全 文 ：１８　 Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈｅｎａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ）　Ｆｅｂ．　２０１４　Ｖｏｌ．３３　Ｎｏ．１
草决明对临床耐药金葡菌的抗菌作用及生物膜形成的影响
吴　铭，刘　根，王京伟，王攀红，韩晶晶，黄红莹＊
（河南大学 医学院，河南 开封４７５００４）
摘　要：目的　探讨草决明对耐药金葡菌的抗菌作用及其对细菌生物膜的抑制作用。方法　以临床耐药菌株为研
究对象，微量肉汤稀释法测定其最低抑菌浓度（ＭＩＣ），９６孔板法测定草决明对金葡菌生物膜的抑制作用，以氯化钠
和蒸馏水测定草决明处理菌细胞壁渗透能力。结果　草决明醇提液抗菌作用较强，其对金葡菌标准菌株和临床菌
株的最低抑菌浓度分别为２５μｇ／ｍＬ、６．２５μｇ／ｍＬ，１／２～１／４ＭＩＣ的草决明醇提液均可明显抑制耐药菌株生物膜
的形成；１／２～１／８ＭＩＣ草决明醇提液处理耐药金葡菌后，其细胞壁渗透力并无明显改变。结论　草决明醇提液对
耐药金葡菌具有抗菌作用，对耐药菌生物膜形成具有明显的抑制作用。
关键词：草决明；耐药金葡菌；抗菌作用；生物膜
中图分类号：Ｒ２８５．６　　　文献标识码：Ａ 文章编号：１６７２－７６０６（２０１４）０１－００１８－０３
　收稿日期：２０１４－０１－０３
　基金项目：河南省教育厅科学技术研究重点项目（１２Ｂ３１０００１）；河南大学大学生创新训练项目。
　作者简介：吴铭（１９７１－），男，河南开封人，硕士研究生，从事微生物感染与免疫学研究工作。
　＊通讯作者：黄红莹（１９６４－），女，河南开封人，教授，从事微生物感染与免疫学研究工作。
Ｓｅｍｅｎ　Ｃａｓｓｉａｅ　Ｔｏｒａｅｓ　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ　Ａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｔｈｅ　Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎａｌ　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ
ｔｈｅ　Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｂｉｏｆｉｌｍ．ｏｎ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｄｒｕｇ　Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｏｆ　Ｓ．ａｕｒｅｕｓ
ＷＵ　Ｍｉｎｇ，ＬＩＵ　Ｇｅｎ，ＷＡＮＧ　Ｊｉｎｇｗｅｉ，ＷＡＮＧ　Ｐａｎｈｏｎｇ，ＨＡＮ　Ｊｉｎｇｊｉｎｇ，ＨＵＡＮＧ　Ｈｏｎｇｙｉｎｇ＊
（Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｈｅｎａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｋａｉｆｅｎｇ，Ｈｅｎａｎ　４７５００４，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　Ｓｅｍｅｎ　Ｃａｓｓｉａｅ　Ｔｏｒａｅｓ　ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ　ａｃｔｉｏｎ　ｏｎ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　Ｓ．ａｕｒｅｒｕｓ　ａｎｄ
ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｆｉｌｍｆｏｒｍａｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｔ　ｓｔｒａｉｎｓ　ｗｅｒｅ　ｐｕｔ　ａｓ　ｒｅｓｅａｒｃｈ
