全 文 ：一 1 382 一 药物分析杂志C hi nJ P h a n t rA na l2 05 0, 25 ( 1 1 )
R P 一 H P L C 法测定雪上一枝篙中雪上一枝篙甲素含量
高绍阳 , 喻萍 , 陈武元 , 杨金永 ,余仕汝
(昆明滇虹药业有限公司 昆明 65 01 06 )
摘要 目的 :建立测定云南常用药材雪上一枝篙 (cA on it uln bacr 咖。 du m iD els . ) 中雪上一枝篙甲素的反相高效液相色谱法 ,考
察 3 种不同来源的雪上一枝篙中雪上一枝篙甲素的含量 。 方法 :采用 xE ten d 一 C l。色谱柱 ( 250 m m x 4 . 6 m m , 5 林m ) ;磷酸盐缓
冲溶液 ( p H 7 . 3) 一 甲醇 ( 2 :8 72) 为流动相 ;检测波长为 Z 10 unr 。 结果 :雪上一枝篙中雪 上一枝篙甲素成分与其他成分能得到
很好的分离 ,不同产地雪上一枝篙药材中雪上一枝篙甲素含量差异较大 , 以云南东川产的雪上一枝篙甲素含量最高。 雪上一
枝篙甲素平均回收率为 98 . 4 % , RS D 为 1 . 7% ( n 二 5 ) 。 结论 :该方法便捷 、灵敏 、 准确 , 重复性好 ,可以控制该药材的质量。
关键词 : 雪上一枝篙 ;雪上一枝篙甲素 ;反相液相色谱法
R P 一 H P L C D e t e r m i n a t i o n Of B ul l a it n e A in
A e o n而m bar c hy P o du m D i e l s .
G AO Sh a o 一 y a n g , Y U P i n g , C H E N W u 一 y u a n , Y A N G Ji n 一 y o n g , Y U S h i 一 ur
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w h ie h e o m m o己 y u s e d i n tr a d i t i o n al m e d i e i n e o f Y u n n a n . T o e h e e k t h e e o n te n t o f bul at i n e A i n A e o n i-
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.
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.
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,
5 林m )
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m o b il e Ph a s e e o n s i st e d of p h o s p h at e b u f( 三r ( p H 7
.
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一 m e t h an o l ( 2 8 : 7 2 ) w a s u s e d
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而 n 一 ’ , a n d 山e u v d e te e t o r w va e l e n gt h w a s 2 10 n m . R es ul st : B ul a ti n e A w a s w e l s e p a r at e d for m o ht e r e o m p o u n d s
o f Ae o n i t u m bar
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e切 o d u m D i e l s for m D o n g e h u an , Y u n n an w as h ihg e r
th an t h at o f for m ot h
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T he a v e ar g e er e o v e叮 Of b u l at i n e A w a s 9 8 . 4% a n d R SD w a s 1 . 7% ( n = 5 ) · C o n ·
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n i r u m bacr h” o d u m D i e l s .
K ey w
o r ds : A e o n it u m bacr 咖o du m D i e l s . ; b u l a ti n e A ; HPL C
雪上一枝篙系毛蓖科植物雪上 一枝篙 ( A co in -
r u m 占acr 切 o d u m D i e l s . ) 的干燥块根 , 具有活血 、镇
痛 、抗炎等作用 , 是云南地区民间习用的药材 , 收载
于 19 % 年版《云南药品标准 》 , 现在多个药物制剂
中均有使用 。 根据文献报道 ,雪上一枝篙含有如雪
上一枝篙 甲素等多种二菇类生物碱 , 因无相应强 吸
收基团 ,其含量测定一般采用离子对萃取分光光度
法 ,未见有文献报道用高效液相色谱法测定其中主
要成分的含量 。 现采用 RP 一 H PL C 测定雪上一枝
篙中主要成分雪上一枝篙甲素的含量 ,并考察了不
同产地药材的含量差异 。 结果表明 ,该法简便准确 ,
不同产地的雪上一枝篙 甲素含量差异较大 , 以云南
东川产的雪上一枝篙甲素含量最高 。
1 仪器与试药
A ig le nt H P 1 10 0 型高效液相色谱仪 ( 四元泵 、
V WD 检测器 、 自动进样器 ) 。 雪上一枝篙甲素对照
品由中国药品生物制品检定所提供 , 编号为 : 895 -
20 0 1
。 雪上一枝篙药材为各地市售 (云南东川 、 云
南丽江 、 四川等 ) ,均经云南省药品检验所蔡毓琼主
任药师鉴定为雪上一枝篙 ( A co int u m 6acr 切od u m
iD els
.
)的干燥块根 。 甲醇为色谱纯 ,其余试剂均为
分析纯 。
2 色谱条件
色谱柱 : E x t e n d 一 C , 8 ( 2 5 0 m m x 4 . 6 un
,
5 林m ,
A igl
e nt ) ;流动相 : 磷酸盐缓冲溶液 ( 取磷酸氢二钠
1
.
