全 文 :收稿日期: 2007 - 10 - 11
基金项目:黑龙江省自然科学基金资助项目 ( D0317)
作者简介:闫立地 ( 1983 - ) ,女,黑龙江大庆人,硕士研究生,研究方向:
中药药理。
通讯作者:李廷利, 男,博士生导师, 主要从事药药理研究工作。 Te:l
0451 - 82193038, E -m ai:l L itingL i8888@ sohu. com
> 0. 05) ,但均未达到正常水平 ( P < 0. 05)。
3 讨 论
TNF -A在免疫介导 GBS发病中起重要作用 [ 2],
它既有局部免疫活性细胞分泌后的直接髓鞘毒效应,
又有破坏血 -神经屏障的间接效应。血 -神经屏障的
破坏与否在 GBS的发病中至关重要, 此屏障一旦破
坏,活化的 T细胞毒性作用则会导致血管炎性改变及
神经髓鞘脱失。研究证明,采用抗 TNF -A抗体可有效
抑制 The ile r病毒引起的免疫性脱髓鞘 [3], 动物实验也
证明采用抗 TNF -A抗体可抑制 GBS[4 ],由此可见,通
过抑制 TNF -A来治疗脱髓鞘疾患是一个重要的途径。
IL - 12是由活化的单核 /巨噬细胞, B细胞等产
生,临床研究资料显示 [5 ], GBS患者急性期重型患者血
清 IL -12水平显著高于轻型患者, 恢复期明显下降。
这提示 IL - 12在 GBS发病机制中可能起致病作用,
且其浓度高低与 GBS严重程度正相关。用 PO180 - 199接
种 C57BL /6(一个 IL -12单体 IL - 12P40基因敲除 IL
- 12),产生 GBS发病延迟,发病率和疾病的严重程度
明显降低, PNS的神经根中 IFN和 TNF -A含量明显
减低, 而 IL - 4含量增多, 说明 IL - 12抑制 Th2细胞
分化为合成 IL - 4, IL - 10等 Th2细胞是导致 GBS发
病的因素之一 [4 ]。
本次实验研究发现, 模型组 TNF -AmRNA、IL -
12mRNA表达明显高于空白组 ( P < 0. 05) , 且在发病
初期即开始升高, 至高峰期达到顶峰。经过治疗后
TNF -AmRNA表达明显下降 ( P < 0. 01), 针刺 14天
后与免疫球蛋白组相比无明显差异, 但与空白组相比
仍未达到正常 ( P < 0. 05)。本实验研究表明: ( 1 )
TNF -AmRNA、IL - 12mRNA是免疫上调因子,参与了
EAN发病。 ( 2)电针膀胱经五脏俞和免疫球蛋白均能
明显抑制 GBS中 TNF -A、IL - 12mRNA的表达,且疗
效相当,但针刺较免疫球蛋白组起效慢。 ( 3)电针膀
胱经五脏俞可以通过抑制 TNF -A、IL - 12免疫上调
因子的过度分泌,即通过抑制 Th1细胞亚群的过度表
达从而发挥治疗 GBS的作用。
参考文献
[ 1 ] 郭向东,许贤豪,林嘉友,等. P2蛋白及其合成肽与实验性变态反
应性神经炎的研究 [ J ].中国神经免疫学和神经病学杂志, 2003,
10( 1) : 25.
[2 ] 马建军,徐军,西村公孝,等. Guillain -Barre综合征患者 HLA和 TNF
基因多态性的研究 [ J ].河南医学研究, 2002, 11(6) : 103 -105.
[ 3 ] Inoue A, KohC - S, Yah ikozaw aH, et a.l The level of tum or n ecro-
sis factor - a p roducingcel ls in the spinal cord correlates w ith the de-
gree ofTheiler. sm u rine encephalo -m oyelitis virus - indu ced d emye-
lination d isease[ J]. Int Imm uno,l 1996, 8: 1009.
[ 4 ] H aggqvist B, Hu ltm an P. E ffcts of deviating the Th2 - response in
m urin e m ercu ry - induced au toimmun ity tow ard s a Th1 - response
[ J]. C lin Exp Imm uno,l 2003, 134 ( 2) : 202.
[ 5 ] 刘洪波,方树友,方伟.格林 -巴利综合征患者血清 IL - 10、IL -
12水平的研究 [ J ].中风与神经疾病杂志, 2001, 18 ( 3) : 166.