ｏｂｊｅｃｔ，ｂｒｏｔｈ　ｍｉｃｒｏｄｉｌｕｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｉｔｓ　ＭＩＣ，９６－ｗｅｌ　ｐｌａｔｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ
ｅｆｆｅｃｔ，ＮａＣｌ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｄｉｓｔｉｌｅｄ　ｗａｔｅｒ　ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｔｈｅ　Ｓｅｍｅｎ　Ｃａｓｓｉａｅ　Ｔｏｒａｅｓ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｎ　ｔｈｅ
ｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｃｅｌ　ｗａｌｓ　ａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｔｏ　ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｈｅ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｗｅｒｅ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ　ｏｎ　ｃｌｉｎｉｃａｌ
ｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　Ｓ．ａｕｒｅｒｕｓ　ｗｈｉｃｈ　ｗｅｒｅ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　Ｓｅｍｅｎ　Ｃａｓｓｉａｅ　Ｔｏｒａｅｓ，ｔｈｅ　ＭＩＣ　ｏｆ　ｔｈｅ
ｓｔａｎｄａｒｄ　ｓｔｒａｉｎｓ　ｏｆ　Ｓ，．ａｕｒｅｕｓ　ｂａｃｔｅｒｉａ　ａｎｄ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｓｔｒａｉｎｓ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ　ｗｅｒｅ　２５μｇ／ｍＬ　ａｎｄ　６．２５μｇ／ｍＬ，ｔｈｅ
ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂｉｏｆｉｌｍ　ｗａｓ　ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ　ｒｅｓｔｒａｉｎｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｄｕｒｉｎｇ　１／２ａｎｄ　１／４ ＭＩＣ；ｒｈｅ　ｓｔｒａｉｎｓ　ｗａｌｓ
ｏｓｍｏｌａｒｉｔｙ　ｃｏｕｌｄ　ｎｏｔ　ｃｈａｎｇｅｄ　ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｓｅｍｅｎ　Ｃａｓｓｉａｅ　Ｔｏｒａｅｓ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｈａｓ　ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ
ｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　Ｓ．ａｕｒｅｒｕｓ　ａｎｄ　ｈａｓ　ｏｂｖｉｏｕｓ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎａｌ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂｉｏｆｉｌｍ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｓｅｍｅｎ　Ｃａｓｓｉａｅ　Ｔｏｒａｅｓ；ｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　Ｓ．ａｕｒｅｒｕｓ；ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｅｆｆｅｃｔ；ｂｉｏｆｉｌｍ