97 9
, 磷酸二氢钾 0 . 2 9 , 加水溶解并稀释至
药物分析杂志 Ci hn Jh P ~n A a l2 05
,
25 ( 1 1) 一 138 3 一
1(X洲) m L ,用 80 % 的磷酸溶液调节 p H 至 7 , 3) 一 甲
醇 ( 2 8 : 7 2 ) ;检测波长为 2 1 0 n m ;柱温 : 3 0 ℃ ;进样
量 10 卜L , 雪上一枝篙甲素保留时间为 巧 . 5 m in ,见
图 l 一 B 。
必 _~ ` ~~ ~ ~~ ~ ~~ ~ ~~ ~ ~~
0 10 2 0
A
图 1 溶剂 ( A ) 、雪上一枝篙甲素对照品 ( B) 及雪上一枝篙药材 ( )C
色谱图
iF g 1 H PLC e h or m a t o g 旧 nIS Of sol v e n t ( A ) , b u lla t in e A e he而 e al r e fe -r
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B ) an d Aco
n “ ur n 份 ac h” dO “ n z D i e l , ( C )
1
. 雪上一枝篙甲素 ( blu iat n 。 )A
3 溶液制备
3
.
1 对照品溶液 精密称取在 80 ℃干燥至恒重的
雪上一枝简甲素对照品适量 ,加甲醇制成每 1 n 1 L 含
5 0 林g 的溶液 ,即得 。
3
.
2 供试品溶液 精密称取样品细粉 1 . 5 9 , 加氨
试液 l rnL 润湿 ,加氯仿 30 m L , 振摇超声 5 而 n ,静
置过夜 ,超声 5 而 n ,滤过 ,残渣用氯仿振摇洗涤 4 次
( 4 x 10 mIJ )
,合并提取液和洗涤液 , 用适量的无水
硫酸钠脱水 , 滤过 , 无水硫酸钠用氯仿洗涤 2 次
( 2 x s mIJ )
, 收集滤液于 60 ℃的水浴上挥至近干 ,
加无水乙醇 1 m L 自然挥干 ,残渣加甲醇溶解转移定
容至 25 mL 量瓶中 , 超声 5 而n ,静止片刻 ,滤过 ,取
滤液过 0 . 45 林m 微孔滤膜 , 即得 。
4 线性关系考察
精密称取雪上一枝篙甲素对照品 3 . 36 m g , 用
甲醉溶解并稀释至 25 m L ,依 “ 2 ” 项下的色谱条件 ,
分别进样 1 . 0 , 2 . 5 , 5 . 0 , 7 . 5 , 10 , 15 . 0 , 2 0 , 2 5 , 3 0 ,
35 林L ,测定峰面积 , 以峰面积积分值对相应的对照
品浓度进行回归 。 雪上一枝篙甲素的回归方程为 :
A = 6
.
4 12 x 10 3 C + 12
.
3 2 r 二 0
.
9 9 9 9
结果表明 : 雪上一枝篙 甲素浓度在 13 . 4 -
47 0
.
4 此 · m L 一 ’ 之间线性关系 良好 。
5 精密度试验
精密吸取 “ 3 . 1” 项下的对照品溶液 10 林L , 连续
进样 6 次 ,雪上一枝篙甲素对照品峰面积积分值的
SR D 为 0 . 5% ( n = 6 ) 。
6 重复性试验
取云南东川产雪上一枝篙药材 1 批 (批号为
0 203 01 )
,按 “ 3 . 2 ” 项下方法平行制备 5 份供试品溶
液 ,分别测定其含量 ,结果样品中雪上一枝篙甲素平
均含量为 0 . 2 1% , R SD 为 1 . 3% ( n 二 5 ) 。
7 稳定性试验
取配制好的供试品溶液 ,分别在 0 , 3 , 6 , 1 8 , 24 h
测定其峰面积 , 结果峰面积的 SR D 为 0 . 4% ( n =
5 )
,表明供试品溶液在 24 h 内稳定 。
8 加样回收试验
取已测知含量的雪上一枝篙 (含雪上一枝篙甲
素 0 . 21 % )样品 0 . 75 9 , 共 5 `份 ,精密称定 , 分别加
人精密称定的雪上一枝篙甲素 2 . 0 m g ,按 “ 3 . 2 ” 项
下方法制备溶液 ,进样测定 ,计算回收率 。 结果雪上
一枝篙甲素的平均回收率 ( n = 5) 为 98 . 4% , SR D 为
1
.
