全 文 ：— 67 —现代中药研究与实践2011年第25卷第6期Chin Med J Res Prac,2011 Nov.,Vol.25 No.6
樟芝 (Antrodia camphorata) 又名牛樟菇、樟窟内
菇、红樟芝，是一种原产于台湾的珍稀药用菌。它主
要分布在台湾的桃园、苗栗、南投、高雄及屏东等
海拔 1 000 m 以上的深山密林中 , 生长在台湾名贵树
木 — 牛 樟 树 (Cinnamomum kanehirae Hayata) 上 , 通
常腐生于牛樟树上百年的树干空洞内。在台湾地区，
樟芝被用于降血脂、解毒保肝、补肾强心、益胃整肠、
镇痛抗菌、强化免疫、抗过敏、抗癌等。现代研究表
明，樟芝含有丰富的生理活性物质 [1-9]，包括多糖体、
三萜类化合物、超氧化物歧化酶 (SOD)、腺苷、小分
子蛋白质 ( 含免疫蛋白 ) 等，其中最主要的活性成分
是多糖 (β-D- 葡聚糖 ) 和三萜类化合物。本文采用正
牛樟芝总三萜提取工艺研究
王 宫 *， 王 瑾， 徐 蔚
（福建省中医药研究院，台湾亚新牛樟芝大陆研发中心 , 福建 福州　350003）
摘要 ：目的 优选牛樟芝总三萜提取工艺。方法 采用四因素三水平正交试验法，以牛樟芝总三萜的
含量为检测指标优选其最佳提取工艺。结果 影响提取的主次因素为提取次数 > 提取时间 > 提取溶剂 > 溶
剂用量。结论 最佳提取工艺条件为 3 倍量 95％乙醇回流提取 3 次，每次 1h。
关键词 ：牛樟芝 ；总三萜 ；提取工艺 ；正交试验
中图分类号 ：R284.2 文献标识码 ：A 文章编号 ：1673-6427(2011)06-0067-02
Research on Extraction Technology of Total Triterpenes of Antrodia camphorata
WANG Gong,WANG Jin, XU Wei
（Fujian Institute of Traditional Chinese Medicine, Mainland R & D Center of Taiwans Asian Antrodia
camphorata, Fuzhou 350003, China）
Abstract: Objective To optimize the extraction technology of total triterpenes of Antrodia camphorata.
Methods The orthogonal test of four factors at three different levels was applied with the content of total
triterpenes as index. Results The sequence of factors was as follows: times of exaction > extraction time>
extraction solvent > dose of solvent. Conclusion The optimum condition of extraction technology was 3 times
of 95% ethanol extracted for 3 times, and 1h each time.
Key words: Antrodia camphorate; total triterpenes; extraction technology; orthogonal test
交试验法优选樟芝总三萜的最佳提取工艺，为生产和
制剂研究提供科学依据。
1 仪器与试剂
1.1 仪器 旋转蒸发仪 (R201D，河南英峪予华仪
器厂 ) ；电子天平（上海奥豪斯国际贸易有限公司，
AR2140）；751 型紫外 - 可见分光光度计 ( 上海分析
仪器厂 )。
1.2 试剂 熊果酸标准品（纯度98%，中国药品生
物制品检定所提供，批号：110742-200517）；高氯
酸(优级纯)；冰醋酸(分析纯)；乙酸乙酯(分析纯)；
5%香草醛-冰醋酸；医用乙醇。
1.3 供试品 牛樟芝子实体（台湾亚新生物科技股
份有限公司提供）
2 方法与结果
2.1 樟芝总三萜的含量测定
按总三萜含量测定的常规方法，以三萜类化合
收稿日期：2011-01-18
*通讯作者：王宫（1962-），副研究员，长期从事中药化学及中药保健品
研究，Tel:13905008190
丸的外观较好 ；滴速对滴丸成型和圆整度有一定的
影响，滴速过快，会造成滴液来不及成型，下落过程
中容易堆积、粘连在一起，使丸型不圆整，通过预
试验确定滴速为每分钟 30~40 滴较适宜。按优化工
艺滴制的滴丸呈棕褐色，圆整光滑，色泽均匀。将滴
丸室温密封放置 1 个月后，滴丸的外观无明显变化，
溶散时限符合药典要求。
参考文献
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1998:315.