　　研究［１－２］显示：近年来耐药金黄色葡萄球菌（Ｓ．
ａｕｒｅｕｓ）感染是医院感染的重要病原菌之一，尤其在
植入性医疗材料表面生长形成生物膜是感染发生的
重要原因。此生物膜一旦形成，抗生素、化学消毒剂
等均难以渗透，易产生耐药性，抗感染治疗效果不
佳。因此，对临床耐药菌株生物膜形成及其抑制因素
的研究已成为抗感染领域的研究热点［３－５］。决明子是
医院常用的药用植物，具有清肝明目、润肠通便的功
效。现代药理学研究［６］表明，决明子具有抗菌作用，
是国家卫生部公布的药食同源的物质之一。程玲铃
DOI:10.15991/j.cnki.41-1361/r.2014.01.003
河南大学学报（医学版）　２０１４年２月　第３３卷　第１期 １９　
等［７］研究显示：决明子提取物中大黄素甲醚对金黄色
葡萄球菌等多种细菌均有抑制作用。我们研究首先
对金黄色葡萄球菌菌膜培养条件进行了摸索，然后调
查了２０株不同来源分离株的菌膜形成状况并对草
决明影响细菌生物膜的作用进行了研究，测定了临床
菌株及金葡菌标准菌株最低抑菌浓度及草决明对细
菌生长的影响，初步探讨了草决明抑制细菌生长的作
用机制。为实际环境中菌膜的预防和控制及草决明
的临床用药提供一定的理论及实验依据。
１　材料与方法
１．１　实验材料
①菌种：金黄色葡萄球菌标准菌株２５９２３由河
南大学医学院微生物实验室提供，耐药金葡菌临床分
离菌株（ＭＲＳＡ菌株）２０株由河南大学附属淮河医院
微生物检验科提供。②中药：草决明购于同仁堂大
药房。③培养基：普通肉汤、营养琼脂、胰蛋白胨大豆
肉汤培养基等购于杭州天和微生物试剂有限公司。
１．２　主要仪器
生物安全柜（苏净集团安泰公司）、恒温培养箱
（上海福码）、恒温摇床（Ｔｈｅｒｍｏ　ｆｏｒｍａ）、高速台式离
心机（ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ）、多功能酶标仪（Ｔｈｅｒｍｏ）。
１．３　实验方法
１．３．１　草决明水提液及醇提液的制备　由药学院中
草药实验室提供。
１．３．２　最低抑菌浓度（ＭＩＣ）测定　取活化的金葡
菌，接种于普通肉汤培养基。于２００ｒｐｍ／ｍｉｎ　３７℃
摇床培养７ｈ，经比浊判定菌量后，稀释至含菌量为
１０５～１０６　ｃｆｕ／ｍＬ（０．５麦氏度）的菌悬液为目标菌
液。于９６孔板中，将灭菌后的草决明水提液及醇提
溶液用无菌营养肉汤培养基配置成系列浓度稀释液
（５０、２５、１２．５、６．２５、３．１２５μｇ／ｍＬ），同时用生理盐水
做空白对照，然后在无菌操作条件下，接种对数期的
金黄色葡萄球菌液２０μＬ，摇匀，３７℃培养２４ｈ。受
试菌株的 ＭＩＣ 测定，以微量肉汤稀释法培养２４ｈ
后，肉眼未见细菌生长的药物最低浓度为 ＭＩＣ，经涂
板菌落计数＜５的为最低杀菌浓度。
１．３．３　金黄色葡萄球菌生长抑制实验　金黄色葡
萄球菌培养至对数生长期，用ＬＢ营养肉汤培养基将
其稀释成含菌体１０７ 个／ｍＬ，于３７℃，２００ｒ／ｍｉｎ培
养１２ｈ，每隔２ｈ取样测ＯＤ　６００值，绘制对照组生长
曲线；再取一定量对数期的金黄色葡萄球菌加入到
含草决明醇提溶液的ＬＢ培养基中（草决明醇提液浓
度为１／２ＭＩＣ），使含菌体１０７个／ｍＬ，继续培养并每
隔２ｈ取样测ＯＤ　６００值，制作出草决明醇提液作用
后的金黄色葡萄球菌生长曲线。
１．３．４　生物膜形成实验　将ＴＳＢ肉汤中培养１８ｈ
的金黄色葡萄球菌调至０．５麦氏标准浊度，用 ＴＳＢ
肉汤进行１∶１００稀释，取菌液加入９６孔培养板中，
每株４个平行孔，封好四周，３７℃培养２４ｈ。用微量
移液器小心吸干菌液后，用ＰＢＳ（ｐＨ７．２）缓冲液洗板
３次，自然干燥；每孔加入甲醇固定液２００μＬ，固定
２０ｍｉｎ。自然晾干，加入５ｇ／Ｌ结晶紫染色２０ｍｉｎ，
