全 文 ：第３６卷　第８期 海　　洋　　学　　报 Ｖｏｌ．３６，Ｎｏ．８
２０１４年８月 ＡＣＴＡ　ＯＣＥＡＮＯＬＯＧＩＣＡ　ＳＩＮＩＣＡ　 Ａｕｇｕｓｔ　２０１４
李静，王俏俏，徐年军，等．２４－表油菜素内酯对龙须菜抗高温胁迫的研究［Ｊ］．海洋学报，２０１４，３６（８）：８２—９０，ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．
０２５３－４１９３．２０１４．０８．００９
Ｌｉ　Ｊｉｎｇ，Ｗａｎｇ　Ｑｉａｏｑｉａｏ，Ｘｕ　Ｎｉａｎｊｕｎ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　２４－ｅｐｉｂｒａｓｓｉｎｏｌｉｄｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｏｆ　Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ　ｌｅｍａｎｅｉｆｏｒｍｉｓ　ｔｏ　ｈｉｇｈ　ｔｅｍｐｅｒａ－
ｔｕｒｅ［Ｊ］．Ａｃｔａ　Ｏｃｅａｎｏｌｏｇｉｃａ　Ｓｉｎｉｃａ（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ），２０１４，３６（８）：８２—９０，ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．０２５３－４１９３．２０１４．０８．００９
２４－表油菜素内酯对龙须菜抗高温胁迫的研究
李静１，２，王俏俏１，２，徐年军１，２＊，孙雪１，２，范美华１，２
（１．宁波大学 应用海洋生物技术教育部重点实验室，浙江 宁波３１５２１１；２．宁波大学 海洋学院 海洋生物工程重点实
验室，浙江 宁波，３１５２１１）
收稿日期：２０１３－１０－１８；修订日期：２０１３－１２－２６。
基金项目：国家自然科学基金项目（３１０７２２２９，４１３７６１５１）；浙江省钱江人才项目（２００７Ｒ１００３８）。
作者简介：李静（１９９０—），女，山东省菏泽市人，主要从事藻类生理及分子生物学研究。Ｅ－ｍａｉｌ：７４５２５６８８７＠ｑｑ．ｃｏｍ
＊通信作者：徐年军（１９７３—），男，湖北省赤壁市人，研究员，博士生导师。Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｕｎｉａｎｊｕｎ＠ｎｂｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
摘要：本研究采用不同浓度２４－表油菜素内酯处理海洋红藻龙须菜，研究热激胁迫后龙须菜的生长速
率、叶绿素荧光参数、抗氧化酶活性、甘露醇、丙二醛、藻胆蛋白含量，以及ＨＳＰ７０、ＰＥ、ＧＲ基因的相对
表达水平变化规律。结果显示，０．１ｍｇ／Ｌ　２４－表油菜素内酯的处理组生长速率最大，显著高于其他处
理组及对照组；叶绿素荧光参数Ｆｖ／Ｆｍ、ｑＰ和ΦＰＳⅡ均随高温逆境时间延长呈现下降趋势，荧光参数
ＮＰＱ随着高温逆境时间延长呈现先上升后下降的趋势，且处理组各项荧光参数值均高于对照组；处
理组的抗氧化酶（ＳＯＤ和ＰＯＤ）的酶活显著高于对照组；甘露醇及藻胆蛋白含量均在０．１ｍｇ／Ｌ处理
组最高，在第三天达到最大值，而丙二醛含量则在０．１ｍｇ／Ｌ处理组最低，在第三天达到最小值；处理
组ＨＳＰ７０、ＰＥ、ＧＲ基因的相对表达量均高于对照组，且０．１ｍｇ／Ｌ处理组各基因表达量最高。以上
结果表明２４－表油菜素内酯能提高龙须菜的抗高温能力，且０．１ｍｇ／Ｌ处理组效果最好。
关键词：龙须菜；２４－表油菜素内酯；热激胁迫；抗高温
中图分类号：Ｑ１７８．５３ 文献标志码：Ａ 文章编号：０２５３－４１９３（２０１４）０８－００８２－０９
１　引言
龙须菜Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ　ｌｅｍａｎｅｉｆｏｒｍｉｓ是一种重要的
产琼胶大型经济海藻。由于其具有较强吸收氮、磷的
能力，可用于推广栽培来修复富营养化海水和减轻海
区养殖污染［１］。龙须菜中的多糖和蛋白含有多种营
养成分和免疫活性物质，可作为海洋药物资源和名贵
海产品鲍鱼的饵料［２］。龙须菜原产于山东半岛，如今
在我国南部的福建和广东等海域也有大规模栽培［３］，
高温胁迫是龙须菜栽培面临的关键问题。
油菜素内酯是一种新型植物激素，在植物体内含
量微少，而且提取成本高、工艺复杂［４］，人工合成油菜
素内酯成为世界各地有机化学专家研究的热点。目
前已经合成２０多种油菜素甾醇类化合物，其中以油
菜甾醇为原料大规模合成２４－表油菜素内酯和高油菜
素内酯应用于研究生产［５］。２４－表油菜素内酯作为人
工合成的油菜素内酯类似物，有着和油菜素内酯一样
极高的生理活性，广泛应用于农业生产。研究证明，
２４－表油菜素内酯可以改善植物生理代谢功能，调节
植物生长发育的许多过程，如促进植物细胞伸长生
长，促进藻细胞分裂、有机物累积，微观组织分化等，
从而提高植物的品质和产量。在高温、高盐度、重金
属等逆境下能调节细胞的生理生化环境，促进其恢复
正常的生理代谢过程，增强植物的抗逆性［６］。
本文根据龙须菜栽培过程中对高温的不适应性，
测定高温胁迫下不同浓度２４－表油菜素内酯处理组龙
须菜的生长速率、叶绿素荧光参数、抗氧化酶活性、渗
透调节物质甘露醇含量、氧化产物丙二醛含量、藻胆
蛋白含量、蛋白质合成伴侣热激蛋白７０基因
（ＨＳＰ７０）表达量、抗氧化酶谷胱甘肽还原酶基因
（ＧＲ）表达量以及光合色素藻红蛋白基因（ＰＥ）表达量
的变化。研究２４－表油菜内酯对高温胁迫下龙须菜的
生理及分子水平影响，探讨２４－表油菜素内酯对提高
龙须菜抵抗高温逆境能力的作用机制。
２　材料与方法
２．１　材料
供试材料为龙须菜９８１品系，采于福建宁德，实
验室保种培养１个月以上。将２ｍｇ　２４－表油菜素内
酯（Ｓｉｇｍａ）溶于２ｍＬ　９５％乙醇中配成母液，充分摇
匀后，４℃保存备用。
２．２　处理方法
于培养瓶中分别加入等量龙须菜和不同量的２４－
表油菜素内酯母液，配制成０、０．００４、０．０２、０．１、０．５
ｍｇ／Ｌ　５个不同浓度，每个浓度３次平行，其中０浓度
为对照组。常温下培养２４ｈ后进行３１℃高温胁迫。
