全 文 ：收稿日期：2010-10-15
作者简介：吴三林（1963-），男，四川宣汉人，乐山师范学院化学与生命科学院副教授。
乐山师范学院学报
Journal of Leshan Teachers College
第 25卷 第 12期
2010年 12月
Vol．25,No．12
Dec．2010
雪莲果低聚果糖的薄层分析鉴定
吴三林， 刘 芳， 付秦超
（乐山师范学院 化学与生命科学学院，四川 乐山 614004）
摘 要：运用薄层层析法分析鉴定雪莲果低聚果糖，最佳层析条件：正丁醇：乙酸：蒸馏水=8：3：2为展开剂，2g二苯胺，
2mL苯胺，10mL85%磷酸共溶于 100mL丙酮为显色系统，确定雪莲果中存在低聚果糖：蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖。
关键词：雪莲果；低聚果糖；薄层层析
中图分类号：R282.71 文献标识码：A 文章编号：1009-8666（2010）12-0024-02
雪莲果是一种含有大量糖类的水果。大多数
块根作物中所含碳水化合物以淀粉的形式存在，
而雪莲果的块根中不含淀粉，主要由低聚果糖、蔗
糖、果糖、葡萄糖组成，含量为干基物质的 90%以
上，其中低聚果糖是主要的糖类物质，含量占果实干
基的 45%-65%，低聚果糖是一种功能性低聚糖[1]。
目前，对低聚果糖的常规分析常采用高效液相色
谱法，但高效液相色谱的色谱柱较难制备且分析
费用较高。薄层法具有操作简单、快捷、准确可靠
等特点，可以广泛应用于实验室研究，但目前尚未
见到采用薄层分析法分析低聚果糖的报道。本文
通过系统的研究，建立了低聚果糖的薄层分析法，
为低聚果糖的生产和应用提供了一种经济、简便
的分析方法。
1 材料与仪器
1.1 主要材料
低聚果糖标准品：山东龙力公司；G-硅胶板
为青岛海洋化工厂生产。
乙酸乙酯、苯胺、二苯胺、磷酸、甲醇、正丁醇、
丙酮、硫酸、无水乙醇、甲酸、冰醋酸、地衣酚均为
市售分析纯。
1.2 主要仪器
微量注射器（北京华仪三谱仪器有限责任公
司）；吹风机（台州人杰电器有限公司）；烘箱（南京
永兴干燥设备厂）；层析缸（上海楚定分析仪器有
限公司）；喷雾器（台州市路桥福达喷雾器厂）。
2 试验方法[2-7]
2.1 溶液配制
1.标准溶液的配制：准确称取低聚果糖标准
品溶于去离子水中，定容后备用。
2.样品液的配制：向分离纯化得的雪莲果低
聚糖液加入无水乙醇，配成 70%的乙醇溶液，低温
冷藏备用。
2.2 展开剂与显色剂的选择
针对该目标物质的三种反应较好的展开显色
系统，分别进行薄层层析，展开剂和显色剂的配比
如表 1所示。
2.3 薄层条件
取制备好的样品液，在硅胶 G薄层板上点样，
与标准溶液一同用溶剂展开，再用显色剂喷板，烘
干后与标准对照，确定样品液中低聚果糖的种类。
硅胶板使用前放入 110℃烘箱中活化 30min，
24
活化后的硅胶板冷却后在距离底边 2cm水平线上
用微量进样器吸取样品液溶液，轻轻接触薄层表
面，每次加样后原点扩散直径不超过 3mm干后反
复点 2次。将薄板有样品的一端浸入扩展剂，扩展
剂浸入高度约 0.5cm，液面应低于点样线，盖好层
析缸盖，上行展层，当展层剂前言离薄板顶端 2cm
时，停止展层，取出薄板，铅笔描出溶剂前沿界线，
用热风吹干。用喷雾器均匀喷洒显色剂，85℃烘干
10min-15min，即可显出各层析斑点。
3 结果与讨论
3.1 展开剂与显色剂选择结果
按照表 1方案进行试验，得出方法一（正丁
醇：乙酸：蒸馏水=8：3：2为展开系统，2g二苯胺，
2mL苯胺，10mL85%磷酸共溶于 100mL丙酮为显
色系统）效果较明显，各斑点相对清晰。而方法二
（正丁醇：甲酸：蒸馏水=15：3：2展开系统，4mL苯
胺与 200mL85%磷酸共溶于 200mL丙酮为显色系
统）及方法三（乙酸乙酯：甲醇：乙酸展开：蒸馏水=
12：3：3：2为展开系统，0.5g地衣酚溶于100mL20%
硫酸为显色系统）底色较深，样点轮廓不清，无法
分辨。因此选用方法一的薄层系统来展开显色。
3.2 薄层层析结果
分别将三个低聚果糖标准品（蔗果三糖、蔗果
四糖和蔗果五糖）和样品点于同一薄层板上，点 1
为样品，2、3、4点分别为三个标品：蔗果三糖、蔗
果四糖和蔗果五糖，其展开结果如图 1所示。从图
1中可以看出，被测样品中存在与三个标样对应
的点，但对应点的分离不是很清晰，呈现首尾相
接。这是由于三个标准样的性质非常相似，难以分
离，Rf相差很小。从以上分析，可以确定被测样品
中存在蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖，即存在低
聚果糖。
4 结论
4.1薄层层析展层系统，经讨论得出以正丁
醇：乙酸：蒸馏水=8：3：2为展开剂，2g二苯胺，
2mL苯胺，10mL85%磷酸共溶于 100mL丙酮为显
色剂，展层效果较为理想，可用于雪莲果低聚糖的
分析。
4.2薄层层析测定结果表明，雪莲果提取液中
含有低聚果糖：蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖。
表 1 薄层系统选择
展开剂 显色剂
正丁醇:乙酸:蒸馏水=8:3:2 2g二苯胺，2mL苯胺，10mL85%
磷酸共溶于 100mL丙酮
正丁醇:甲酸:蒸馏水=15:3:2
4mL苯胺与 200mL 85%磷酸共
溶于 200mL丙酮
乙酸乙酯:甲醇:乙酸:蒸馏水=
12:3:3:2
0.5g 地衣酚溶于 100 mL 20%
硫酸
参考文献：
[1]刘坚, 李静威, 兰海, 等. 雪莲果不同部位的营养成分分析[J]. 草业学报, 2009, 18（4）：236～240.
[2]李秀琴, 杨星惠, 安素欣. 低聚果糖的纯化方法[J]. 河北化工, 2003, 1：4～7.
[3]米运宏, 邓梁华, 黄扩宇. 高纯度低聚果糖制备研究进展[J]. 广西轻工业, 2007, 2(2):25～26.
[4]汪东风, 谢晓凤, 严峻, 等. 茶多糖等有效成分综合提取研究[J]. 中草药, 1998, 29：739～740.
[5]李志孝, 孟延发, 盂雪琴, 等. 栀子多糖的分离纯化及其性质[J]. 生物化学与生物物理学报, 1993, 25：301～305.
[6]肖桂武, 曾和平. 龙葵多糖的分离、纯化和鉴定(II)[J]. 中草药, 2000, 31：162～164.
[7]朱桂兰, 童群义. 薄层色谱法分析低聚乳果糖[J]. 食品工业科技, 2004, 25(1)：131～132.
图 1 低聚果糖的层析图
25