全 文 ：☆盆翻醇藻祠☆— 资任编辑 肖 乐 周 围单胞藻饵料在扇贝育苗生产中 V al X (ha g 针剂 1 支和 V . .刃. s mg 针剂占有很重要的地位。 在扇贝育苗中 , l 支 , 即配成 N 、 P 、 eF 、 is 、九 、 V劝 营目前尚未有完善的人工饵料和其他 养盐母液 。代用饵料 ,可以说有无单胞藻饵料直 培养液的配制 :接关系到扇贝育苗的成败 。本文是根 在 5 X( X] 腼 l 消毒海水中 , 用高压据作者近十年在育苗场承担单胞藻 消毒过的移液管或量筒依次加人营饵料培养技术指导的实际工作经验 养母液 N 、 P 、 eF 、 iS 、 V。 、 V` 各 5而 。归纳 、 总结而成 。 注意每加完一种母液后要摇匀再加(一 )选种及一级扩大 第二种 。 iS 只有硅藻类加 ,其他藻种选种一般在亲贝人池前 2一 3 个 不加。月进行 。种类要根据不同扇贝育苗时 一级扩大的接种 、 添加新培养液间来确定 。 以海湾扇贝 (A gor ep c t en 可按 :1 1一:1 5 进行 。 根据生长情况iar id an s) 育苗为例 : 2一刁 天扩种或添加新培养液一次 。海湾扇贝亲贝人池一般在三月 注意同一瓶培养液不要给不同种藻初 ,由于此时水温较低 ,一级扩大培 加 , 以免交叉污染 。养一般先选一些低温种类如新月菱 一级扩大培养室的温度 、 光照要形藻 (iN sctz hi a c h set ir u m ,硅藻类 ) 、 根据所培养的藻种适宜条件进行控87 01 (1绷肠 51 5 sP . ,金藻类 )等。 以后 制 。 低温种为主时 , 控制在 15一逐渐过渡到中、 高温种 , 如扁藻类 18℃ , 3X( 冷e s X( X) L 坏 ; 中 、高温种为
( lP
a t , m o
asn su 玩。司而 “ 苗 .s .P he l一 主 时 , 控 制在 18一佗 5℃ , 5《拟】-
g o la n d i e a )
、
30 1 1 ( lsoc hyr
s
i
s g al ban
a , l lX X) 肠 x o
金藻类 )等。 藻种必须经过严格筛选 。 藻种要采取封闭式培养 ,每日摇
作者在工作中发现 , 即使是同一种 动 4 次以上以利其生长 。
藻 ,由于燕种来源不同 ,它们在适应 (二 )二 、 三级扩大培养的计划安
性 、 增殖速率等诸多方面都存在较大 排和操作程序
差异 ,所以生产场家可多去几家保种 要搞好单胞藻饵料生产以保证
单位购买藻种 ,也可自己用稀释分离 亲贝暂养及幼体培育饵料供应充足 、
法 、 平板分离法等分离藻种 ,从中选 优质 , 生产计划安排是非常重要的 。
择出无杂质 、增殖快 、 无原生动物及 许多场家正是由于这点没有做好 ,导
杂藻污染的优质藻种进行一级扩大 致饵料供应不足 ,从而使育苗失败 。
培养。 首先需由育苗技术人员提供所
一级扩大容器一般用三角烧瓶 需饵料的时间 、数量 ,然后再根据水 、
和 1一 2 万毫升的白细口瓶 。 总容 t 气温情况 、天气情况 、设备条件及一
为全部单胞藻培养水体的 1l/ o 。 三 级扩大培养所能提供出的燕液 t 确
角烧瓶要煮沸消毒 。白细口瓶的消毒 定二级扩大培养的开始时间 。作者根
是用 :1 1盐酸 ( H a )浸泡后放 t 4 小 据实际工作经验总结出一简易推算
时以上 ,再用冷开水冲洗干净 (用 PH 公式如下 :
试纸测试为中性 ) , 瓶口用高压消毒 2、 石B A/
过的包瓶纸扎紧 。 X二 3n
一级扩大培养用水要用脱脂棉 其中 : A 为一级扩大可提供出的
过滤后煮沸消毒 。营养盐母液要高压 藻液量 ;
灭菌消毒 。 B 为投喂时平均日投饵 t ;