培养条件：光照强度４０μｍｏｌ／（ｍ
２·ｓ），盐度２５，光周
期Ｌ∶Ｄ（１２ｈ∶１２ｈ），每隔３ｄ加一次Ｐｒｏｖａｓｏｌｉ培养
基。生理实验分别于高温胁迫第０～６ｄ的同一时间
点取样，样品用去离子水快速冲洗后吸干水分，液氮
快速处理后于－２０℃保存，冷冻干燥后备用。分子实
验分别于高温胁迫第２４ｈ、４８ｈ的同一时间点取样，
液氮冻存备用。
２．３　生长速率测定
通过测定龙须菜培养６ｄ后藻体鲜质量的变化
来计算龙须菜的相对生长速率ＲＧＲ［７］：
ＲＧＲ＝ （ｌｎ　Ｗｔ－ｌｎ　Ｗ０）／ｔ×１００％， （１）
式中，Ｗ０ 为实验开始时藻的鲜质量，单位是ｇ，Ｗｔ为
实验结束时藻的鲜质量，单位是ｇ，ｔ为实验天数，单
位是ｄ。
２．４　叶绿素荧光参数的测定
用水样叶绿素荧光仪 ＭＩＮＩ－ＰＡＭ测定叶绿素荧
光参数。实验组为０．１ｍｇ／Ｌ处理组，对照组不添加
２４－表油菜素内酯。测量前藻体先进行暗适应１５
ｍｉｎ，使用弱测量光测定Ｆ０，然后用饱和脉冲激发测
出最大荧光值Ｆｍ。荧光参数ＰＳⅡ最大光能转换效
率（Ｆｖ／Ｆｍ）、实际光能转换效率（ΦＰＳⅡ）、非光化学
淬灭（ＮＰＱ）和光化学淬灭（ｑＰ）可以通过数据输出直
接获得［８］。
２．５　抗氧化酶活性测定
超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）测试盒（Ａ００１）；植物过氧
化物酶（ＰＯＤ）测定试剂盒（Ａ０８４）均购自南京建成生
物工程研究所。实验过程按照试剂盒说明书操作。
２．６　甘露醇含量测定
准确称取干藻样０．０５ｇ，加入４ｍＬ去离子水匀
浆后３　０００ｒ／ｍｉｎ离心５ｍｉｎ。接着取２ｍＬ上清液，
加入３．７５ｍＬ　０．１ｍｏｌ／Ｌ　ＣｕＳＯ４ 溶液和２．５ｍＬ　３．８
ｍｏｌ／Ｌ　ＮａＯＨ溶液，涡旋振荡混匀后立即置于沸水浴
中加热５ｍｉｎ，待样品冷却，３　０００ｒ／ｍｉｎ离心５ｍｉｎ，
取得上清液测定ＯＤ６４０。每个样品取３个平行［８］。
２．７　丙二醛（ＭＤＡ）含量的测定
采用硫酸巴比妥法测定，
ＣＭＤＡ ＝６．４５（Ａ５３２－Ａ６００）－０．５６Ａ４５０（μｍｏｌ／Ｌ），
（２）
根据提取液计算样品中所含 ＭＤＡ 的量，单位为
μｍｏｌ／ｇ。
２．８　藻胆蛋白含量的测定
采用硫酸铵沉淀法测定，准确称取０．０５ｇ干藻
样，液氮研磨。在离心管中加入４ｍＬ　ｌ　ｍｏｌ／Ｌ　ｐＨ６．８
的ＰＢＳ，先离心得到粉红色上清液，然后加入饱和度
５５％的硫酸铵充分搅匀，放置于冰箱４℃下避光过夜，
沉淀得藻胆蛋白粗提物，测定上清液在Ｄ５６５ｎｍ、Ｄ６１５ｎｍ、
Ｄ６５０ｎｍ的值，具体计算方法参照朱招波等［８］。
２．９　ＨＳＰ７０、ＰＥ、ＧＲ基因的定量表达分析
龙须菜３１℃不同时间处理后，液氮冻存研磨，用
ｐｌａｎｔ　ｋｉｔ试剂盒提取 ＲＮＡ。然后用 ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ　ＴＭ
Ｒｅｖｅｒｓｅ　Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ（ｔａｋａｒａ公司）试剂盒反转录成
ｃＤＮＡ，－２０℃保存。
ＲＴ－ＰＣＲ所用的特异性引物为：ＨＳＰ７０正向引
物（５’－ＡＣＣＴＣＣＡＣＣＴＡＡＡＴＣＡＡＡ－３’）和反向引物
（５’－ＣＴＣＡＧＣＧＴＣＡＡＧＣＡＡＣＴＡ－３’）；ＰＥ正向引物
（５’－ＡＧＡＣＧＣＴＧＴＡＴＣＡＧＧＡＡＴ－３’）和反向引物
（５’－ＡＧＣＣＡＴＡＣＧＡＣＧＧＴＴＡＣＴ －３’）；ＧＲ 正向引
物（５’－ＴＡＣＡＡＣＴＧＧＧＣＡＧＡＡＣＧＧ－３’）和反向引物
（５’ＡＡＡＣＡＣＴＧＣＧＧＴＧＧＧＡＡＴ－３’）；参照基因１８ｓ
正向引物（５’－ＴＧＣＣＧＣＣＡＣＣＧＴＴＴＡＣＴＧ－３’）和反
向引物（５’－ＡＣＣＣＧＡＴＴＣＡＡＡＣＡＡＡＣＣＡＡ－３’）。
ＲＴ－ＰＣＲ：反应体系为：ＳＹＢＲ　Ｐｒｅｍｉｘ　Ｅｘ　ＴａｑⅡ
（２×）缓冲液１２．５μＬ，正向和反向引物 （１０μｍｏｌ／Ｌ）
各０．５μＬ，ｃＤＮＡ模版１μＬ，ｄＨ２Ｏ　１０．５μＬ。仪器为
３８８期　李静等：２４－表油菜素内酯对龙须菜抗高温胁迫的研究
Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ荧光定量ＰＣＲ仪。程序采用：９５℃３０ｓ（１
ｃｙｃｌｅ）；然后４０ｃｙｃｌｅ（９５℃１５ｓ，５５℃３０ｓ，６８℃３０
ｓ），荧光信号收集；接着对扩增产物进行溶解曲线分
析，程序为９５℃３０ｓ，５５℃３０ｓ，９５℃１５ｓ（１ｃｙｃｌｅ），
５５～９５℃，＋０．５℃／ｃｙｃｌｅ。
２．１０　统计分析
数据处理采用Ｅｘｃｅｌ　２００７、ＳＰＳＳ１６．０统计软件进
行数据处理及统计分析．用ｏｎｅ－ｗａｙ　ＡＮＯＶＡ 检验差
异的显著水平（ｐ），设显著水平为ｐ＜０．０５。
３　结果与分析
３．１　表油菜素内酯对高温下龙须菜生长速率的影响
藻体生长是其生理过程的综合表现。图１显
示，实验过程中，龙须菜相对生长速率随着２４－表
油菜素内酯处理浓度的升高呈现先上升后下降的
趋势。当２４－表油菜素内酯浓度为０．１ｍｇ／Ｌ时生
长速率达到最大值３．３６％，比对照组２．５１％增加
了３６．６４％，显著高于其他浓度处理（ｐ＜０．０５）。
说明高温环境下添加适当浓度的２４－表油菜素内
酯有利于龙须菜生长。
图１　不同浓度２４－表油菜素内酯对高温下龙须菜
相对生长速率的影响
Ｆｉｇ．１　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　２４－ｅｐｉｂｒａｓｓｉｎ－
ｏｌｉｄｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ＲＧＲ　ｏｆ　Ｇ．ｌｅｍａｎｅｉｆｏｒｍｉｓ　ｕｎｄｅｒ　ｈｉｇｈ　ｔｅｍｐｅｒ－
ａｔｕｒｅ　ｓｔｒｅｓｓ（ｍｅａｎ±ＳＤ）
３．２　表油菜素内酯对高温下龙须菜叶绿素荧光参数
的影响
由图２可知，龙须菜的荧光参数Ｆｖ／Ｆｍ、ΦＰＳⅡ、
ｑＰ均呈现下降趋势，且经２４－表油菜素内酯处理后各
个荧光参数都有所提高。其中处理组和对照组的
Ｆｖ／Ｆｍ在第一天均有所下降。第二天开始２４－表油
菜素内酯处理组下降幅度减缓，比对照组减缓了
