全 文 ：第 10卷　第 26期　2010年 9月
1671— 1815(2010)26-6515-04　
科　学　技　术　与　工　程
ScienceTechnologyandEngineering
　Vol.10　No.26　Sep.2010
　2010　Sci.Tech.Engng.
医药卫生
乌药叶中总黄酮提取工艺的研究
许海丹　顾霞敏
(浙江省台州学院医药化工学院 ,临海 317000)
摘　要　以总黄酮为考察指标 ,采用紫外分光光度法测定乌药叶总黄酮含量 ,研究乌药叶总黄酮的乙醇溶液提取工艺。通过
单因素实验和正交实验 ,考察乙醇浓度 、提取时间 、固液比 、提取温度 、提取次数等因素对黄酮提取率的影响。 结果表明 , 乙醇
提取乌药叶总黄酮的较佳工艺条件为 60%(v/v)的乙醇溶液 ,固液比 1:60, 70℃回流提取 2次 , 每次 1.5 h。在此条件下 ,乌药
叶总黄酮提取率达 3.31%。
关键词　乌药叶　　总黄酮　　提取
中图法分类号　R284.2;　　　　文献标志码　B
2010年 6月 24日收到 浙江省分析测试科技计划项目(2008F70008)资助
第一作者简介:许海丹(1980—), 浙江临海人 , 讲师 , 硕士 /研究
生.研究方向:天然产物的提取和分离。 E-mail:adaxhd@tzc.edu.
cn。
　　乌药 Linderaaggregata(Sims)Kosterm为樟科
(Lauraceae)山胡椒属(Lindera)药用植物 , 性温味
辛 ,具有顺气止痛 、温肾散寒之功效 [ 1] 。目前 ,乌药
药材主要采自其块根 ,而地上部分的药用价值尚未
被开发 。据报道乌药叶中黄酮资源丰富 ,为乌药叶
中抗菌 、抗炎的主要成分 [ 2] 。从乌药叶中分离得到
槲皮素 、槲皮素 -3-O-吡喃鼠李糖苷 、香叶木素
-7-O-β-D-葡萄糖苷 、芦丁等黄酮类物质 [ 3, 4] ,但
还未见提取工艺研究的报道。为了进一步研究和
开发利用乌药叶资源 ,本文以总黄酮含量为考察指
标 ,采用单因素和正交实验法确定乌药叶中总黄酮
的最佳提取工艺条件 。
1　材料与仪器
1.1　实验材料
　　乌药植株于 2009年 9月采自浙江省台州市天台
山 ,将植株各部位分离并用清水洗净 ,自然风干 ,
115℃杀青 20 min, 70℃下干燥 7 h,粉碎后过 0.45
mm金属网筛 ,将烘干样品置于干燥器中保存 ,备用。
1.2　仪器与试剂
UV— 2450型紫外可见分光光度计(日本岛津
公司);DF— 101S型集热式恒温加热磁力搅拌器
(巩义市予华仪器有限责任公司);RE— 52AA型旋
转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂);SHZ—DⅢ型循
环水式真空泵(巩义市英峪予仪器厂)。芦丁标准
品(中国药品生物制品检定所 , 批号:100080—
200707);实验用水为蒸馏水;其余试剂均为分
析纯 。
2　方法
2.1　单因素实验
　　精密称定约 1.0g乌药叶粉末 ,置于 250mL三
颈烧瓶中 ,在不同条件下回流提取 ,考察提取溶剂 、
提取时间 、固液比和提取温度等对乌药叶中黄酮提
取效果的影响 。所得提取液过滤 ,定容至 50 mL,测
定提取液中总黄酮的含量 ,并计算其提取率 。
2.2　正交实验
在单因素实验的基础上 ,拟定三个因素(乙醇
浓度 、提取时间 、固液比 )的三个水平 ,见表 1, 按
L9(33)正交实验设计表进行实验 ,以获取最佳工艺
参数 。
表 1　正交设计因素水平表
水平 A B C乙醇浓度 /% 提取时间 /h 固液比 /(g:mL)
1 50 1.0 1∶ 40
2 60 1.5 1∶50
3 70 2.0 1∶60
2.3　提取率的测定
精密吸取 1mL样品溶液于 10mL容量瓶中 ,参
照文献 [ 5]方法进行总黄酮含量测定 。通过下式计
算出总黄酮的提取率 。
提取率 =黄酮浓度 ×稀释释倍 ×提取液体积乌药叶重量 ×100%。
3　结果与讨论
3.1　单因素实验
3.1.1　乙醇浓度对黄酮提取率的影响
精密称取乌药叶粉末 1.0 g,在 70℃、固液比
1∶40的条件下回流提取 2次 ,每次 1 h,考察乙醇 -
水不同比例对提取效果的影响。由结果(图 1)可
