全 文 ：第 26卷 第 3期
2 0 0 8年 3月
中 华 中 医 药 学 刊
CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE
Vo.l 26 No. 3
M ar. 2 0 0 8
中华中医药
学刊
南葶苈子饮片中多糖的提取及含量测定
马梅芳 1,吕文海2
( 1.山东中医药大学 2006级博士研究生 ,山东 济南 250014; 2. 山东中医药大学,山东 济南 250014)
摘 要:目的:从南葶苈子饮片中提取多糖, 并测定其含量。方法:水提醇沉法提取多糖, 硫酸 -蒽酮法测定
多糖含量。结果:测得南葶苈子饮片中多糖含量较高, 平均回收率 100. 26% , RSD= 1. 61% ( n = 6)。结论: 首次
从南葶苈子饮片中提取出多糖; 其含量测定方法简便、准确, 回收率高。
关键词:南葶苈子;炮制; 多糖;提取; 含量测定
中图分类号: R284. 2 文献标识码: A 文章编号: 1673 - 7717( 2008) 03 -0657 - 02
Ex trac tion and Determ inat ion of Polysacchar ides from Descu ra in ia
S oph ia ( L. ) W ebb ex Prantl P rocessed
MA M ei-fang1, LU W en-hai2
( 1. DoctoralC andidates in G rade 2006 of Shandong Un iversi ty of TCM, Jinan 250014, Shandong , Ch ina;
2. Shandong Un iversity ofTCM, Jinan 250014, Shandong, C hina)
Abs trac t: Ob jective : To ex tract and dete rm ine polysaccha rides from Descurain ia Sophia ( L. ) W ebb ex P rantl p ro-
cessed. M ethod: Po lysaccha rides fromDescura in ia Soph ia ( L. ) W ebb ex P rantl processed we re ob ta ined by ho twa te r ex-
trac tion and e thano l precipita tion, con tent was determ ined by way of anth rone su lphuric ac id. Result: The po lysaccha rides
conten t o fD escura in ia Sophia ( L. ) W ebb ex P ran tl processed w as highe r, the mean recove ry was 100. 26% , RSD =
1. 61% ( n = 6) . Conclusion: Po ly saccharide s we re ex trac ted fromD escura in ia Soph ia ( L. ) Webb ex P rantl processed
fo r the first time. The me thod o f conten t de te rm ina tion is simp le, rap id and accurate w ith good reproducibility.
Keywords: descurain ia soph ia ( L. ) w ebb ex pran t;l proce ss; po ly saccharide s; ex trac tion; con tent determ ination
收稿日期: 2007 - 11 - 01
作者简介:马梅芳 ( 1973 - ) ,女, 山东枣庄人,主管中药师, 博士研
究生,研究方向:中药质量控制。
南葶苈子为十字花科植物播娘蒿 [ Descurain ia Sophia
( L. ) W ebb ex P ran tl]的干燥成熟种子, 味辛、苦, 性大寒;
可泻肺平喘, 利水消肿; 用于痰涎雍肺, 喘咳痰多, 胸腹水
肿,小便不利, 肺源性心脏病等。药理研究表明, 南葶苈子
具有强心、止咳、平喘、抗菌、降血脂、抗癌等多方面作
用 [1 - 5]。为进一步开发利用这一药物资源, 笔者从南葶苈
子饮片中提取多糖, 并测定其含量,结果令人满意。