５．７２％。且在整个高温胁迫实验过程中Ｆｖ／Ｆｍ都高
于对照组。ΦＰＳⅡ和ｑＰ与Ｆｖ／Ｆｍ下降趋势一致，从
第二天开始２４－表油菜素内酯处理组下降幅度减缓，
第二天比对照组分别减缓了２５．８１％、１０．１８％。
ＮＰＱ与其他荧光参数不同，处理组和对照组都随着
高温逆境时间的延长大致呈现先上升后下降的趋势。
２４－表油菜素内酯处理组ＮＰＱ第二天、第三天分别上
升了７．１６％、１７．３２％，比对照组减缓了６．７１％、
８．８５％。由此可见，２４－表油菜素内酯能提高龙须菜
的光合作用能力，从而增强其抗高温逆境能力。
３．３　表油菜素内酯对高温下龙须菜抗氧化酶活性的
影响
图３ａ显示，各组龙须菜ＳＯＤ酶均呈现先上升后
下降的趋势，前三天各组ＳＯＤ酶活性持续上升，在３
天均达到最大值，其中０．１ｍｇ／Ｌ、０．０２ｍｇ／Ｌ处理组
与对照组差异显著（ｐ＜０．０５）。在下降过程中除
０．００４ｍｇ／Ｌ处理组外其他各组均高于对照组。ＰＯＤ
酶活性变化趋势同ＳＯＤ，如图３（ｂ），先逐步上升在第
三天０．１ｍｇ／Ｌ处理组ＰＯＤ活性达到最高，比对照组
增加３７．５６％，与其他处理组差异显著（ｐ＜０．０５）。第
四天其他各组ＰＯＤ仍持续上升，但只有０．１ｍｇ／Ｌ处
理组与对照组差异显著（ｐ＜０．０５）。实验后两天各组
ＰＯＤ均下降，但经２４－表油菜素内酯处理的龙须菜
ＰＯＤ活性仍高于对照组。推测表２４－油菜素内酯诱
导龙须菜耐热性提高与高温下保持龙须菜体内较高
的抗氧化酶活性有关。
３．４　表油菜素内酯对高温下龙须菜甘露醇和丙二醛
含量的影响
由图４ａ可见，高温下第一天对照组甘露醇含量
下降，处理组相对于对照组都有不同程度的提高，且
都和对照组差异显著（ｐ＜０．０５）。第二、三天各处
理组甘露醇含量都有增长，第三天都达到最大值，其
中０．１ｍｇ／Ｌ比对照组增加了１５．０９％，与对照差异
显著（ｐ＜０．０５）。之后甘露醇含量开始下降，但处
理组一直处于高于对照组水平。说明适当浓度的
２４－表油菜素内酯有利于龙须菜体内甘露醇含量的
积累。
由图４ｂ可见，高温第一、二天各组龙须菜 ＭＤＡ
大量积累，第三天０．１ｍｇ／Ｌ和０．０２ｍｇ／Ｌ处理组
ＭＤＡ含量开始下降，分别比对照下降了２０．７６％、
１８．２２％，与对照组差异极显著（ｐ＜０．０１）。且在整体
变化趋势中对照组 ＭＤＡ含量一直高于处理组。说
明高温下添加２４－表油菜素内酯处理可以减缓 ＭＤＡ
在藻体细胞内的积累。
４８ 海洋学报　３６卷
图２　２４－表油菜素内酯对高温下龙须菜叶绿素荧光参数的影响
Ｆｉｇ．２　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　２４－ｅｐｉｂｒａｓｓｉｎｏｌｉｄｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ｏｆ　Ｇ．ｌｅｍａｎｅｉｆｏｒｍｉｓ　ｕｎｄｅｒ　ｈｉｇｈ
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ（ｍｅａｎ±ＳＤ）
图３　不同浓度２４－表油菜素内酯对高温下龙须菜抗氧化酶活性的影响
Ｆｉｇ．３　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　２４－ｅｐｉｂｒａｓｓｉｎｏｌｉｄｅ　ｏｎ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ｅｎｚｙｍｅｓ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ
Ｇ．ｌｅｍａｎｅｉｆｏｒｍｉｓ　ｕｎｄｅｒ　ｈｉｇｈ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｓｔｒｅｓｓ（ｍｅａｎ±ＳＤ）
３．５　表油菜素内酯对高温下龙须菜藻胆蛋白含量的
影响
由图５可知，藻红蛋白在处理第一天，除了０．１
ｍｇ／Ｌ浓度处理组外，其他各组的都有所下降，各组藻
红蛋白含量在第三天达到最大值，其中０．１ｍｇ／Ｌ处
理组含量最高，比对照组高出３１．１８％，与对照组差异
５８８期　李静等：２４－表油菜素内酯对龙须菜抗高温胁迫的研究
图４　不同浓度２４－表油菜素内酯对高温下龙须菜甘露醇和丙二醛含量的影响
Ｆｉｇ．４　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　２４－ｅｐｉｂｒａｓｓｉｎｏｌｉｄｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｍａｎｎｉｔｏｌ　ａｎｄ　ＭＤＡ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ
Ｇ．ｌｅｍａｎｅｉｆｏｒｍｉｓ　ｕｎｄｅｒ　ｈｉｇｈ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｓｔｒｅｓｓ（ｍｅａｎ±ＳＤ）
显著（ｐ＜０．０５）。第三天之后各组藻红蛋白含量虽然
都在下降，但处理组均高于对照组。藻蓝蛋白（ＰＣ）
在处理第一天，除对照组和０．００４ｍｇ／Ｌ处理组有所
下降外，其余各组含量均增加，其中０．１ｍｇ／Ｌ处
理组的藻蓝蛋白比对照组多２８．１６％，与对照组差异
显著（ｐ＜０．０５）。第二含量均开始增加，除０．００４
ｍｇ／Ｌ处理组外其他各组在第三天达到峰值后开始下
降，但２４－表油菜素内酯处理组都高于对照组。
图５　不同浓度２４－表油菜素内酯对高温下龙须菜藻红蛋白和藻蓝蛋白含量的影响
Ｆｉｇ．５　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　２４－ｅｐｉｂｒａｓｓｉｎｏｌｉｄｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　Ｒ－ＰＥ　ａｎｄ　Ｒ－ＰＣ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ
Ｇ．ｌｅｍａｎｅｉｆｏｒｍｉｓ　ｕｎｄｅｒ　ｈｉｇｈ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｓｔｒｅｓｓ（ｍｅａｎ±ＳＤ）
