全 文 ：第 ３ ６卷 增刊 ２青 岛 科 技 大 学 学 报 （ 自然科学版 ）Ｖｏｌ ．３６ Ｓｕｐ ． ２
２ ０ １ ５年１ ２月Ｊｏｕｒｎａ ｌｏｆＱｉｎｇｄａｏ Ｕｎ ｉｖｅｒｓ ｉｔ ｙｏｆ Ｓｃ ｉ ｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ （ＮａｔｕｒａｌＳｃ ｉｅｎｃｅＥｄ ｉｔ ｉｏｎ ）Ｄｅｃ ．２０ １５
文章编号 ： １ ６７ ２－ ６９８ ７ （ ２０ １ ５ ） Ｓ２ －０ ０ ９０ －０４
柠檬酸铁对舟形藻生长及理化成分的影响
赵世宝ｗ
（ １ ． 青岛科技大学 化工学院 ，山东 青岛 ２ ６６ ０４２ ；２ ？ 青岛琅琊台集团股份有限公司 ， 山 东 青岛 ２ ６ ６ ４０ ０）
摘 要 ： 微藻的 生长受很 多 因素的 影响 ，文章通过对海洋底栖硅藻进行培养 ，研究培养基 中柠檬酸铁浓度对
舟形藻生长及理化成分 的影响 ， 为舟形藻的 扩大培养及在饵料方面的 大规模应 用提供理论基础 。 实验方法 ：
静置培养 ，每天摇瓶 ３ 次 ， 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量 ， 蒽酮 法测 定 多糖含量 ，分光光度法测定 色 素含量 ，
改 良的酸水解法测 定粗脂含量 。 实验结果如下 ： 当培养基 中 的柠檬酸浓度为 ２ 吨 ＊Ｌ＿＼ 最大细 胞密 度为
４． ９７ Ｘ １ ０４ 个 ？ ｍＬ— １ ， 而增长率也最大 ， 达 ０． ０ ７６ｄ— 。 藻细胞的理化成分受柠檬酸铁浓度的影 响显著 ， 当培
养基中柠檬酸铁浓度 为 ８ｍｇ ．Ｌ一 １ 时 ， 单个藻 细胞 中蛋白 质含量 、 多糖含量 、粗脂含量 均 为最 高 ， 当柠檬酸浓
度为 ４ｍｇ ．Ｌ－ １ 时 ，藻类 的叶绿素和类胡 萝 卜 素含量最高 。 由此可见 ， 高 农度柠檬酸铁有利 于胞 内 理化成分
的积 累 ， 低浓度柠檬酸铁有利 于舟形藻细胞的 生长 。
关键词 ： 舟形藻 ； 生长条件 ； 理化成分
中 图分类号 ： Ｑ９４ ９ ． ２７文献标志码 ： Ａ
ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＦｅｒｒｉｔｅｏｎｔｈｅＧｒｏｗｔｈａｎｄＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ
Ｃｏｍｐｏｓ ｉｔｉｏｎｓｏｆＮａｖｉｃｕｌａ Ｌｅｎｚｉ
ＺＨＡＯＳｈ ｉ－ｂａｏ１ ２
（ １ ． Ｃｏｌ ｌｅｇ ｅｏｆ Ｃｈｅｍｉ ｃａ ｌＥｎｇ ｉｎｅ ｅｒｉｎｇ ，Ｑｉ ｎｇｄａｏＵｎ ｉ ｖｅ ｒｓｉ ｔｙｏｆ Ｓｃ ｉｅｎｃ ｅａｎｄ Ｔｅｃ ｈｎｏ ｌｏｇｙ ，Ｑｉｎｇｄａｏ２ ６ ６０４ ２ ， Ｃｈ ｉｎａ ；
２ ．ＱｉｎｇｄａｏＬａｎｇｙａ ｔａ ｉ Ｇｒｏ ｕｐＣｏ． ？Ｌｔｄ ． ？Ｑｉｎｇｄａｏ２ ６ ６ ４００ ， Ｃｈｉｎａ ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ ：Ｔｈｅｇｒｏｗｔ ｈｏｆｍｉ ｃｒ ｏａｌｇａ ｅｗａｓａｆｆｅｃｔ ｅｄ ｂｙ ｍａｎｙｆａｃ ｔｏｒ ｓ ，ｃｕ ｌｔｕｒｅｏｆ ｂｅｎ ｔｈ ｉｃｄ ｉａｔｏｍ ， ｔｏｓ ｔｕｄｙｔｈｅ
