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四种单胞藻和海洋红酵母对刺参浮游幼虫生长与变态成活的影响



全 文 : 
第41卷 第10期  
2011年10月 
中 国 海 洋 大 学 学 报
PERIODICAL OF OCEAN UNIVERSITY OF CHINA
41(10):030~034
Oct.,2011
四种单胞藻和海洋红酵母对刺参浮游幼虫
生长与变态成活的影响*
张萍萍,李 琪**,孔令锋,于瑞海
(中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室,山东 青岛266003)
摘 要: 本实验研究4种单胞藻与海洋红酵母(Rhodomonas sp.)搭配以及单胞藻混合投喂对刺参浮游幼虫体长生长及
变态存活率的影响。采用三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)、小新月菱形藻(Nitzschia closteriumf.minutissima)、
牟氏角毛藻(Chaetoceros muelleri)和等鞭金藻(Isochrysis galbana)与海洋红酵母分别以1∶0、0.8∶0.2、0.6∶0.4、0.4∶
0.6、0.2∶0.8和0∶1的比例搭配投喂刺参浮游幼虫,观测浮游幼虫每天的体长变化以及变态成活率。结果表明,单胞藻
与海洋红酵母以适当比例混合投喂能提高刺参幼虫的体长日增长率,单独投喂海洋红酵母的刺参变态成活率也显著高于
单独投喂单胞藻组。采用2种单胞藻以0.5∶0.5的比例混合投喂浮游幼虫,结果表明牟氏角毛藻与小新月菱形藻混合投
喂组刺参浮游幼虫的变态成活率高于牟氏角毛藻与等鞭金藻的混合组。
关键词: 单胞藻;海洋红酵母;刺参;生长率;变态成活率
中图法分类号: S917     文献标志码: A     文章编号: 1672-5174(2011)10-030-05
  刺参(Apostichopus japonicus)主要分布在辽宁、
山东、河北等北方沿海,是我国北方海水养殖的主要种
类。由于海洋开发以及陆源污染物和养殖自身污染物
等因素的影响,刺参自然栖息和繁殖场所的生态环境
受到破坏,天然捕获量逐年减少。市场消费需求的不
断增加刺激了刺参人工增养殖产业的迅猛发展。目前
刺参养殖的苗种主要来源于人工育苗,苗种品质的优
劣是直接影响刺参生长、成活的重要因素。由于刺参
浮游幼虫阶段主要以单胞藻为饵料,培育适宜的单胞
藻饵料投喂耳状幼体是获得较高的变态成活率的关
键[1]。为达到营养全价与平衡,生产上通常采用2~3
种饵料混合投喂刺参浮游幼虫。单胞藻的培育不仅占
用空间大,劳动强度和生产成本高,而且存在与幼虫发
育不同步,供给不及时,易老化,营养单一等缺点,给育
苗带来严重影响[2]。海洋红酵母(Rhodotorulasp.)是
从海洋自然环境中分离出来的单细胞真核生物,菌体
富含蛋白质、肝糖不饱和脂肪酸、虾青素等,具有较高
营养价值,能显著提高水产动物幼体的存活率[3]。此
外,海洋红酵母还具有培养周期短、适应能力强、成本
低等优点,在海产动物育苗生产上具有应用前景[4]。
本文采用在刺参浮游幼虫培养阶段广泛应用的三
角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)、小新月菱形
藻(Nitzschia closteriumf.minutissima)、牟氏角毛藻
(Chaetoceros muelleri)和等鞭金藻(Isochrysis galba-
na)等4种单胞藻,研究海洋红酵母与单胞藻搭配使用
时对浮游幼虫生长与变态成活率的影响,以探讨海洋
红酵母替代单胞藻的可行性。
1 材料与方法
1.1实验材料
三角褐指藻、等鞭金藻、小新月菱形藻和牟氏角毛
藻的藻种采自中国海洋大学微藻实验室,并在海泰水
产养殖有限公司进行扩种培养。海洋红酵母购自蓬莱
水产饲料公司,并冷冻保存(-20℃),使用时置室温
下自然解冻备用。
亲本种参于2010年5月初采自乳山养殖海区,经
阴干、流水刺激后排放精、卵,在原池受精。36h后停
止充气,优质浮游幼虫上浮,拖网收集上浮幼虫。
1.2实验设计
所有实验均在3L的塑料容器内进行,设置不同
单胞藻与红酵母组合及不同单胞藻之间的组合,每个组
合设置3个重复。浮游幼虫培育温度为(22±1.5)℃,
幼虫培育密度为0.3/mL。
1.2.1不同单胞藻与海洋红酵母的配比  根据不同
单胞藻的个体大小,确定三角褐指藻、等鞭金藻、小新
月菱形藻和牟氏角毛藻的投喂密度分别为5×103、1×
104、1×104 和1.5×104 mL。海洋红酵母投喂密度为

