全 文 ：第 26卷 第 8期
2 0 0 8年 8月
中 华 中 医 药 学 刊
CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE
Vo.l 26 No. 8
Aug. 2 0 0 8
中华中医药
学刊
215 方法学考察
2151 1 线性关系考察 在 2. 3. 1项的色谱条件下, 取 2. 2.
2项下对照品溶液 ( 0. 174mg# mL - 1 ),分别自动进样 5、10、
20、40、60LL,测定峰面积。以对照品溶液的进样量 ( Lg)为
横坐标,以峰面积为纵坐标, 绘制标准曲线。其回归方程
为: Y= 164 6. 1X+ 153. 27, R = 0. 9996。结果表明, 天麻素
在 0. 87~ 10. 44Lg范围内线性关系良好。
2151 2 精密度考察 取 2. 2. 2项下对照品溶液, 重复进样
6次, 每次 2LL, 测定峰面积, 得 RSD值为 1. 76% , 结果表
明,仪器精密度良好。
2151 3 稳定性考察 取供试品 2. 2. 1项下的供试液 A1,
分别于 0, 1, 2, 4, 8h各进样 1次, 每次 20LL, 测定其峰面
积。得 RSD值为 1. 17% , 结果表明,供试液至少在 8h内稳
定性良好。
2151 4 重复性考察 按上述方法和色谱条件, 取样品 2. 2
项下 2号样品溶液 25mL, 5份, 进行 HPLC测定其峰面积。
得 RSD值为 0. 78% , 结果显示本法重复性良好。
2151 5 加样回收考察 精密量取 2. 2项下供试溶液 2m L,
6份, 分别精密加入天麻素对照品溶液 3. 132m g, 按 2. 2项
下方法,依法制备供试液, 照 2. 3项下色谱条件, 依法进行
含量测定,计算其平均回收率为 101. 52% , RSD为 1. 58%。
2151 6 样品中天麻素的含量 取 2. 2项下 3组供试品溶
收稿日期: 2008 - 03 - 26
作者简介:马梅芳 ( 1973 - ) ,女, 山东枣庄人,主管中药师, 博士研
究生,研究方向:中药质量控制。
液,分别进样 20LL,记录天麻素色谱峰面积,外标一点法计
算含量。见表 1。
表 1 3组样品中天麻素含量
编号 天麻素含量 (m g# mL- 1 ) €x RSD(% )
1 1. 5780 1. 5766 1. 5812 1. 5786 0. 32
2 1. 7364 1. 7477 1. 7200 1. 7347 0. 80
3 1. 6731 1. 7157 1. 7102 1. 6997 1. 36
3 讨 论
以天麻素、甘草次酸等 7个指标综合评判,优选半夏白
术天麻汤的半仿生 -酶法提取液的工艺条件, 能体现中药复
方整体、综合、客观、模糊的特点。以 HPLC测定该复方半仿
生 -酶法提取液中天麻素的含量,方法准确、重现性好。
考虑知识产权问题,本研究中提取工艺设计, 从略。
参考文献
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南葶苈子不同炮制品药效学与急性毒性实验研究
马梅芳,吕文海,李 洁
(山东中医药大学,山东 济南 250014)
摘 要: 目的: 观察研究南葶苈子不同炮制品的镇咳、祛痰、利尿作用和急性毒性。方法: 采用小鼠 /氨水引
咳0法、/酚红排泌0法、大鼠 /代谢笼0法观察不同炮制品在镇咳、祛痰、利尿方面的作用,测定小鼠的半数致死量
和最大耐受量来考察其急性毒性。结果: 南葶苈子不同炮制品能明显延长小鼠咳嗽潜伏期, 减少咳嗽次数, 促进
酚红排泌,增加大鼠排尿量, LD50未能测出, 小鼠最大耐受量 30g生药 /kg, 为成人临床常用剂量的 200倍。结论:
南葶苈子不同炮制品有明显的止咳、祛痰、利尿作用, 其急性毒性较低。
关键词:南葶苈子;炮制; 镇咳;祛痰; 利尿;急性毒性
中图分类号: R2851 1 文献标识码: A 文章编号: 1673 - 7717( 2008) 08 -1825 - 03
Expermi enta l Research on Pharmacology and Acute
Toxico logy ofDescu ra in ia S oph ia ( L. ) W ebb ex Prantl P rocessed
MA M ei-fang, LU W en-ha ,i LI Jie
( Shandong Univers ity of Ch ineseM ed icine, Jinan 250014, Shandong, Ch ina)
Abstrac:tObjective: To study antitussive, expectoran,t diu re tic effects and acute tox icity o fDescurain ia Sophia( L. )
W ebb ex P rantl p rocessed.M ethods: Antitussive experiments in m ice w ith cough induced by amm onia w ater. Expec to rant
1825
DOI：10.13193/j.archtcm.2008.08.226.mamf.085
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expe rim en ts w ith pheno l red exc re tion m e thod in m ice. M etabo lic cage m ethod o f rats w as adopted to be engaged in diu re-
sis expe rim ents. To ob serve acute tox icity by mea sure the 50% le tha l dose ( LD50 ) and the m ax imum to le rance dose
(M TD ) in m ice. Resu lts: D escurainia Soph ia ( L. ) W ebb ex P ran tl P rocessed m ay lead to e longation o f cough - induced
paten t pe riod, reduction of cough tim es and increasing o f pheno l red sec retion volum e in m ice, significantly increa se the
urina ry output in ra ts, the 50% le tha l do se ( LD50 ) can no t be m easu red, the crude drug m ax im um tolerance dose of
m icew as 30g /kg, 200 tim es o f that in hum an. Conclusion: D escu rainia Soph ia ( L. ) W ebb ex P ran tl P ro ce ssed w ere e f-
fec tive on re lieving cough, dispe lling phlegm and diuresis obviously. , and the acu te toxic ity wa s low.