ｅｆｆｅｃｔｏｆｆｅｒｒｉ ｃｃ ｉｔｒａ ｔｅｏｎ ｔｈｅｇ ｒｏｗｔｈａｎｄｂ ｉｏ ｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｍ ｐｏｓ ｉ ｔ ｉｏｎｓ ｏ ｆＮａｖｉ ｃｕｌａ ｌｅｎｚ ｉ ，ｉｔｃａｎｐｒｏｖｉｄｅａ ｔｈｅｏｒｅｔ？
ｉ ｃａｌ ｂａｓｉ ｓｏｆｔｈｅ ｔｒａｉｎ ｉｎｇａｎｄ ｌａｒｇ ｅ－ ｓｃａｌ ｅａｐｐ ｌｉｃａｔ ｉｏｎｓ ．Ｗｈｅｎｔｈｅ ｆｅｒ ｒｉｃｃｉｔｒａ ｔｅｗａｓ２ｍｇ？ ，ｔｈｅｈｉｇｈｅｓ ｔｄｅｎ？
ｓ ｉｔｙ ｏ ｆａ ｌｇａｌｃｅ ｌ ｌ４ ． ９７Ｘ １ ０４ｍＬ－ １ ， ｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔｇｒｏｗｔｈｒａｔｅ０ ． ０７ ６ｄ＿ １ ． Ｂｉｏ ｃｈｅｍｉ ｃａ ｌｃｏｍ ｐｏ ｓ ｉｔｉｏｎｓｏ ｆａｌｇａｌｃｅｌｌ ｓ
ｗｅｒｅｓ ｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ａ ｆｆ ｅｃｔｅｄｂｙｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔ ｒａｔｉｏｎｓｏｆ ｆｅｒｒｉ ｃｃｉ ｔｒａｔ ｅ ，ｔｈｅｍｏｓｔｐｒｏｔｅｉｎｃｏｎｔｅｎｔ ，ｐｏ ｌｙｓａｃ？
ｃｈａｒ ｉｄｅｃｏｎｔ ｅｎｔ ，ｃｒｕｄｅｆａｔｃｏｎｔｅｎｔｗｅｒｅｏｂｔａ ｉｎｅｄｕｎｄｅｒｔｈｅｆｅｒ ｒｉｃ ｃ ｉｔｒａ ｔｅｉ ｓ８ｍｇ ？Ｌ＿ １ ，ｈ ｉｇｈｃｏｎｃｅｎｔｒａｔ ｉｏｎｓｏ ｆ
ｆｅｒ ｒ ｉｃ ｃｉ ｔｒａｔｅｗｅｒｅｂｅｎｅｆｉｔｔｏａｃｃｕｍｕｌ ａｔ ｉｏｎｏ ｆｂ ｉｏ ｃｈｅｍｉ ｃａ ｌｃｏｍｐｏ ｓ ｉｔ ｉｏｎｓ ，ｂｕ ｔｎｏ ｔｃｏｎｄｕ ｃ ｉｖｅｔｏｔｈｅｇｒｏｗｔｈｏｆ
ｃｅ ｌ ｌｓ ．Ｗｈｅｎｔｈｅｆｅｒ ｒｉｃｃ ｉ ｔｒａｔ ｅｗａｓ４ｍｇ？Ｌ＿ １ ，ｔｈｅｃｏｎ ｔｅｎｔｏｆｃｈｌｏ ｒｏｐｈｙ ｌｌ ａｎｄｃａｒｏ ｔｅｎｏ ｉｄ ｗａ ｓｈ ｉｇｈｅｓｔＴｈｕｓ ，
ｔｈｅ ｉｎｃｒｅａ ｓｉ ｎｇｆｅｒｒ ｉｔｅｃａｎ ｅｌｅｖａ ｔｅ ｂｉ ｏｃｈｅｍ ｉｃａｌｃｏｍｐｏｓ ｉ ｔ ｉｏｎｓｏｆａ ｌｇａ ｌｃｅ ｌｌｓ ，ｔｈｅｌｏｗｃｏｎｃｅｎ ｔｒａｔ ｉｏｎ ｏｆ ｆｅｒ ｒｉｔｅｃａｎ
ｐｒｏｍｏｔｅｔｈｅｇｒ ｏｗｔｈｏｆ Ｎａｖｉｃｕｌａｌ ｅｎｚ ｉ ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ ：Ｎａｖｉ ｃｕ ｌａ ｌｅｎｚｉ ＾ｇｒｏｗｔｈｃｏｎｄｉｔ ｉｏｎｓ ；ｂ ｉｏｃｈｅｍ ｉｃ ａ ｌｃｏｍｐｏｓ ｉ ｔｉｏｎｓ
近 ２０ 年来 ，随着市场对鲍和海参需求的增加和野生的理论基础 ， 对鲍和海参的育苗工作及水产养殖事业具有
资源的枯竭 ，作为新兴海水养殖业的鲍和海参人工养殖 已实际意义 。
在多个国家得到发展 ［ １ ３ ］ 。 容易被鲍和海参利用的硅藻有由于底栖硅藻不能悬浮在水中 ， 并充分利用水 ， 因此
两类 ：一类是具有较强附着能力 的硅藻 ， 在被舔食时可借主要利用固定化技术开发底栖硅藻 。 但是固定化技术 目
