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塑料白桶单胞藻生产性培养的初步试验



全 文 :第 !期 #$
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研究简报
收稿日期:!%%% & %’ & %!
第 $卷 第 ! 期
!%%% 年 (月
)*+, $ -*, !
./01 !%%%
浙江海洋学院学报 2自然科学版 3
.*/405+ *6 7819:50; <=150 >0:?14@:AB 2-5A/45+ C=:10=1 3
塑料白桶单胞藻生产性培养的初步试验
D41+:E:054B A1@A *0 >@:0; D+5@A:= F8:A1 G5441+@ :0
A81 H*EE14=:5+ H/+A/41 *6 I:=4*5+;51
王 侃
F50; J50
2浙江省海洋水产养殖研究所,温州 ’!K%%K 3
2 7819:50; I54:=/+A/441 L0@A:A/A1M F10N8*/ ’!K%%K 3
随着贝类人工苗种技术的不断改进与发展,工厂化种苗生产技术的提高,使得技术人员在生产
中必须能够稳定地提供大量的单胞藻类作为饵料,为解决这个问题,国内外许多藻类培养工作者做
了很多研究,有立柱式封闭培养、薄膜袋式封闭式培养,在生产中,现在一般采用玻瓶一级保种,小
池或小型薄膜袋 2也有常见的虾苗袋改装 3或玻璃缸 2桶 3二级扩种和大池三级培养,采用聚乙烯白
色塑料桶的二级扩种尚未见诸报道,于是我们做了一些尝试,在工厂化种苗生产中用白桶代替小型
薄膜袋,并取得了可进行大规模生产的理想效果。
材料与方法
试验藻种来源于宁波大学藻种室的青岛大扁藻 2 !#$%&’(#) *+,,’#(,-.# /#01 $)-(,$#’+()-)
O@10; 1A =850; 3、等鞭藻 ’% 2 2)’.*0%)-) ,#3#(# D54P1 3、湛江叉鞭金藻 2 4-.0#+0-# 5*#( 6-#(,+()-)
Q/, 3、牟式角毛藻 2 7*#+$’.+0’) &8++0- R1EE14E503。
试验时间是 $$$年 K S T月,水温在 !K S ’% U之间。
试验场地在该育苗场的室外水泥地上,顶部有透明玻璃钢瓦遮阴,四周开放式,将白桶放置于
离地 K% =E的水泥板上,进行不间断连续充气,并用透明薄膜盖于桶上部,然后用橡皮筋拉紧,进行
封闭式培养。
试验用白色塑料桶为市场售常用聚乙烯塑料桶,圆状形,直径 ’% =E,高 (% =E,加满水约 (, K
V %W ER。试验用双层薄膜袋即常见虾苗袋改装。
试验采用营养盐配方:金藻为 %%% ER 煮沸淡水加 J-<’#% ;、JQ!D-5!C:’煮沸淡水加 J-<’%% ;、JQ!D养液 ER的比例进行培养。
使用海水经育苗厂大型沙滤池沙滤后煮沸冷却,海水密度为 , %W S , %#,[Q#, !。
!# 浙江海洋学院学报 $自然科学版 % 第 ! 卷
半连续培养
所需时间
& ’
抽出液平均
细胞浓度
& !#(个·)*+!
每次抽出量
& !#(·)*+!
半连续
培养次数
总计
& ,
-值
湛江叉鞭金藻 . /(! (01 ( !. #01.2
等鞭藻 3#! . //1 (01 ( !. #0(3/
牟氏角毛藻 2/ /2/ (01 ( !/ #0.1/
青岛大扁藻 !/# . (01 ( /# #034.
# ! / 3 ( 1 -
湛江叉 白 桶 /1 (3 2# !! /!3 /.1 #0(2/
鞭金藻 薄膜袋 /1 .. !/# /.3 3# (!/ #01.#
等鞭藻3#!!
白 桶 3 .# !#3 !(4 //1 /4/ #03.
薄膜袋 (# # !2/ /1! 3/3 (3! #0(21
牟氏角毛藻
白 桶 /# 13 4# !3! //! 3// #0111
薄膜袋 /# .# !#! !4# /.( (!/ #0.#1
青岛大扁藻
白 桶 !# !! // 34 14 2# #03#
薄膜袋 !3 !( / 1! 43 !## #0(#4
培养种类
培养天数 & ,
单胞藻密度计数与数据处理,用血球计数板每天计数一次,两组样品取平均值,!值计算
! 56#!