Keywords: Descurainia Sophia ( L. ) W ebb ex P rant;l process; antitussive e ffec;t expectoran t e ffec;t diu re tic e ffec;t a-
cute tox icity
南葶苈子系十字花科植物播娘蒿 [D escura inia Soph ia
( L. ) W ebb ex P rantl]的干燥成熟种子。具有止咳平喘、利
尿消肿、强心之功效, 化学成分研究中迄今尚未找到与药效
相关的活性成分。有关南葶苈子的药理作用虽有研
究 [1 - 5], 但是与其炮制相关的药效学研究尚未见报道。为
进一步探讨南葶苈子炮制的意义, 笔者从镇咳、祛痰、利尿、
急性毒性几个方面对南葶苈子的不同炮制品进行研究。
1 实验材料
111 药物 南葶苈子原药材于 2004年 6月采自济南郊
区,由济南市宏济堂药业集团提供,经山东中医药大学中药
鉴定教研室周凤琴教授鉴定为十字花科植物播娘蒿 [De-
scurain ia Sophia( L. ) W ebb ex P ran tl]的干燥成熟种子。饮
片自制。
生南葶苈子:取原药材,去净杂质, 筛去灰屑。
炒南葶苈子:取生南葶苈子置锅内,文火炒至微鼓起,
表面色泽稍加深, 有香气逸出时, 取出, 放凉。得率
941 5%。
炒南葶苈子 (炒老品 ): 取生南葶苈子置锅内, 文火或
中火炒至微鼓起,表面色泽明显加深,有焦香气逸出时,取
出,放凉。得率 9015%。
酚红:上海试剂三厂生产,批号 990112,分析纯。
氨水: 安徽省萧 县隆达精 细化工厂 生产, 批号
20040309,分析纯。
112 动物 昆明种小鼠, 18~ 22g, 雌雄兼有; W istar大鼠,
150~ 200g,雄性。均由山东中医药大学动物实验中心提供。
113 仪器 721分光光度计 ,上海分光化学仪器厂生产。
2 实验方法与结果
211 镇咳试验 (氨水引咳法 ) [6 - 7] 昆明种小鼠, 18~ 22g,
雌雄各半,浓氨水恒压喷雾刺激 10s后立即取出, 记录小鼠
从接受喷雾开始到出现咳嗽的潜伏期, 以及 2m in内的咳嗽
次数。喷雾后 2m in不咳嗽者舍弃。合格小鼠随机分组,各
组按 20m L /kg体重灌胃给药, 对照组灌胃生理盐水, 大、
中、小剂量生品、炒品及炒老品组分别灌胃相应制品不同浓
度的水煎液,连续 7天, 末次给药后 1h,分别接受氨水喷雾
刺激 10s后立即取出, 记录小鼠从接受喷雾开始到出现咳
嗽的潜伏期及 2m in内的咳嗽次数, 分别观察南葶苈子不同
炮制品的镇咳作用。结果见表 1。
结果表明,不同剂量生品、炒品、炒老品均可使小鼠咳
嗽潜伏期延长, 2m in内咳嗽次数减少, 与对照组比较, 差异
有统计学意义。相同剂量生品、炒品的镇咳效果要明显优
于炒老品,其差异有统计学意义;但生品、炒品之间差异无
统计学意义。同一炮制品不同剂量之间差异也无统计学意
义。
表 1 南葶苈子不同炮制品对小鼠
氨水引咳潜伏期及咳嗽次数的影响
组别 n 剂量
( g /kg)
咳嗽潜伏期
( s, €x ? s)
2m in内咳嗽次数
(€x ? s)
对照组 10 - 2518 ? 6136 4015 ? 6152
生品组 10 115 3817 ? 6170* * 2711 ? 6190* *
生品组 10 310 3814 ? 6126* * 2714 ? 6142* *
生品组 10 610 3912 ? 6139* * 2812 ? 6196* *
炒品组 10 115 3819 ? 6189* * 2618 ? 6196* *
炒品组 10 310 3816 ? 5167* * 2716 ? 6165* *
炒品组 10 610 3911 ? 7168* * 2713 ? 6157* *
炒老品组 10 115 3119 ? 6119* 3414 ? 6135*