助附着力打开硅壳 ， 另一类是细胞太大的硅藻和一些附着前不易放大 ，无法达到规模化生产 ， 而从 自 然海区收获的
能力低但壳硅化程度较大的硅藻 ，在被舔食时不能借助附底栖硅藻 ，质量得不到保证 ， 会直接影响鲍苗和海参苗的
着力打开硅壳 ， 因此大部分被鲍和海参以活细胞 的形式排成活率及变态发育 。 本工作通过打破传统固定化培养底
出体外ｗ 。 开发出来的人工饵料不能适应鲍和海参幼体栖硅藻的模式 ，去掉附着基 ， 以期获得更高的细胞生长速
的摄食习性和营养需求 ［ ５］ ，通过研究营养盐中的柠樣酸铁率和生长密度 。 根据内 因和外 因 的情况 ，随时调整管理措
对底栖硅藻的影响 ，为今后大面积培养底栖硅藻提供一定施 ， 为幼鲍和海参提供质优量足 的饵料 。
收稿 曰期 ： ２ ０ １ ５－ １０ － １ ５
作者简介 ： 赵世宝 （ １９ ８ １— ） ，男 ，硕士研究生 ．
增刊 ２
赵世宝 ：柠樣酸铁对舟形藻生长及理化成分的影响
中 ， 残渣加人 ５ ｍＬ８ ０％丙酮混勻 ， ４ °Ｃ放置 ３ ｈ后离心 ， 合
１ 并上清液 ，以 ８０％丙酮定容 ，用分光光度法［ ６＂ ° ］测定叶绿
１ ． １ 试剂与仪器 素 ａ 、叶绿素 ｂ 、总叶绿素 、类胡萝 卜素含量 （ｍｇ ？Ｌ－ １ ） 。
牛血清蛋白 标准液ｒａ 、考马斯亮蓝 （＞２５〇Ｐ］ 、 蒽酮试
剂 （配制的蒽酮试剂呈淡黄色方可用于实验 ） ［ ６ ］ 、葡萄糖标
准溶液 （ １ｍｇ？ ｍＬ＿ ｌ ） ， 常规试剂均为 国产分析纯 。２ ． １ 不同柠樣酸铁浓度舟形藻生长动力学 曲线
生物显微镜 ，ＣＸ－ ２ １ 型 ； 电子天平 ， ＦＣ２ ０４ 型 ； 血球计不同柠檬酸铁下舟形藻的生长动力 学 曲 线见 图 １ 。
数板 ， Ｘ＆Ｋ－ ２５ 型 ；紫外可见分光光度计 ， ＵＶ－２０００ 型 ； 快不同铁离子对舟形藻的生长有极显著影响 （ ｊｂ＜０ ． ０ １ ） 。 从
速混匀器 ， ＳＫ－ １ 型 ； 冰箱 ， ＢＯ＞２３ ６Ｈ 型 ； 高速冷 冻离心接种到第 ６ｄ 藻细胞处于延滞期 ， 各实验组藻细胞密度增
机 ，ＧＲ２ １Ｇ 型 ；座式 自 动 电热压力蒸汽灭菌锅 ， ＺＤＸ－３ ５ＳＢＩ长缓慢 ，从第 ６ｄ 始 ， 不同柠檬酸铁浓度培养基中 的藻 细
型 ； 电热恒温 水浴锅 ， ＤＫ－ ９８－ ＩＩＡ 型 ； 电热 鼓风干燥箱 ， 胞密度 出现较大变化 ，柠檬酸铁浓度为 ２ｍｇ？ＬＨ 的实验
１０ １Ａ－ １Ｅ型 。组藻细胞生长较快 ，最大藻细胞密度可达 ４ ．９７ Ｘ １０４ 个 ？
１ ． ２ 培养基 ｍＬ－ １ ， 柠檬酸铁浓度为 １ｍｇ？Ｌ－ １ 的实验组次之 ，在培养
以普通培养基做对照 ， 即柠檬 酸铁浓 度为 １ｍｇ？基中增加柠檬酸铁的浓度 ，细胞密度逐渐减小 。 当柠檬酸
Ｌ一、设置柠檬酸铁浓度梯度为 １ ， ２ ， ４ ， ８ｍｇ ＊Ｌ＇各实验铁浓度为 ８ｍｇ ？时 ， 细胞密度最低 。 郑维发等 ［ １ １ ］研
组 的 其 他 营 养 盐 浓 度 相 同 ， ＮａＮＯ３ １ ００ｍｇ．Ｌ—＼究表明 ，舟形藻 （ ｉＶ聊＇ｃｍＷ ＢＴＯＯ Ｉ 在 ０？ ４ｍｇ ？Ｌ— １ ＦｅＣｌ３
ＫＨ２ ＰＯ４ １０ｍｇ ？ Ｌ＿ １ ， Ｎａ２ Ｓｉ０３ ？９Ｈ２ ０１ ００ ｍｇ ？Ｌ￣ ＇ Ｊ／２中生长速率最髙 ，大于 ４ｍｇ．Ｌ－ １ 时 ，呈现明显的 下降趋
