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鲜切雪莲果护色保鲜工艺的研究



全 文 :!#$
鲜切雪莲果护色保鲜工艺的研究
杨! 波,杨! 光,陈佳雯
(上海理工大学食品与生物技术研究所,上海 !#$)
摘% 要:以雪莲果为试材,研究鲜切雪莲果防酶促褐变的工艺。实验中将物理方法和化学方法结合起来,采用正交实
验筛选出鲜切雪莲果的最佳组合护色剂,从而确定雪莲果最优组合防褐变的工艺。结果表明:抗坏血酸、柠檬酸、
&’()*+,! 和 +,-.都有抑制褐变的效果,但组合抑制剂的护色效果比单元抑制剂好。且最佳组合护色剂为:/012抗
坏血酸 3 /02柠檬酸 3 /12&’()*+,! 3 0/12+,-.。
关键词:鲜切雪莲果,多酚氧化酶,组合护色剂
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中图分类号:(?!11/$% % % % 文献标识码:)% % % % 文 章 编 号:0!*$G(!#)H*!$#*H
收稿日期:!I*J*01
作者简介:杨波(0#GI*),女,工程师,硕士,主要从事食品与生物技术
方面的研究工作。
% % 雪莲果原产于南美安第斯山,是当地印第安人
的传统食品,已有 1 年历史,近年来通过多种途径
进入我国。雪莲果属于菊科植物,由于外形像蕃薯,
将其归属于薯芋类蔬菜[0]。雪莲果的食用部分为根
块,果肉吃起来的口感却很像水梨,汁多而晶莹剔
透,甘甜爽脆。雪莲果含有 ! 种人体必需的氨基酸
及丰富的矿物质,还含有极高的钙、镁、铁、锌、钾、硒
等微量元素,并且雪莲果的果寡糖含量是所有植物
中最高的。果寡糖不能被人体充分吸收,却具有以
下功效:促进消化,调理胃肠道,产生双歧因子;调理
血液,清除高血脂,有效地控制胆固醇,提高身体免
疫力[!]。由于果寡糖不能被人体充分吸收,因此属低
热量食品,很适合糖尿病人及减肥者食用。雪莲果
是当今吃出美丽、吃出健康的新潮果品。但雪莲果
被切开和去皮后,极易褐变,看起来像变黑的土豆
块,令人食欲大减,影响产品货架期。目前对鲜切雪
莲果褐变的研究还相对较少,本实验以雪莲果为试
材,研究鲜切雪莲果防酶促褐变的工艺。实验中将
物理方法和化学方法结合起来,采用正交实验筛选
出鲜切雪莲果的最佳组合护色剂和最优组合防褐变
的工艺,以期为雪莲果进一步加工抑制褐变,提高产
品的利用价值,提供参考依据。
9! 材料与方法
9:9! 材料与仪器
新鲜无损伤的雪莲果% 购自菜市场;邻苯二酚、
磷酸氢二钠、乙二胺四乙酸二钠(&’()*+,!)、氯化
钠、抗坏血酸、柠檬酸% 均为分析纯。
4K*0J 型紫外分光光度计,(’L*1 型离心机,
电炉(!!K 0M),)&0 型电子天平,NO?*$P 型
精密 NO计,O/O/?型电热恒温水浴锅,家用搅拌机。
9:;! 实验方法
0/!/0% 雪莲果中多酚氧化酶的提取[$]% 取适量雪莲
果洗净、去皮、切分,用搅拌机捣碎至匀浆,用纱布过
滤;滤液于 HQ冰箱中静置 01R65,离心 $9 S R65;取
上清液并用纱布过滤,即为粗酶液。粗酶液于 HQ冰
箱中保存备用。
0/!/! % 雪莲果 TTU 最适波长的确定[H] % 取 !RL
NOG/1I 的磷酸氢二钠 *柠檬酸缓冲溶液于 !RL
/0R=. S L的邻苯二酚中,并加入 0RL 雪莲果 TTU 粗
酶液,稳定 0R65 后,将酶与底物的反应产物在
HVI5R波长下进行吸收波长的扫描,最大吸光度
所对应的波长即为其最大吸收波长。
0/!/$% 温度对雪莲果 TTU 活性的影响[H]% 在 !RL
/0R=. S L的邻苯二酚中加入 !RL NOG/1I 的磷酸氢二
钠*柠檬酸缓冲溶液和 /0RL的雪莲果 TTU粗酶液,
分别使反应体系在 $、H、1、G、J、I、#Q下恒温