用自来水冲洗，干燥。实验以ＴＳＢ肉汤作为空白对
照，金黄色葡萄球菌ＡＴＣＣ２５９２３作为阴性对照。
１．３．５　生物膜形成抑制实验　选用草决明醇提液的
１／２、１／４、１／８ＭＩＣ为单独用药浓度。在９６孔板中加
入草决明醇提液１００μＬ＋菌液１００μＬ；同时设阴性
对照组（不加药物），３７℃培养２４ｈ后进行染色，用
体积分数为９５％的乙醇脱色，酶标仪测定ＯＤ值，计
算出Ａ５７０的平均值。每次测定均重复测３次计算平
均值。
１．３．６　草决明－ＮａＣｌ和草决明－蒸馏水的金葡菌
渗透试验　分别配制菌液浓度为１０６　ｃｆｕ／ｍＬ的含不
同浓度ＮａＣｌ和１／２ＭＩＣ浓度草决明醇提液的营养
肉汤３ｍＬ，３７℃摇菌培养１２ｈ，然后在６００ｎｍ 下，
以不含细菌的营养 肉汤作空白，测定每管吸光度。
分别配制细菌悬液为１０６　ｃｆｕ／ｍＬ的不同浓度草决明
醇提液的营养肉汤３ｍＬ（１／２、１／４、１／８ＭＩＣ浓度），
以不加药物的营养肉汤为阴性对照，３７℃摇菌培养
１２ｈ，蒸馏水处理，于０，４，８，１２和２４ｈ时取１００μＬ
菌悬液在琼脂平板上划线培养并计数菌落。
２　结果
２．１　最低抑菌浓度测定
草决明水提液对金葡菌标准菌株和临床菌株的
ＭＩＣ均为５０μｇ／ｍＬ，醇提液对金葡菌标准菌株和临
床菌株的 ＭＩＣ　２５μｇ／ｍＬ、６．２５μｇ／ｍＬ。
２．２　金黄色葡萄球菌生长曲线
当加入１／２ＭＩＣ的草决明醇提液时，金葡菌生
长的最高ＯＤ值降低，与未加药组比较差异不显著，
见图１。
２．３　金葡菌生物膜形成实验
不同来源分离株的金葡菌粘附实验结果：１２株
菌经结晶紫染色后菌膜形成明显，８株有菌膜形成但
菌膜较薄，金葡菌标准菌株菌膜形成阴性。
２．４　草决明对耐药金葡菌生物膜形成的影响
草决明醇提液的１／２、１／４ＭＩＣ均可明显抑制临
床耐药金葡菌生物膜形成，见图２。
２０　 Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈｅｎａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ）　Ｆｅｂ．　２０１４　Ｖｏｌ．３３　Ｎｏ．１
图１　金葡菌生长曲线（药物浓度：１／２ＭＩＣ） 图２　草决明对耐药金葡菌生物膜形成的影响
２．５　草决明醇提液－ＮａＣｌ的金葡菌渗透试验
不加草决明醇提液时，随着ＮａＣｌ浓度上升，测
试管的吸光度逐渐下降，当ＮａＣ　ｌ浓度达到１４％ 时
吸光度接近零，说明随着ＮａＣｌ浓度上升，存活的细
菌越来越来少，当ＮａＣｌ浓度达到１８％ 时细菌即不
再生长。当１／２ ＭＩＣ 草决明醇提液与不同浓度
ＮａＣｌ共同作用时，ＮａＣｌ浓度分别达到１０％、１２％
时吸光度接近零，说明细菌对ＮａＣｌ溶液的耐受能力
并无明显变化，亦说明药物处理后细菌细胞壁渗透力
未明显改变。
２．６　草决明醇提液－蒸馏水的金葡菌渗透试验
蒸馏水处理后，随时间的延长，不含草决明醇提
液的金葡菌悬液菌落计数逐渐减少，１２ｈ后菌落数迅
速减 少；２４ｈ 后 仍 有 少 数 菌 落 存 活 （耐 药 菌
４９０ｃｆｕ／ｍＬ，标准金葡菌２６７ｃｆｕ／ｍＬ）。随着加入草决
明醇提液浓度的增高，细菌菌落数逐渐减少，随着时
间的变化，１２ｈ后菌落数迅速减少；２４ｈ后仍有少数菌
落存活（１／２ＭＩＣ醇提液中耐药菌２．６ｃｆｕ／ｍｌ，标准金
葡菌６．９ｃｆｕ／ｍＬ）。与未加药菌悬液变化趋势一致，说
明草决明醇提液未明显改变金葡菌细胞壁结构，蒸馏
水对金葡菌的溶菌能力变化不明显，见表１。
表１　金葡菌蒸馏水渗透实验（菌落计数ｃｆｕ／Ｌ）
时间／ｈ
１／２ＭＩＣ
耐药菌／标准菌
１／４ＭＩＣ
耐药菌／标准菌
１／８ＭＩＣ
耐药菌／标准菌
对照
耐药菌／标准菌
０　 ９００／４３　 １　３００／１０２　 １　３３０／５００　 ３　７００／３０００
４　 ８８６／４７　 １　４００／１２９　 １　３００／６００　 ３　５９０／３　０００
８　 ８０２／２１　 １　５００／２３　 １　４８０／５８０　 ４　０００／３　４００
１２　 ５６０／９　 １　９２０／１５　 １　５５０／５６０　 ２　３３６／３　５３０