营养盐母液的配制 :称取硝酸钠 X 为开始二级扩大培养的时间
( N aN 0
3 ,化学纯 )61 .2 5 克 、 磷酸二氢 与开始投喂时间相隔的天数。
钾 ( K H ZP0 4 ,化学纯 )4 .4 克 、 柠檬酸 此公式可根据单胞藻培养条件
铁 (化学纯” . 1克 、硅酸钠 ( N a多10 3 , 适宜与否做适当加减。
化学纯 ) 5 克 , 分别溶人 5X( ha l蒸馏 三级扩大培养于供饵前一周左
水中 ,各放人一棕色细口瓶中。 再取 右开始 。 投喂池必须停加营养盐 3
两个棕色细口瓶各加人 1X( 刃吻 1蒸馏 天 、 藻液密度和原生动物含量符合投
水 。 然后全部放人高压灭菌器中消 喂标准 (新月菱形藻和 87 01 达 30
毒 。冷却后在两燕馏水瓶中分别加人 万 / d 以 上 ;3 o n 达 2X() 万 / d 以
— 《中国水产》 19 9年 1期—
杨秀生
单胞藻饵料培养实用技木
乍f.日.、ù一.:一J沙劝刀了库红声召纽产吟翻
一 34 一
上 ;扁藻 40 万/ 衬 以上 ;原生动物量
开始供饵后每日要做好计划安排 , 供饵前期日扩
种量要大于日供饵量 , 中后期二者达到平衡 。
二 、 三级扩大培养所用容量一般为玻璃钢槽和水
泥池 。 容积在 2一 2m0 V个 ,总容量应不低于扇贝育苗
水休的 7口% 。 培养水体不够或气温太低时 , 可用聚乙
烯塑料袋进行封闭式充气培养 。
聚乙烯塑料袋封闭式充气培养是一种保温性和防
污染性都比较好的方法 ,尤其适用于二级扩大培养 。其
安装方法为 :
1
、 根据需要取适当长度聚乙烯塑料袋 (长 3一 5
米 ,宽 .0 5一 1米 ) 。
2
、 两端各用乳胶管捆扎固定于一硬塑料管外 。 两
端所用硬塑料管 口径不 同 : 一端直径为 1c5 m ,长 巧 一
2仅m ,为加液口 ;另一端直径为 5一 1c0 m ,长 10 一 1c5 m ,
为气管通人口 。
3
、 充气管从气管通人口进人 ,并用坠石固定于袋
底 , 以防充气时浮于水面 。充气管插人部分长度与袋长
相近 ,其上顺次间隔一定距离穿一小孔 (即充气孔 ) 。
4
、 两端 口用洁净纱布包扎防尘 。
立 、 三级扩大培养操作每 日工作程序为 :
上午完成 : 1 、 中和消毒海水
2
、 测余抓
3
、 施加营养盐母液
4
、接 、扩种及添加新培养液
下午完成 : 5 、消毒池子及用具
6
、消毒海水
7
、 配制第二天所需营养盐母液
8
、消毒水泵及水道板
(兰 )管养盐母液配制
为了节省接种 、加培养液时间 ,使单胞藻充分利用
有效的背养和光照进行光合作用 , 各种试剂和营养盐
必须提前一天按所需量配好母液 。
母液浓度 :
N :硝酸钠 (农业用即可 )6 0 ~ 一 120 克溶人 1X( X) m l
淡水中。
P : 确酸二氢钾 ( 农业用即可冲 } 一80 克溶 人
1仪X] 腼 1淡水中。
eF :柠檬酸铁 2 克溶人 1X( X) I n l 淡水中 。
有一点应注意 : 扇贝育苗中单胞藻饵料培养应避
免施用有机 N 肥 , 以防 N H+-4 一N 过高影响育苗。
母液要煮沸消毒 ,并放置于暗处保存备用 。
(四 )消毒方法
应用于饵料生产上的消毒方法有许多 。 作者在生
产实践中也曾使用过紫外线处理 、酸处理 、 高锰酸钾消
毒等方法 ,但感到均不如有效氯消毒适用 、 有效。 含有
效抓的药物有次抓酸钠 、 次抓酸钙等 。
培养池和用具的消毒方法 : 用含有 1嘶〕mP 以上
有效抓的淡水浸泡 (水泵要抽吸数次以消毒管道 ) ,放
置 8 小时后用淡水或消毒海水冲净 。
— 《中国水产》
海水的消毒方法 : 在过滤海水中加人次氯酸钠
