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夜交藤中总黄酮的超声提取及含量测定



全 文 :3.4 有机成分分析 将索氏提取的浓缩液 A、B蒸干 , 用色谱甲
醇溶解提取物 , 并进行高效液相色谱分析(见图 4 ~ 5)。 实验结
果表明 , “佐塔”中非极性成分较少 , 而乙醇提取物中含有相对较
多的有机成分 , 这些有机成分还有待进一步分析。
图 4 “佐塔 ”乙醇提取液分析结果
图 5 “佐塔 ”石油醚提取液分析结果
4 讨论
曾有文献对 “佐塔 ”的微结构与成分进行了报道 , 本文就在
此研究的基础上 , 对藏药 “佐塔”进行系统性研究 , 从研究结果中
可以看出 , “佐塔”中含三十多种元素 , 其中主要成分为 S和 Hg,
其所含晶系有六方 HgS、单质 C、Fe3O4 等 , 其颗粒大小为 1 ~
5μm,基本以积聚态的形式存在 , 且形状和分布都不规则。本次
结果在晶体特征上基本相似 ,而在元素组成以及微结构上与前者
的研究有所差异 , 其原因可能是:①藏药 “佐塔”炮制工艺繁杂 ,
且全手工操作在其炼制过程因人而异 ,会造成其矿物学特征如化
学组成 、晶体结构 、形态及微量元素的含量差异;②两次的实验条
件有所不同也可能是造成结果有差异的原因。
根据对 “佐塔”样品进行微结构与成分分析 , 发现 “佐塔 ”中
存在无机和有机成分 , “佐塔 ”在藏药中发挥的增效作用 , 可能是
颗粒表面化效应 [ 10] ,也可能是其中的有机成分入机体病灶而发
挥了药效 , 但具体的药效成分以及发挥作用的机制还有待于进一
步深入研究。
参考文献:
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收稿日期:2009-11-23; 修订日期:2010-03-31
基金项目:石河子大学骨干教师资助基金(No.HG05002)
作者简介:王自军(1971-),男(汉族),陕西宁强人 ,现任石河子大学化学
化工学院副教授 ,硕士学位 ,主要从事药物提取和有机化学的教学和研究
工作.
夜交藤中总黄酮的超声提取及含量测定
王自军
(石河子大学化学化工学院 ,新疆 石河子 832000)
摘要:目的 从夜交藤中提取总黄酮 , 并测定其含量。方法 运用超声技术提取夜交藤总黄酮 ,用比色法测定总黄酮含量。
结果 测得夜交藤中总黄酮含量为 9.379% , 平均回收率为 98.8% ,相对标准偏差(RSD)为 2.27%(n= 6)。 结论 运
用超声技术从夜交藤中提取总黄酮 ,反应速度加快 , 提高了提取效率。
关键词:夜交藤; 总黄酮; 超声提取; 含量测定
DOI标识:doi:10.3969 /j.issn.1008-0805.2010.12.084
中图分类号:R284.2  文献标识码:B  文章编号:1008-0805(2010)12-3211-01
  夜交藤(CaulisPloygonimultiflori, YJT), 又名首乌藤 , 为蓼科
植物何首乌的藤茎或带叶藤茎 [ 1] 。性甘微苦 、平 , 养心安神 , 通
络祛风 , 具有养血祛风止痛之效 , 并具有抗炎抑菌作用 [ 2] , 用于
治疗失眠 、劳伤 、多汗 、血虚身痛 、痈疽 、瘰疬 、风疮疥癣 [ 3] 。
超声技术的应用 , 近年来得到很大发展。超声具有穿透力
强 、选择性高等特点。超声技术可以大大加快反应速度 , 缩短反
应时间。超声技术应用于植物细胞破壁 ,有效地提高了收率 [ 4] 。
对于夜交藤总黄酮的其它提取方法还未见报道 ,我们首次运
用超声技术辅助测定夜交藤中总黄酮的含量 [ 5] , 反应速度加快 ,
实验结果比较令人满意。
1 仪器 、样品及试剂
UV-2401型分光光度计(日本岛津), DL-360超声波仪
(35kHz, 浙江宁波市象山县石浦海天电子仪器厂)。对照品芦丁
购自中国药品生物制品检定所 ,其余试剂均为分析纯。夜交藤购
自石河子中药店 ,粉碎后备用。
2 方法与结果
2.1 测定方法依据 以芦丁为对照品测定夜交藤中总黄酮含量 ,
加入铝离子试剂 ,同时控制适宜 pH值 , 使黄酮化合物与铝盐形
成配合物在可见光区能获得稳定的特征吸收峰。
2.2 测定方法建立
2.2.1 标准曲线制备 精密称取芦丁对照品 10 mg, 置 25 ml容
量瓶中 , 加 80%乙醇溶解 , 定容 , 精密吸取 0.0, 0.2, 0.4, 0.6,
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2010VOL.21NO.12 时珍国医国药 2010年第 21卷第 12期
0.8, 1.0ml,分置于 10 ml容量瓶中 ,加 5%亚硝酸钠 0.3ml,放置
6 min,再加 10%硝酸铝 0.3ml,放置 6 min, 加 4%氢氧化钠 4 ml,
加水至刻度 , 摇匀 。进行全波长扫描 , 在 510 nm处均有最大吸
收。以 510 mn处测得的吸收度 A对浓度 C回归 ,得回归方程:A
=11.225C+0.0027, r=0.999 13, 在 8 ~ 40 μg/ml的范围内 , 浓
度与吸收度有良好的线性关系。
