全 文 ：白花蛇舌草与水线草的褶合光谱法鉴别分析
黄庆华 1 ,温金莲 1 ,严寒静2 ,姚仰勋*
(广东药学院 1.分析化学教研室 2.药用植物与中药鉴定教研室 ,广东 广州 510006)
摘要:目的 建立白花蛇舌草和伞房花耳草(水线草)的鉴别分析方法。方法 采用褶合变换技术和计算机信息处理技术进行鉴
别分析。结果 通过两两匹配 ,用三维褶合光谱差谱显示鉴别结果 , 将两者的 4种不同提取液进行鉴别分析 , 得出 4个非同一
性认定鉴别结论。结论 本法适用于白花蛇舌草与水线草的鉴别。
关键词:白花蛇舌草;水线草;褶合光谱法;鉴别
中图分类号:R 284　文献标识码:A　文章编号:1006 - 8783(2006)06 -0589 - 03
*广东药学院 2005届本科毕业生
作者简介:黄庆华 , 女 , 教授 , 主要从事现代分析技术在中药
研究中的应用 , Tel:020 - 39352135;E - m ail:
HQH1003@ tom. com。
Iden tification o fO ldenland ia d iffusa (W ild) Roxb and Olden land ia corymbosa L. by convolution
spectrom etry
HUANG Q ing-hua , WEN Jin-lian , YAN H an-jing, YAO Yang-xun
(Departm ent of Analy tica l Chem istry ,Guangdong College of Pharmacy , Guangzhou ,Guangdong 510006, Ch ina)
Abstract:Object ive To deve lop a m ethod fo r the identifica tion ofO ldenland ia d iffuca (W ild) Roxb andO ldenlandia corymbosa L.
M ethods The herbs were identified by using the convo lu tion curve transform ation techno logy and com pu te r info rm ation process
techno logy. The results w ere demonstra ted by m atch com parision and three-dimensional differential diagram of convo lu tion spec tra.
Results Four batches of ex traction so lu tion of the two herbs were identified and four non-iden tical resu lts w ere acquired. Conclusion
This m ethod is simp le and va luab le for the identifica tion of these two herbs.
K ey words:O ldenland ia d iffusa (W ild) Roxb. ;O ldenlandia corym bosa L. ;convo lution spec trom etry;iden tification
　　白花蛇舌草具清热解毒 、利湿消肿等功效 , 《中
华人民共和国药典》(2005年版 )一部附录记载其为
茜草科植物白花蛇舌草 Oldenlandia diffusa (W ild. )
Roxb.的干燥全草 ,白花蛇舌草的混淆品中以同属
植物伞房花耳草 (水线草)O lden land ia corymbosa L.
最常见 ,两者基源相近 ,性状相似 ,一般方法较难鉴
别 。据文献报道 ,目前对白花蛇舌草与水线草的鉴
别 ,有薄层色谱法[ 1] , FTIR谱法[ 2] 、X射线衍射
Fourie r指纹图谱法[ 3] 、紫外谱线组法 [ 4]和 rDNA ITS
序列分析法[ 5]等 。本文采用褶合光谱法的定性鉴
别功能 [ 6, 7] ,测出白花蛇舌草与水线草在不同极性
溶剂中的紫外 —可见吸收光谱 ,利用褶合变换技术
和计算机信息处理技术 ,将吸收光谱转变为褶合光
谱 ,将被测物对光吸收特性的变化信息以数学分量
的形式分离提取出来 ,构成一种由成百上千条褶合
