英毛细管柱，30． 0m × 250μm ×0． 25μm) ;进样口温
度:150℃;程序升温:40℃，保持 5min，以 2℃ /min 的速率升至
100℃，保持 6min，再以 2． 5℃ /min的速率升至 180℃;载气:氦
气，流量:1． 0ml /min，分流比 20∶1。
2． 1． 3 质谱条件:电离方式:EI 离子源;离子源温度:230℃，
四级杆温度:150℃，接口温度:280℃;电子倍增器电压:
1329. 4V;电子能量 70eV;扫描范围:45． 0 ～ 600． 0aum。
2． 2 对照品溶液的制备 取芦丁对照品 9． 28mg，槲皮素对照
品 8． 84mg和山奈酚对照品 5． 86mg，精密称定，分别置于 50ml
量瓶中，用 80%甲醇溶解并定容。精密称取异槲皮苷对照品
7． 29mg，槲皮苷对照品 8． 70mg，金丝桃苷对照品 6． 48mg，分别
置于 10ml量瓶中，用 80%甲醇溶解并定容。制得浓度分别为
芦丁 0． 1855mg /ml，金丝桃苷 0． 648mg /ml，异槲皮苷 0． 729mg /
ml，槲皮苷 0． 87mg /ml，槲皮素 0． 1767mg /ml 和山奈酚
·53·临床合理用药 2011 年 9 月第 4 卷第 9B期 Chin J of Clinical Rational Drug Use，September 2011，Vol. 4 No. 9B
DOI:10.15887/j.cnki.13-1389/r.2011.18.023
0. 1137mg /ml的对照品储备液。精密吸取芦丁、槲皮素、山奈
酚储备液 6ml，异槲皮苷储备液 5ml，槲皮苷储备液 8ml，金丝桃
苷储备液 0． 6ml，溶于 50ml 量瓶中，则配成混合对照品液，供
HPLC色谱图测试。
2． 3 供试品溶液制备 取样品粉末(过 3 号筛)1． 0g，精密称
定，加入 80%甲醇 50ml，回流 90min，然后补足重量，继续回流
90min，补足重量，再回流 90min，过滤，滤液用 80%甲醇定容至
100ml量瓶中，过 0． 45μm微孔滤膜，作为供试品溶液。经对药
材粉碎粒度、不同体积装样量、顶空加热温度、顶空加热时间的
优化，确定供试品制备或顶空进样条件:取地耳草粉末(过 80
目筛)3g，精密称定，置顶空瓶中，密封，放入顶空进样器，110℃
加热平衡 60min，按选定的分析条件对地耳草挥发性成分进行
HSGC-MS分析。
2． 4 色谱图测定 取供试品溶液进样，按选定的测试条件，进
行检测。同一上述实验条件下，测定所有供试品 HPLC、HSGC-
MS色谱图。HPLC色谱，经与对照品对照，确认其中 3 种黄酮
类化合物;HSGC-MS色谱，测得所有供试品的 HSGC-MS 总离
子流图，再对总离子流图中的各峰经质谱扫描后得质谱图，所
有组分质谱数据经计算机处理和 NIST － 98 标准质谱图库检索
鉴定，并与有关标准谱图核对，初步确定出地耳草挥发性成分
中 54 种化合物。根据供试品测定结果所给出的峰数、峰值(积
分值)和峰位(相对保留)等相关参数，进行分析、比较，制定优
化的色谱图，见图 1。
t /min
A HPLC色谱图
t /min
B HSGC-MS色谱图
图 1 地耳草色谱图
2． 5 色谱图分析
2． 5． 1 HPLC色谱图:(1)共有特征峰标定:经对供试品 HPLC
色谱图的分析、比较，地耳草样品标定 10 个共有特征峰，7、8、
10 号峰与对照品指纹图谱对照分别鉴定为异槲皮苷、槲皮苷
和槲皮素。(2)相似度评价:将测试数据导入国家药典委员会
“中药指纹图谱相似度评价系统(2004A)”软件，经校正选峰，
设定匹配模式，将色谱峰自动匹配，生成对照图谱(图 1 － A) ，
进行色谱峰差异性评价和整体相似性评价。各相似度值如下:
080513 － 0． 930，080523 － 0． 945，080603 － 0． 965，080613 －
0. 966，080623 － 0． 972，080703 － 0． 958，080713 － 0． 982，
080723 － 0． 976。结果表明地耳草样品指纹谱相似度较好(＞
0． 930)。
2． 5． 2 HSGC-MS色谱图:(1)共有特征峰标定:经对挥发性成
分 GC-MS总离子流图的分析、比较，地耳草标定 12 个共有特
征峰，1 ～ 12 号峰化学成分依次为:2-甲基-1，3-丁二烯、3-甲基
呋喃、2-甲基丁醛、糠醛、5-(1，1-二甲基)环戊二烯、壬烷、
(+)-α-蒎烯、癸烷、D-柠檬烯、2，6-二甲基-3，5-庚二酮、十一碳
烷、正十三烷。(2)色谱峰重叠率:以地耳草样品(080623)图
谱为基准，按以下公式计算［待测样品与标准样品共有的峰
数 × 2 /(待测样品与标准样品峰数和) ］× 100%。分别求得另
外 7 种样品色谱峰的重叠率依次为:86． 7%、84． 6%、85． 7%、
88. 1%、86． 8%、89． 5%、89． 3%。(3)共有峰百分比:计算 8 个
样品中共有峰面积之和占峰总面积的百分比依次为:85． 6%、
88. 4%、82． 3%、80． 1%、86． 7%、78． 3%、83． 1%。(4)相似度
评价:将测试数据导入 Excel 表格，用中位数夹角余弦法计算
相似度，进行色谱峰差异性评价和整体相似性评价。各相似度
值如下:080513 － 0． 948，080523 － 0． 962，080603 － 0． 979，
080613 － 0． 951，080623 － 0． 980，080703 － 0． 989，080713 －
0. 981，080723 － 0． 921。结果地耳草样品色谱图相似度较好，
均 ＞ 0． 92。
3 讨 论
HPLC色谱图分析结果表明，地耳草不同物候期样品之间
既有相关性，又有微小区别。相应共有特征峰均已在色谱图上
体现，但各峰面积有所不同，说明不同物候期成分含量有一定
差异。通过与对照品对照分析，异槲皮苷、槲皮苷、槲皮素可列
为地耳草指纹谱的共有特征峰(分别为 7、8、10 号峰) ;相似度
评价，6、7 月份样品色谱图与色谱图共有模式的相似度较好
(＞ 0． 950)。
HSGC-MS色谱图揭示了地耳草挥发性成分中特征性成分
质量分数的配比关系，能全面、综合、准确地反映不同采收时间
样品 HSGC-MS色谱图的关系，结果显示不同采收期药材的色
谱图相似性较好，6、7 两个月的样品共有峰百分比较高且含量
也较高，与传统采收期基本一致。
综上所述，HPLC、HSGC-MS 色谱图的动态变化具有一定
规律性，其色谱图相似度的最大值与传统采收期基本一致。结
合黄酮类成分［9］、挥发性成分［10］的分析及其动态研究结果，初
步认为 6、7 月份为适宜采收期。
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(收稿日期:2011 － 07 － 15)
·用药经验·
小儿合理用药举措
罗代辉，李华英，向爱华
作者单位:644000 四川省宜宾市第一人民医院
【关键词】 小儿;合理用药
【中图分类号】 R 969． 3 【文献标识码】 B 【文章编号】 1674 － 3296(2011)09B － 0037 － 01
随着社会的发展，如何安全、有效、合理的用药成为社会关
注的焦点。小儿身体正处于发育阶段，肝、肾、神经和消化等组
织器官尚未发育完全，很容易受到损害。小儿滥用药物将导致
治疗失败;加重药物相互不良反应，细菌的耐药性增强，增加患
儿痛苦;激化医患矛盾，助长医师与药品经销商的利益关系。
作为医务人员，要和小儿家长一同努力，使小儿用药做到科学、
