全 文 ：第 24卷第 8期
2005年 8月
水 产 科 学
FISHERIES　SCIENCE Vol.24 No.8Aug.2005
单胞藻的生产性培养技术
孙成渤1 , 王小华1 , 宓慧菁2
(1.天津农学院 职业技术学院 , 天津　300380;2.天津市水产研究所 渤海水产资源增殖站 , 天津　300221)
关键词:球等鞭金藻;湛江叉鞭金藻;小球藻;牟氏角毛藻;亚心形扁藻;生产培养
中图分类号:S963.213 文献标识码:B 文章编号:1003-1111(2005)08-0039-02
　　收稿日期:2004-12-28;　修回日期:2005-03-07.　　作者简介:孙成渤(1957-),男 ,高级讲师;主要从事水生生物学和水产养殖育苗技术.
　　单胞藻类具有营养丰富 , 生长繁殖迅速 ,对环境适应性
强和易培养的特点 ,是水产动物特别是贝类 、甲壳类幼体的
优质适口饵料。但由于天津地区海水透明度低 , 有机质含
量 、浮游动物 、浮游植物丰富 , 进行藻类生产性培养困难很
大 ,为此 , 2004 年笔者以球等鞭金藻(Isochrysis galbana)、小
球藻(Chlorella sp.)、 牟氏 角毛 藻(Chaetoceros miielleri
lemmermann)、湛江叉鞭金藻(Dicrateria zhanjiangensis)、亚心
形扁藻(Platymonas subcordiformis)为试验藻种 , 研究了海水
单胞藻类一级培养(保种)、二级培养(中继培养)、三级培养
(生产性培养)的操作规程。探讨了不同藻类的生态条件和
生长特性及海水单胞藻培养中应注意的问题。
1　接种与培养
1.1　试验藻种
球等鞭金藻 、小球藻由天津市海发珍品发展有限公司
引进。牟氏角毛藻 、湛江叉鞭金藻由辽宁省大连市汇丰水
产器材公司引进。亚心形扁藻由河北省黄骅市南排河镇兴
海育苗场引进。试验用水取自增殖站三级沉淀池海水和井
水 , pH 8.6 ,盐度 30。
1.2　培养用水的配制
将经过沉淀的海 、淡水配成相对密度为 1.020的海水后
进行过滤(滤棉要经常更换 , 水的流速要慢), 然后煮沸 5 ～
10 min ,以杀死微生物 ,最后把沸水倒入用 HCl或NaClO消毒
过的聚乙烯塑料桶内 , 冷却备用。藻液中加入 EDTA , 络合
重金属离子。
1.3　藻类培养
1.3.1　一级培养
培养容器为 5000 ml烧瓶或 10000 ml 、20000 ml玻璃瓶。
选择生命力旺盛 、无污染的藻液进行培养。将藻种上
清液缓慢倒入消毒后的玻璃瓶中 , 根据所扩藻类的不同 , 在
藻液或培养用水中加入相应的硝酸钠(NaNO3)、磷酸二氢钾
(KH2PO4)、柠檬酸铁(FeC6H5O7·5H2O)、硅酸钠(Na2SiO3)、乙
二胺四乙酸钠(EDTA)、维生素 B1、维生素 B12等主要营养盐。
加水量视藻种密度而定 , 1∶1 、1∶2 或 1∶3。 最后用酒精棉擦
拭瓶口 ,用消毒的滤纸封口 , 摇匀后 , 置于光线充足处。室
温 24 ～ 26℃, 每小时摇动一次。扩种情况依藻类长势情况
而定。藻液达 10000～ 20000 ml即可进行二级培养。
1.3.2　二级培养
培养容器为国产藻类连续培养机 、3 t玻璃钢水槽 、塑料
薄膜袋封闭式充气一次性培养。
培养用水为煮过的水或 50%消毒水加 50%煮沸过的
水。
扩种时 ,将藻液倒入容器中 , 用泵将水打入藻液中 , 加
入相应营养盐。接种量 1∶10 ～ 1∶20。接种后 , 玻璃钢水槽用
消毒的塑料布遮盖 , 24 h 连续充气 , 日光灯照射。每天视藻
液的颜色 、浓度 、生长情况添加营养盐和培养用水。经 5 ～ 6
d即可供三级生产性培养。
1.3.3　三级培养
培养容器为 8 t玻璃钢水槽 、水泥池封闭式或开放式充
气一次性培养。
培养用水经次氯酸钠或漂白粉处理消毒。
培养方法与二级培养相同。接种量据情掌握 , 但不宜
低于 1∶50。充气量达到藻液翻腾。一般经 7 d 培养 , 藻细胞
达到一定密度时 ,即可用于投喂青蛤的 D型幼虫 、锯缘青蟹
的Z1 幼体和南美白对虾 、日本对虾的蚤状幼体等。
2　主要藻类的培养条件
2.1　金藻类
正常情况下 , 金藻培养液呈金黄色或棕色 , 悬浮无沉
淀 ,具有趋光性 , 新扩后或在阳光照射下出现少量附壁。球
等鞭金藻不耐高温 ,最适温度 23 ～ 28℃, 湛江叉鞭金藻最适
温度为 25～ 32℃, 超过 32℃则生长缓慢甚至死亡 ,适盐范围
20 ～ 30 ,最适光照强度为 7000～ 9000 lx。一级培养的金藻密
度可达 150万个/ml。
2.2　小球藻
正常情况下 , 小球藻培养液呈暗绿色 , 有沉降性 , 因此
培养小球藻必须连续充气。最适温度为 25℃, 光照 10000
lx。小球藻喜氮 ,藻液中适当提高氮肥浓度有利于生长。一
级培养的小球藻密度可达 230 万个/ ml。