微量元素 ｌ ｍＬ ． Ｌ－ １ 。势 。 实验结果表明 ： 当柠檬酸浓度达到 ８ｍｇ ？Ｌ— １ 时 ， 不
１ ． ３ 藻细胞培养 利于细胞的生长 。
不同藻种有不 同的接种密度 ， 如果藻细胞在水中分布
均匀 ， 则接种时间不受限制 ，但很多藻细胞都有趋光上浮广
的习性 ， 一般选择上午 ８？ １ ０ 时进行接种 。 反应器灭菌言 ６
后 ，按 １：５ 的 接种量进行接种 ， 接种密度 为 １ ． ５ Ｘ １ ０４ ｔ４ 二
个 ． ｍＬ－ １ ， 培养温度保持在 （ ２０ 士１ ）°Ｃ ， 自 然散射光照 ，｜ ３＿ ＿４实验过程的关照强度为 ： ２０００ ￣ ９０ ００ｌ ｘ ， 静置培养每天｜２ｆ一＾ ＾摇匀反应器 ３ 次 ，賴－天观察麵生长状况 。ｉ
生长测定°
０ ２４６８１ ０１２１ ４１ ６每天肉眼观察外观 ， 看表面气泡情况 ， 培养基颜色 ，附 培养时间 ／ｄ
着情况 。 摇匀后 ，取 ３ 个样品 做平行实验 ，用血球计数板团 ，
计数 ，紫外分光光度计测定光密度值 ，观察细胞形态 ，检査 Ｆ＾ｆｉｇ． １Ｌ ｆｆｅｃｔ ｏｔ ｉ ｅｒｎ ｔｉｃｃｏｎｃｅｎｔ ｒａ ｔ ｉｏｎ ｓｏｎｃｅ ｌ ｌ细胞的生长状况 ，计算比生长速率？ 。ｇ＿ｈ ｍｅ ｅｒｆｋ
１ ． ５ 舟形藻细胞中可溶性蛋 白质含置的测定
取适量藻液测定 ＯＤ＾ｎ－ ， ８０００ｒ？ｍｈｒ １ 离心去除上２． ２ 不同柠檬酸铁浓度对舟形藻 比生长速率的彩响
清液 ，用去离子水洗涤 ３ 次沉淀收集海藻泥 ， 加适量蒸馏不同柠檬酸铁浓度下舟形 藻的 比生长速率见图 ２ 。
水反复冻融 ３ 次 ， ８０００ 转离心 １ ５ｍｉｎ 收集上清 ， 定容 。 生物量见图 ３ 。 当培养基 中柠檬酸铁浓度为 １ ？ ２ｍｇ ？
取 １ｍＬ待测液 ，用考马斯亮蓝法 ［ｓ ］测定并计算每个细胞Ｌ－ １ 时 ，藻细胞的 比生长速率较大 ， 其中柠檬酸铁浓度为 ２
中 的蛋 白质含量 。ｍｇ ＊Ｌ－ １ 时 ，藻细胞的 比生长速率最大为 ０ ． ０７ ５７ｃＴ １ ，逐
１ ． ６ 舟形藻细胞中可溶性多糖含置的测定渐提高培养基中的柠檬酸铁浓度 ， 舟形藻细胞的比生长速
取一定量进人稳定期的藻液 ，测 〇Ｄ？。？后 ，用上述方
法反复冻融破壁后 ， ８０００ 转离心 １ ５ｍ ｉｎ ， 收集上清液 ， 藻ａａ
泥加人适量蒸馏水 ，沸水浴 ３ｈ ，离心得上清 ， 将两次上清７０ ． ０７ｐ］＾合并 ， 定容 。 吸取 ０ ． １ｍＬ提取液 ， 加人 ４ｍＬ 冰浴蒽酮混！
匀 ，蒽酮 比色法 ［ｓ ］测定并计算每个细胞中多糖含量 。 ｂ
１ ． ７ 舟形藻细胞中粗脂含量的测定ｇ Ｑ （） ３改 良的酸水解法测细胞中粗脂含量Ｗ 。 ｃ
根据锥形瓶中增加的质量 ， 计算 出 样品中粗脂质量 ，ｌ０ １
根据细胞数及提取液体积 ， 计算出每个细胞中粗脂含量 。 ＾ １２４８
１ ． ８ 舟形藻细胞中色素含置的测定 ｐ （梓嫌酸铁Ｗ ｔｎ ｊｒＬ １ ）
取适量稳定期 的藻液 ， 测 ６３０ｎｍ 的 ＯＤ值后 ， ８００ ０
转离心１ Ｓ腿 ，收集藻泥后反复冻融３次 ，加 ５ｍＬ８０％丙Ｆ ｉｇ． ２Ｅｆ ｆｅ ｃｔｏｆ ｆｅ ｒｒ ｉ ｔ ｉｃｃｏｎｃｅｎｔ ｒａ ｔ ｉｏｎｓｏｎｔｈ ｅｓｐｅｃｉ ｆｉ ｃ＿混勻 ， ４ °Ｃ放置 ３ｈ ， 离心 ，将上清液倒人 ２５ｍＬ 容量 ｇ ｒｏｗｔｈｒａ ｔｅ ｏｆＮａ．！ｃ ？／ａ ＾