**
基金项目:山东省科技发展计划项目(2009GG10005013)资助
收稿日期:2010-09-27;修订日期:2011-03-20
作者简介:张萍萍(1982-),女,硕士生。E-mail:zhongrushui@163.com
通讯作者:Tel:0532-82031622;E-mail:qili66@ouc.edu.cn
10期 张萍萍,等:四种单胞藻和海洋红酵母对刺参浮游幼虫生长与变态成活的影响
1.5×105 mL。不同单胞藻与海洋红酵母搭配使用时,
按浓度比计算。每种单胞藻与海洋红酵母的搭配比例
设置为1∶0,0.8∶0.2,0.6∶0.4,0.4∶0.6和0.2∶
0.8,同时以单独投喂海洋红酵母组作为对照组(R),共
产生21个实验组。
1.2.2不同单胞藻投喂组合  4种单胞藻之间以
0.5∶0.5的比例搭配,共设置6个投喂组合。
1.3实验结果处理
用幼体日平均生长速度(G)、变态成活率(SRm)和
特定生长率(SGR)3个指标评价培育效果。每天每组
采集30个浮游幼体,测量体长。40%樽形幼虫出现
时,停止测定体长并投放附着基。樽形幼虫附着结束
后,对成功附着变态的幼虫进行计数和统计。采用
SPSS16.0软件进行各处理组间的单因素方差分析
(ANOVA)和显著性T-test检验。
G(μm/d)=40%幼体为初耳状幼体至40%幼虫
为樽形幼虫这一时间段内幼虫每天的体长增长。
SRm(%)=(Q稚/Q终)
SGR(%/d)=ln(Lt/Lo)/t
其中Q稚=投放附着基后成功变态的稚参数;Q终=
投放附着基前存活的幼虫数;Lt=40%幼虫至樽形幼虫
时的体长;Lo=40%幼体至初耳状幼体时的体长。
2 结果
2.1单胞藻与海洋红酵母的不同比例搭配对刺参浮游
幼虫生长与变态成活率的影响
三角褐指藻与海洋红酵母搭配投喂时,前5d,
0.6∶0.4、0.4∶0.6和对照组的体长日生长快于其他
组;当浮游幼虫临近变态时各组体长增长速度均明显
下降,第7、8天时各组体长增长速度差异不显著(见图
1A)。小新月菱形藻与海洋红酵母搭配投喂4d后,
1∶0和0.2∶0.8组的日增长速度显著低于其他组
(P<0.05),从第6天开始,投喂海洋红酵母的对照组
的体长日增长速度显著高于其他组(P<0.05),其他组
之间差别不显著(见图1B)。牟氏角毛藻与海洋红酵
母搭配投喂时,在第4、5天0.8∶0∶2组的体长日增
长速度显著高于其他组(P<0.05),0.2∶0.8组的增
长速度始终略低于其他组(见图1C)。等鞭金藻与海
洋红酵母搭配投喂时,对照组的体长日增长速度始终
高于其他组,而1∶0和0.8∶0.2组的日增长速度始
终低于其他组(见图1D)。
图1 4种单胞藻与海洋红酵母搭配投喂时刺参幼虫的体长日增长
Fig.1 Growth rate in body length of A.japonicus larvae fed with the mixture of Rhodomonas sp.and four different microalgal diets
  表1显示了单胞藻与海洋红酵母搭配投喂时刺参
幼虫的变态成活率和特定生长率。当只投喂三角褐指
藻时,刺参浮游幼虫的变态成活率显著低于对照组
(P<0.05),其他3种单胞藻单独投喂时也出现同样现
象。三角褐指藻0.8∶0.2组的变态成活率显著高于
1∶0组(P<0.05),而与其他组间差异不显著;小新月
菱形藻0.6∶0.4组的变态成活率显著高于1∶0和
0.2∶0.8组(P<0.05),与其他3组间差异不显著;牟
氏角毛藻0.6∶0.4组和0.2∶0.8组与1∶0组之间
差异显著(P<0.05)。当不同单胞藻与海洋红酵母以
相同比例搭配投喂时,等鞭金藻组的变态成活率显著
低于其他组(P<0.05);牟氏角毛藻0.6∶0.4组和
13
中 国 海 洋 大 学 学 报 2 0 1 1年
0.2∶0.8组的变态成活率显著高于以相同比例搭配的
其他组(P<0.05)。投喂不同饵料搭配的浮游幼虫的
特定生长率差异不显著,仅等鞭金藻1∶0和0.8∶0.2
组的特定生长率显著低于其他组(P<0.05)。
表1 4种单胞藻与海洋红酵母的不同搭配对刺参幼虫变态成活率(SRm)和特定生长率(SGR)的影响(平均值±标准差)
Table 1 Effects of combinations of Rhodomonas sp.and four different microalgal
diets on survival at metamorphosis and specific growth rate in A.japonicus(mean±SD)
饵料组合
Diet combination
A-R  B-R  C-R  D-R
SRm/%