知 ,随乙醇浓度的增加 ,黄酮提取率增大 ,当浓度达
到 60%时提取率最大;但乙醇浓度继续增加 ,提取
率则明显下降 ,故宜选用 60%乙醇为提取溶剂。
3.1.2　提取时间对黄酮提取率的影响
用 60%的乙醇 ,在 70℃、固液比 1∶40的条件下
回流提取 2次 ,每次分别为 0.5 h、1.0h、1.5 h、2.0
h、2.5 h。结果(图 2)表明 ,随着提取时间的延长黄
酮提取率逐渐增加 ,当提取时间为 1.5 h时 ,黄酮的
提取率最高 ,但继续增加提取时间时 ,提取率反而
有所下降 ,长时间受热会破坏有效成分 ,杂质含量
可能也相对增加 。因此 ,实验确定最佳提取时间为
1.5h。
3.1.3　固液比对黄酮提取率的影响
用 60%乙醇 ,分别以固料比 1∶30、1∶40、1∶50、
1∶60、1∶70进行提取 ,温度控制在 70℃,回流 2次 ,
每次1.5h,结果见图 3。从图 3可以看出 ,随提取固
液比的增加 ,黄酮提取率逐渐增大 ,在 1∶50时提取
率最大 。过多的溶剂使得杂质含量变大 ,并且给后
序的浓缩带来困难 。因此 ,本实验确定最佳固液比
为 1∶50。
3.1.4　提取温度对黄酮提取率的影响
用 60%乙醇 , 1∶50固液比 ,分别在 50℃、60℃、
70℃、80℃、90℃的条件下回流提取 2次 ,每次 1.5
h,测定总黄酮的提取率 。图 4结果表明 ,随着温度
的升高 ,总黄酮提取率存在一个极大值 ,当温度为
70℃时 ,提取率最高。温度过高 ,活性成分易被破
坏 ,因此 ,较佳的提取温度定在 70℃。
图 1　乙醇浓度对黄酮提取效果的影响
图 2　提取时间对黄酮提取效果的影响
图 3　固液比对黄酮提取效果的影响
6516 科　学　技　术　与　工　程 10卷
图 4　提取温度对黄酮提取效果的影响
3.1.5　提取次数对黄酮提取率的影响
回流提取 1、2、3、4、5次 ,其余操作条件按上述
实验确定参数进行。
表 2　提取次数对提取效果的影响
提取次数 1 2 3 4 5
黄酮提取率 /% 2.91 3.33 3.37 3.38 3.40
表 2表明 ,随着提取次数的增加 ,乌药叶中黄酮
提取率也逐渐增加。提取 2次之后 ,增加很缓慢 ,说
明提取 2次基本上黄酮类化合物已溶出。考虑到提
取周期 、经济等因素 , 本实验确定最佳提取次数为
2次 。
3.2　正交实验
按照 “2.2”项下正交实验设计进行实验 。结果
见表 3。根据表 3可知 ,各因素对乌药叶中黄酮提
取率的影响主次顺序依次为:乙醇浓度 >提取时间
>固液比。其最佳提取方案为 A2B2C3 ,即乙醇浓度
60%,提取时间 1.5 h,固液比 1∶60。
3.4　最佳条件的验证
在最佳提取条件下提取乌药叶中黄酮 ,平行操
作 3份 ,测定总黄酮的平均提取率为 3.31%。
表 3　正交实验方案及结果分析
序号 A B C 黄酮提取率 /%
1 1 1 1 2.69
2 1 2 2 2.81
3 1 3 3 2.72
4 2 1 2 3.14
5 2 2 3 3.27
6 2 3 1 2.80
7 3 1 3 2.69
8 3 2 1 2.81
9 3 3 2 2.67
K1 8.22 8.52 8.30
K2 9.21 8.89 8.62
K3 8.17 8.19 8.68
R 1.04 0.70 0.38
4　结论
以乙醇为溶剂提取乌药叶中总黄酮 ,研究了单
因素对黄酮提取率的影响 ,通过正交实验确定了最
佳提取工艺条件:乙醇浓度 60%,提取时间 1.5 h,
固液比 1:60,此时乌药叶总黄酮提取率为 3.31%。
研究结果为乌药叶中黄酮类化合物的进一步开发
利用提供参考依据 。
参　考　文　献
1　国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部).北京:化学工
业出版社 , 2005:53
2　侴桂新 , 王峥涛 , 徐珞珊 , 等.乌药的化学成分及药理作用.中
国野生植物资源 , 1999;18(3):5— 10
3　张朝凤 , 孙启时 , 赵燕燕 , 等.乌药叶中黄酮类成分研究.中国
药物化学杂志 , 2001;11(5):274— 276
4　张朝凤 , 孙启时 , 侴桂新 , 等.乌药叶中黄酮类成分研究(2).