２４　 ２．６／６．９　 １４．５／１．７　 ２０／１３．２　 ４９０／２６７
３　讨论
耐药金黄色葡萄球菌是细菌生物膜的主要形成
菌，研究显示：细菌形成菌膜后，菌体对外界各种理
化因子的耐受能力会大大增强，能够提高细菌对抗菌
药物的抗性和抗吞噬作用［８－１１］。菌膜状态的金黄色
葡萄球菌可引发多方面的问题：与感染反复发作有
关，也是造成静脉导管及其他医疗装置相关感染的主
要原因，并且由于对抗生素、免疫系统等抵抗能力的
增强，增加了对上述疾病的治疗难度［１２］；因此，对于
金黄色葡萄球菌菌膜的研究十分重要。
有学者研究［７］证实：草决明的乙醇提取物及氯仿
提取物对多种细菌均有抑制作用。为研究草决明对
耐药金葡菌的抗菌作用及菌膜形成的影响，我们从临
床患者体内取得耐药金葡菌，首先观察其生物膜形成
能力，然后挑选生物膜阳性菌株进行研究，以金葡菌
标准菌株为对照，测定了草决明水提液及醇提液的最
低抑菌浓度，结果证明醇提液的抗菌作用较强，尤其
对耐药金葡菌作用明显。然后通过观察草决明醇提
液对耐药金葡菌生物膜形成的影响，证实草决明醇提
液具有抑制耐药金葡菌生物膜形成的作用。最后我
们通过草决明－ＮａＣｌ和草决明－蒸馏水的金葡菌渗
透试验，探讨了不同浓度草决明醇提液对金葡菌细胞
壁的影响，结果证实：随着醇提液浓度的升高，金葡菌
细胞壁的渗透能力无明显变化，说明草决明醇提液并
未通过对金葡菌细胞壁的渗透作用影响金葡菌生物
膜形成，其生物膜抑制作用机制有待进一步研究。
（下转第４０页）
４０　 Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈｅｎａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ）　Ｆｅｂ．　２０１４　Ｖｏｌ．３３　Ｎｏ．１
ｉｎｄｕｃｅｓ　ａ　ｓｋｉｎ－ｈｏｍｉｎｇ　ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ　ｃｅｌｓ　ａｎｄ
Ｔｃｅｌｓ　ｔｈｅｙ　ｓｔｉｍｕｌａｔｅ［Ｊ］．Ｅｕｒ　Ｊ　Ｉｍｍｕｎｏｌ，２０１２，４２（５）：
１　３３７－１　３５３．
［７］Ｖｅｅｒａｐｐａｎ　Ｓ　Ｇ，Ｏ’Ｍｏｒａｉｎ　Ｃ　Ａ，Ｄａｌｙ　Ｊ　Ｓ，ｅｔ　ａｌ．Ｒｅｖｉｅｗ
ａｒｔｉｃｌｅ：ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ａｎｔｉｔｕｍｏｕｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ－αｏｎ　ｂｏｎｅ
ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ　ｉｎ　ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｂｏｗｅｌ　ｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ］．Ａｌｉｍｅｎｔａ－
ｒｙ　ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ　＆ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，２０１１，３３（１２）：１　２６１－
１　２７２．
［８］Ｗｅｉｔｚｍａｎｎ　Ｍ　Ｎ．Ｔｈｅ　Ｒｏｌｅ　ｏｆ　Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ，
ｔｈｅ　ＲＡＮＫＬ／ＯＰＧ　Ａｘｉｓ，ａｎｄ　ｔｈｅ　Ｉｍｍｕｎｏｓｋｅｌｅｔａｌ　Ｉｎｔｅｒ－
ｆａｃｅ　ｉｎ　Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｂｏｎｅ　Ｔｕｒｎｏｖｅｒ　ａｎｄ　Ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ
