作 者 ：李洪艳
期 刊 ：辽宁师范大学 2001年 01期 页码：41
关键词：商陆核糖体失活蛋白；植物表达载体；转化烟草；
摘 要 ：以商陆核糖体失活蛋白（PAP）的cDNA序列为依据，设计并合成特异性引物，应用多聚酶链式反应（PCR）技术扩增出5’端含有BamHI，3’端含有KpnI限制性内切酸酶切位点的目的片段，且在序列的开始和结尾分别加入起始密码子ATG和终止密码子TAA。将该目的片段定向克隆于载体pROKII中与CaMV35S启动子和Nos末端构成植物表达载体pRPAP，通过菌落直接PCR法和酶切分析鉴定出阳性重组子，用直接导入法将其导入农杆菌EHA105，以此作为工程菌进行烟草转化，...