青 岛 科 技 大 学 学 报 （ 自 然科学版 ）
第 ３ ６ 卷
０６
［
量亦影响饵料的价值 ［１ ４］ ， 因此 ，多糖在水产养殖特别是鲍
＾
０ － ５ ＇ 和海参育苗过程中具有重要作用 ［ １ ５］ 。
Ｊ０ ． ４Ｌ３ｂｅ ｃ
＾０ － ３鬥＋＾呈 １２０ ．
％ ° － ２ ＼ ｉ ｌ〇〇 ａ
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ｌ８０ ．ｒ ｎ＾
１２４ ８＾６０
ｐ（梓搛酸铁ＶＯｎ ｇ． ！／ １ ）篇 ４０１ｂｂ９２０ Ｉ孓１ ｉ—ｉ— Ｉ图 ３ 柠樺酸铁浓度对舟形薄生物最的影响＆＆
Ｆｉｇ． ３Ｅｆｆｅｃ ｔｏｆ ｆｅｒｒｉｔ ｉｃ ｃｏｎ ｃｅｎ ｔ ｒａｔ ｉｏｎｓ ｏｎ 〇１２ ４８
ｂ ｉｏｍａｓ ｓｏ ｆＮａｖｉｃｕ ｌａｌｅｎｚｉ ／ ？（梓樣酸铁） ／ （ｍ ｇ ， Ｌ ＿ ｌ）
率迅速降低 ， ２ｍｇ ．Ｌ＿ 〗 实验组中藻细胞生物量最大 ， 可Ｓ Ｓ 不 同梓槺黢铁浓度对舟形藻细胞 中 多糖含置的影响
达０ ？４７ｇ？Ｌ－ １ ， ８ｍｇ．Ｉ，实验组的生物量最低 ，说明髙 呢５Ｅｆ ｆｅ ｅｔ Ｑｆｆｃｒｉｄｅａ＞＿ ｔｒａ ｔ ｉ ＜３ｎｓｏｎ＿ｅｎｔ
浓麵嫌酸＿黯臟＿■长 。 ｅｒｆＰｄ胃 ｉｎＷ
２ ＿ ３响２． ５ 柠樺酸铁浓度对舟形細胞粗脂含置的影响
柠檬酸铁浓度对舟形藻细胞中麵含量的影响见表＿ ＪＭ ４ 。
６ 。 細 ６麻 ，料舟顏麵顿＿含量随培养基
白 樣酸？浓度
为 ８
－７
＇
巾梓檬酸铁浓度的升細增加 ， 呈正 比 ， 高浓麟樣酸铁
Ｌ 时 ，单 Ｉ ，细胞蛋 白质含量最高 ’ 可达 ３ ． ４６ Ｘ １０ 降 有利于粗脂的积累 ， 当梓檬酸铁浓度为 ８ｍｇ ．Ｌ－ １时 ， 单与麵明等⑴的研究对比发现 ， 随着培养基中柠檬酸赚 个纖中随脂含量最大 ， 可达 ９〇ｘ１ 〇 ＿Ｖｇ。 Ｍａ＿ ｒ度的增加 ’底栖硅藻 Ｎｔｏｄｕａ Ｓ ｐ． 藻细胞蛋 ， 质含量亦 出 等關研究表明 ，娜藻的 ＥｐＡ 含量较高 ，从硅藻 中提取渐＿＿？ ’＠＃＃＾１： ’＾＿＾＠
１５１１１＾ ，廳高 无鱼腥臭味 同时可以施鱼職源 的有藻 ，但是不同种属的藻类之间具有一定的差异性 ， 因此单ｐｇ＃个细胞的最高蛋白质含量不 同 。°
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Ｉ１ － ？１０ｎ ＼ Ｉ Ｉ Ｉ Ｉ Ｉ Ｉ
ｆ０ ． ５ 挤１２４８符〇 ｌ＿＿＾ ＾ ＾＿＿＾＿＿ ，＿＿＾ ＾＿＿＾＿＿ １／？（柠檬酸铁） ／ （ｍｇ ＿ Ｉ／ ＿ ）
１ ２４８
ｐ （梓檬酸铁） ／（ｍ ｇＬ’ 图 ６ 柠樣酸铁浓度对舟形藻细胞中粗脂含量的影响
Ｆ ｉｇ．６Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｆｅ ｒｒ ｉ ｔ ｉｃｃｏｎｃ ｅｎ ｔｒａ ｔｉｏｎ ｓｏｎ ｃｏｎｔ ｅｎ ｔＢ４ 不同梓檬黢铁綱舟形藻细胞中蛋 白质含？麵ｏｆｃｒｕｄｅ ｆａ ｔｉ—
Ｆｉｇ． ４Ｅｆｆｅｃ ｔｏｆｆｅｒ ｒ ｉ ｔ ｉｃｃｏｎｃｅｎｔ ｒａ ｔ ｉｏｎｓ ｏｎｃｏｎ ｔｅｎｔｏｆ