7%
。
9 样品测定
按上述测定方法对 3 种不同产地来源的雪上一
枝篙样品进行测定 , 以外标法计算 。 结果见表 1 。
表 1 雪上一枝篙中雪上一枝筒甲素的含且
测定结果 (% ,介 二 4)
T a b 1 n e ` I ,I st of b u l a吐n e A d e et r m i . a 柱o n in
Aco
n如 m bacr 匆甲 o du m 珑ies
产地
( p耐 u e认 g ~ )
批号
(肠橄No . )
雪上一枝篙甲素
( b
u】al it n e A )
注7472减282-x1地L比.0)n0以云南东川
oD
n g c h~
, Y
~
云南丽江
(均 ian g , Y一 )
四川 ( S i e hu an )
0 20 30 1
0 20 302
03 05 0 1
0 30 70 1
皿 0 10 1
能 030 1
03 1 10 1
03 080 1
03 10 1 未检出( ont de t ce 企司 )
1 0 讨论
10
.
1 雪上一枝篙甲素在碱性环境下对热较为敏
感 ,考虑最后氯仿液中会残留微量的碱性水溶液 ,故
一 1 8 3 4一 药物分析杂志 Ch i nJPh r maA na lZ) ( X5, 25 ( 1 1 )
在挥干时 ,水浴温度不宜超过 60 ℃ 。
1 0
.
2 因流动相体系 p H 偏碱性 ,会溶解一般 C l: 柱
的硅胶键合相 ,所以 ,在色谱柱的选择上 , 宜选用如
A ig l e n t Ex t e n d 一 C小 X DB 一 C ; 。 、 B D S 等耐碱性的色
谱柱 , 既能获得良好的峰形 , 又能延长色谱柱的使用
寿命 。
参考文献
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(本文于 2 0 5 年 3 月 25 日修改回 )
叫卜 咖月卜 如月 卜 帅 月卜 加月 . , 一冲月卜咖 阅 , 巾月卜 肋月卜 巾 月卜 1 州卜 巾月卜巾川卜 仙门卜仰 , 卜 咖 阅卜 朴月卜 闷 , , 卜 闷 . 险 月卜 比阅卜 一闷卜 闷卜 肋 月卜 一J阅卜 月卜 司卜 巾 月卜 而闷 . 如 月卜 闷卜 叫卜 阳月卜 肋闷卜 闷.
第二届中美药典论坛在京举行
由中 、 美两 国药典委员会主办的 ” 第二届 中美药典论坛 ” 于 20 5 年 10 月 24 日在北京举行 。
国家食品药品监督管理局邵明立局长出席论坛开幕式并致辞 。 邵 明立局长在讲话中指 出 , 中美两 国药
典委员会通过 ” 中美药典论坛 ” 的形式 ,在药品标准领域定期 交流的机制 , 为两国在 医药领域全面开展交流
与合作起到 了良好的示范与借鉴作用 , 希望中美双方今后继续将这种定期交流的合作机制坚持下去 , 不 断加
强中美双方在药品标准管理交流与合作 、及时了解和掌握药品科学技术方 面的最新进展 ,促进药品质量控制
技术的发展和提高 ,最终对中美两 国药品标准的协调起到积极作用 。
论坛期 间 , 来自国内外的专家 、 学者和有关政府官员介绍 了中美药典的概况 、 并就植物 药 ( 营养补 充剂 ) 、 生
物技术和生物制品等方 面的管理规定和技术要求进行研讨交流 。 国家食品药品监督管理局及其直属在京单
位的有关代表 、来自全国 31 个省 ( 自治区 、 直辖市 ) 药品生产 、 检验 、 科研和管理等单位的代表 20 人参加 了
研讨 。
( 中国药典高效液相色谱图集》2 005 年 (第一卷 ) 已出版发行
高效液相色谱法由于具有高选择性 、高灵敏度等特点 , 自《中国药典》 19 8 5 年版首次被引人后 ,随着仪器
的普及 ,该法在药典中的应用不断扩大 , 《中国药典》 20 5 年版中采用高效液相色谱法的项目就有 13 6 项 。
高效液相色谱法已成为药典中最常采用 的主要方法之一 。
该图集是国家药典委员会首次组织编制的高效液相色谱图集 。 该图集首先整理汇集了 《中国药典》
20 0 5 年版一部和二部部分增修订品种中高效液相色谱法品种的色谱图和色谱条件 。
为了便于更进一步理解和掌握药典中高效液相色谱方法 , 我会将逐步地 、 分期分批地组织有关单位把
《中国药典》收载的高效液相色谱方法的色谱图和色谱条件汇集成册 ,供大家在工作中参考 。
该图集采用轻涂纸印刷 ,大 16 开精装 。 定价为人民币 2 85 元 。
联系电话 : 0 10 一 6 7 10 3 3 7 5 、 0 10 一 6 7 15科 8 8 一 6 14
传真电话 : 0 1 0 一 6 7 16 7 19 4
联系人 : 赵曦 、李芸
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