３．６　表油菜素内酯对高温下龙须菜ＨＳＰ７０、ＰＥ、ＧＲ
基因表达的影响
图６ａ显示，２４ｈ热激处理后，ＨＳＰ７０基因表达
量呈现先下降后上升趋势，由高到低依次为：
０．１ｍｇ／Ｌ处理组、０．５ｍｇ／Ｌ处理组、０．０２ｍｇ／Ｌ处理
组、０．００４ｍｇ／Ｌ处理组、对照组，处理组表达量均高
于对照组。如６ｂ显示，热激处理４８ｈ后，表达量由
高到低依次为：０．１ｍｇ／Ｌ处理组、０．０２ｍｇ／Ｌ处理
组、０．５ｍｇ／Ｌ处理组、０．００４ｍｇ／Ｌ处理组、对照组。
该结果表明处理组ＨＳＰ７０基因的表达量均高于对照
组，且０．１ｍｇ／Ｌ浓度与对照组差异显著（ｐ＜０．０５）。
２４ｈ热激后ＰＥ基因相对表达量趋势如图７ａ，由
６８ 海洋学报　３６卷
高到低依次为：０．１ｍｇ／Ｌ处理组、０．０２ｍｇ／Ｌ处理
组、０．５ｍｇ／Ｌ处理组、０．００４ｍｇ／Ｌ处理组、对照组，
浓度为０．１ｍｇ／Ｌ处理组表达量与除０．０２ｍｇ／Ｌ处
理组外其他各组差异性显著 （ｐ＜０．０５）。４８ｈ热激
后的相对表达量如图７ｂ，由高到低依次为：０．１ｍｇ／Ｌ
处理组、０．５ｍｇ／Ｌ处理组、０．０２ｍｇ／Ｌ处理组、０．００４
ｍｇ／Ｌ处理组、对照组，同样浓度为０．１ｍｇ／Ｌ处理组
表达量与对照组差异性显著 （ｐ＜０．０５）。结果表明
处理组ＰＥ基因的表达量均高于对照组，在０．１ｍｇ／
Ｌ浓度最显著。
龙须菜在热激处理２４ｈ后，不同处理组ＧＲ相对
表达量情况如图８ａ，由高到低依次为：０．１ｍｇ／Ｌ处理
组、０．５ｍｇ／Ｌ处理组、０．００２ｍｇ／Ｌ处理组、０．００４
ｍｇ／Ｌ处理组、对照组，浓度为０．１ｍｇ／Ｌ处理组表达
量最高，与对照组差异性显著 （ｐ＜０．０５）。４８ｈ热激
后，ＧＲ相对表达量情况如图８ｂ，由高到低依次为：
０．１ｍｇ／Ｌ处理组、０．５ｍｇ／Ｌ处理组、０．０２ｍｇ／Ｌ处
理组、０．００４ｍｇ／Ｌ处理组、对照组，以０．１ｍｇ／Ｌ处理
组表达最高，与对照组差异性显著 （ｐ＜０．０５）。结果
表明处理组ＧＲ基因的表达量均高于对照组，在０．１
ｍｇ／Ｌ浓度最显著。
图６　不同浓度２４－表油菜素内酯对高温下龙须菜ＨＳＰ７０基因相对表达的影响
Ｆｉｇ．６　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　２４－ｅｐｉｂｒａｓｓｉｎｏｌｉｄｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ
ＨＳＰ７０　ｏｆ　Ｇ．ｌｅｍａｎｅｉｆｏｒｍｉｓ　ｕｎｄｅｒ　ｈｉｇｈ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ（ｍｅａｎ±ＳＤ）
图７　不同浓度２４－表油菜素内酯对高温下龙须菜ＰＥ基因相对表达的影响
Ｆｉｇ．７　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　２４－ｅｐｉｂｒａｓｓｉｎｏｌｉｄｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＰＥｏｆ
Ｇ．ｌｅｍａｎｅｉｆｏｒｍｉｓ　ｕｎｄｅｒ　ｈｉｇｈ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ（ｍｅａｎ±ＳＤ）
４　讨论
高温胁迫下，植物会打破体系原有的动态平衡，
导致氧代谢失调，造成活性氧、丙二醛的积累，改变膜
的透性，严重时对植物可造成致死性伤害［９］；藻体中
的藻胆蛋白是ＰＳⅡ捕光色素复合体，能够直接吸收
光能，作为天线色素参与光合作用，而且还可以作为
藻体细胞的贮存蛋白，有利于藻类在自然界中的生存
竞争，但高温极易导致藻体内色素蛋白复合体ＰＳⅡ
失活，藻胆蛋白降解［１０］，使逆境下藻类的光合活性降
７８８期　李静等：２４－表油菜素内酯对龙须菜抗高温胁迫的研究
图８　不同浓度２４－表油菜素内酯对高温下龙须菜ＧＲ基因相对表达的影响
Ｆｉｇ．８　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　２４－ｅｐｉｂｒａｓｓｉｎｏｌｉｄｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＧＲｏｆ
Ｇ．ｌｅｍａｎｅｉｆｏｒｍｉｓ　ｕｎｄｅｒ　ｈｉｇｈ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ（ｍｅａｎ±ＳＤ）
低，影响藻体生长。
研究结果显示油菜素内酯能提高小球藻细胞内
核酸和蛋白质的合成量，从而促进小球藻的生长和生
物量的合成［１１］；表油菜素内酯还能影响硅藻卡尔文
循环的关键酶，改善硅藻的生长生理［１２］；在油菜素内
酯对莱茵衣藻生物量积累和生长速度影响的研究中
发现，表油菜素内酯能够加速藻细胞的生长速度［１３］；
在高温胁迫下用表油菜素内酯处理甜瓜幼苗，结果提
高了甜瓜幼苗抗氧化酶活性，加强其对光能的捕获、
转换，促进幼苗的生长，降低高温胁迫的抑制
作用［１４］。
张慎好等研究发现在发芽期用油菜素内酯浸种
能提高种子的发芽率并促进侧根生长、胚根生长［１５］。
本实验结果显示添加２４－表油菜素内酯的处理组生长
速率均高于对照组，２４－表油菜素内酯提高了龙须菜
的生长速率。
曹云英和赵华发现表油菜素内酯能够增强稻苗
体内活性氧保护酶系统ＳＯＤ和ＰＯＤ的活性和诱导
其表达，有效减轻高温对秧苗的伤害［１６］。本实验中，
ＳＯＤ、ＰＯＤ均随着高温逆境时间的增加而呈先上升后
下降的趋势。高温逆境刚开始时，龙须菜体内的抗氧
化酶系统受高温逆境诱导而启动，随着自由基的增
多，酶的活性不断上升以清除自由基，使其维持在平
衡状态。但处理组与对照组相比能显著地提高龙须
菜体内的ＳＯＤ、ＰＯＤ，尤其以０．１ｍｇ／Ｌ和０．０２ｍｇ／Ｌ
对龙须菜抗氧化酶的提高最为显著，与对照差异显
著。且以０．１ｍｇ／Ｌ　２４－表油菜素内酯处理的龙须菜
ＳＯＤ、ＰＯＤ活性最大。
高温逆境下藻类的光合活性会降低［１７］。本实验
结果显示经高温逆境后，龙须菜的各个荧光参数Ｆｖ／
Ｆｍ、ΦＰＳⅡ和ｑＰ均下降。但是经过２４－表油菜素内酯
处理后，各荧光参数的下降幅度都比对照要慢，说明
添加２４－表油菜素内酯能在一定程度上改善高温逆境