1 仪器与试药
UV -2401PC紫外分光光度计 (日本 岛津 ) ; d -无水
葡萄糖对照品 (中国药品生物制品检定所, 批号 110833)
200302); 所用试剂均为分析纯。
南葶苈子原药材于 2004年 6月采自济南郊区, 由济南
市宏济堂药业集团提供, 经山东中医药大学中药鉴定教研
室周凤琴教授鉴定为十字花科植物播娘蒿 [D escurainia
Sophia ( L. ) W ebb ex P rantl]的干燥成熟种子,饮片自制。
生南葶苈子:取原药材,去净杂质, 筛去灰屑。
炒南葶苈子:取生南葶苈子置锅内,文火炒至微鼓起,
表面色泽稍加深,有香气逸出时,取出, 放凉。得率94. 5%。
炒南葶苈子 (炒老品 ): 取生南葶苈子置锅内, 文火或
中火炒至微鼓起,表面色泽明显加深,有焦香气逸出时,取
出,放凉。得率 90. 5%。
2 方法与结果
2. 1 标准曲线的制备
2. 1. 1 葡萄糖对照品溶液的制备 精密称取 105e 干燥
至恒重的无水葡萄糖对照品 34. 7m g, 置 100mL容量瓶中,
加水溶解并稀释至刻度 , 摇匀, 作为对照品溶液 (浓度
347Lg /mL)。
2. 1. 2 标准曲线绘制 精密量取对照品溶液 0. 1、0. 2、
0. 3、0. 4、0. 5、0. 6mL,分别置 10m L具塞刻度试管中, 各加
水至 2. 0mL, 摇匀,在冰水浴中缓缓滴加 0. 2%蒽酮 -硫酸
溶液至刻度,混匀, 放冷后置水浴中保温 10m in, 取出, 立即
置冰水浴中冷却 10m in,取出, 以相应试剂为空白,照紫外 -
可见分光光度法, 在 582nm 波长处测定吸光度, 以吸光度 A
为纵坐标,浓度 C为横坐标,绘制标准曲线,得回归方程: A
= 0. 03116+ 0. 038125977C, r = 0. 9997。在 3. 47~ 20. 82Lg /
mL范围内, 葡萄糖浓度与吸光度之间线性关系良好。
2. 2 精密度试验
精密量取对照品溶液 0. 4mL, 6份, 按标准曲线绘制方
法操作, 测得吸光度分别为 0. 5494、0. 5431、0. 5431、
0. 5437、0. 5437、0. 5415, 平均值 0. 5441, RSD = 0. 50% ( n
= 6)。表明方法的精密度良好。
2. 3 多糖的提取及精制
取南葶苈子生品 60g, 炒品 60g, 炒老品粉末 60g, 分别
置索氏提取器中, 用 20倍石油醚 ( 30e ~ 60e )回流提取
4h, 药渣挥干溶剂; 用 20倍乙醚回流提取 4h, 药渣挥干溶
剂;用 20倍 80%乙醇回流提取 4h, 药渣挥干溶剂, 转移至
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DOI：10.13193/j.archtcm.2008.03.210.mamf.061
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CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE
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中华中医药
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圆底烧瓶中,以电热套加热, 用 20倍水回流提取 4h, 提取
液浓缩至一半体积, 加入 1%活性炭,脱色,滤过,滤液加入
乙醇使含醇量达 80% ,静置过夜, 滤过, 残渣用乙醚、丙酮、
无水乙醇反复洗涤数次,得南葶苈子多糖,置硅胶干燥器中
干燥备用。生品多糖得率 3. 36% , 炒品多糖得率 3. 35% ,
炒老品多糖得率 3. 12%。
2. 4 多糖换算因子测定
取生品多糖 16mg, 炒品多糖 16m g, 炒老品多糖 16m g,
精密称定,分别加水溶解并定容至 50m L,精密量取 0. 5m L,
按标准曲线绘制方法操作,利用标准曲线计算单糖浓度,按
下式计算换算因子 f。
f=
W @ 1000
C @ D
注: W 为多糖的重量 ( m g ); C为溶液中单糖的浓度
(Lg /m L); D为稀释倍数;测得生品多糖 f= 3. 081, RSD =
1. 16% ( n = 6); 炒品多糖 f= 3. 078, RSD = 1. 48% ( n =
6) ;炒老品多糖 f= 3. 075, RSD= 1. 49% ( n = 6)。