DOI:10.13386/j.issn1002-0306.2009.04.058
!#$
!#$后,测定其吸光度。
%&’&() 热处理时间对雪莲果 **+ 活性的影响[!]) 在
’, -&%./ 0 , 的邻苯二酚中加入 ’, 123&!4 的磷
酸氢二钠5柠檬酸缓冲溶液和 -&%,的雪莲果 **+粗
酶液。使反应体系在(6- 7 %8)恒温水浴中分别反应
-&!、%&-、’&-、9&-、(&-、!&-、3&-#$后,测其吸光度值。
%&’&!) 12对雪莲果 **+活性的影响[(]) 配制 12’&-
:4&- 系列的磷酸氢二钠5柠檬酸缓冲溶液,各种缓冲
溶液取 ’,,分别加入 ’, -&%./ 0 , 的邻苯二酚和
-&%,的雪莲果 **+粗酶液,室温下静置 !#$后,分
别测定其吸光度。
%&’&3) 化学抑制剂对雪莲果 **+ 活性的影响[3]) 在
加有 ’, 123&!4 磷酸氢二钠5柠檬酸缓冲溶液、’,
-&%./ 0 ,邻苯二酚和 -&%,雪莲果 **+粗酶液的反
应体系中,加入 ’, 浓度分别为 -&-!;、-&%-;、
-&’-;、-&(-;、-&4-;、%&--;、’&--;的抗坏血酸、柠
檬酸、<=>?5@A’ 和 @AB/。室温下静置 !#$后,分别
测定其吸光度。
%&’&C) 正交实验确定鲜切雪莲果的最佳护色剂组合
) 以抗坏血酸( -&-!;、-&%-;、-&%!;)、柠檬酸
(-&-!;、-&%-;、-&%!;)、<=>?5@A’(-&-!;、-&%-;、
-&%!;)和 @AB/(-&!;、%&-;、%&!;)进行四因素三水
平的正交实验,采用 ,6(9
()正交设计表[C]。在加有
’, 123&!4 磷酸氢二钠 5柠檬酸缓冲溶液、’,
-&%./ 0 ,邻苯二酚和 -&%, **+粗酶液的反应体系九
支试管中,分别加入 ’, 组合护色剂:处理号为 % 至
6,四种护色剂各取-&!,,室温下静置!#$后,分别测
定其吸光度。以上每个处理均重复 9次,取其平均值。
! 结果与分析
!#$ 雪莲果 %%&的最适波长
将酶与底物的反应产物在 (--:4--$波长下进
行吸收波长的扫描,结果表明,(--$ 处有最大吸光
度,则其最适吸收波长为 (--$。
!#! 温度对雪莲果 %%&活性的影响
温度对雪莲果 **+活性的影响,实验结果见图 %。
图 %) 温度对雪莲果 **+活性的影响
由图 % 可知,当温度为 ’!:(!8时,雪莲果 **+
的活性随温度的上升逐渐增强,在温度为 (-8时,雪
莲果 **+活性最强,即其最适温度为 (-8;当温度升
至 !-8及以上时,**+的活性得到很大程度的抑制,
并随温度的上升,**+ 活性逐渐下降,可见,温度对
雪莲果多酚氧化酶活性的影响是双重的。当温度低
于 (-8时,以催化酶促反应为主;当温度高于 (-8
时,以钝化 **+活性为主。这是由于 **+ 的本质是
一种蛋白质,当温度过高时维持其活性的三维结构
的完整性和稳定性将受到破坏,使 **+ 酶钝化。即
高温可抑制多酚氧化酶的活力。
!#’ 热处理时间对雪莲果 %%&活性的影响
热处理时间对雪莲果 **+ 活性的影响,实验结
果见图 ’。
图 ’) 热处理时间对雪莲果 **+活性的影响
图 ’ 结果表明,在热处理 %:’#$ 内,所测得的
吸光度与时间成一定的负相关,但 9#$ 后则变化缓
慢。可见,在 6-8下延长热处理时间对雪莲果 **+
活性的抑制效果并未得到明显的提高,说明瞬间高
温的处理方法可有效地抑制该 **+ 催化的褐变。但
由于高温会使雪莲果中的营养成分损失,特别是抗
坏血酸受热容易分解,所以实际生产中应综合考虑
多种因素相结合来控制雪莲果 **+的褐变。
!#( )*对雪莲果 %%&活性的影响
12对雪莲果 **+活性的影响,实验结果见图 9。
图 9) 12对雪莲果 **+活性的影响