安全、合理、有效。
1 医师对患儿合理用药的影响
1． 1 明确诊断，查明原因对症下药 很多医师把抗生素当成
“万能药”来用。如对非感染性疾病、病毒性感冒、过敏性咳嗽
等都选用抗生素治疗，甚至动用高价的三、四代广谱头孢菌素
类药物。经济加重的同时增加耐药菌株的产生。医师应根据
《抗菌药物临床应用指导原则》，用药前先做必要的检查，初步
确定是病毒、细菌还是支原体感染，避免盲目用药。
1． 2 选药时有明确的指针 根据药物特性，结合患儿具体情
况，选用安全有效价廉的药物。不要轻信广告药物，不图新药、
贵药。因为新药的不良反应往往需要长期深入细致的临床调
查研究，由于时间局限，很多不良反应还不能确定。
1． 3 掌握影响药物的因素 如药物的剂型、用药途径、小儿年
龄性别及营养状况等。用药尽量少而精，避免“大撒网”的用
药方式。
2 护士在小儿合理用药中的作用
2． 1 不盲目执行医嘱 护士是医嘱的具体执行者，医师不合
理使用抗菌药物现象时有发生，医院管理部门应重视护士在抗
菌药物合理应用中的作用。护士参加科室的抗菌药物检查和
监管，发现不合理用药，及时反馈给主治医师，报告科主任，必
要时上报医院主管部门，以充分发挥护士在医院抗菌药物合理
应用中的作用，使临床用药更趋合理。
2． 2 正确采样 护士认真做好标本采集，注意采样方法正确，
标本送检及时，为临床医师提供有效的用药依据。避免因采集
方法不正确或标本污染而引起检验结果错误，导致临床医师不
合理用药或误导用药的发生。
2． 3 注意观察用药后反应
2． 3． 1 临床用药品种繁多，抗菌药物有配伍禁忌:护士应掌握
抗菌药物特性，在使用过程中应注意不同药物之间的化学反
应，正确选择抗菌药物的溶媒，减少药物之间的拮抗作用，不良
反应和毒性。根据患儿的不同个体差异和病情，抗菌药物的半
衰期，安排给药时间，使抗菌药物在患儿体内达到最佳血药浓
度，取得最佳疗效。
2． 3． 2 在用药过程中密切观察患儿的情况:向主管医师反馈
患儿用药后的反应，及时调整给药方案，随时注意发现不良反
应和过敏反应。发现异常立即报告医师采取必要的措施，确保
用药安全。
2． 3． 3 发挥护士的宣教作用:小儿药物的滥用与医师的用药
习惯及患儿家长对用药知识欠缺有关。护士可以用对抗菌药
物的药学知识向实习医师、进修医师、新分配医师、外地调入的
医师介绍医院的抗菌药物管理制度，合理用药的方法，在临床
应用中的经验，与医师共同讨论给药的方法［1］。向患儿家长
介绍合理用药知识，让患儿家长理解医师用药方案，不提出违
反抗菌药物用药原则的不合理要求，减少临床不合理用药。
3 家长是患儿合理用药的监护者
3． 1 不滥用药物 消除家长把小儿用药视作“有病治病，无
病防病”的误区。如乱用抗菌药物可导致耐药性的产生，一旦
真正需要抗菌药物时，药物就起不到作用了。而且滥用抗菌药
物会对小儿的神经系统、血液系统、消化系统、肝肾功能造成
损害［2］。
3． 2 避免滥用滋补和维生素类药品 很多家长为了孩子成
长，乱用人参、人参蜂王浆、冬虫夏草、维生素 A 等药物，殊不
知，正是这些物质把孩子推向病态。如人参蜂王浆已是公认的
激素制剂，可导致小儿性早熟。维生素 A 过多服用可影响骨
骼发育，使骨骼停止生长。目前医学界对这些疾病常常束手无
策，深感棘手。家长要积极配合医师用药，不能盲目迷信偏方、
中药、进口药、广告药等，甚至于对医师产生对抗情绪，私自更
换其他药物。
参考文献
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(收稿日期:2011 － 07 － 22)
·73·临床合理用药 2011 年 9 月第 4 卷第 9B期 Chin J of Clinical Rational Drug Use，September 2011，Vol. 4 No. 9B