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活性。
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收稿日期:2014 - 08 - 18;修回日期:2014 - 10 - 22
作者简介:于建华(1981 -),女(蒙古族),讲师,硕士,研究方
向为水产养殖,yjhyjh926@ 163. com.
通信作者:周 玮(1963 -),男,教授,博士,研究方向为水产
养殖,zhouwei@ dlou. edu. cn.
超滤浓缩技术在小新月菱形藻中的应用
于建华1,周 玮2,王国栋3
(1.内蒙古民族大学 动物科学技术学院,内蒙古 通辽 028042;2.大连海洋大学 水产与生命学院,
辽宁 大连 116023;3.大连举扬科技有限公司,辽宁 大连 116023)
中图分类号:S853. 75 文献标识码:B 文章编号:1004 - 7034(2015)05 - 0138 - 03
小新月菱形藻(Nitzschia closterium)含有丰富的
多不饱和脂肪酸 EPA 和 DHA,是一种利用价值较高
的单胞藻,在水产养殖方面具有很高的应用价
值[1 - 2]。小新月菱形藻是许多贝类、海参、虾类等经
济动物苗种生产、幼体培育的优良饵料 [3 - 4]。然而
在水产经济动物育苗时,由于小新月菱形藻培养受到
自然条件、技术水平等因素的限制,藻类供应往往不
及时,直接或间接地影响了苗种生产;因此,藻类及时
供应是成功育苗的关键。
近年来,很多学者以浓缩藻液的方式储存藻液,
以满足生产需要[5 - 6]。超滤技术由于具有应用范围
广、可以在常温下运行、能耗低、设备简单、易维护等
优点,已经在医药、化工、生物工程、食品等领域得到
了广泛的应用[7 - 10]。目前,利用超滤技术对金藻的
浓缩已有报道[11],但对小新月菱形藻的浓缩研究报
道很少。操作压力是单胞藻饵料浓缩机的一个重要
参数,试验利用大连海洋大学研制的单胞藻饵料浓缩
机(MFZ -1)对小新月菱形藻进行浓缩,研究操作压
力和起始密度对浓缩机浓缩效果的影响,为发挥单胞
藻饵料浓缩机最佳使用性能提供依据,现报道如下。
1 材料与方法
1. 1 主要仪器及小新月菱形藻来源
MFZ -1 单胞藻饵料浓缩机,大连海洋大学研
制;CX21FS1 显微镜,购自上海肯强仪器有限公司;
XB - K -25 血球计数板,购自上海求精生化试剂仪
器有限公司;50 L 塑料桶,购自庆云三元塑料制品有
限公司。以上仪器和设备均由大连海洋大学水产与
生命学院海洋生物实验室提供。
小新月菱形藻,购自大连陆源海产科技园单胞藻
饵料培养室。
1. 2 浓缩机滤水率的测定
在饵料池(18 m3)中培养小新月菱形藻,藻液体
积为 10 m3,在密度为 1. 0 × 106,2. 0 × 106个 /mL 时
开始浓缩试验。操作压力分别为 0. 02,0. 06,0. 10,
0. 16,0. 20 MPa。试验时浓缩机进藻管口,出藻管口
放在饵料池中,出水管口放入 50 L塑料桶中。
记录由出水管过滤出的水装满 50 L塑料桶所需
要的时间,取 2 次测定的平均值。滤水率 Y =
V / T。
式中:Y为滤水率(L /min),V为体积(L),T为收
集 50 L水时所需要的时间(min)。
试验开始后,每隔 1 h测定滤水率和浓缩藻液密
度,当滤水率降至开机时的 1 /2 时结束试验。
1. 3 藻类的培养方法
采用 f /2 海水培养基进行培养[1]。
1. 4 数据的统计分析
采用 SPSS11. 5 软件进行相关性检验,单因素方
差分析和邓肯氏多重比较。
2 结果
2. 1 操作压力对浓缩机滤水率的影响
2. 1. 1 起始密度为 1. 0 × 106个 /mL 时不同时间的
滤水率 见图 1。
随着浓缩时间的延长,滤水率逐渐下降。刚开始
浓缩时滤水率最大,各压力组起始滤水率在
(35. 98 ± 0. 52) ~(18. 17 ± 0. 48)L /min 之间。刚
开始浓缩时,各压力组之间差异显著(P < 0. 05)。浓
缩 1 h后,滤水率迅速降低,随着浓缩时间继续增加,
滤水率继续降低,但是降低幅度逐渐变小,最后趋于
稳定状态。压力越大滤水率越大,刚开始浓缩时滤水
831
Heilongjiang Animal Science
and Veterinary Medicine № 05 2015
DOI:10.13881/j.cnki.hljxmsy.2015.0689
2015 年 05 月(上)
图 1 不同操作压力对浓缩机滤水率的影响
率从大到小的操作压力为 0. 20 MPa > 0. 16 MPa >
0. 10 MPa > 0. 06 MPa > 0. 02 MPa,随着浓缩时间的