下龙须菜的光合生理状态。Ｆｖ／Ｆｍ下降说明高温损
伤ＰＳⅡ反应中心，而添加２４－表油菜素内酯能够抑制
高温对ＰＳⅡ反应中心的损伤，减缓高温对光合作用原
初反应的抑制，减轻对光合电子传递过程的阻碍。高
温能影响藻细胞对碳的固定与同化，ΦＰＳⅡ在高温下
随时间的延长逐渐下降，而本实验中添加２４－表油菜
素内酯能显著提高ＰＳⅡ实际光能转化效率，提高光合
能力。ＰＳⅡ实际光能转化效率光化学淬灭ｑｐ的下降
说明用于进行光合作用的电子减少，与ΦＰＳⅡ的下降
相一致。２４－表油菜素内酯处理组与对照组相比ｑＰ
值有了一定的提高，增强了光适应状态下ＰＳⅡ进行光
化学反应的能力。非光化学淬灭ＮＰＱ在高温逆境下
有所升高表明ＰＳⅡ吸收的光能以热的形式耗散的部
分增多，避免过多光能损伤光合器官，保护藻体［１８］，
而２４－表油菜素内酯能在一定程度上显著提高ＮＰＱ，
从而更好地提高ＰＳⅡ的热耗散能力，保护藻体的光合
结构。
在一定胁迫范围内，植物能通过自身细胞的渗透
调节作用表现出抵抗外界渗透胁迫的能力。甘露醇
作为植物一种重要的渗透调节物质，不仅对细胞渗透
压起到调节作用，还对活性氧特别是Ｏ２－和·ＯＨ的
产生有抑制作用，而且对已生成的·ＯＨ则有清除作
用，对植物抗逆性有双重作用［１９］。有研究证明藻类
能通过调节藻体内甘露醇的含量来适应渗透压的改
变［２０］。本试验中０．１０ｍｇ／Ｌ的２４－表油菜素内酯处
８８ 海洋学报　３６卷
理组能显著提高龙须菜在高温下的甘露醇含量，甘露
醇的积累不仅提高了龙须菜细胞的渗透调节能力，而
且通过清除·ＯＨ而使龙须菜免受高温氧化伤害。
高温逆境下，藻体活性氧自由基的积累会引起膜
脂过氧化，而丙二醛是膜脂过氧化的主要产物之一，
研究中常以丙二醛含量来反映植物膜脂过氧化水平
和对细胞膜的伤害程度，其含量大小与逆境的耐性密
切相关。张元等研究认为高温逆境会提高坛紫菜体
内的丙二醛含量，引起膜脂过氧化［２１］。本实验中，龙
须菜体内的丙二醛随着时间的延长而呈上升趋势，膜
脂过氧化程度加重。各浓度２４－表油菜素内酯处理组
的龙须菜丙二醛含量都低于对照，其中０．１０ｍｇ／Ｌ
２４－表油菜素内酯处理的龙须菜丙二醛含量最低，细
胞膜酯过氧化程度最低，从而使藻体能维持正常的生
理生化代谢过程。
红藻中的光合色素除了叶绿素ａ外主要是藻胆
蛋白，包括藻红蛋白、藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白。藻胆
蛋白是ＰＳⅡ捕光色素复合体，能够直接吸收光能并
传递给ＰＳⅡ，但是却容易受到高温等外界环境的影
响［２２］，本实验研究发现，在高温逆境初期（１ｄ）龙须菜
藻胆蛋白含量开始下降，这一结果应证了高温逆境对
藻体内藻胆蛋白的破坏。在实验整个过程中，各个
２４－表油菜素内酯处理组的藻胆蛋白都高于对照组，
其中０．１ｍｇ／Ｌ处理组的藻胆蛋白显著高于对照。藻
红蛋白荧光定量表达研究结果同样显示，处理组表达
量高于对照组，尤其０．１ｍｇ／Ｌ浓度处理组显著高于
对照组。２４－表油菜素内酯缓解了高温对藻红蛋白的
破坏。
热激蛋白的表达是细胞受高温胁迫后在分子水
平上最主要的响应之一。热激蛋白可以通过阻止蛋
白质的变性以及促使变性蛋白复性，保护胁迫条件下
的细胞少受损伤。有研究表明在无芒雀麦中加入２４－
表油菜素内酯能增加热激蛋白基因表达从而提高抗
热力［２３］。本实验显示，２４－表油菜素内酯可显著提高
热激胁迫下ＨＳＰ７０的表达水平，以提高在高温下龙
须菜的耐受性，尤其在０．１ｍｇ／Ｌ浓度处理组有显著
性差异。
谷胱甘肽还原酶是植物细胞抗氧化酶系统中重
要的一员，它通过参与抗坏血酸－谷胱甘肽循环而在
细胞活性氧的清除中起重要作用［２４］，郭丽红等研究
也表明谷胱甘肽还原酶在抗氧化系统和植物对逆境
的适应中起重要作用［２５］。本实验研究显示加入２４－
表油菜素内酯处理组的ＧＲ相对表达量比对照组有
所增加，以０．１ｍｇ／Ｌ浓度处理组表达量最为显著，从
而提高龙须菜在高温逆境时的抗氧化酶活性。
综上所述２４－表油菜素内酯通过提高ＳＯＤ、ＰＯＤ
酶活性、ＨＳＰ７０、ＧＲ基因相对表达量，清除细胞在高
温逆境中增加的活性氧、变性蛋白，降低 ＭＤＡ含量，
稳定膜结构；同时能提高体内渗透调节物质甘露醇含
量，促进藻胆蛋白的合成，促进ＰＳⅡ的光合作用活性
从而使龙须菜在高温下能维持正常的生理功能，提高
高温耐受力。
参考文献：
［１］　Ｎｅｌｓｏｎ　Ｓ　Ｇ，Ｇｌｅｎｎ　Ｅ　Ｐ，Ｃｏｎｎ　Ｊ，ｅｔ　ａｌ．Ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ　ｐａｒｖｉｓｐｏｒａ（Ｒｈｏｄｏｐｈｙｔａ）ｉｎ　ｓｈｒｉｍｐ－ｆａｒｍ　ｅｆｆｌｕｅｎｔ　ｄｉｔｃｈｅｓ　ａｎｄ　ｆｌｏａｔｉｎｇ　ｃａｇｅｓ　ｉｎ　Ｈａ－
ｗａｉ：ａ　ｔｗｏ－ｐｈａｓｅ　ｐｏｌｙｃｕｌｔｕｒｅ　ｓｙｓｔｅｍ［Ｊ］．Ａｑｕａｃｕｌｔｕｒｅ，２００１，１９３（３／４）：２３９－２４８．
［２］　刘朝阳，刘晓庆．龙须菜的生物学作用及应用前景［Ｊ］．养殖与饲料，２００７（５）：５５－５８．
［３］　Ｚｈｏｕ　Ｙ，Ｙａｎｇ　Ｈ　Ｓ，Ｈｕ　Ｈ　Ｙ，ｅｔ　ａｌ．Ｂｉｏｒｅｍｅｄｉａｔｉｏｎ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍａｃｒｏａｌｇａＧｒａｃｉｌａｒｉａ　ｌｅｍａｎｅｉｆｏｒｍｉｓ（Ｒｈｏｄｏｐｈｙｔａ）ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ　ｉｎｔｏ　ｆｅｄ　ｆｉｓｈ　ｃｕｌ－
ｔｕｒｅ　ｉｎ　ｃｏａｓｔａｌ　ｗａｔｅｒｓ　ｏｆ　ｎｏｒｔｈ　Ｃｈｉｎａ［Ｊ］．Ａｑｕａｃｕｌｔｕｒｅ，２００６，２５２（２／４）：２６４－２７６．
［４］　郭奇珍．新型植物激素－油菜素内酯［Ｊ］．植物生理学通讯，１９８３（２）：７－１３．
［５］　王广聚，董服灿，董建军，等．２４－表油菜素内酯的合成及应用研究［Ｊ］．农药，２００１，４０（６）：１２－１５．