由 9 可知,不同 12 下 **+ 活性差别很大。当
12’!&- 时,随 12升高,+=值缓慢增加;当 12)3&-
时,+=值上升很快;至 123&3 时,吸光度达到最大,
此时 **+活性最高;当 12)C&- 时,+=值逐渐减小;
因此雪莲果 **+的最适 12 为 3&4。调节 12 能有效
地抑制酶的活性,从而抑制酶促褐变。
在果蔬加工过程中,通常用酸处理来调节原料
的 12。酸护色的机理在于它降低了原料的 12,以控
制多酚氧化酶的活力。由于多酚氧化酶的最适 12
在 3:C 之间,低于 9&- 已明显无活性[4]。
!#+ 化学抑制剂对雪莲果 %%&活性的影响
研究不同浓度同一护色剂对雪莲果 **+ 活性的
影响,实验结果见图 (:图 C。
) ) 图 (:图 C 结果表明,抗坏血酸、柠檬酸、<=>?5
@A’ 和 @AB/ 对雪莲果 **+ 都有一定的抑制作用,且
抑制作用随护色液浓度的增加而增强[6]。抗坏血酸
作为一种还原剂和 **+ 的竞争性抑制剂[%-],既可除
去组织中的氧气,又可将酚类物质氧化所生成的醌
还原,从而阻止褐色物质的进一步形成。虽然 DB 的
抑制作用随其浓度的增大而增强,但由于 DB 的价格
!#$
较贵,实际应用中 ! 用量较少,浓度较低。柠檬酸
浓度大于 #$#%&时,其抑制作用随浓度的增加而增
强(图 %),大于 #$’&时抑制程度趋于平缓,这是因为
柠檬酸对底物是竞争性抑制,两者同时竞争酶的活
性中心,当柠檬酸浓度趋于无穷大时,反应速率趋于
零,说明柠檬酸与酶结合成无活性的二元复合物,它不
能生成酶催化产物,而底物与酶结合的二元复合物不
会再与柠檬酸结合成三元复合物[’’]。()*+,-./ 是一
种金属离子螯合剂,但其抑制 001 活性的效果并不
明显;当浓度达到 #$’&后,随着浓度的上升,其抑制
效果趋于稳定。-.2主要因减少了溶液中氧气溶解
量而起到抑制酶促反应的作用。在实际加工过程
中,食盐溶液的浓度过高,易引起果蔬制品风味的变
化,一般 ’&的食盐水为宜。
!#$ 正交实验确定鲜切雪莲果的最佳护色剂组合
在单因素实验的基础上,以抗坏血酸(#$#%&、
#$’#&、#$’%&)、柠檬酸( #$#%&、#$’#&、#$’%&)、
()*+,-./(#$#%&、#$’#&、#$’%&)和 -.2(#$%&、’$#&、
’$%&)进行四因素三水平的正交实验,实验表略。
由正交实验直观分析可知,多元复合护色剂对
鲜切雪莲果褐变程度影响的重要性次序为抗坏血酸
3 -.2 3 ()*+,-./ 3柠檬酸,褐变程度最小的护色
剂组合为 #$’%&抗坏血酸 4 #$’#&柠檬酸 4 #$#%&
()*+,-./ 4 ’$%& -.2;重复实验结果表明,该组合
护色剂的确能有效控制鲜切雪莲果的酶褐变,且组
合抑制后 1)值为 #$#5’,低于单元护色剂 #$’&抗坏
血酸处理后的 #$#67(图 7)。
组合护色剂将抗坏血酸和柠檬酸降低酶促反应
体系的 89以及与底物的竞争作用,和 ()*+,-./ 对
001中活性因子 :/ 4的鳌合作用以及食盐水降低反
应体系氧溶解量的作用联合起来,发挥出很好的抑
制酶促褐变的效果。另外,在成本上组合护色剂比
单元护色剂较为便宜[’/]。例如,抗坏血酸的单价为
#$/;# 元 < =,柠檬酸的单价为 #$#>6/ 元 < =,()*+,-./
的单价为 #$#5# 元 < =,食盐的单价为 #$##/% 元 < =;单
独使用 #$’%&的抗坏血酸 /?@需要 #$#A5 元,组合使
用 #$’%&抗坏血酸 4 #$’#&柠檬酸 4 #$#%& ()*+,
-./ 4 ’$%&-.2 /?@需要 #$#%’ 元,则相对成本下降
了 >%$#7&。所以组合护色剂的护色效果比单元护色
剂好,且成本较低。
!%$ 组合护色剂浸泡时间对鲜切雪莲果的影响