延长,0. 20 MPa压力组与其他组始终差异显著(P <
0. 05)。
2. 1. 2 起始密度为 2. 0 × 106个 /mL 时不同时间的
滤水率 见图 2。
刚开始浓缩时滤水率最大,各压力组之间差异显
图 2 不同操作压力对浓缩机滤水率的影响
著(P < 0. 05),滤水率在(35. 01 ± 0. 42)~(18. 03 ±
0. 38)L /min之间,滤水率从大到小的操作压力为
0. 16 MPa > 0. 20 MPa > 0. 10 MPa > 0. 06 MPa >
0. 02 MPa。随着浓缩时间的延长,0. 16 MPa 压力组与
其他组始终差异显著(P < 0. 05)。
2. 2 操作压力对藻液密度的影响(见表 1、表 2)
随着浓缩时间的增加,浓缩密度逐渐增大。同一
表 1 不同压力、不同浓缩时间的藻细胞密度(起始密度为 1. 0 × 106个·mL - 1) × 106个·mL - 1
压力 /MPa 0 h 1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h 7 h 8 h
0. 02 1. 04a ± 0. 09 1. 14a ± 0. 05 1. 26a ± 0. 01 1. 30a ± 0. 01 1. 36a ± 0. 02 1. 43a ± 0. 01 1. 59a ± 0. 04 1. 73a ± 0. 05 1. 94a ± 0. 01
0. 06 1. 10a ± 0. 02 1. 15a ± 0. 02 1. 29a ± 0. 05 1. 33a ± 0. 06 1. 42a ± 0. 07 1. 54ab ± 0. 05 1. 67a ± 70. 03 1. 82ab ± 0. 12 2. 02ab ± 0. 08
0. 10 1. 02a ± 0. 07 1. 17a ± 0. 04 1. 30a ± 0. 06 1. 39a ± 0. 03 1. 51a ± 0. 07 1. 64b ± 0. 06 1. 79a ± 0. 04 2. 13b ± 0. 10 2. 24b ± 0. 12
0. 16 1. 08a ± 0. 02 1. 25a ± 0. 04 1. 47b ± 0. 04 2. 04b ± 0. 07 2. 38b ± 0. 01 2. 94c ± 0. 01 4. 03b ± 0. 21 6. 25c ± 0. 11 14. 28c ± 0. 03
0. 20 1. 06a ± 0. 06 1. 21a ± 0. 04 1. 53b ± 0. 04 1. 96b ± 0. 11 2. 35b ± 0. 07 3. 52d ± 0. 05 4. 26b ± 0. 05 8. 57d ± 0. 05 16. 32d ± 0. 02
注:同列数据肩标字母完全不同表示差异显著(P < 0. 05),含有相同字母表示差异不显著(P > 0. 05)。
表 2 不同压力、不同浓缩时间的藻细胞密度(起始密度为 2. 0 × 106个·mL - 1) × 106个·mL - 1
压力 /MPa 0 h 1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h 7 h 8 h
0. 02 2. 06a ± 0. 04 2. 11a ± 0. 04 2. 29a ± 0. 02 2. 48a ± 0. 03 2. 66a ± 0. 06 2. 79a ± 0. 01 2. 94a ± 0. 07 3. 32a ± 0. 02 3. 61a ± 0. 06
0. 06 1. 95a ± 0. 05 2. 16a ± 0. 08 2. 37a ± 0. 06 2. 53a ± 0. 04 2. 71a ± 0. 12 2. 93a ± 0. 02 3. 16b ± 0. 06 3. 45a ± 0. 06 3. 80a ± 0. 04
0. 10 2. 12a ± 0. 04 2. 51b ± 0. 10 2. 85b ± 0. 06 3. 05b ± 0. 04 3. 29b ± 0. 04 3. 56b ± 0. 03 3. 89c ± 0. 05 4. 28b ± 0. 03 4. 75b ± 0. 06
0. 16 1. 92a ± 0. 12 2. 53b ± 0. 02 3. 07c ± 0. 06 3. 70d ± 0. 04 4. 65d ± 0. 05 5. 88d ± 0. 07 7. 69e ± 0. 05 15. 38d ± 0. 04 38. 47d ± 0. 08
0. 20 2. 08a ± 0. 15 2. 30ab ± 0. 11 2. 72b ± 0. 04 3. 42c ± 0. 04 3. 82c ± 0. 11 4. 36c ± 0. 09 5. 69d ± 0. 05 10. 42c ± 0. 15 22. 36c ± 0. 06