ｐｒｏｔｅ ｉｎｉｎＮａｖｉｃｕｌａ ｌｅｎｚｉ２ ． ６ 柠檬酸铁浓度对舟形藻细胞色素含置的影响
培养基中不同柠橡酸铁浓度对舟形藻细胞色素含量
２ ． ４柠槺酸铁浓度对舟形藻细胞多糖含量的影响的影响见图 ７ 。 当培养基中柠檬酸铁浓度在 １ ？ ４ｍｇ ．
不同柠檬酸铁浓度对舟形藻细胞中 多糖含量 的影 响Ｌ－ １时 ， 叶绿素含量 随柠檬酸铁浓度 的升高呈现高 －低 －高
见图 ５ 。 如 图 ５ 所示 ， 当培养基 中柠檬酸铁浓度为 １ ？ ４的趋势 ，培养基中柠檬酸铁浓度高达 ８ｍｇ ．Ｌ－ １ 时 ，单个
ｍｇ？Ｌ
－
１ 时 ，藻细胞中 的多糖含量随柠檬酸铁浓度变化呈细胞叶绿素含量出现降低 。 当梓檬酸铁浓度在 ２ ？ ８ｍｇ？
现出低 －高－低的变化规律 ， ４ｍｇ？Ｌ－ １ 实验组中细胞多糖Ｌ－ １ 时 ， 类胡萝 卜素含量随柠檬酸铁浓度的增加呈现低－
含量最低 ， 为 ２ ０． ９父 １０＿ ４ 纯 ， ２ｍｇ ＊Ｌ－ １ 实验组中细胞多高 －低的变化趋势 ， 其中 ， 当柠檬酸铁浓度为 ４ｍｇ．Ｌ— １
糖含量水平较高 ，是 ４ ｍｇ ？ ＩＴ １实验组的 ３ ．８ １ 倍 ， 当柠檬时 ，单个藻细胞中的 叶绿素和类胡萝 卜素含量均最高 ， 分
酸铁浓度髙达 ８ｍｇ？Ｌ－ １ 时 ， 细胞 中多糖含量最高 ， 可达别为 ０ ． ３ ７ Ｘ １ （Ｔ ４ ， ０． ３０Ｘ １（Ｔ ４ｐｇ 。 藻类色素 中 的岩藻黄
９４ ． ２ Ｘ ｌ ＣＴＶｇ 。 硅藻分泌的 由糖类组成的胞外多聚 物对素具有抗癌 、抗炎 、抗氧化 、增殖支气管和上皮癌细胞株等
诱导鲍幼体附着变态起重要作用 ［ １ ２ １３ ］ 。藻细胞内 的多糖含功效 。
增刊 ２
赵世宝 ：柠檬酸铁对舟形藻生长及理化成分的影响
呈０ ４５ ［２ ］ＢｕｅｎＳ ＭＡ ，Ｇａ ｌ ｌａｒｄｏＷ Ｇ．Ｅｖａ ｌ ｕａ ｔ ｉｏｎｏ ｆｍｕｃｕｓ ＊ Ｎａ ｖｉｃ ｕｌａ
ｂ０ ． ４ １５ ， ， ｓ３ ａ ｎｄｍ ｉｘｅｄ ｄ ｉａ ｔｏｍｓａｓ ｌ ａｒｖａ ｌｓ ｅ ｔｔ ｌｅｍ ｅｎ ｔｉ ｎｄｕｃｅｒ ｆｏｒｉ ｈｅ ｔｒｏｐ ｉｃａ ｌ
— 〇 ． ．’ ５＾ ａｂａ ｂａｌｏ ｎｅＨａ ｌ ｉｏｔ ｉｓａ ｓｉｎ ｉｎｅ ［ Ｊ ］ ．Ａｑ ｕａｃ ｕ ｌｔ ｕ ｒｅ ，２０ ０３ ＊２ ２ １ ；３ ５ ７－
ｉ ，ｐ｜ ｂ「 － ． ．ｉｇ］０ ． ２ ［ ３］ Ｇｏ ｒｄｏｎ ＨＲ ．ＣｏｏｋＰ ．Ｗｏ ｒ ｌｄ ａｂａ ｌｏｎｅ ｆ ｉ ｓｈｅ ｒ ｉ ｅｓａ ｎｄａｑｕａ ｃｕ ｌ －
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｜
。爾１肩１ ．肩１肩 丨１ ，一一—
以抒朦酸 铁＂⑶ 殳丄’ｔ ｈｉ ｃｄｉａ ｔｏｍ ｓｆｏｒｔ ｈｅｇｒｏｗｔｈｏｆｐｏｓｔ － ｌａ ｒｖａ ｌａｂａ ｌｏｎｅＨａｌ ｉｏ ｔ ｉｓ
ｄｉｓｃｕｓｈａｎｎａ ｉ［ Ｊ］ ．Ｊｏｕ ｒｎａ ｌｏｆＥｘｐｅ ｒ ｉｍｅｎｔａ ｌＭａ ｒ ｉｎｅＢ ｉｏ ｌｏｇｙ
图 ７ 不同柱麵铁 浓度对舟形藻细胞中 色素含量＿ ？向ａｎｄＥｃｏｌｏｇｙ ，１ ９ ９ ５ ， １９４ ＝ １８ ９－ １ ９９ ．