夜交藤对自由活动大鼠睡眠时相的影响
闫立地,郭冷秋,刘 颖,李廷利
(黑龙江中医药大学 ,黑龙江 哈尔滨 150040)
摘 要: 目的:观察夜交藤对自由活动大鼠睡眠时相的影响。方法: 按 20g /kg(生药量 )的剂量, 经灌胃途径给予大
鼠, 连续给药 7天后描记大鼠皮质脑电。结果:夜交藤水煎液能延长自由活动大鼠总的睡眠时间 ( P < 0. 01), 在睡眠时
相上主要表现为延长 SWS1和 SWS2,对 REMS没有明显的影响。结论 :夜交藤水煎剂对正常大鼠睡眠周期有一定的影
响, 具有改善睡眠的作用。
关键词: 脑电图;夜交藤; 睡眠时相;中医药疗法;实验研究
中图分类号: R285. 5 文献标识码: A 文章编号: 1000 -1719( 2008) 03 - 0466 - 02
E ffects ofCaulis PolygoniM ultiflori. on Sleeping State of Free -movingRats
GUO Leng - q iu, YAN L i - d i, LIU Y ing
(Heilong jiang University o f Ch inese M edic ine, Harb in 150040, H eilongjiang, China)
Abstrac t: Ob jec tive: To invest the effec ts o f Cau lis Polygon iM ultiflo r.i decoction on sleep ing sta te of free -m ov ing ra ts.
M ethod s: Afte r intraga stric adm inistra tion of C au lis Polygon iM ultiflor.i decoction ( equiv alen t to 20g /kg crude drug) fo r 7 day s,
Po ly som nog raphy was used to reco rd the changes of EEG o f d iffe rent sleeping sta te s in ra.t R esu lts: A fte r adm inistra tion o f Cau lis
Po lygoniM ultiflo r.i decoction, to ta l sleeping time w as inc reased in free -m ov ing rats( P < 0. 01), SW S1 and SWS2 w as obvi-
ously increased on sleeping sta tes bu tREM S changed insignifican tly. C onclusion: The decoc tion of Caulis Po lygoniMu ltiflo r.i has
influence on sleep ing state o f norm a l rats and has im prov ing - sleep effec.t
K eywords: po ly som nog raphy; caulis po lygoni mu ltiflo r.i decoc tion; sleeping sta te; TCM the rapentiv s; expe rim ental study
#466# 辽宁中医杂志 2008年第 35卷第 3期
DOI:10.13192/j.ljtcm.2008.03.150.yanld.066
夜交藤 ( Cau lis Po lygon iM ultiflo r.i )异名首乌藤,
为蓼科植物何首乌的藤茎。具有养心安神,通络驱风
的功效。本实验研究拟通过对大鼠脑电图 ( EEG )的
描记与分析,确定夜交藤对大鼠睡眠周期的影响,为其
养心安神功效提供实验依据。
1 材料与方法
1. 1 动物 W istar大鼠,雄性, 体重 200~ 240g(黑龙
中医药大学实验动物中心提供许可证号: 黑动字第
P00101006)。
1. 2 药物 夜交藤 ( C aulis Po lygoniM u ltiflo r.i ) ,蓼科
植物何首乌的藤茎。经黑龙江中医药大学生药学教研
室孙慧峰鉴定。购于哈尔滨药材公司。
夜交藤的制备方法:称取夜交藤适量,加入 5倍量
蒸馏水, 浸泡 1h, 煎煮 2次, 第 1次 30m in, 第 2次
20m in,合并煎液, 过滤,滤液均浓缩至 2g /mL备用。
1. 3 主要仪器 ND - 97数字化脑电图仪,恒温恒湿
自动光控电子屏蔽室,大鼠脑立体定位仪,有机玻璃笼
(自制 )。
1. 4 试剂 戊巴比妥钠 (上海化学试剂采购供应站
分装厂批号 96 - 01 - 22)。
1. 5 方法 大鼠采用戊巴比妥钠腹腔注射麻醉
( 40mg /kg )后,脑立体定位仪固定, 头部剪毛, 消毒后,
剪去头部皮肤,充分暴露颅骨, 剥离骨膜。分别于颅骨
上 ( AP - 2, R2; AP+ 2, R2)钻孔, 将 2个直径 1mm不
锈钢螺丝钉植入颅骨内,使之与硬脑膜接触,但不穿透
硬脑膜,作为皮层电极; 在额骨正中 ( AP+ 5, R0)钻孔
安置接地电极,并将电极螺丝钉制成微型插座,以牙科
水泥固定 [1 - 4 ]。术后将实验动物置于特定的环境中,
单笼饲养,连续 3天腹腔注射 4万单位青霉素,恢复 7
天,并于术后第 7天将附有导线的插头与大鼠头部电
极插座相连,进行大鼠对电极插座连接的适应性训练,
训练 4. 5h。将埋好记录电极的大鼠, 共 16只,随机分
为 2组,每组 8只,每天保证明暗交替 12h,术后恢复 2
天后, 分别按 20g /kg (生药量 )的剂量,每天 8: 30经灌
胃途径给予实验动物夜交藤水煎液、蒸馏水, 共 7天,
于末次给药 30m in后, 将头部的记录电极通过微型插
座和连接线连接到数字化脑电图仪上, 开始记录脑电
和肌电,每只大鼠描记 2天,取其平均值。
2 结 果
夜交藤对正常大鼠睡眠时间的影响, 见表 1。
表 1 夜交藤对正常大鼠睡眠时相的影响 ( x ? s )
组别 药品 n SW S1 SW S2 REMS TST( min )