2.2.2 回收率实验 精密称取粉碎过的夜交藤供试品 , 测定含
量 , 再加入适量的芦丁对照品 ,按标准曲线制备项进行操作 ,由回
归方程求出黄酮含量 ,计算回收率。 结果见表 1。平均回收率为
98.8%, RSD=2.27%(n=6)。
2.2.3 精密度实验 精密称取夜交藤供试品 3份 , 每份测试 3
次 , x±s=9.367 ±0.007,相对标准偏差(RSD)为 0.075%(n=
3)。结果见表 2。
表 1 回收率实验结果
实验号 芦丁对照品量m/mg
测得总黄酮量
m/mg
回收率
(%)
1 0.200 0.195 97.5
2 0.200 0.192 96.0
3 0.200 0.201 100.5
4 0.400 0.391 97.8
5 0.400 0.396 99.0
6 0.400 0.409 102.2
表 2 精密度实验结果
实验号 测定次数 测得黄酮总含量m/mg x±s
RSD
(%)
1 9.312
1 2 9.461 9.374±0.077 7 0.83
3 9.348
1 9.451
2 2 9.362 9.367±0.081 1 0.87
3 9.289
1 9.467
3 2 9.321 9.360±0.094 2 1.01
3 9.291
2.3 样品测定 精密称取夜交藤粉末 1g置于碘量瓶中 ,用 80%
乙醇超声提取两次 ,每次提取时间 40 min, 提尽黄酮。另用少量
80%乙醇多次洗涤夜交藤 , 并入提取液中 ,定量转移入 100 ml容
量瓶中 ,用 80%乙醇定容至刻度 , 摇匀 , 即得测总黄酮之夜交藤
样品液。将测总黄酮之样品液定量稀释后 ,再精密吸取稀释液适
量于 10ml容量瓶中 ,照标准曲线制备项下方法操作 , 测定吸收
度 , 由回归方程求出稀释液中总黄酮浓度。结果见表 3。
表 3 夜交藤中总黄酮含量
测定次数 称重量m/g
总黄酮含量
(%) x±s
RSD
(%)
1 1.000 4 9.583
2 1.000 0 9.174 9.379±0.205 2.19
3 1.000 1 9.379
3 讨论
黄酮类化合物具有降脂 、抗血栓 、抗氧化 、降糖等多种生理活
性 [ 6] 。超声技术应用于黄酮的提取 , 可以大大地加快反应速度 ,
有效地提高回收率和药材的利用率。本实验采用超声技术提取
夜交藤总黄酮(总黄酮含量为 9.379%), 大大缩短了提取时间 ,
提高了提取效率 。关于利用超声技术从夜交藤中提取黄酮类物
质的提取工艺 ,如最佳时间和最佳频率等 , 在进一步研究之中。
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收稿日期:2010-01-31; 修订日期:2010-05-07
基金项目:湖北工业大学发酵工程省部共建教育部重点实验室开放基金
作者简介:康 旭(1972-),男(汉族),陕西扶风人 ,现任湖北工业大学生
物工程学院讲师 ,硕士学位 ,主要从事食品生物技术工作.
*通讯作者简介:袁江兰(1970-), 女(汉族),江苏睢宁人 , 现任湖北工业
大学生物工程学院副教授 ,博士学位 ,主要从事食品生物技术工作.
微生物转化半枝莲抑菌活性的研究
康 旭 ,李冬生 ,胡 征 , 袁江兰*
(湖北工业大学生物工程学院 ·发酵工程省部共建教育部重点实验室 ,湖北 武汉 430068)
摘要:目的 研究微生物转化对半枝莲抑菌活性的影响。方法 以冬虫夏草为菌种对半枝莲进行微生物转化 , 采用滤纸片
法和微量稀释法检测转化前后半枝莲水提液和挥发油的抑菌活性。结果 发酵液对腐生葡萄球菌和鼠伤寒沙门氏菌抑
制作用明显增强;发酵后挥发油对阴沟肠杆菌 、腐生葡萄球菌抑制作用微弱增强。结论 半枝莲经冬虫夏草菌生物转化
后对某些菌抑制作用有所增强。
关键词:冬虫夏草菌; 半枝莲; 微生物转化; 抑菌活性
DOI标识:doi:10.3969 /j.issn.1008-0805.2010.12.085
中图分类号:R284.2  文献标识码:B  文章编号:1008-0805(2010)12-3212-03
  半枝莲 , 又名狭叶韩信草 , 来源于唇形科植物半枝莲 Scutel- lariabarbataD.Don全草。生长于池沼边 、田边或路旁湿润处 , 产
于江苏 、江西 、福建 、广东 、广西等地。全草含生物碱 、黄酮苷 、酚
类 、甾体 [ 1 , 2] 。现代药理学研究表明 , 半枝莲具有解热 、抗癌 、抑
菌 、抗氧活性 、护肝作用 [ 3 , 4] 。冬虫夏草菌(Cordycepssinensis)为
麦角菌科(Clavicipitaceae)、虫草属 Cordyceps(Fr.)Link真菌。 冬
虫夏草具有抗菌 、抗衰老 、抗心肌缺血及心律失常 、增强免疫 、促
进造血功能等作用 ,在抗菌方面 ,体外试验证明 [ 5]冬虫夏草发酵
液中的虫草素对金黄色葡萄球菌 、大肠埃希菌 、枯草芽胞杆菌 、苏
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时珍国医国药 2010年第 21卷第 12期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2010VOL.21NO.12