Ｆ ｉｇ．７Ｅｆ ｆｅ ｃｔｏｆ ｆｅ ｒｒ ｉ ｔ ｉｃｃｏｎｃ ｅｎ ｔ ｒａ ｔ ｉｏｎｓｏｎｃｏｎｔ ｅｎｔ ｏｆ ［ ５ ］ 钱振明 ． 海洋底 栖硅藻 生长条 件及其理化成分 的研究 ［Ｄ］ ．
ｐ ．ｇｍｅｎｔ ｓｍＮａｖｉｃｕｌａ ｌｅ ｎｚｉ大连 ：大连理工大学 ， ２００８ ．
［ ６ ］ 张志 良 ． 植物生理学实验指导 ［Ｍ］ ． 北京 ： 高等 教育出版社 ．
３ 讨 论＿？
［ ７ ］ 王秀奇 ， 秦淑媛 ， 高天慧 ，等 ． 基础生物化学实验 ［Ｍ］ ． 北京 ：
生长状况较好的藻 细胞形态正常 ， 呈褐色 ， 表面有形髙等教育出 版社 ， ２００ ３．
态微小的气泡上升 ， 镜检计数会发现藻细 胞密度有所增［ ８］Ｐ ｉ ｒ ｔＳ 〗 ． Ｐ ｒ ｉｎｃ ｉｐ ｌ ｅｓｏｆ ｍｉ ｃｒｏｂ ｅｓａ ｎｄ ｃｅ ｌ ｌ ｃｕ ｌｔ ｉ ｖａ ｔ ｉｏｎ ［ Ｍ］ ．（ ） ｘ －
力 ［１ ，有时会出现几个细胞并排的情况 。 生长状况不好的藻 ｆｏｒｄ ：Ｂ ｌａｃｋｗｅ ｌ ｌ Ｓｃ ｉ ｅｎｔ ｉ ｆ ｉ ｃ ，１ ９７５ ．
细胞培养基颜色发 白 ， 产生 的气泡较大 ， 镜检观察细胞 内［ ９ ］ＧＢ／Ｔ５〇〇９ ． ６＿２ 〇〇３ 食品中脂肪的测定 ［Ｓ］ ．
色素发生变化 ， 由正常的褐 色变 为偏绿色 ， 有些细胞 出 现［ １ 〇］ 陈建 勋 ． 王晓峰 ． 植 物生理学 实验指 导 ［Ｍ ］ ．２ 版． 广州 ：
空壳 ，有时会出现老化成片脱落的现象 。华南理工大学出 版社 ， ２ 〇〇６ ：２４ － ２５ ．
本实验中 的底栖硅藻 ／ｅｎｚ ！． 随 培养基 中 柠［ １ １ ］ 郑维发 ， 王霄梅 ， 王义 琴 ． 等 ． 四种营养盐对舟形藻 ｆ Ｎ ａｖ ｉ ｃｕＭ
橡酸铁浓度增 加 ，细胞密度 和 比生长速率都降低 ， 其 中 最ＢＴ００ １ 生长速率 的影响 ［ ＿〇 ． 海洋 与湖 沼 ， ２〇〇 ７ ， ３８ （ ２ ） ：Ｉ ５７ －
适宜藻细胞生长的柠檬酸铁浓度 大约为 ２ｍ ｇ？Ｉ， １ ，藻细１ ６ ２ ＇
胞密度可达 ４． ９７ Ｘ １ ０４ 个 ． ｍＬ— 丨 ， 藻细 胞的生物量亦最Ｄ ２ ］Ｓｅ ｒｇｉｏＭＵＭ ａｒｉａ Ｃ Ｇ ， Ｉ？瞭 ＩｉＰａｒｔ ｉａ ｌｃｈａ ｒａｃｔ ｅｒｉ加 ｉ〇ｎ
高 ， 钱振明等 ［５ ］ 研究表明 ，大约Ｉ ． ４ ４？ ２ ． １ ４ｍｇ ．Ｌ Ｉ的柠〇 ｆ ｅＸ〇Ｐ〇ｌｙＳａ Ｃ ＣｈａＨ ｃｋＳ ｅｘｕｄａｔ ｅｄ ｂｙ ｐ ｌａｎ ｋ－ ｔ 〇ｎ ｉ Ｃ ｄ ｉ ａ＿ｓ ｍａ ｉ ｎ
ｔ ａ ｉｎｅｄｉｎｂａ ｔ ｃｈｃｕ ｌ ｔ ｕｒｅｓ
［ Ｊ ］ ．Ａｃｔ ａＯｅ ｃｏ ｌｏｇｉ ｃａ ，２００３（ ２ ４ ） ：檬酸铁浓 度 ， 最能促进底栖硅藻 ｓｐ ． 细胞 的生＾＾４ ９ － ５ ３ ．
长 ’ 浓度过高时细胞生 长受抑 制 ’ 与本 头验结 果－致 。 本
［ １ ３ ］ Ｃｅｃ ｉ ｌ ｉａ Ｆ ， Ｒ （Ａｅｒｔ Ｄ Ｄ Ｐ ， ｃ ｌａｕｄ ｉＱ Ｓ ， ｅ ｔ ａ ｌ ．Ｃａｒｂ （） ｈｙｄ ｒａ ｔｅ ｓｙｎ＿
实验培养的舟形藻密度 高于传统的固 定化培 养得到的藻 ｔｈｅ ｓｌｓ ｂｙｔｗ。 Ｎ ａｖ ｉ ｅ ｕ ｌ ａｓｔｒｅ ｉｎｓ ｉ ｓ（）ｌ ａ ｔ ｅｄｆｒｅｍｂｅｎ ｔｈ ｉ ｅａｎｄ ｐｅ －