沈阳药科大学学报 , 2003;20(5):342— 344
5　顾霞敏 , 许海丹.聚酰胺吸附—铝离子显色法测定乌药叶中总
黄酮的含量.时珍国医国药 , 2009;20(1):196— 197
651726期 许海丹:乌药叶中总黄酮提取工艺的研究 　
StudyontheProcessforExtractingTotalFlavonoids
fromLinderaAggregataLeaves
XUHai-dan, GUXia-min
(SchoolofPharmaceuticalandChemicalEngineering, TaizhouUniversity, Linhai317000, P.R.China)
[ Abstract] 　TheprocessforextractingtotalflavonoidsfromleavesofLinderaaggregata(Sims)Kosterm.was
studied.Throughmeasuringthecontentoftotalflavonoids, themainfactorsafectingtheprocessnamelyethanol
concentration, extractiontemperature, extractiontime, solid/liquidratioandextractiontimeswereoptimizedbythe
factoranalysisandorthogonalexperiment.Theresultsshowedthattheoptimalconditionsoftheextractionwereob-
tainedasfolows:1:60 (w/v)ofleavesto60% ethanolsolution, temperatureat70℃, extractingfor2 timesre-
peatedlyand1.5 honce.Usingthistechnology, theextractionyieldoftotalflavonoidsinLinderaaggregataleaves
reached3.31%.
[ Keywords] 　Linderaaggregataleaves　　totalflavonoids　　extraction
(上接第 6504页)
PlaneStressHybridElementforMembranewithVariableThickness
LAIYun-shan, MAHai-tao
(StateKeyLaboratoryofSubtropicalBuildingScience, SchoolofCivilEngineering
andTransportation, SouthChinaUniversityofTechnology, Guangzhou510641, P.R.China)
[ Abstract] 　Anewhybridstresselementformulationispresentedfortheanalysisofmembraneswithvariable
thickness.Independentmembraneforceanddisplacementfieldsareusedintheformulation.Basedonthe5-param-
eterstressfieldofPian-Sumihara shybridstresselementandtheconventionalbilineardisplacementfield, anew
hybridelementisformulated.Numericalexamplesshowthevalidityandefectivenessofthenewelement.
[ Keywords] 　membranewithvariablethickness　　hybridstresselement　　membraneforce
(上接第 6507页)
TheMeasurementofMagnetostrictionCoefficient
ofAmorphousAloyFe73.5Cu1Nb3Si13.5B9
CIUYu-guang, GUOHong
(ColegeofSciences, LiaoningShihuaUniversity, Fushun113001, P.R.China)
[ Abstract] 　ThemagnetostrictioncoeficientofamorphousaloyFe73.5Cu1Nb3Si13.5B9ismeasuredwithourhand-
mademeasurementsystem.Thesystemisveryreliableandaccurate(theaccuracycanobtain0.3×10-7)andcan
workcontinuouslyuntilthesaturatedmagnetostrictioncoeficientλsandthemagnetostrictioncurveisobtained.
[ Keywords] 　opticallever　　accuracy　　saturatedmagnetostrictioncoeficient
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