1∶0  36.34±2.12a* 36.38±2.33a* 36.72±1.63a* 14.40±3.30a**
0.8∶0.2  44.41±4.24b* 42.33±2.78ab* 41.67±0.99ab* 16.40±1.18ab**
0.6∶0.4  46.01±3.31bc* 46.77±1.78bc* 54.04±0.54d** 22.80±2.10bc***
0.4∶0.6  38.09±3.87ab* 40.35±1.41ab* 43.08±0.81abc* 21.44±1.32ab**
0.2∶0.8  37.67±1.10ab* 35.29±0.81a* 45.21±3.71bc** 17.00±2.65ab***
R  44.69±1.70b  44.69±1.70bc  44.69±1.70bc  44.69±1.70d
SGR/%·d-1
1∶0  0.091±0.004b  0.098±0.001b  0.104±0.001b  0.084±0.002a
0.8∶0.2  0.102±0.004b  0.101±0.001b  0.107±0.004b  0.088±0.004a
0.6∶0.4  0.109±0.003b  0.102±0.001b  0.107±0.004b  0.093±0.002b
0.4∶0.6  0.107±0.004b  0.106±0.003b  0.100±0.004b  0.096±0.003b
0.2∶0.8  0.094±0.002b  0.099±0.004b  0.100±0.005b  0.096±0.004b
R  0.099±0.002b  0.099±0.002b  0.099±0.002b  0.099±0.002b
注:A,三角褐指藻;B,小新月菱形藻;C,牟氏角毛藻;D,等鞭金藻;R,红酵母;纵列不同小写字母代表差异显著;横列不同星号数目代表差异显著(P<
0.05)。Note:A,Phaeodactylum tricornutum;B,Nitzschia closteriumf.minutissima;C,Chaetoceros muelleri;D,Isochrysis galbana;R,Rhodo-
monas sp.;Data with different lowercase letters in the same vertical column and different number of asterisk in the same horizontal column mean signifi-
cantly different at 0.05level.
2.2不同单胞藻组合对刺参浮游幼虫生长与存活的影响
各组的变态成活率间差异性比较明显,B-C组和
对照组显著高于 A-B、B-D和C-D组(P<0.05)。特
定生长率各组间没有显著差异(见表2)。在第5、6天
投喂海洋红酵母的对照组的体长日生长速度显著高于
单胞藻混合组,其他时间各组没有显著差异(见图2)。
表2 单胞藻混合投喂对刺参幼虫变态成活率(SRm)和
特定生长率(SGR)的影响(平均数±标准差)
Table 2 Effect of the mixtures of different microalgal diets on
survival at metamorphosis and specific growth rate
in A.japonicus(mean±SD)
饵料组合
Diet combination
SRm/% SGR/%·d-1
A-B  36.45±0.92ab  0.103±0.003a
A-C  42.08±2.11bc  0.108±0.003a
A-D  30.98±1.52a 0.094±0.002a
B-C  48.31±0.83c  0.106±0.006a
B-D  29.09±1.93a 0.101±0.004a
C-D  35.07±2.37ab  0.101±0.001a
R  44.69±1.70c  0.099±0.002a
注:A,三角褐指藻;B,小新月菱形藻;C,牟氏角毛藻;D,等鞭金藻;R,红
酵母;纵列不同小写字母代表差异显著(P<0.05)。
Note:A,Phaeodactylum tricornutum;B,Nitzschia closterium f.
minutissima;C,Chaetoceros muelleri;D,Isochrysis galbana;R,
Rhodomonas sp.;data with different lowercase letters in the same verti-
cal column are significantly different(P<0.05).