炒老品组 10 310 3211 ? 6124* 3411 ? 6138*
炒老品组 10 610 3118 ? 6111* 3417 ? 5179*
注:与对照组比较, * P < 0105; * * P < 0101。
21 2 祛痰试验 (酚红排泌法 ) [6 - 7] 昆明种小鼠, 18~ 22g,
雌雄各半,随机分组, 各组按 20mL /kg体重灌胃给药, 对照
组灌胃生理盐水,大、中、小剂量生品、炒品及炒老品组分别
灌胃相应制品不同浓度的水煎液, 连续 7天 , 末次给药后
01 5h, 将已禁食 12h的小鼠腹腔注射 01 5g /dL的酚红溶液
01 5m L,注射后 015h脱颈椎处死小鼠, 分离气管, 取 5g /dL
N aHCO3溶液 015mL来回灌洗气管 3次, 合并 3次灌洗液,
离心, 取上清液于 546nm 波长处测定吸光度, 用酚红作一
标准曲线,根据曲线计算酚红含量 ( Lg /mL)。结果见表 2。
表 2 南葶苈子不同炮制品对小鼠气管酚红排泌量的影响
组别 n 剂量
( g /kg)
气管酚红的排泌量
(Lg /mL, €x ? s)
对照组 10 - 1173 ? 0161
生品组 10 115 4102 ? 0186* *
生品组 10 310 3191 ? 0194* *
生品组 10 610 3198 ? 0176* *
炒品组 10 115 4105 ? 0186* *
炒品组 10 310 3196 ? 0187* *
炒品组 10 610 3192 ? 0192* *
炒老品组 10 115 3113 ? 0176* *
炒老品组 10 310 3107 ? 0178* *
炒老品组 10 610 3110 ? 0172* *
注:与对照组比较, * * P < 0101。
结果表明,不同剂量生品、炒品、炒老品均可使小鼠气
管酚红排泌量增加,与对照组比较, 差异有统计学意义。相
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同剂量生品、炒品的祛痰效果要明显优于炒老品,其差异有
统计学意义;但生品、炒品之间差异无统计学意义。同一炮
制品不同剂量之间差异也无统计学意义。
213 利尿试验 (代谢笼法 ) [ 6- 7 ] W istar大鼠, 150 ~ 200g,
雄性,灌胃生理盐水 21 5m L /100g后,收集 24h内尿量,以排
尿量达灌胃量的 40%以上者选入实验,取预选合格大鼠随
机分组,于禁食 (不禁水 ) 24h后灌胃给予 5m L /100g含被试
药物的生理盐水负荷,用手压迫大鼠下腹部使其排尽余尿,
对照组给予相应的生理盐水, 放入代谢笼 (每笼 1只大
鼠 ), 连续收集尿液 5h,计算 5h总的排尿量。结果见表 3。
表 3 南葶苈子不同炮制品
对正常水负荷大鼠排尿量的影响
组别 n 剂量 ( g /kg) 5h总排尿量 ( mL)
对照组 10 - 3153 ? 1113
生品组 10 115 5195 ? 1120* *
生品组 10 310 7122 ? 1141* *
生品组 10 610 8157 ? 1139* *
炒品组 10 115 4173 ? 1119*
炒品组 10 310 6101 ? 1114* *
炒品组 10 610 7135 ? 1116* *
炒老品组 10 115 4102 ? 1124
炒老品组 10 310 4113 ? 1121
炒老品组 10 610 4108 ? 1125
注:与对照组比较, * P < 0105; * * P < 0101。
结果表明,不同剂量生品、炒品均可使大鼠排尿量增
加,与对照组比较, 差异有统计学意义; 而炒老品对正常水
负荷大鼠无利尿作用。相同剂量生品利尿作用要强于炒
品,差异有统计学意义。同一生品或炒品的利尿作用随剂
量增大而增强,同一炮制品不同剂量间的差异均有统计学
意义。
214 急性毒性试验 [6 - 7 ] ¹ 半数致死量 ( LD
50
)测定:昆明