注:同列数据肩标字母完全不同表示差异显著(P < 0. 05),含有相同字母表示差异不显著(P > 0. 05)。
工作压力下,随着饵料浓缩机工作时间的延长,在工
作前 6 h各组浓缩密度差异不明显,到第 8 小时时表
现出很大差异。
压力不同则浓缩密度不同。当小新月菱形藻起
使浓缩密度为 1. 0 × 106个 /mL、浓缩 8 h 时,各压力
组浓缩密度从大到小的排序与滤水率一致,各组之间
差异显著(P < 0. 05)。压力为 0. 20 MPa时,浓缩 8 h
密度最大[为(16. 32 ± 0. 02)× 106个 /mL],0. 02 MPa
最小[为(1. 94 ± 0. 01)× 106个 /mL]。当小新月菱形
藻起使浓缩密度为 2. 0 × 106个 /mL 时,浓缩 8 h
0. 02,0. 06 MPa 组与其他组之间差异显著(P <
0. 05)。压力为 0. 16 MPa 时浓缩 8 h 密度最大[为
(38. 47 ± 0. 08)× 106个 /mL],0. 02 MPa 最小[为
(3. 61 ± 0. 06)× 106个 /mL]。
3 讨论
3. 1 关于操作压力对滤水率的影响
超滤是采用压力作为推动力的膜分离技术[9],
操作压力、操作时间影响超滤膜的滤水率。超滤膜孔
径一般为 0. 005 ~ 1. 000 μm[9]。进行小新月菱形藻
浓缩时藻细胞和水经过超滤膜,在压力作用下水通过
超滤膜,而藻细胞由于分子大被超滤膜截留下来,随
着浓缩时间的延长,被滤出的水越来越多,浓缩密度
越来越大。
本试验中,由图 1 可知,随着压力的增大,滤水率
931《黑龙江畜牧兽医》科技版
增加,滤水率最大时的压力为 0. 20 MPa,滤水率最小
时的压力是 0. 02 MPa。压力是超滤的动力,操作压
力增加则滤水率增加,这与周玮等[11]利用浓缩机浓
缩金藻时的结果一致。随着压力的增加,推动水经过
超滤膜的压力增加,大量的水分子经过超滤膜,使滤
水率增加,但是滤水率的增加幅度不是越来越大,随
着浓缩时间的延长滤水率增加幅度逐渐降低,最后趋
于稳定。根据超滤的原理,大分子的溶质随着水一起
流到膜表面,但是不通过膜,在膜表面聚积成密集的
“溶质层”,这种现象被称为浓差极化现象[10]。本试
验中,随着压力的增加、浓缩时间的延长,停留在超滤
膜表面的藻细胞越来越多,浓差极化现象越来越明
显,阻碍了水通过超滤膜,浓差极化对超滤膜的影响
抵消了增加的压力,因而后期滤水率增加幅度降低,
最后趋于稳定。本试验中,高密度浓缩时,尽管压力
增加到了 0. 20 MPa,但是滤水率并没有增加,低于
0. 16 MPa,压力越大对超滤膜的破坏就越严重,阻碍
了水分子通过超滤膜。苗豪梅等[12]研究发现,适宜
的操作压力不易形成凝胶层或膜孔堵塞。张宁等[13]
也认为,超滤的压力并不是越大越好,压力越大加速
超滤膜的压实,且耗能大。
3. 2 关于操作压力对浓缩密度的影响
在压力作用下,随着浓缩时间的延长,藻细胞密
度逐渐增加。藻细胞和水经过超滤膜,藻细胞不通过
超滤膜;因此,随着时间的延长藻细胞密度逐渐增加。
低密度浓缩 2 h 后,各组之间浓缩密度差异显著,压
力越大浓缩密度最大。当压力为 0. 20 MPa 8 h 时密
度最大。高密度浓缩时,浓缩 8 h 密度最大时的压力
为 0. 16 MPa,藻液密度浓缩至初始密度的 20 倍。由
于在 0. 20 MPa 时,浓缩机滤水率低于 0. 16 MPa,因
此 0. 20 MPa浓缩密度低于 0. 16 MPa。
3. 3 关于起始密度对浓缩机浓缩效果的影响
藻类的起使密度不同,浓缩机的滤水率和藻液的
浓缩密度不同。由图 1 和图 2 可知,在低密度时
(1. 0 × 106个 /mL)随着压力的增大,浓缩机滤水率增
加,浓缩密度增加。在高密度(2. 0 × 106个 /mL)进行
浓缩时,压力增加,滤水率增加,浓缩密度增加;但当
压力增加到 0. 20 MPa时,滤水率和浓缩密度下降,低
于 0. 16 MPa。滕建文[9]、齐辉[14]认为,料液浓度对
超滤作用有影响,料液浓度低容易过滤,料液浓度高
则过滤效率低。本试验得到相似的结论,密度越低滤
水率越高。由图 1 和图 2 可知,浓缩 1 h 后低密度浓
缩组滤水率下降趋势比高密度浓缩组平缓,密度越高
对膜孔的阻塞越强,藻细胞不易过滤。
4 结论
利用单胞藻饵料浓缩机对小新月菱形藻进行浓
缩,低密度时(1. 0 × 106个 /mL)采用 0. 20 MPa 压力、
高密度时(2. 0 × 106个 /mL)采用 0. 16 MPa 压力滤水
率最大,浓缩密度也最大。
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