［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃａ，２　０１３（２　０１３）：１２５　７０５．
［９］Ｘｉｏｎｇ　Ｊ　Ｈ，Ｏ＇Ｂｒｉｅｎ　Ｃ　Ａ．Ｏｓｔｅｏｃｙｔｅ　ＲＡＮＫＬ：ｎｅｗ　ｉｎ－
ｓｉｇｈｔｓ　ｉｎｔｏ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆ　ｂｏｎｅ　ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ［Ｊ］．Ｊ　Ｂｏｎｅ
Ｍｉｎｅｒ　Ｒｅｓ，２０１２，２７（３）：４９９－５０５．
［１０］Ｂａｕｄ’ｈｕｉｎ　Ｍ，Ｄｕｐｌｏｍｂ　Ｌ，Ｔｅｌｅｔｃｈｅａ　Ｓ，ｅｔ　ａｌ．Ｏｓｔｅｏ－
ｐｒｏｔｅｇｅｒｉｎ：Ｍｕｌｔｉｐｌｅ　ｐａｒｔｎｅｒｓ　ｆｏｒ　ｍｕｌｔｉｐｌｅ　ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ［Ｊ］．
Ｃｙｔｏｋｉｎｅ　Ｇｒｏｗｔｈ　Ｆａｃｔｏｒ　Ｒｅｖ，２０１３，２４（５）：４０１－４０９．
［１１］Ｔａｋａｙａｎａｇｉ　Ｈ．Ｏｓｔｅｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ：ｓｈａｒｅｄ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ
ａｎｄ　ｃｒｏｓｓｔａｌｋ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｉｍｍｕｎｅ　ａｎｄ　ｂｏｎｅ　ｓｙｓｔｅｍｓ［Ｊ］．
Ｎａｔ　Ｒｅｖ　Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００７，７（４）：２９２－３０４．
［１２］Ｍｏｓｃｈｅｎ　Ａ　Ｒ，Ｋａｓｅｒ　Ａ，Ｅｎｒｉｃｈ　Ｂ，ｅｔ　ａｌ．Ｔｈｅ　ＲＡＮＫＬ／
ＯＰＧ　ｓｙｓｔｅｍ　ｉｓ　ａｃｔｉｖａｔｅｄ　ｉｎ　ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｂｏｗｅｌ　ｄｉｓｅａｓｅ
ａｎｄ　ｒｅｌａｔｅｓ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｓｔａｔｅ　ｏｆ　ｂｏｎｅ　ｌｏｓｓ［Ｊ］．Ｇｕｔ，２００５，５４
（４）：４７９－４８７．
［１３］Ａｓｈｃｒｏｆｔ　Ａ　Ｊ，Ｃｒｕｉｃｋｓｈａｎｋ　Ｓ　Ｍ，Ｃｒｏｕｃｈｅｒ　Ｐ　Ｉ，ｅｔ　ａｌ．
Ｃｏｌｏｎｉｃ　ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ　ｃｅｌｓ，ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ　ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，ａｎｄ　Ｔ
ｃｅｌ－ｍｅｄｉａｔｅｄ　ｂｏｎｅ　ｄｅｓｔｒｕｃｔｉｏｎ　ａｒｅ　ｍｏｄｕｌａｔｅｄ　ｂｙ　ｒｅｃｏｍｂｉ－
ｎａｎｔ　ｏｓｔｅｏｐｒｏｔｅｇｅｒｉｎ［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，２００３，１９（６）：８４９－
８６１．
［１４］Ｔｕｒｋ　Ｎ，Ｃｕｋｏｖｉｃ－Ｃａｖｋａ　Ｓ，Ｋｏｒｓｉｃ　Ｍ，ｅｔ　ａｌ．Ｐｒｏｉｎｆｌａｍ－
ｍａｔｏｒｙ　ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ　ａｎｄ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ａｃｔｉｖａｔｏｒ　ｏｆ　ｎｕｃｌｅａｒ　ｆａｃｔｏｒ
ｋａｐｐａ　Ｂ－ｌｉｇａｎｄ／ｏｓｔｅｏｐｒｏｔｅｇｅｒｉｎ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｂｏｎｅ　ｄｅ－
ｔｅｒｉｏｒａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　Ｃｒｏｈｎ’ｓ　ｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ］．Ｅｕｒ　Ｊ
Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ　Ｈｅｐａｔｏｌ，２００９，２１（２）：１５９－１６６．
［责任编辑　姬　荷］
（上接第２０页）
参考文献：
［１］Ｃｏｓｔａ　Ｍ　Ｏ，Ｂｅｌｔｒａｍｅ　Ｃ　Ｏ，Ｆｅｒｒｅｉｒａ　Ｆ　Ａ，ｅｔ　ａｌ．Ｃｏｍｐｌｅｔｅ
Ｇｅｎｏｍｅ　Ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ａ　Ｖａｒｉａｎｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｍｅｔｈｉｃｉｌｉｎ－Ｒｅｓｉｓｔａｎｔ
Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　ＳＴ２３９Ｌｉｎｅａｇｅ，Ｓｔｒａｉｎ　ＢＭＢ９３９３，
Ｄｉｓｐｌａｙｉｎｇ　Ｓｕｐｅｒｉｏｒ　Ａｂｉｌｉｔｙ　Ｔｏ　Ａｃｃｕｍｕｌａｔｅ　ｉｃａ－Ｉｎｄｅｐｅｎｄ－
ｅｎｔ　Ｂｉｏｆｉｌｍ［Ｊ］．Ｇｅｎｏｍｅ　Ａｎｎｏｕｎｃ，２０１３，１（４）：１－２．
［２］Ｇｈａｆｏｕｒｉａｎ　Ｓ，Ｍｏｈｅｂｉ　Ｒ，Ｒｅｚａｅｉ　Ｍ，ｅｔ　ａｌ．Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ
ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｂｉｏｆｉｌｍ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ａｍｏｎｇ　ＭＲＳＡ　ａｎｄ　ＭＳＳＡ
ｓｔｒａｉｎｓ［Ｊ］．Ｒｏｕｍ　Ａｒｃｈ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ　Ｉｍｍｕｎｏｌ，２０１２，７１（４）：
１７５－１８２．
［３］Ｍａｓａｄｅｈ　Ｍ　Ｍ，Ｍｈａｉｄａｔ　Ｎ　Ｍ，Ａｌｚｏｕｂｉ　Ｋ　Ｈ，ｅｔ　ａｌ．Ｉｎ
ｖｉｔｒｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ　ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｂｉｏ－
ｆｉｌｍ－ｆｏｒｍｉｎｇ　Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ　ａｎｄ　Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ
ａｕｒｅｕｓ：ｐｏｓｓｉｂｌｅ　ｒｏｌｅ　ｏｆ　ｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｎｄ　ｍｅｍｂｒａｎｅ
ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ［Ｊ］．Ｉｎｆｅｃｔ　Ｄｒｕｇ　Ｒｅｓｉｓｔ，２０１３，５（６）：２７
－３２．
［４］Ｂａｋｋｉｙａｒａｊ　Ｄ，Ｎａｎｄｈｉｎｉ　Ｊ　Ｒ，Ｍａｌａｔｈｙ　Ｂ，ｅｔ　ａｌ．Ｔｈｅ　ａｎｔｉ－
ｂｉｏｆｉｌｍ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｏｆ　ｐｏｍｅｇｒａｎａｔｅ（Ｐｕｎｉｃａ　ｇｒａｎａｔｕｍ　Ｌ．）
ｅｘｔｒａｃｔ　ａｇａｉｎｓｔ　ｈｕｍａｎ　ｂａｃｔｅｒｉａｌ　ａｎｄ　ｆｕｎｇａｌ　ｐａｔｈｏｇｅｎｓ［Ｊ］．
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［５］Ｍｏｏｔｚ　Ｊ　Ｍ，Ｍａｌｏｎｅ　Ｃ　Ｌ，Ｓｈａｗ　Ｌ　Ｎ，ｅｔ　ａｌ．Ｓｔａｐｈｏｐａｉｎｓ