曲线组合而成的光谱群。这些曲线扩大了不同物质
对光吸收的差异 ,将白花蛇舌草与水线草对光吸收
的细微差别进行放大和处理 ,定性鉴别的结果用三
维褶合光谱的差谱图直观地表示 ,量化指标由差谱
值百分比表达 。
1　仪器 、试剂和样品
1. 1　仪器
UV7501紫外 /可见分光光度计 (无锡科达仪器
厂),褶合光谱软件 (上海玉田分析仪器公司 )。
1. 2　试剂
无水乙醇 、石油醚和三氯甲烷(均为国产分析纯)。
1. 3　样品
白花蛇舌草与水线草 (2004年 10月采自广东
肇庆鼎湖山 ),经广东药学院药用植物与中药鉴定
教研室严寒静博士鉴定为白花蛇舌草 O lden land ia
d iffusa (W ild ) Roxd. 及 水 线 草 O lden land ia
corymbosa L.的全草 。
2　方法和结果
2. 1　线性范围
分别精密称取白花蛇舌草与水线草适量 ,粉碎后
分别置于适量体积的水 、无水乙醇 、石油醚和三氯甲
589
第 22卷第 6期 广　东　药　学　院　学　报 Vo.l 22 No. 6
2006年 12月 JOURNAL OFGUANGDONG COLLEGE OF PHARMACY Dec. 2006
烷溶剂中 ,超声提取 30m in,滤过。取续滤液分别配
成 5份适当浓度梯度的溶液 ,测定各自 λmax (水提取
液选 420 nm)处的 A值 ,得到相应的线性范围 ,见表
1。
表 1　白花蛇舌草与水线草 4种提取溶液的线性范围
Tab. 1　L inear range of four ba tches of extraction so lu tion s
溶剂 提取物 线性范围(g mL - 1) r
水 白花蛇舌草水线草 0. 012 ～ 0. 024
0. 992 9
0. 996 6
无水乙醇 白花蛇舌草水线草 0. 010 ～ 0. 020
0. 998 2
0. 989 3
三氯甲烷 白花蛇舌草水线草 0. 016 ～ 0. 033
0. 999 1
0. 999 6
石油醚 白花蛇舌草水线草 0. 042 ～ 0. 067
0. 999 1
0. 997 7
2. 2　稳定性
分别取 “2. 1”项下白花蛇舌草和水线草的 4种
提取溶液的续滤液 ,在线性范围内 ,配成适当浓度的
溶液 ,分别在 0. 0, 0. 5, 1. 0 , 1. 5, 2. 0, 2. 5和 3 h时
测定 λmax(水提取液选 420 nm)处的 A值 。试验显
示 , 3 h内白花蛇舌草和水线草的 4种溶剂提取液 ,
在所选波长处的 A值稳定。
2. 3　光谱测定
在线性范围内 ,分别提取配制白花蛇舌草和水
线草在 4种不同的溶剂中的 5种浓度梯度溶液 。以
所用溶剂为空白 ,每种浓度的溶液重复测定 4次 ,分
别得到白花蛇舌草和水线草 ,在每种溶剂中各 20条
360 ～ 460 nm(水提液 400 ～ 540 nm ,三氯甲烷提取
液 370 ～ 470 nm),间隔 0. 5 nm的吸收曲线 。
2. 4　自我训练
启动褶合光谱软件的定性鉴别功能 ,选取 360
～ 460 nm (水提液 400 ～ 540 nm ,三氯甲烷提取液
370 ～ 470 nm),间隔 2 nm ,分别对白花蛇舌草和水
线草提取液进行自我训练。随机选取 10条白花蛇
舌草或水线草的吸收曲线信息构组数据文件 x1(白
花蛇舌草)或 y1(水线草),另 10条吸收曲线信息构
建数据文件 x2(白花蛇舌草)或 y2(水线草 )。 x1与
x2、y1与 y2分别作匹配比较 (褶合变换和比较褶合
光谱群是否一致),绘制三维褶合光谱差谱图和计
算差谱值 ,如得到同一性认定结论 ,则表示自我训练
完成。结果见表 2,图 1为白花蛇舌草三氯甲烷提
取液的自我训练三维褶合光谱差谱图和吸收曲线。
2. 5　鉴别分析
分别在 4种提取溶液中 ,随机选出 10条白花蛇
舌草的吸收曲线构组数据文件 x1 ,另随机选出 10条
水线草的吸收曲线构建数据文件 y1 , x1与 y1进行匹
配比较。在 4种不同提取溶剂中 ,水线草提取液与
白花蛇舌草提取液比较 ,得出四个非同一性认定的
结论 ,见表 3和图 2 ～图 5。
表 2　白花蛇舌草和水线草的自我训练结果
Tab. 2　 R esults of self-tra inn ing for O lden landia diffusa
(W ild. ) Roxb. and O lden land ia corymbosa L.