( N
a
CI O ) 溶液使水中有效氯浓度达到 1仆一2仇甲m ,放
置 8 小时后加人硫代硫酸纳 ( N a燕0 3 )中和至无余氯为
止 。余氛的测定用碘化钾一淀粉试剂 ,方法是在中和后
的消毒海水中滴人一滴该试剂 ,如变蓝色则为有余抓 ,
如无色即为无余氯。
碘化钾一淀粉试剂的配制 :取可溶性淀粉少许 ,用
蒸馏水加热溶化后再加人少许碘化钾 (KJ )搅匀 ,冷却
后装人试剂瓶备用 。
聚乙烯袋封闭式培养的消毒方法 : 在安装好的聚
乙烯袋中加人适量含有效氯 1仆一20P pm 的过滤海水 ,
8 小时后中和即可 。
(五 )培养方法
在中和好的海水中依次加人 N 、 P 、 eF 母液 , 加人
量为每立方水体 N l X( 刃咖 l , P l X() m l , F 。 50 血。 硅藻
用 玻璃 钢 槽或 聚 乙 烯袋 培 养 时 还 需 加 硅 酸 钠
( N哨10 3 ) 10岁m 3。 金藻类用水还需加人 V 。 , l X( 如 1岁m 3 、
V .夕 .s m岁m 3混合均匀后即可接种或用于添加新培养
液。
接种前藻种要经过严格镜检确保无污染 。
接种 、 加新培养液比例为 :1 1一 1 :5 , 时间间隔为
2一刁 天扩种或添加新培养液一次。 一般在水温低 、 藻
种少的情况下按藻 :培养液= 1: 5一 7 接种 ,培养 5一 7 天
后再按 l’: 1一 2 扩种或添加新培养液 。 待 2一 3 天后即
可再扩种 、 添加新培养液或投喂 。 在水温高 、 原生动物
易污染的情况下 , 扩种初始密度一定不要低于投喂标
准密度 (见二 )的 1乃 , 以保持原藻种优势并使单胞藻
始终处于指数生长期。
如果单胞藻已处于指数生长后期而尚未达到投喂
密度或扁藻上浮浓缩投喂后剩余藻液中未发现污染
时 , 可直接用营养盐母液按每立方水体积 N 25 0 - ~ .
5X() n d
,
P 25一5 0m l , eF l侧} 一 Zo inl 施肥 ,这样可使单
胞藻重新进人指数生长期 。
日常管理 :
1
、 充气 : 24 小时连续充气 。 气量在 目测液面水流
涌动但不呈沸腾状即可 。如无充气设备 ,培养池每 日需
用搅板 (木质或塑料质 )搅拌 4 次以上 (注意每次都要
把全部池底搅到 ) 。高温 、光强 、 刚接种及培养水体较深
时要增加搅拌次数。 搅拌时要防止藻液溢出或溅人别
的池中 。
2
、温度控制 :低温时可用暖气 、 预热水 、采用聚乙
烯塑料袋封闭式培养等方法调节 ; 高温时可通过开窗
通风 、 遮帘等方法调节 。 低温种为主时 , 室温控制在
l于一 18 ℃ ; 中 、 高温为主时 ,室温控制在 18一 2 5℃为好 。
3
、 光强控制 :单胞藻饵料培养光照主要依靠 自然
光源 。 晴天 ,在无充气设备或藻液深度在 3c0 m 以下培
养时 ,低温种光强应控制在 1《D X)[ L u x 以下 ,高温种光
强应控制在 15以洲) L ux 以下 。光线过强可用遮帘方式调
节 。 充气培养 、 藻液深度在 3c0 m 以上时光强可不加控
制 。 在阴雨天 , 光强低于 3 (以 ) L u x 时要采用人工光源
(日光灯 、碘钨灯等 )提高光照量 。 藻液深度最多不应超
19 9 年 1期— 一 35 一
过 7珑m ,否则不利其进行光合作用 。
(六 )防污染措施
在单胞藻生产性培养中 , 防污染问题是其最重要
的一环 。可以说它直接关系到单胞藻培养的成败 。 以往
单胞藻饵料培养技术的资料和文章在防污染问题上往
往只强调消毒 、 藻种选优 、提高接种比例等方面 ,而忽
略了工作人员的操作培训这一重要环节 。 而恰恰是操