Ｍｏｄｕｌａｔｅ　Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　Ｂｉｏｆｉｌｍ　Ｉｎｔｅｇｒｉｔｙ ［Ｊ］．
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［８］Ｓａｖａｇｅ　Ｖ　Ｊ，Ｃｈｏｐｒａ　Ｉ，Ｏ＇Ｎｅｉｌ　Ａ　Ｊ．Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ
ｂｉｏｆｉｌｍｓ　ｐｒｏｍｏｔｅ　ｈｏｒｉｚｏｎｔａｌ　ｔｒａｎｓｆｅｒ　ｏｆ　ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ　ｒｅｓｉｓｔ－
ａｎｃｅ［Ｊ］．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ　Ａｇｅｎｔｓ　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，２０１３，５７（４）：
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［９］Ｐａｙｎｅ　Ｄ　Ｅ，Ｍａｒｔｉｎ　Ｎ　Ｒ，Ｐａｒｚｙｃｈ　Ｋ　Ｒ，ｅｔ　ａｌ．Ｔａｎｎｉｃ　ａｃｉｄ
ｉｎｈｉｂｉｔｓ　Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　ｓｕｒｆａｃｅ　ｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎ　ｉｎ　ａｎ
ＩｓａＡ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｍａｎｎｅｒ［Ｊ］．Ｉｎｆｅｃｔ　Ｉｍｍｕｎ，２０１３，８１（２）：
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［１０］Ｇｏｐａｌ　Ｒ，Ｌｅｅ　Ｊ　Ｈ，Ｋｉｍ　Ｙ　Ｇ，ｅｔ　ａｌ．Ａｎｔｉ－ｍｉｃｒｏｂｉａｌ，ａｎ－
ｔｉ－ｂｉｏｆｉｌｍ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ａｎｄ　ｃｅｌ　ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ＮＲＣ－１６ｐｅｐ－
ｔｉｄｅ　ｄｅｒｉｖｅｄ　ｆｒｏｍ　ｗｉｔｃｈ　ｆｌｏｕｎｄｅｒ，Ｇｌｙｐｔｏｃｅｐｈａｌｕｓ　ｃｙｎｏ－
ｇｌｏｓｓｕｓ［Ｊ］．Ｍａｒ　Ｄｒｕｇｓ，２０１３，２８（６）：１　８３６－１　８５２．
［１１］Ｆａｌａｒｅｒｏ　Ａ，Ｓｋｏｇｍａｎ　Ｍ，Ｋｕｊａｌａ　Ｊ，ｅｔ　ａｌ．（＋）－Ｄｅ－
ｈｙｄｒｏａｂｉｅｔｉｃ　Ａｃｉｄ，ａｎ　Ａｂｉｅｔａｎｅ－Ｔｙｐｅ　Ｄｉｔｅｒｐｅｎｅ，Ｉｎｈｉｂｉｔｓ
Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　Ｂｉｏｆｉｌｍｓ　ｉｎ　Ｖｉｔｒｏ［Ｊ］．Ｉｎｔ　Ｊ　Ｍｏｌ
Ｓｃｉ，２０１３，５（６）：１２　０５４－１２　０７２．
［１２］Ｄｉｃｉｃｃｏ　Ｍ，Ｎｅｅｔｈｉｒａｊａｎ　Ｓ，Ｓｉｎｇｈ　Ａ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｆｆｉｃａｃｙ　ｏｆ
ｃｌａｒｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ　ｏｎ　ｂｉｏｆｉｌｍ　ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｅｔｈｉｃｉｌｉｎ－ｒｅｓｉｓｔ－
ａｎｔ　Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ｐｓｅｕｄｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｓ［Ｊ］．ＢＭＣ　Ｖｅｔ　Ｒｅｓ，
２０１２，２１（８）：１－７．
［责任编辑　李武营］