种小鼠 20只, 18~ 22g, 雌雄各半,以最大浓度 ( 01 5g /mL )、
最大体积 ( 01 4mL /10g体重 )灌胃不同炮制品的水煎液,连
续观察 7天, 小鼠全部存活,故未能测出 LD50。º最大耐受
量测定: 昆明种小鼠, 18 ~ 22g, 雌雄各半 , 随机分组, 禁食
16h, 各组按 25mL /kg体重灌胃给药, 给药剂量分别为
151 0、221 5、3010g生药 /kg, 分 3次灌胃给药,对照组灌胃生
理盐水,连续观察 7天,记录小鼠体重、饮水、摄食、活动及
毒副反应情况。体重结果见表 4。
表 4 南葶苈子不同炮制品
最大耐受量试验小鼠体重增加值
组别 n 剂量
( g /kg)
3天体重增加值
( g, €x ? s)
7天体重增加值
( g, €x ? s)
对照组 10 - 2133 ? 0166 4117 ? 1114
生品组 10 1510 2101 ? 0168 3184 ? 1111
生品组 10 2215 1163 ? 0162* 3155 ? 0187
生品组 10 3010 1107 ? 0163* * 3133 ? 1104
炒品组 10 1510 1199 ? 0164 3186 ? 1110
炒品组 10 2215 2102 ? 0168 3181 ? 1118
炒品组 10 3010 1193 ? 0172 3171 ? 1105
炒老品组 10 1510 2107 ? 0175 3193 ? 1116
炒老品组 10 2215 2111 ? 0167 3185 ? 1103
炒老品组 10 3010 2109 ? 0172 4101 ? 1110
注:与对照组比较, * P < 0105; * * P < 0101。
结果表明, 3天体重增加值, 生品大剂量、中剂量组明
显低于对照组, 差异有统计学意义; 其它各组与对照组比
较,差异无统计学意义。 7天各组体重增加值与对照组比
较,差异均无统计学意义。观察期内, 各组小鼠无一死亡;
灌胃当天,仅生品大剂量组小鼠活动明显减少,聚集成团,
摄食量减少,但 3天后可逐渐恢复正常。其它各组小鼠饮
水、摄食、活动均正常。测得各炮制品的小鼠最大耐受量
30g生药 /kg,为成人临床常用剂量的 200倍。
3 讨 论
镇咳、祛痰试验结果显示, 不同剂量南葶苈子生品、炒
品、炒老品均有显著的镇咳、祛痰作用,相同剂量生品、炒品
的效果要优于炒老品,而生、炒品之间无显著性差异。说明
南葶苈子只要炒制得当, 不会影响其镇咳、祛痰的疗效, 而
炒过则会使其疗效减低。同一炮制品不同剂量各组之间无
显著性差异,提示应用南葶苈子取其止咳、化痰功效时, 剂
量不必过大,小剂量即可发挥较好的疗效, 这与中医临床实
际情况是相符的,临床资料表明, 复方中应用南葶苈子取其
止咳、化痰功效时, 用量一般为 3~ 9g。
利尿试验结果显示,不同剂量南葶苈子生品、炒品均有
显著利尿作用,而炒老品无利尿作用; 相同剂量生品利尿作
用要强于炒品;同一炮制品的利尿作用随剂量增大而增强。
说明南葶苈子炒后可使其利尿作用缓和, 而炒过则会使其
利尿功效丧失。量效关系提示应用南葶苈子取其利水功效
时,大剂量疗效要优于小剂量, 这与中医临床的实际情况也
是相符的 ,临床资料表明, 复方中应用南葶苈子取其利水功
效时,一般剂量可用至 15~ 30g,甚至更大。
急性毒性试验结果显示, 南葶苈子生品大、中剂量, 短
时间内对小鼠体重增加有一定抑制作用, 大剂量则可使其
活动明显减少,推测与其利尿作用有关,随时间延长, 药物
作用减弱,可逐渐恢复正常; 相同剂量,炒品、炒老品对小鼠
活动、体重增加无影响。说明南葶苈子生品有一定毒副作
用,但毒性较低, 可以耐受。炒制以后可使其毒副作用明显
降低,能进一步提高用药的安全性。此结果与传统认为
/葶苈子有小毒,炒后可使其毒性降低0的理论相符。
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