细胞密度 。 郑维发等ｕ ｌ 培养 的来 自 烟 台海域 的 舟 形藻 ｌａｇｉ ｃｍ ｕ ｃｉ ｌａｇｅｓ ｉｎｔ ｈ ｅＴｙｒｒｈ ｅｎ ｉ ａｎＳｅａ （Ｔｕｓ ｃａｎＡｒｃｈ ｉｐｅ ｌａｇｏ ）
ＭｒａＶ？／ａ ＢＴ００ １ ，优化培养后最大藻 细胞密度 可达２ ． ３ １ Ｘ［ Ｊ ］ ，Ａｐｐ ｌ ｉ ｅｄＰｈｙｃｏｌｏ ｇｙ ，２００３ （ １ ５ ） ：２ ５ ９－２６ １ ．
１ ０５ｍＬ— １ ， 高于本文实验结果 ． 说明藻细胞密度 受很多因［ １ ４ ］ 祁秋霞 ． 温度对两种 海洋微 藻生 长与 多糖含量 的影 响 ［ Ｊ ］ ．
素影响 ，包括培养方式 、 营养盐形式 、 藻种来 源等 ， 一 般来 水产养殖 ， ２０ １ １ ，３２ （ １ ） ：２０－２３ ．
说 ， 本地藻种较易 获得更高的藻细胞密度 。［ １ ５ ］ 徐力文 ． 刘广峰 ． 王江勇 ． 鲍育苗生物学 中饵料硅藻 的相关
硅藻胞 内 理化成 分影 响鲍苗 和 海参 苗 的 生 长 、 变研究进展 ［ Ｊ ］ ． 海洋科学进展 ， ２ 〇０６ ，２ ４ （ ４ ） ： ６ １ １ － ６ １ ７ ．
态 ［ １ ８ －ｗ ］ ， ８ ｍｇ ．Ｌ１ 柠檬酸 铁浓 度 实验组 中 ， 单个藻 细胞［ Ｉ ６］ 张影霞 ． 黄巍峰 ． 微藻 ＤＨＡ 在月 饼中的应用 ［ Ｊ］ ． 现代食品
蛋 白质含量最高 ，可达 ３ ． ４６ Ｘ １ ０－Ｖｇ ， 单个细胞多糖含量科技 ， ２〇 １ １ ， ２７ （ １ ２ ） ： 〗 ４ ９ ４ － １ ４ ９ ７ ＿
可达 ９４． ２１Ｘ １０ — Ｖｇ ， 单个细胞粗脂含 量可 达８９ ． ６ １Ｘ［ １ ７ ］Ｍａｇ ｅｄＰ ，ＤｉｏｎＭＦ ，Ｐｅｔ ｅ ｒＤ Ｎ ，ｅｔ ａ ｌ ．Ｌｉ ｐ ｉｄａｎｄｆａ ｔ ｔ ｙａｃ ｉ ｄ
ｌ 〇 Ｖｇ ， ４ｍｇ．１／ １ 实验组中单个细胞叶绿素 和类胡萝 卜ｙ ｉ ｅ ｌｄｏｆｎ ｉｎｅ ｓ ｔａ ｔ ｉｏｎａ ｒｙ －ｐｈａ ｓｅ ｍｉ ｃ ｒｏａ ｌｇａｅ ：Ａｐｐ ｌ ｉｃａ ｔ ｉｏｎｓａｎｄ
素含量最 高 ，分别 为〇 ？３ ７ Ｘ １ ０－Ｖ ｇ和〇？ ３０Ｘ１ ０ — 丨 邶 ， 由ｕｎｕ ｓｕａ ｌＣ ２４ －Ｃ ２ ８ｐｏ ｌｙｕｎｓａ ｔｕ ｒａ ｔ ｅｄｆ ａ ｔ ｔｙａＣ ｉｄＳ［ Ｊ ］＿Ｊｏ ｕｒｎａ ｌｏｆ
此可见 ， 培养基 中低浓度 的柠檬酸铁有利 于 藻细胞的生Ａｐｐ ｌ ｉｅｄＰｈｙｍｂｇｙ ’２ ００５ ’ｍ？ ：２８Ａｍ
丨
ｚ 古冰你 ？＃讲＊－扯亩士 丨工进 ：如跑其兰 士么 ａ／ｔ Ｍ Ｅ［ １ ８］ 隋锡林 ． 海参增养殖 ［Ｍ］ ． 北 京 ： 中国农业出版社 ， １ ９ ９ ０ ．ｋ ’ 高浓度的 更有利？细＿养＾＿＇胃 。
［咖贼 ＿＿ 海紐 配調觀 问 题 的若 干 问 题
参 考 文 献［Ｊ ］ ？ 台湾海峡 ， １ ９ ９８ ， １ ７ ： ５ ６－６０ ．
［ ２０］ 李太武 ， 丁明进 ， 刘金屏 ． 皱纹 盘鲍及其饵料营养成分的研
［ １ ］ＣｒａｗｆｏｒｄＲＭ ，ＭａｎｎＤ Ｇ ，Ｒｏｕｎｄ ＦＥＴｈｅｄｉａ ｔｏｍｓ［Ｍ］ ．Ｃａｍ－究 ［Ｊ ］ ？ 海洋科学 ， １ ９ ９ ５（ １ ） ：５ ２ －５ ６ ．
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