作不当 ,造成了许多育苗场家单胞藻饵料培养失败 。
防污染应采取以下措施 :
1
、 培养室严禁非工作人员进人 。 工作人员必须穿
水靴 , 水靴要经次抓酸钠水 (有效抓浓度 1X() pp m 以
上 )浸泡消毒方可人内。
2
、 加强操作人员的防污意识 ,做到中和前 、 施肥
前 、 接种及添加培养液前必须洗手 。 严禁用手接触藻
液 。
3
、培养池及培养用水必须经足 t 的有效抓消毒 8
小时后方可使用 。
4
、水泵及用具 、 水道板必须每天消毒 (水道板用含
1X( 知p m 以上有效抓的淡水冲洗 )。 消毒后的水泵及用
具在使用前严禁放在未消毒的地方或水道板上 。
5
、不同藻 、 不同池的用具未经消毒严禁混用 ,以免
交叉污染 。
6
、在水沮较高时要适当提高消毒用药浓度并提高
接种密度 , 以保持原藻种优势 ,防止原生动物策殖。
7
、 发生严重原生动物污染的藻池要先用 1X( 丫p m
有效抓杀灭后再放掉 , 以免污染水道 。
(七 )常见异常情况的分析与处理
1
、 下沉 :
如在刚接种或添加营养液后发生下沉现象可能是
由于 :
l) 环境变化过大 :如光 、 温等不适 。处理方法 : 调节
光 、 温 ,加强搅拌 。
2 )营养盐浓度不适 :如 P 、 eF 等浓度过高。 处理方
法 : 加 N ,调节 N 、 P 比 ,使之不少于 1:0 ;1 加水稀释 ,使
eF 浓度小于 0 . SP Pm 。
3) 伴随变色 、 藻体死亡是水未中和 。 处理方法 :放
掉 。
如在培养过程中 、 后期发生下沉现象可能是由于 :
4 )有毒性生物或细菌污染 。 镜检可发现藻体相互
粘连 、 结块 、有大量原生动物 。 处理方法 :用 1X( 知pm 有
效氛杀灭后放掉 。
5) 藻液老化 。 镜检可发现燕体形态 、 大小改变 ,有
死亡细胞 ,原生动物极少或无。 处理方法 :添加新培养
液 。
6) 新水泥池未处理好 ,碱性过大 。 镜检无原生动
物 ,侧 PH达 .9 5 以上 。 处理方法 :用盐酸调节 P H 至 8
左右 ,加强搅拌。
7) 正常下沉 : 扁藻夜间下沉 。 镜检藻休正常 ,有分
裂细胞 。 处理方法 : 不做处理。
下沉情况的处理首先是查明原因 , 再根据不同的
原因做适当处理 。
一 36 一 — 《中国冰济,
2
、变色 :
1 )刚接种或加水后出现变灰 、 藻体死亡 ,为水未中
和 。 处理方法 :放掉。
2 )培养过程中出现颜色变淡 、 藻液密度下降为有
捕食性敌害生物污染 。 处理方法 :用 1X( 扣p m 有效抓杀
灭后放掉 。
3) 培养过程中出现颜色变灰 、 起泡沫 ,镜检有大量
死细胞为有毒素型生物污染 。 处理方法 : 同上。
4 ) 培养过程中出现颜色变为非原藻种特有颇色 ,
而是出现其他的颜色为有杂藻污染 。镜检可发现杂藻 。
处理方法 : 同上 。
5) 培养过程中藻液变混独 ,液面有菌膜 ,镜检藻体
相互枯连 ,结成团块 ,表明有细菌污染 。处理方法 : 污染
严重要用 lX( 扣pm 有效氛杀灭后放掉 。 如污染不太严
重可试用抗生素 (如土霉素 、 氛霉素等 ) 1一口 p pm , 1次 /
日 ,连用三天 。
作者地址 :青岛市贵州路 47 号 , 山东省海水养技研究所
娜编 : 2自父幻2
若先泛三试汽父、勺刘飞级 }岌鉴刁瓤节涓赢《中国名特优经济水产品养殖》
正式出版并开始征订
由中国水产杂志社组织编著 、上海科学技术出版
社出版的《中国名特优经济水产品养殖》一书正式出
版 。
该书为《中国经济水产品原色图集》的姐妹篇 ,内
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19 9 年 1期