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DOI:10.13728/j.1673-6427.2011.06.027
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物熊果酸为对照品，用冰醋酸 - 香草醛和高氯酸为显
色剂，用分光光度法在 548 nm 波长下测定总三萜的
含量。
2.1.1 标准曲线的绘制 取熊果酸标准品 1.15 mg，
溶于 10.00 mL 乙酸乙酯中，混合均匀得标准溶液。
分 别 吸 取 0.00、0.10、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00
和 1.20 mL 标准溶液，在 100 ℃水浴上蒸干后加入
0.40 mL5% 香草醛 - 冰乙酸溶液和 1.00 mL 高氯酸，
于 60℃水浴中加热 15 min 后移入冰水浴中，再加入
5.00 mL 冰乙酸，摇匀后置于室温，15 min 后用紫外 -
可见分光光度计在 548 nm 波长下测定其吸光度。根
据测定结果绘制标准曲线。标准品重量在 0~0.14 mg
范围内与吸光度值呈良好的线性关系，其线性回归方
程为 Y=0.140 8X+0.002 6，相关系数 r=0.999 1。
2.1.2 样品溶液中总三萜的含量测定 称取牛樟芝
粉末 10 g，溶于一定体积的溶剂中，超声提取一定
时间和一定次数（提取溶剂、溶剂用量、提取时间
和提取次数依据正交表的安排），过滤，滤液回收溶
剂，用氯仿溶解并定容于 50 mL 量瓶中，精密吸取
氯仿液 10 mL，置分液漏斗中，用饱和 NaHCO3 溶液
萃取 4 次，每次 10 mL，合并萃取液，置 50 mL 量
瓶中，用饱和 NaHCO3 稀释至刻度，制得样品溶液。
吸取一定体积的该溶液，在 100 ℃水浴上蒸干后加入
0.40 mL 5% 香草醛 - 冰乙酸溶液和 1.00 mL 高氯酸，
于 60 ℃水浴加热 15 min 后移入冰水浴中，再加入 5.00
mL 冰乙酸，摇匀后置于室温。15 min 后用紫外 - 可
见分光光度计在 548 nm 波长下测定样品溶液的吸光
度，用标准曲线法计算含量。
2.2 正交试验及结果
本实验选用 L9(34) 正交试验表安排试验 , 设计 4
个试验因素为 ：提取溶剂、提取次数、提取时间及溶
剂用量，每个因素设 3 个水平，以总三萜含量作为考
察指标。其因素与水平见表 1，实验结果见表 2。
3 讨论及结论
对正交试验结果进行直观分析后可以看出，
四个因素中提取次数 (C) 对总三萜提取率的影响最
大，其次是提取溶剂（A）和提取时间（B），影响
最小的因素是试剂用量 (D)，各因素的影响大小是
C>A>B>D。因此我们得出牛樟芝总三萜最佳提取工
艺为 C3A2B2D1，即 3 倍量 95％乙醇回流提取 3 次，
每次 1 h。按最佳提取工艺及样品溶液中总三萜的
含量测定方法测得该品种牛樟芝总三萜的提取率为
l0.02%。
参考文献
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表1 因素水平表
Tab.1 Factors and levels
水平
1
2
3
A 提取溶剂
氯仿
95%乙醇
甲醇
B 提取时间(h)
0.5
1.0
1.5
C 提取次数(次)
1
2
3
D 试剂用量(倍)
3
5
7
表2 L9(34)正交实验结果
Tab.2 Results of orthogonal test
实验号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
K1
K2
K3
R
A
1
1
1
2
2
2
3
3
3
26.10
26.34
24.65
1.69
B
1
2
3
1
2
3
1
2
3
25.60
26.05
25.44
0.61
C
1
2
3
2
3
1
3
1
2
23.83
25.86
27.40
3.57
D
1
2
3
3
1
2
2
3
1
25.92
25.69
25.48
0.44
总三萜得率/%
8.12
8.87
9.11
8.73
9.54
8.07
8.75
7.64
8.26
因　素