图2 单胞藻混合投喂时刺参幼虫的体长日增长
Fig.2 Growth rate in body length of A.japonicus larvae
fed with mixture of different microalgal diets
3 讨论
3.1不同单胞藻与海洋红酵母的组合投喂刺参浮游幼

近年来,对单胞藻作为贝、浮游动物开口饵料的研
究很多。刘广丰等[5]研究了4种微藻对缢蛏(Sinon-
vacula constricta)稚贝暂养效果,结果表明绿色巴夫
藻(Pavlova viridis)和牟氏角毛藻对缢蛏稚贝的暂养
效果优于小球藻(Chlorellasp.)和亚心形扁藻(Platy-
monas subcordiformis)。郭峰等[6]的研究结果阐明了
23
10期 张萍萍,等:四种单胞藻和海洋红酵母对刺参浮游幼虫生长与变态成活的影响
适宜的底栖硅藻种类对九孔鲍(Haliotis diversicolor
Reeve)早期稚贝阶段生长和存活的重要性,个体小或
者胞外产物量大的藻类有利于九孔鲍早期稚贝的培
育。Nasrolahi 等[7] 等 研 究 发 现 用 钙 质 角 毛 藻
(Chaetoceros calcitrans)、小球藻(Chlorella vulgaris)
和四 尾 栅 藻 (Cenedesmus quadricauda)饲 喂 藤 壶
(Amphibalanus improvisus)幼虫时,钙质角毛藻能缩
短幼虫的发育时间,但幼虫成活率却低于小球藻,单胞
藻的种类和投喂浓度对幼虫的发育都有明显影响。
Liu等[8]使用4种单胞藻饲喂鸟蛤(Clinocardium nut-
tallii)幼虫时发现,鸟蛤幼虫期及变态后的生长发育状
况与藻的种类有一定关系,并且2种藻混合使用时效
果更佳。当球等鞭金藻、硅藻(Thalassiosira weissflo-
gii)等4种单胞藻及海洋红酵母以不同浓度饲喂水蚤
幼虫时,发现海洋红酵母能提供水蚤(Acartia)幼虫足
够的营养,投喂硅藻也能得到同样的效果,但投喂球等
鞭金藻时幼虫不能完成整个生命过程[9]。蔡诗庆和孙
世春[10]研究了3株海洋酵母以不同的比例替代球等鞭
金藻喂养海湾扇贝(Argopectens irradias)幼贝,探讨
3株海洋酵母作为生物饵料的可行性。然而,迄今关于
单胞藻与海洋红酵母搭配使用饲喂刺参浮游幼虫的研
究还未见报道。在本研究中,4种单胞藻以不同的比例
与海洋红酵母搭配使用时,刺参浮游幼虫的生长率和存
活率产生了差异。三角褐指藻与海洋红酵母以0.6∶
0.4和0.4∶0.6的比例搭配使用时,浮游幼虫的体长日
增长速度高于其他比例搭配组,与单独投喂海洋红酵
母组虽有差异但不显著。单独投喂小新月菱形藻时,
刺参浮游幼虫的体长日生长速度低于与海洋红酵母搭
配使用的组别。牟氏角毛藻与海洋红酵母搭配时,幼
虫体长日生长速度随着牟氏角毛藻比例的降低而降
低,表明牟氏角毛藻是刺参浮游幼虫优良的开口饲料。
从试验结果可知,不同单胞藻以适宜的比例与海洋红
酵母搭配投喂,能收到相比于投喂单一饵料更好的效
果,但比例的大小因单胞藻种类的不同而有差异。等
鞭金藻由于有不易被浮游幼虫消化的细胞壁而不宜作
为开口饵料单独使用。海洋红酵母与等鞭金藻混合使
用时,能显著提高幼虫的体长日生长速度和特定生长
率。单独投喂海洋红酵母的幼虫的变态成活率一般高
于单独投喂单胞藻组。
3.2不同单胞藻组合投喂刺参浮游幼虫
生产上采用2~3种单胞藻混合投喂刺参浮游幼
虫的方式不仅可以避免单一饵料营养单一的缺点,而
且可以避免由于1种饵料老化或微生物污染带来的不
良后果。在本研究中,小新月菱形藻和牟氏角毛藻搭
配使用时,浮游幼虫的变态成活率高于其他组。等鞭
金藻与其他单胞藻混合时,浮游幼虫的变态成活率也
高于单独投喂等鞭金藻组。说明在营养组成上互补的
2种单胞藻对幼虫的变态成活率有显著的促进作用,同
时其他单胞藻能够降低难以消化的金藻对幼虫生长和
存活的不利影响。这与张辉等[11]研究的不同单细胞藻
类对日本对虾(Japanese tiger prawn)仔虾生长及存
活率的影响结果类似,其结果表明,不同单胞藻对仔虾
的影响不同,且当2种藻搭配使用时只要含有仔虾需
求最多的1种藻时仔虾生长都比较好。Gireesh和
Gopinathan[12]的研究也支持这一结果,当单独投喂1
种饵料时,球等鞭金藻和微拟球藻对锯齿巴非蛤
(Paphia malabarica Chemnitz)的生长发育最好,当球
等鞭金藻和微拟球藻以1∶1的比例搭配时能得到同
样的效果。
实际生产中经常使用的干酵母和藻粉,由于具有
在海水中分散不均匀、易沉淀等缺点,既污染水体,又
降低了饵料的利用率。Coutteau等[13]研究了在水产
养殖中使用干酵母替代单胞藻的可能性,发现干酵母
不能被卤虫(Artemia salina)正常摄食以致造成低生