$ 56##
%
!:相对生长常数 #&:%时间培养后密度 $ !#( & )*%
%:培养天数 ##:接种密度 $ !#( & )*%
接种和培养:用 / 7 !#( )*细口瓶培养一级藻种,白桶内和藻膜袋内接一级藻种,在室外作连续
充气培养,光线为自然光,接种比例 !8 !#。先进行对比试验,每个藻种取二个样品,样品取平均值,然
后对白桶进行半连续培养试验,即当金藻达到 /## 7 !#(个 & )*,角毛藻达到 /1# 7 !#(个 & )*,青岛
大扁藻达到 2# 7 !#(个 & )*时,抽出 3 & (藻液作为大池培养用,在留下的藻液中再加入 3 & (培养
液,如此反复数次,至袋内死藻较多、藻种老化,则不能继续培养,可换新桶继续培养。
/ 结 果
/0 !连续培养结果 $藻液浓度 7 !#(个 & )5 %
从表中可以看出,薄膜袋中金
藻生长速度比白桶快,经 3 ,左右即
达到生长所需的 /## 7 !#( 个 & )*,
白桶经 ( 9 1 , 达到 /## 7 !#( & )*,
将上述状态的白桶和薄膜袋停气,
在白天均可见上层悬浮浓雾状茶
色的藻细胞集群,镜检藻体细胞活
动迅速,大量向边缘移动,并有许
多正在分裂的细胞,证明白桶和薄
膜袋中的细胞生长良好,同样牟氏
角毛藻浓度达到 /## 7 !#( 个 & )*
也变成深茶色呈酱油状,镜检可以
许多在分裂的细胞,在白桶和薄膜袋中生长良好,对青岛大扁藻来说,恢复到原细口瓶浓度 !## 7 !
#(个 & )*所需时间,薄膜袋快点,需要 ( 9 1 ,,桶中所需时间为 . 9 2 ,。镜检观察过程中发现,接种
后青岛大扁藻有一个延缓期,而后来生长相当好,细胞分裂正常,停气后白天即呈墨绿色集群于藻
液上部。
/0 /半连续培养试验结果 $ !年 1月 !日至 .月 !日,水温 /1 9 / :,自然光 %
从表中看,用桶半连续培养的效果是明显的,在培养中,连续抽取 3 & (藻液后再加培养液,到
发现白桶有少量污染生物出现,藻液开始老化的时候,培养的次数已达 (次。
3 讨 论
30 ! 由于我们的试
验在室外进行,结
合了泥蚶人工育苗
生产的需要,虽然
由于自然光的影响
使单胞藻的分裂有
快有慢,但整个育
苗生产过程中用桶
第 !期 #
薄 膜 袋 白 桶
容 积 有效容积 $ % & ’ !( ) *+ ,- 有效容积约. ) *+ ,-
从接种到收获
所需培养时间
金藻类、角毛藻类需! ’ / 0,扁藻类约
需& 0,忌直射光。
金藻类、角毛藻类约需/ ’ + 0,扁藻类约需
. ’ 1 0,不忌直射光
使用特点、要求
封闭式充气,不易污染,透光性强,受
光面积大
封闭式充气,不易污染,透光性较强,受光
面积大。
操 作 操作不方便,袋易破。 操作方便,不易损坏,可随意移动。
成 本 成本高,属一次性使用。 成本低,可反复使用。
式培养的藻类基本满足了育苗中的饵料的需求,在生长中我们使用了 2*只桶培养金藻、角毛藻,.*
只桶培养扁藻,每天一般能提供 * ’ !* 3的金藻、角毛藻及 * ’ !* 3的扁藻,值得注意的是,青岛大
扁藻自始至终使用了白桶培养,仍取得良好的效果,而作为贝类育苗常用的亚心形扁藻,在我们培
养初期即发现生长缓慢,远不如青岛大扁藻,所以放弃培养,可能用藻种来自上海,不太适应这时
的高比重,未经驯化的原因。而白桶出现的主要问题是在培养后期,当水温高于 /* 4时,培养 / ’ + 0
后,金藻类藻细胞很容易腐败死亡。如何避免藻细胞死亡是我们以后要继续研究的问题。
/% !作为目前生产中最常用的薄膜袋和白桶的使用对比
比较二者差异,薄膜袋由于透光性好,生长的白桶快一些,但实际生产中,提供更多的藻液用于大
池扩种才是关键,白桶的容积较大发挥了优势,并且由于成本、操作等诸方面胜于薄膜袋的原因,
使白桶将成为最广泛使用的培养藻类工具。
参 考 文 献
徐秉权 % 单胞藻封闭式高密度培养技术的研究 % 海水养殖,#2*5 $ ( 6 &/ ’ &#
! 王如才 % 柱式封闭充气培养小新月嵌菱形藻的好方法 % 海洋湖沼通报,#2!5 &!
/ 缪国荣 % 单胞藻薄膜袋封闭式培养技术的研究 % 青岛海洋大学学报,# $/ (:# ’ !+
+ 于瑞海 % 用塑料薄膜袋进行一级藻种培养的研究 % 海洋科学,##*5 $+ (:.! ’ ./
& 孙成有 % 在高温期培养湛江叉鞭金藻防治敌害生物的方法 % 水产科学,##/5 ! $! (:. ’ 1
. 陈明耀 % 海洋饵料生物培养 % 北京:农业出版社5 #1#
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浙江海洋学院学报编辑部
王侃:塑料白桶单胞藻生产性培养的初步试验