Ñ 蒸馏水 8 92. 2 ? 5. 79 12. 50 ? 3. 03 11. 67 ? 1. 82 116. 38 ? 5. 91
Ò 夜交藤水煎液 8 112. 50 ? 11. 27* 21. 13 ? 5. 16* 14. 04 ? 4. 05 147. 54 ? 8. 82*
注:与空白组比较, * P < 0. 01。
从表 1可知, 夜交藤可明显减少大鼠的觉醒时间
(W ) ( P < 0. 01), 延长 TST( P < 0. 01) ,在睡眠时相
上夜交藤主要表现为延长 SWS2 ( P < 0. 05)和 SWS1
( P < 0. 01) ,可增加 SWS。
3 讨 论
夜交藤是中医临床常用的养心安神药,多于其他
药物配伍治疗各种失眠症, 但有关其对睡眠周期影响
的实验研究至今尚未见报道。根据大鼠脑电图, 并参
考有关文献 [ 5- 11], 将大鼠觉醒 -睡眠周期分为觉醒
(W ake )、慢波睡眠 Ñ 期 ( SWS1 )、慢波睡眠 Ò 期
( SWS2 )和快动眼睡眠 ( REM S) 4个时相。睡眠是一种
最基本的生理行为,在睡眠各期中 SWS和 REMS最为
重要。前者对机体的发育和疲劳的恢复起着重要的作
用。此期间生长激素分泌达高峰, 而且脑的葡萄糖代
谢明显降低,脑部的血流量有所下降,提示此期睡眠有
保存脑部能量, 并使整个躯体功能获得恢复的作用。
后者则对脑的发育和智力的发达起重要的作用。本实
验结果表明:夜交藤水煎液能延长自由活动大鼠总的
睡眠时间 ( P < 0. 01), 在睡眠时相上主要表现为延长
SWS1和 SWS2,对 REMS没有明显的影响。据此表明
夜交藤水煎液能够促进机体发育,加快疲劳的恢复,延
长睡眠。
参考文献
[ 1 ] Depoortere H. S om e aspect of the polygraph ic s tudies on sleep -
w ak efu lness cycle in rat[ J]. W aking and s leep, 1980, 4: 47 - 62.
[ 2 ] 朱国庆,钟明奎,张景行,等. 基底外侧杏仁核对睡眠 -觉醒的调
节作用 [ J ].生理学报, 1998, 50( 6 ): 688 - 692.
[ 3 ] 朱国庆,钟明奎,张景行. 5 -羟色胺和环磷腺苷对睡眠的影响
[ J ].中国药理学通报, 1999, 15( 2 ): 141 - 143.
[ 4 ] 李树新,库宝善,林志彬.白细胞介素Ñ 对睡眠的调节 [ J].中国药
理学通报, 1995, 11 ( 3) : 179 - 182.
[ 5 ] C laude Gottesm ann. The transi tion from s low -w ave s leep to paradoxi-
cal s leep: evolving facts and con cep ts of th e neu rophysiolog ical
p rocesses underly ing the in term ed iate s tage of sleep [ J ]. Neu ro-
science and B iobehav ioral Review s, 1996, 20: 367 - 387.
[ 6 ] P ierreGauthier, C hristianA rnaud, Gab rielGando lfo, et a.l Inf luence
of GABA2 recep tor an tagonist on the s leep -w ak ing cycle in the rat
[ J ], Brain Research, 1997, 773: 8 - 14.
[ 7 ] 张杰,王明时.睡眠脑电的研究 [ J ]. 国外医学 # 生物医学工程分
册, 1997, 20 ( 2) : 65 - 68.
[ 8 ] M Yoshim oto, H H iguch,i M Kam ata, et a.l The effects of benzodiaz-
epine ( triazo lam ), cyclpyrrolone ( zop iclone) and im idazopy ridine
( zolp idem ) hypnotics on the frequen cy of h ippocam pal theta activity
and sleep st ru cture in rats [ J ]. Eu ropean Neu rop sychopharm aco logy,
1999, 9: 29 - 35.
[ 9 ] K oich i Saitou, Yoshio Kaneko, Yuk io Sugimoto, et a.l S low w ave sleep
- inducing effects of firs t generation H
1
- antagon is ts [ J ]. B io.l
Ph arm. Bu l,l 1999, 22: 1079 - 1082.
[ 10 ] Im eri L, Mancia M, Opp M R. B lockade of 5 - hydroxytryptam ine
( seroton in) - 2 recep tors alters interleuk in - 1 - induced changes in
rat sleep [ J ]. Neu roscience, 1999, 92: 745 -749.
[ 11 ] Youssef S lisl,i Renaud de Beau repaire. Interleuk in - 1b and calcito-
n in, bu t not corticotropin - releas ing factor, alter s leep cycles w hen
in jected in to the rat hypo thalam iclateral paraven tricu lar area [ J ].
Neu roscience Letters, 1999, 265: 29 - 32.
#467# 辽宁中医杂志 2008年第 35卷第 3期