长率和存活率,但使用化学方法去除干酵母的细胞壁
时,卤虫能正常摄食,认为细胞壁是影响干酵母作为单
胞藻的代用饵料的关键。James等[3]的研究指出海洋
红酵母由于其氨基酸尤其是必需氨基酸含量高,相比
于干酵母能显著提高轮虫(Brachionus plicatilis)的密
度和产量。Liu等[14-15]研究了杜氏盐藻(Dunaliella
tertiolecta)和浓缩的海藻浆对海胆 (Anthocidaris
crassispina)和幼虫新陈代谢率及存活率的影响,结果
表明杜氏盐藻在这两方面都大大优于浓缩海藻浆,投
喂海藻浆的幼虫不能正常生长。
综上所述,适合幼虫生长的饵料不仅要大小合适
能被摄食,更重要的能在幼虫体内被消化吸收,并含有
丰富的营养,才能有助于幼虫的生长发育[16]。本研究
中牟氏角毛藻对刺参浮游幼虫的投喂效果较好,等鞭
金藻较差。在4种单胞藻中,添加适量的海洋红酵母
能提高刺参浮游幼虫的变态成活率,表明了海洋红酵
母作为单胞藻代用饵料的可行性。
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Efects of Marine Yeast(Rhodomonas sp.)and Four Diferent Microalgal
Diets on Larval Growth and Survival at Metamorphosis in
the Sea Cucumber Apostichopus japonicus
ZHANG Ping-Ping,LI Qi,KONG Ling-Feng,YU Rui-Hai
(The Key Laboratory of Mariculture,Ministry of Education,Ocean University of China,Qingdao 266003,China)
Abstract: The effects of the mixtures of marine yeast Rhodomonas sp.and four types of microalgae and
the mixtures of two different microalgae on the growth and survival rate at metamorphosis in Aposticho-
pus japonicus were examined.The growth and survival at metamorphosis were observed in the A.ja-
ponicus larvae fed on a combined diet of Rhodomonas sp.and four types of microalgae(Phaeodactylum
tricornutum,Nitzschia closteriumf.minutissima,Chaetoceros muelleri,and Isochrysis galbana)in the
ratios of 1∶0,0.8∶0.2,0.6∶0.4,0.4∶0.6,0.2∶0.8and 0∶1.The results indicated that when the
microalgae were mixed with Rhodomonas sp.in an appropriate ratio,the growth rate in body length of the
larvae increased markably.The survival at metamorphosis of the larvae fed on Rhodomonas sp.was obvi-
ously higher than those only fed on the microalgae.When two types of microalgae were mixed in the ratio
of 1∶1,the survival rate at metamorphosis of the larvae fed on the mixture of C.muelleri and N.closte-
riumwas clearly higher compared with those fed on the mixture of C.muelleri and I.galbana.
Key words: microalgae;Rhodomonas sp.;Apostichopus japonicus;growth rate;survival at metamor-
phosis
责任编辑 王 莉
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