图 5 的结果表明,当浸泡时间少于 /#?BC 时,护
色剂抑制褐变的效果随浸泡时间的延长而增强,但
超过 /#?BC后,浸泡时间的加长对护色效果影响很
不显著。所以,浸泡时间可以控制在 /#?BC左右。
图 5D 浸泡时间对鲜切雪莲果的影响
!&$ 正交实验确定鲜切雪莲果的最佳护色保鲜工艺
以热烫温度(5%、6#、6%E)、热烫时间(’、/、
>?BC)和浸泡时间(’%、/#、/%?BC)进行三因素三水平
的正交实验。取雪莲果洗净、去皮、切分成大小均匀的
小碎块。称取 6份,每份 ’#=。分别进行 ’至 6号的实
验,每个处理均做 / 个平行实验。分别取出沥干、打
浆、过滤、取汁样品测定其吸光度,取其平均值。
D D 由表 ’ 可知,鲜切雪莲果的最佳护色保鲜工艺
组合为热烫温度 6%E、热烫时间 ’?BC、组合护色剂浸
泡时间 /%?BC,其中因素热烫温度的 F 值最大,表明
热烫温度对于抑制鲜切雪莲果的酶促褐变起着显著
性作用,而组合护色剂起到辅助作用。
’$ 结论
’(D 食盐水对鲜切雪莲果有护色作用,且食盐水浓度
越高其护色效果越好。一般用 ’&G/&的食盐溶液。
’!D 由于雪莲果 001 的最适温度为 7#E,因此高温
短时的热处理方法可有效地抑制该 001催化的褐变。
’’D 雪莲果 001 的最适 89 为 ;$5,可添加柠檬酸、
抗坏血酸等对雪莲果做酸处理以降低体系的 89,从
而抑制酶促褐变。
!!#
表 ! 正交实验结果直观分析
实验号
热烫温度
(#)
热烫时间
($%&)
组合护色剂浸泡
时间($%&) ’(
! !()*) !(!$%&) !(!*) !+,-,
. ! .(.$%&) .(./) !+0!,
1 ! 1(1$%&) 1(.*) !+,)*
- .(2/) ! . !+012
* . . 1 !+1/0
, . 1 ! !+.).
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3. !+--1 !+10/ !+*!/
31 !+/1. !+1-0 !+1/2
4 /+,*/ /+/21 /+./,
!# 组合护色剂 /+!*5抗坏血酸 6 /+!/5柠檬酸 6
/+/*57(89:;<. 6 !+*5 ;<=> 能有效控制鲜切雪莲
果的酶褐变,且抑制效果比单独使用 /+!*5抗坏血
酸的好,成本也相对较小。
!$ 鲜切雪莲果的最佳护色保鲜工艺组合为:雪莲
果块热烫处理(2*#,!$%&)后,立即放入冷水中降温
硬化;取出沥干,浸泡于组合护色剂 /+!*5抗坏血酸
6 /+!/5 柠檬酸 6 /+/*5 7(89 : ;<. 6 !+*5 ;<=>,
.*$%&;取出沥干,用保鲜膜密封;放入冰箱中冷藏。
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(上接第 .1) 页)
图 !/ X Y L(Z1,Z-)的响应面图
为检验 4[9 法的可靠性,采用上述最优提取条
件对胡桃醌进行超声波提取,实际测得的提取率为
/+/))-5,与理论值相比相对误差在 /+1-5左右。因
此,采用 4[9法优化得到的提取条件参数准确可靠,
具有使用价值。
!% 结论
基于实验设计软件 (GQ%T&:7OMGKJ [ILJ\过二次回归设计得到了胡桃醌超声波提取率与超声
功率、超声温度、超声时间、液料比关系的回归模型,
经检验证明该模型是合理可靠的,能够较好地预测
胡桃醌的超声波提取率。利用模型的响应面及其等
高线,对影响胡桃醌超声提取的关键因素及其相互
作用进行探讨,得到的优化工艺参数为超声时间
!+--F,液料比 !0+0 ] !,超声波功率 11*^,超声温度
-1+)#,在此条件下,胡桃醌的平均提取率为
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