全 文 ：单胞藻培养过程中接种和添加培养液应注意的几个问题
焦改志
(青岛市水产局 , 2 6 6 0 01 )
本文总结出了单胞藻培养过程中接种和添加培养
液应注意的几个问题 。
1 所接藻种应达到足够数量和一定浓度
因为藻类细胞迅速生长繁殖需要培养液中有足够
浓度的由藻类细胞自己产生的物质 (如径基乙酸 ) . 藻种
量大 ,一接种就可由旧培养液带来大量的这些物质而有
利于藻类生长 。 第二 ,高比例接种可使藻类细胞从旧培
养液到新培养液中营养浓度不致于差别过大 ,减少了藻
类细胞对新环境的适应时间 ,缩短了延缓期 ,使藻类细
胞尽早进入指数生长期 ,从而缩短了培养时间。 再者 ,保
持培养藻类数量上的绝对优势通过分泌较多的抗生物
质而对敌害生物起抑制作用 ,减轻了污染 。
在环境因子不太适宜 、 藻类生长不良 、 敌害生物大
量出现的可能性大时 ,高比例接种尤其必要 。
一般单胞藻藻种与培养液比例应为 1 : 2一 1 , 5 。
扁藻 、 三角褐指藻和新月菱形藻 、 金藻类 、 角毛藻的
藻种浓度应分别为 30~ 40 , 300 , 2 50 , 2 00 ( X 1 0 `ulI ) 。
2 接种的藻种必须是取 自正处于指数生
长期的藻类细胞
因为此时 ,藻类细胞正在旺盛生长 、 迅速分裂繁殖 ,
这些藻类细胞到新培养液中 ,能较快地又进入指数生长
期。 而如果藻种己经过 了指数生长期 ,或藻种来自不良
环境 ,则藻类细胞是老化的或被严重污染的 ,就必然使
延缓期延长 。
选择下一次扩大接种或收获投饵的时间 ,最好是指
数生长期的末期 。 这一方面充分发挥了培养液的作用 ,
且藻种细胞达到了较大的浓度 , 另一方面也保证了下一
次接种用藻种的质量 。
3 接种时还应注意接种时间
种 。 因为晚上不少藻类细胞沉于底部 ,而白天藻类细胞
进行光合作用 ,有趋光上浮习性 ,尤其是其有运动能力
的种类更明显 。 上午 8 : 0 ~ 1 0 : 0 一般是藻类细胞上浮
明显的时候 ,此时接种可以把上浮的优质藻类细胞吸出
做藻种 ,弃去底部沉淀的藻类细胞 (这些藻类细胞一般
活力较弱 ) ,起选种作用 。 而且此时接种藻类细胞可进行
较长时间光合作用并迅速繁殖 ,缩短了延缓期 。
关于添加培养液 , 以下几点值得注意 :
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1 海水及施肥工具均应严格消毒 ;分次添加培
养液较一次加完为好 。 一次性接种和添加培养液易产生
如下后果 : ( l) 营养很快被耗尽 ; ( 2) c仇或 姚供应不足 ;
(3 ) PH 值发生较大变化 ; (4 ) 由于 自身遮盖而减弱光照
强度 ; (5 )藻类细胞之间产生自体抑制 。
由于这些原因而使指数生长期不能长期持续下去
而很快进入相对生长下降期 。
而分次添加培养液可使营养物质不断得到补充 ,环
境条件比较稳定 ,一般不会出现一次加培养掖中造成指
数生长下降的抑制条件 。 根据作者实验 ,同样条件下 ,分
次加培养液培养单胞藻达到浓度要求较一次加完培养
液的培养周期可缩短粤一粤时间 。`
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.3 2 半连续培养较一次性培养好 。 在一次培养方
式的基础上 ,当培养液中藻类细胞达到一定密度后 , 每
天或隔天 ,收获一部分藻种 ,并补充一部分新培养液 ,继
续培养 ,谓之半连续培养 。 半连续培养也可使藻类细胞
不断保持指数生长 。
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3 晴天由于光线适宜 ,藻类细胞生长繁殖快 ,应
多加培养液 ;而阴雨天应适当少加培养液 。
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4 投喂前 12 一 2 h4 不应加培养液 。 因临近投喂
时再加培养可导致藻液中营养盐浓度升高 , 投喂虾苗 、
贝苗 、 鱼苗时不利于它们生长 。
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5 一次培养方式培养单胞藻 ,培养时间不要太
长 ,否则藻类细胞已经过了指数生长期 。 根据作者工作
经验 ,一般 4 月中旬前培养时间不宜超过 1d0 , 4 月中旬
到 4 月底不宜超过 d8 , 5 月以后以 4~ d6 为宜 。
接种时间最好是上午 8 : 0 ~ 1。 : 0 ,不宜于晚上接
海洋科学 , 1 9 9 3年 n 月 ,第 6期