2. 5 样品测定
取干燥样品粉末 1g,精密称定,置索氏提取器中, 加乙
醚 100mL,回流提取至提取液无色, 药渣挥干溶剂, 继续以
80%乙醇 100mL回流提取至提取液无色, 药渣挥干溶剂,
转移至圆底烧瓶中, 精密加水 200m L, 称定重量, 回流提取
2h,放冷后用水补足损失的重量, 滤过, 精密量取续滤液
0. 5mL, 加水至 2. 0mL, 按标准曲线绘制方法操作, 测定其
吸光度值,按下式计算多糖含量。结果见表 1。
多糖含量 = C @ D @ f
W @ 106
@ 100%
注: C为样品溶液的葡萄糖浓度 (Lg /m L); D为样品溶
液的稀释倍数; W 为样品的重量 ( g) ; f为换算因子。
表 1 南葶苈子饮片中多糖含量测定结果 (% , n = 3)
样品 测得多糖含量 RSD
生南葶苈子 10. 386 0. 34
炒南葶苈子 10. 392 0. 76
炒老南葶苈子 8. 111 0. 25
2. 6 重复性试验
取同一样品粉末 1g, 6份,按样品测定方法操作平行测
定,计算多糖含量, 求得 RSD = 0. 73%。表明方法的重现性
良好。
2. 7 加样回收率试验
取样品 (已知多糖含量 10. 40% )粉末 1g, 6份, 精密称
定,精密加入无水葡萄糖对照品 39. 4m g, 按样品测定方法
制备溶液并测定吸光度值。按下式通过换算因子折算多糖
的回收率。结果见表 2。
表 2 多糖含量测定加样回收率试验结果 ( n = 6)
编号 取样量
( g)
测得多糖
量 (m g)
样品中含有
多糖量 ( mg)
加入葡萄
糖量 ( mg)
回收率
(% )
平均回收
率 (% )
RSD
(% )
1 1. 1351 239. 87 118. 05 39. 4 100. 39
2 1. 0991 239. 13 114. 31 39. 4 102. 86
3 1. 1145 238. 76 115. 91 39. 4 101. 23
4 1. 1256 238. 02 117. 06 39. 4 99. 68
5 1. 1343 237. 78 117. 97 39. 4 98. 73
6 1. 1223 236. 42 116. 72 39. 4 98. 64
100. 26 1. 61
结果表明该方法的加样回收率高。
回收率 =测得多糖量 -样品中含有多糖量加入葡萄糖 @换算因子 @ 100%
3 讨 论
( 1)硫酸蒽酮法测定多糖含量的原理是根据多糖在强
酸性条件下,被浓硫酸水合产生的高温迅速水解, 产生单
糖,单糖进一步脱水形成糠醛衍生物, 糠醛衍生物在强酸性
条件下,与一些具有活性亚甲基并有共轭未饱和系统的化
合物,如苯酚、蒽酮、苯胺等缩合生成有色物质, 该有色物质
在特定波长处和一定浓度范围内, 吸光度与浓度呈线性关
系,从而可用比色法测定其单糖含量, 再根据单糖与多糖之
间的换算因子,计算多糖的含量。
( 2)实验过程中需要注意的是: ¹ 蒽酮试剂不稳定, 需
用时新配 ; º显色反应过程中, 水浴保温时间及冰水浴中冷
却时间应严格控制,以保证结果的准确; »空白溶液与供试
品溶液的制备应平行进行。
( 3)根据南葶苈子饮片的特点及多糖的性质, 样品用
乙醚、80%乙醇除去脂溶性杂质及单糖、低聚糖、苷类等干
扰性成分后,加水回流提取多糖并测定其含量。提取时间
笔者比较了 1、2、3h, 结果显示,回流 2h,多糖的溶出即达到
平衡, 2h以后, 延长回流时间, 测得多糖含量不再增加, 故
确定加水回流时间为 2h。
( 4)从试验结果可以看出,南葶苈子生品多糖、炒品多
糖、炒老品多糖的换算系数相同 (均等于 3. 08), 推测炮制
对南葶苈子多糖的结构没有影响;南葶苈子生品、炒品多糖
含量基本相等,而炒老品多糖含量则明显低于生品和炒品,
说明炮制对南葶苈子多糖的含量有影响,炒制程度适中, 不
会影响多糖含量,但是炒老以后会使其多糖含量下降, 原因
可能是受热温度过高或受热时间过长, 导致部分多糖被破
坏所致。
( 5)硫酸蒽酮法测定南葶苈子饮片中多糖的含量, 操
作简便、准确、回收率高, 为控制南葶苈子饮片质量提供了
新的依据。
( 6)现代药理研究表明, 多糖是多种中药的有效成份
之一,具有多种生物活性,是理想的免疫增强剂, 它能激活
免疫细胞,提高机体免疫功能, 在抗病毒、抗肿瘤等方面有
着广泛的应用 [6]。南葶苈子饮片中多糖含量较高,其结构
组成和生理活性还有待于进一步研究。
参考文献
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