［６］　Ｓａｓｓｅ　Ｊ　Ｍ．Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ａｃｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｂｒａｓｓｉｎｏｓｔｅｒｏｉｄｓ：ａｎ　ｕｐｄａｔｅ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｐｌａｎｔ　Ｇｒｏｗｔｈ　Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ，２００３，２２（４）：２７６－２８８．
［７］　Ａｂｒｅｕ　Ｍ　Ｈ，Ｖａｒｅｌａ　Ｄ　Ａ，Ｈｅｎｒíｑｕｅｚ　Ｌ，ｅｔ　ａｌ．Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　ｖｓ．ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ　ｍｕｌｔｉ－ｔｒｏｐｈｉｃ　ａｑｕａｃｕｌｔｕｒｅ　ｏｆ　Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ　ｃｈｉｌｅｎｓｉｓ　Ｃ．Ｊ．Ｂｉｒｄ，Ｊ．ＭｃＬａｃｈｌａｎ
＆Ｅ．Ｃ．Ｏｌｉｖｅｉｒａ：ｐｒｏｄｕｃｔｉｖｉｔｙ　ａｎｄ　ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ［Ｊ］．Ａｑｕａｃｕｌｔｕｒｅ，２００９，２９３（３／４）：２１１－２２０．
［８］　朱招波，孙雪，徐年军，等．水杨酸对龙须菜抗高温生理的影响［Ｊ］．水产学报，２０１２，３６（８）：１３０４－１３１２．
［９］　Ｗａｈｉｄ　Ａ，Ｇｅｌａｎｉ　Ｓ，Ａｓｈｒａｆ　Ｍ，ｅｔ　ａｌ．Ｈｅａｔ　ｔｏｌｅｒａｎｃｅ　ｉｎ　ｐｌａｎｔｓ：Ａｎ　ｏｖｅｒｖｉｅｗ［Ｊ］．Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　ａｎｄ　Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　Ｂｏｔａｎｙ，２００７，６１（３）：１９９－２２３．
［１０］　Ｍｏｒｇａｎ－Ｋｉｓｓ　Ｒ，Ｉｖａｎｏｖ　Ａ　Ｇ，Ｗｉｌｉａｍｓ　Ｊ，ｅｔ　ａｌ．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ　ｔｈｅｒｍａｌ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｅｎｅｒｇｙ　ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｐｈｏｔｏｓｙｓｔｅｍⅡａｎｄ　ｐｈｏｔｏｓｙｓｔｅｍⅠｉｎ
ｔｈｙｌａｋｏｉｄ　ｍｅｍｂｒａｎｅｓ　ｏｆ　ａ　ｐｓｙｃｈｒｏｐｈｉｌｉｃ　ａｎｄ　ａ　ｍｅｓｏｐｈｉｌｉｃ　ａｌｇａ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ　ｅｔ　Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ　Ａｃｔａ（ＢＢＡ）－Ｂｉｏｍｅｍｂｒａｎｅｓ，２００２，１５６１（２）：２５１－
２６５．
［１１］　Ｂａｊｇｕｚ　Ａ．Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｂｒａｓｓｉｎｏｓｔｅｒｏｉｄｓ　ｏｎ　ｎｕｃｌｅｉｃ　ａｃｉｄｓ　ａｎｄ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ　ｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｃｅｌｓ　ｏｆ　Ｃｈｌｏｒｅｌｌａ　ｖｕｌｇａｒｉｓ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｂｉｏｃｈｅｍ－
ｉｓｔｒｙ，２０００，３８（３）：２０９－２１５．
［１２］　Ｍｅｋｈａｌｆｉ　Ｍ，Ａｖｉｌａｎ　Ｌ，Ｌｅｂｒｕｎ　Ｒ，ｅｔ　ａｌ．Ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｒｅｓｅｎｃｅ　ｏｆ　２４－ｅｐｉｂｒａｓｓｉｎｏｌｉｄｅ，ｏｎ　ｃｕｌｔｕｒｅｓ　ｏｆ　ａ　ｄｉａｔｏｍ，Ａｓｔｅｒｉｏｎｅｌｌａ　Ｆｏｒｍｏｓａ［Ｊ］．Ｂｉｏ－
９８８期　李静等：２４－表油菜素内酯对龙须菜抗高温胁迫的研究
ｃｈｉｍｉｅ，２０１２，９４（５）：１２１３－１２２０．
［１３］　Ｃｈａｎｇ　Ａ，Ｃｈａｎｇ　Ｍ，Ｆｅｎｇ　Ｐ，ｅｔ　ａｌ．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｘｏｇｅｎｏｕｓ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｅｌｅｃｔｅｄ　ｐｈｙｔｏｈｏｒｍｏｎｅｓ　ｏｎ　Ｃ．ｒｅｉｎｈａｒｄｔｉｉ　ｍｅｔａｂｏ－
ｌｉｓｍ［Ｄ］．Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ：Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｍａｒｙｌａｎｄ，２０１１．
［１４］　张永平，杨少军，陈幼源．２，４－表油菜素内酯对高温胁迫下甜瓜幼苗抗氧化酶活性和光合作用的影响［Ｊ］．西北植物学报，２０１１，３１（７）：１３４７
－１３５４．
［１５］　张慎好，武春成，赵振忠，等．油菜素内酯在黄瓜上的应用效果研究［Ｊ］．种子，２００９，２８（６）：９８－１０１．
［１６］　曹云英，赵华．高温胁迫下油菜素内酯对水稻幼苗的保护作用［Ｊ］．中国水稻科学，２００７，２１（５）：５２５－５２９．
［１７］　赵素芬，何培民．高温对两种卡帕藻的酶活性、色素含量与叶绿素荧光的影响［Ｊ］．生态学报，２０１１，３１（２２）：６８４５－６８５２．
［１８］　梁英，冯力霞，田传远．高温胁迫对球等鞭金藻３０１１和８７０１叶绿素荧光特性的影响［Ｊ］．水产学报，２００９，３３（１）：３７－４４．
［１９］　王娟，李德全．逆境条件下植物体内渗透调节物质的积累与活性氧代谢［Ｊ］．植物学通报，２００１，１８（４）：４５９－４６５．