2.3　亚心形扁藻
DOI :10.16378/j.cnki.1003-1111.2005.08.014
正常情况下 ,扁藻培养液呈翠绿色 , 有沉降性和附壁现
象 ,必须连续充气。扁藻对温度和盐度适应范围广 ,最适温
度 20～ 28℃, 高温适应性差 ,超过 31℃, 生长受到抑制 , 最适
盐度 30 ～ 40。扁藻喜磷 ,适当增加磷肥有利于生长 ,最适光
照 5000～ 10000 lx。
2.4　牟氏角毛藻
正常情况下 , 牟氏角毛藻培养液呈金黄色 , 无沉淀 , 一
级培养密度可达 33 万个/ml , 适盐 26 ～ 35 ,适温 5 ～ 30℃, 生
长率随水温升高而提高 ,超过 30℃生长率开始下降 ,最适温
度 30℃,最适光照 10000～ 15000 lx。
3　注意事项
3.1　接种时间
选择阳光充足的晴天 , 在 8:00 ～ 10:00 接种 , 晚上或阴
雨天不宜接种。
3.2　敌害生物的防治
一些较大型的敌害生物 ,如尖鼻虫(Oxyrrhis sp.)、游仆
虫(Euplotes)、变形虫(Amoeba)等可直接吞噬藻类细胞 , 当
其大量存在时 ,可在 2 ～ 3 d 内使藻液变清。细菌过多 , 也会
影响藻类生长 ,使细胞下沉。
培养过程中 ,造成藻液污染的途径有:培养用海水以及
清洗消毒容器 、工具的用水没有经过有效处理或处理不彻
底;营养盐不干净;水泥池培养 ,微生物通过空气污染藻液;
操作不遵守操作规程;种类混杂等。
防治措施:为了使培养的藻类生长繁殖迅速 , 必须定期
接种 ,保持良好的培养条件;所用器具用浓 HCl 、NaClO或煮
沸严格消毒;作好藻种分离 ,同种放在一起;逐级培养 , 同级
间严禁互相扩;作好操作人员卫生 , 按照规程操作。
3.3　藻细胞下沉的原因
藻种的老化 ,细菌 、原生动物污染 ,藻细胞死亡 ,营养盐
浓度过大 ,接种过于频繁等都能造成藻细胞下沉。
3.4　水质处理
水质好坏直接影响藻类的长势 , 天津地区海水透明度
低 ,有机质含量 、浮游动物 、浮游植物的种类和数量丰富 , 淡
水碱性化 ,进行藻类生产性培养困难很大 , 因此藻类培养水
质处理至关重要。
一 、二级培养主要用经过煮沸的海水 , 三级培养则使用
消毒海水。把经过砂滤的海 、淡水配成相对密度为 1.020 的
海水 ,再用黑塑料布遮阳沉淀一段时间后 , 每吨水加入有效
氯为8%的NaClO 250 g进行杀菌消毒 , 连续充气使药物均匀
分布水中。经 6～ 8 h 后 ,每吨水再加入 25 g Na2S2O3 中和余
氯 ,充气 4 ～ 6 h 后 , 即可使用 ,效果很好。
参考文献:
[ 1] 　杨海波 ,于媛 ,刘艳 ,等.营养元素对小球藻生长及胞内蛋白质
和多糖含量的影响[ J] .水产科学 , 2004 ,23(1):7-8.
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京:中国农业出版社 ,2000.
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[ 4] 　孙成渤.水生生物学[M] .北京:中国农业出版社 , 2004.37-73.
[ 5] 　李永涵 ,赵文.水产饵料生物学[M] .大连:大连出版社 , 2002.
279-285.
Commercial Culture of Marine One-celled Algae
SUN Cheng-bo1 , WANG Xiao-hua1 , BI Hui-qin2
(1.Profession Technological School , Tianjin Agricultural College , Tianjin 300380 , China;2.The Bohai Sea Fishery Resources Reproduce Sta-
tion , Tianjin Fishery Institute , Tianjin 300221 , China)
Key words:Isochrysis galbana;Dicrateria zhanjiangensis;Chlorella sp.;Chaetoceros miielleri lemmermann;
Platymonas subcordiformis;productive culture
(责任编辑:晓　荷)
大连市水产品质量检验检测中心通过国家认证
2005年 7 月 23日 , 大连市水产品质量检验检测中心通过了国家农业部和质检总局的双重计量认证 ,成为东北地区第一家
国家级渔业产品质量监督检查测试中心 ,可以对水产品生产的环境 ,生产用饵料 、渔药和加工环节 , 从源头直至上市的全过程
进行监测。
(大连市海洋与渔业局办公室供稿)
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