溶剂 差谱值 /%白花蛇舌草 水线草
水 0. 18 0. 18
无水乙醇 0. 00 0. 00
三氯甲烷 0. 00 0. 14
石油醚 0. 00 0. 00
a. 三维褶合光谱差谱图　b. 吸收曲线
图 1　白花蛇舌草的三氯甲烷提取溶液的自我训练(差谱点
0. 00%)
Fig. 1　Plots of self-train ing forO lden land ia diffu sa
(W ild. ) Roxb. in ch loroform solu tion ( sub tract
spectrom etry va lue 0. 00%)
表 3　白花蛇舌草与水线草提取液的鉴别分析结果
Tab. 3　 Iden tification betw een the tw o herbs in four bat-
ches of ex trac ts
溶剂 差谱值 /%
水 18. 26
无水乙醇 29. 56
三氯甲烷 46. 37
石油醚 29. 56
a. 三维褶合光谱差谱图　b. 吸收曲线
1. 白花蛇舌草　2. 水线草
图 2　白花蛇舌草和水线草水提液的鉴别结果 (差谱点
18.26 %)
Fig. 2　 Iden tif ication betw een the two herbs in thew ater so-
lu tion( sub tract spec trometry value 18. 26%)
590
广东药学院学报 , 2006, 22(6)
a.三维褶合光谱差谱图　b.吸收曲线
1.水线草　2.白花蛇舌草
图 3　白花蛇舌草和水线草乙醇提取液的鉴别结果(差谱点
29. 56%)
F ig. 3　 Iden tif ication betw een the tw o herbs in the alcohol
solu tion( sub tract spec trom etry value 29. 56%)
a.三维褶合光谱差谱图　b.吸收曲线
1.水线草　2.白花蛇舌草
图 4　白花蛇舌草和水线草三氯甲烷提取液的鉴别结果(差
谱点 46. 37%)
F ig. 4　 Iden tification be tw een the two herbs in thech loro-
form so lu tion( sub tract spectrom etry va lue 46. 37%)
a.三维褶合光谱差谱图　b.吸收曲线
1.水线草　2.白花蛇舌草
图 5　白花蛇舌草和水线草石油醚提取液鉴别结果(差谱点
29. 56%)
F ig. 5　 Iden tification between the two herbs in the benz-
im un pur ifica tum solu tion( sub tract spectrom etry
value( 29. 56%)
3　讨 论
同一性判据的建立是通过标准样品的自我训练
完成 。自我训练的样本数理论上要求越多越好 ,本
实验取 20个样本数 ,其中 10个作标准样本 ,另 10
个样本用于有效性判别训练 ,如果得到同一性鉴别
结论 (考虑到仪器测试等原因产生异常值 ,同一性
认定时允许 1%差谱点的存在 ),则认定这 20个样
本具有代表性 ,自我训练已完成 ,否则需要增加标准
样本数 ,进行再训练 ,直到自我训练的完成。
白花蛇舌草与水线草的 4种提取液比较 ,褶合
光谱都有明显的差异 ,其中三氯甲烷提取液的差异
最大 (差谱值达 46. 37%),这与 FTIR谱鉴别的结果
相一致[ 2] 。原因可能是两种植物的三氯甲烷提取
液中所含化学成分种类和含量上的差异要明显大于
其余 3种溶剂提取液。
白花蛇舌草和水线草主要含有蒽醌类 、萜类和
黄酮类等化学成分 ,二者的吸收光谱很相似 ,传统的
紫外可见分光光度法定性鉴别方法 ,如光谱特征信
息比较法和吸收光谱比较法都缺乏专属性 。 FTIR
谱法等虽专属性强 ,但仪器成本高 。本文利用褶合
光谱的定性鉴别功能 ,将白花蛇舌草和水线草提取
液对光吸收的细微差别进行放大并鉴别 ,得到令人
满意的结果。
参考文献:
[ 1]卢文彪 ,曾元儿. 白花蛇舌草与水线草的薄层色谱鉴别
[ J] . 中药材 , 2001, 24(8):564.
[ 2]李湘南 ,刘小平 , 黎其荣 , 等. 白花蛇舌草与其伪品水线
草的 FT IR谱鉴定 [ J] . 中药材 , 2004, 27(5):335.
[ 3]刘小平 , 李惠 , 徐海星 , 等. 白花蛇舌草的 x射线衍射
Fou rie r指纹图谱鉴定 [ J] .中药材 , 2003, 26(7):488.
[ 4]王丽 ,周诚 , 顾少菊.白花蛇舌草及水线草的紫外谱线组
法鉴别 [ J] . 广州医学院学报 , 2003, 31(1):85.
[ 5]刘忠权 ,郝明干 , 王加连. 应用位点特异性引物鉴定白花
蛇舌草 [ J] . 中药材 , 2004, 27(7):484.
[ 6]王建军 ,吴玉田. 褶合光谱法在药物分析领域内的应用
[ J] . 药学进展 , 2002, 26(1):1.
[ 7]陈建达 ,徐辉 , 金文祥. 麻黄碱 、伪麻黄碱的褶合光谱法
鉴别分析 [ J] . 第二军医大学学报 , 2004, 25(10):1151.
(收稿日期:2006 -10 - 24;修回日期:2006 -11 - 28)
591
第 6期　黄庆华 ,等.白花蛇舌草与水线草的褶合光谱法鉴别分析