［２０］　Ｉｗａｍｏｔｏ　Ｋ，Ｓｈｉｒａｉｗａ　Ｙ．Ｓａｌｔ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ　ｍａｎｎｉｔｏｌ　ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ　ｉｎ　ａｌｇａｅ［Ｊ］．Ｍａｒｉｎｅ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００５，７（５）：４０７－４１５．
［２１］　张元，谢潮添，陈昌生，等．高温胁迫下坛紫菜叶状体的生理响应［Ｊ］．水产学报，２０１１，３５（３）：３７９－３８６．
［２２］　Ａｌｍｅｓｅｌｍａｎｉ　Ｍ，Ｄｅｓｈｍｕｋｈ　Ｐ　Ｓ，Ｓａｉｒａｍ　Ｒ　Ｋ，ｅｔ　ａｌ．Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｒｏｌｅ　ｏｆ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ｅｎｚｙｍｅｓ　ｕｎｄｅｒ　ｈｉｇｈ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｓｔｒｅｓｓ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００６，
１７１（３）：３８２－３８８．
［２３］　Ｗｉｌｅｎ　Ｒ　Ｗ，Ｓａｃｃｏ　Ｍ，Ｇｕｓｔａ　Ｌ　Ｖ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　２４－ｅｐｉｂｒａｓｓｉｎｏｌｉｄｅ　ｏｎ　ｆｒｅｅｚｉｎｇ　ａｎｄ　ｔｈｅｒｍｏｔｏｌｅｒａｎｃｅ　ｏｆ　ｂｒｏｍｅｇｒａｓｓ（Ｂｒｏｍｕｓ　ｉｎｅｒｍｉｓ）ｃｅｌ　ｃｕｌｔｕｒｅｓ
［Ｊ］．Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉａ　Ｐｌａｎｔａｒｕｍ，１９９５，９５（２）：１９５－２０２．
［２４］　Ｍａｌｉｃｋ　Ｎ，Ｍｏｈｎ　ＦＨ．Ｒｅａｃｔｉｖｅ　ｏｘｙｇｅｎ　ｓｐｅｃｉｅｓ：ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｏｆ　ａｌｇａｌ　ｃｅｌｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｐｌａｎｔ　Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２０００，１５７（２）：１８３－１９３．
［２５］　郭丽红，陈善娜，龚明．钙对玉米幼苗谷胱甘肽还原酶活性的影响［Ｊ］．植物生理学通讯，２００２，３８（２）：１１５－１１７．
Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　２４－ｅｐｉｂｒａｓｓｉｎｏｌｉｄｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｏｆ
Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ　ｌｅｍａｎｅｉｆｏｒｍｉｓ　ｔｏ　ｈｉｇｈ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ
Ｌｉ　Ｊｉｎｇ１，２，Ｗａｎｇ　Ｑｉａｏｑｉａｏ１，２，Ｘｕ　Ｎｉａｎｊｕｎ１，２，Ｓｕｎ　Ｘｕｅ１，２，Ｆａｎ　ＭｅｉＨｕａ１，２
（１．Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｍａｒｉｎｅ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，Ｎｉｎｇｂｏ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎｉｎｇｂｏ　３１５２１１，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｍａｒｉｎｅ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｍａｒｉｎｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｎｉｎｇｂｏ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎｉｎｇｂｏ３１５２１１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ　ｅｘｐｌｏｒｅ　ｔｈｅ　ｅｆｅｃｔ　ｏｆ　２４－ｅｐｉｂｒａｓｓｉｎｏｌｉｄｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｍａｒｉｎｅ　ｒｅｄ　ａｌｇａｅ　Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ　ｌｅｍａｎｅｉｆｏｒｍｉｓ　ｕｎｄｅｒ　ｈｉｇｈ
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｓｔｒｅｓｓ，ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒａｔｅ，ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ，ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ｅｎｚｙｍｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ，ａｓ　ｗｅｌ　ａｓ　ｔｈｅ
ｃｏｎｔａｉｎｓ　ｏｆ　ｍａｎｎｉｔｏｌ，ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ，ｐｈｙｃｏｂｉｌｉｐｒｏｔｅｉｎ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ＨＳＰ７０，ＰＥａｎｄ　ＧＲ
ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｉｎ　Ｇ．ｌｅｍａｎｅｉｆｏｒｍｉｓ　ａｆｔｅｒ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　２４－ｅｐｉｂｒａｓｓｉｎｏｌｉｄｅ　ａｎｄ　ｈｅａｔ　ｓｈｏｃｋ
ｓｔｒｅｓｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒａｔｅ　ｏｆ　０．１ｍｇ／Ｌ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｇｒｏｕｐ　ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｏｆ
ｏｔｈｅｒ　ｇｒｏｕｐｓ．Ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ｏｆ　Ｆｖ／Ｆｍ，ｑＰａｎｄΦＰＳⅡｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｗｈｉｌｅ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ｏｆ　ＮＰＱ
ｆｉｒｓｔ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ａｎｄ　ｔｈｅｎ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ａｌｏｎｇ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｅｘｔｅｎｓｉｏｎ　ｏｆ　ｈｉｇｈ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｓｔｒｅｓｓ．Ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｐａ－
ｒａｍｅｔｅｒｓ　ｉｎ　ａｌ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｇｒｏｕｐｓ　ｗｅｒｅ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐｓ．Ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ＳＯＤ　ａｎｄ　ＰＯＤ　ｉｎ
ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｇｒｏｕｐｓ　ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐｓ．Ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｍａｎｎｉｔｏｌ　ａｎｄ　ｐｈｙｃｏｂｉｌｉｐ－
ｒｏｔｅｉｎ　ｌｅｖｅｌｓ　ｗｅｒｅ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈｅｓｔ　ｉｎ　０．１ｍｇ／Ｌ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｇｒｏｕｐ，ａｎｄ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｓｕｍｍｉｔ　ａｔ　３ｄｐｏｓｔ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．
Ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ　ｌｅｖｅｌ　ｗａｓ　ｔｈｅ　ｌｏｗｅｓｔ　ｉｎ　０．１ｍｇ／Ｌ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｇｒｏｕｐ，ａｎｄ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｂｏｔｔｏｍ　ａｔ　３
ｄ　ｐｏｓｔ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．Ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｇｅｎｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ＨＳＰ７０，ＰＥａｎｄ　ＧＲｉｎ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｇｒｏｕｐｓ　ｗｅｒｅ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ
ｔｈｏｓｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐｓ．Ｔｈｅｙ　ａｌ　ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈｅｓｔ　ｉｎ　０．１ｍｇ／Ｌ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｉｎｄｉｃａｔｅｄ
ｔｈａｔ　２４－ｅｐｉｂｒａｓｓｉｎｏｌｉｄｅ　ｃｏｕｌｄ　ｉｍｐｒｏｖｅ　ｈｉｇｈ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｏｆ　Ｇ．ｌｅｍａｎｅｉｆｏｒｍｉｓ，ａｎｄ　ｔｈｅ　０．１ｍｇ／Ｌ　ｔｒｅａｔ－
ｍｅｎｔ　ｇｒｏｕｐ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｅｆｅｃｔ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ　ｌｅｍａｎｅｉｆｏｒｍｉｓ；２４－ｅｐｉｂｒａｓｓｉｎｏｌｉｄｅ；ｈｉｇｈ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｓｔｒｅｓｓ；ｈｉｇｈ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ
０９ 海洋学报　３６卷