全 文 ：们经常用来监测效率的一些细胞 , 如象烟草细胞悬浮系及大肠杆菌等 . 现在能得到的金粒
子的大小和形状比钨粒一致 , 但还不能得到各种大小范围的 (粒子 ) . 供我们对种种应用
进行系统优化 . 期望不久就能得到 0 . 1 ~ 6 . 0“ m 范围内的各种不同大小均一金粒子 .
目前的方法是将 D N A 沉淀于微弹的外表面 . 这种包裹是不均匀的并导致粒子聚集 .
尽管经过大量的努力我们仍不能取得包裹过程的实质性改 良 . 但我们发现通用方法的所有
移液步骤之中及之间— 从钨粒悬浮原液的除尽到加精胺和装进大射弹— 连续搅动能增加均一性 , 降低聚集 .
有理由认为在飞行时由于与残余气体分子的高速碰撞 , 微弹的表面分子将暴露于高热
之中 . 尽管这种热脉冲相当短暂 , 但它可能使大部分 D N A 包裹层清除或除解 , 这在更高
速度时尤其如此 . 因此包装 D N A 或包装 (D N A 涂包过 ) 整个微弹的方法是十分可取
的 , 尤其对那些需要很高速度时更是这样 . 然而迄今这一方面还没有开展什么工作 .
3
、 了解生物学关键因子
即使生物射弹方法中所有物理参数均已优化 (即粒子组成 , 大小 、 包裹 、 速度等 ) , 要
使这一方法达到最高效果 , 还有许多生物学可变因素需要了解和优化 . 这些生物学因素包
括细胞大小 、 目标对真空的耐性 、 轰击时细胞或组织的放置 (即方位 、 铺展 ) , 细胞膨压
等 . 目标的生物学状态有特殊的重要性 , 我们知道细胞培养时期 、 有丝分裂期以及细胞的
总体健康是影响生物射弹法效率的重要因素 . 如可预期的那样 , 细胞膨压是重要的 , 因而
轰击前在细胞培养液中添加高浓度渗透物在许多应用中是关键性的 . 显然 , 某些细胞 比其
他细胞更能耐受严重的声震 , 而这种存活与所用渗透物的水平有互作 .
优化几个以上变异因素可能是十分费时的 , 在变数存在互作时尤其如此 . 由于对每一
应用领域有众多物理学与生物学参数需要优化 , 一系列分级因析可能是较好的实验方法 ,
各别实验中聚集的因素或许有互作 . 用这种方法可迅速建立一个数据库 , 它将使我们得以
预测新 目标的最佳实验条件 . (参考文献 36 篇略 )
翁益群 译自 P r o e e e d坛9 o f A m e r ic a n B io m e d三e a t E n g加e e r ln g S o e加yt M e e t in g , 19 9 0
(待出版 )
文」大钧 校
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美洲商陆抗病毒蛋白抑制 H IV 一 1
在 C D +4 T 细胞中的复制
人们早已知道从美洲商陆中分离到的抗病毒蛋白 (P A )P能抑制某些植物 R N A 病毒 、
单纯疤疹病毒 、 灰质病毒和流感病毒的复制 . 现在才发现它还抑制艾滋病病毒 . 在
O n co ge n 公司 ( S ca t le , W A ) 和其它地方的科学家发现 , 纯化的 、 均一的 P A P 可抑制
H I V 一 1在人原发 C D +4 细胞中繁衍 .
一 5 一
DOI : 10. 13560 /j . cnki . biotech. bul l . 1985. 1991. 05. 002
在原发 T 细胞和巨噬细胞中的 5 0 % H IV 一1 抑制剂量 (功妒 约为 s x1 Op M s A P P .将
A P P浓度加大 10 倍时 , 并不抑制未受感染的 T 细胞或骨髓母细胞的生长 , 说明抑制作用
对病毒是专一的 .
随后 , 科学家将 P A P 与一些能够与 C D +4 细胞上的 C D S 、 C D 7 或 C D 4 表面抗原起反
应的单克隆抗体结合使用 , 用于 C D 4勺细胞、 这一来不仅促进了 PAP 穿越质膜的传递过
程 。 并利用了 P A P一M a b 结合物在质膜中的加长半衰期 ( 16 一 18 小时 , 而游离 P A P 则小
于 30 分钟 ) 、 单抗结合物 P A P一抗 C D 4 和 P A P一抗 C D 7 的 H VI 一 1 复制抑制活性是非结
合性 P A P 的 , 千多倍 . 而且 , 只有当浓度高于抑制剂盆三个数量级时才会对未受染 c D +4
细胞或骨髓母细胞造成 50 0/ 抑制 .
另外 , 即使在抑制浓度 ~ 50 倍时 , 抗 C D 4 结合物也只与 3% 的细胞表面 C D 4 分子结
合 , 从而不会抑制几种 C D 4 依赖性免疫反应 .
另有几则相关消息 . 英国的 A gr icu l t u r al G en et ics C o . 宣布已克隆了 P A P 的编码序
列 . 该公司有意将此基因插人到植物中 , 使之抗病 . 此外 , 公司还将其插人大肠杆菌中 ,
希望用细菌生产 P A P . 该公司与许多植物生物技术集团一样 , 一直致力于寻找在植物中
生产重组 D N A 抗体的可能性 , 由此 , 他们有可能在柑对短的时间内在植物中生产 P A P一
单抗结合物 . 若然 , 公司将在成本上占有很大优势 , 因为从植物甲生产单抗的成本有可能
低至每克 25 美分 .
王璋瑜 译自 《丑 iot 伙h on 玩盯 N . 钾动 , 1990 年 , 10 卷 25 期 , 4 页
荷兰公司用遗传工程方法改变菊花颜色
荷兰的 1F 以反g o n o B . .v 公司已成功地用遗传工程法将一种粉红色菊花变成白色 . 公司
的科学家成功地将查耳酮合成酶基因插人到这种畅销花种的植株中 . 查耳酮合成酶基因是
决定花瓣中色素形成的基因之一 原花种是由上述公司的一家持股公司 iF de s 提供的 , 后
者是荷兰的一家菊花育种 、 繁殖公司 ,
F 一o h g e n e 采用 了 D N ^ P一a n t T e e h n o 一o g y e o r p (奥克兰 , 加利福尼亚 )的转化一再生体
系以及 D N A P 的 ` tr an s w i ct h ’ 技术来改造菊花 . 荷兰负责重组 D N A 审查工作的机构 , 即
遗传改造委员会允许 lF or ige n 。 在严格控制的条件下培植这种改造的品种 .
这些条件包括要采用一种装备特殊的玻璃房 , 地面的窗门均有严格要求 . 目的是使温
室中绝对没有昆虫 , 以免将花粉带到野外 . 公司希望在短期内获准在正常条件下培植该品
种 . 公司不敢公布实验设施的地点 , 深怕遭到环境活动家的强烈干扰 . 这些组织 已阻挠过
马铃薯实验的进行 . lF o ir g en 。 不愿步其后尘 .
菊花销量在荷兰排行老二 , 1989 年的销售额约为 .2 90 亿美元 .
王璋瑜 译自 《 B fo t ec h on lo 盯 N e w s) , 1990 年 , 10 卷 25 期 , 5 页
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