全 文 ：白花蛇舌草与水线草中氨基酸的含量测定
广州中医药大学 (1 50《 )7 ) 周 诚 王 丽 冯 小映
摘要 利用氨基酸分析仪测定 了白花蛇舌草与水线草中氨基酸含量 。 白花蛇舌草与水线草的三个 主要产地
少`洲郊区 、广西桂林 、海南海 口的氨基酸含量测定结果表明 :三产 区中两 品种均以广一州市郊的含量最高 , 而海南海
口的含量最低 ;而且水线草在三个产区中 , 氨基酸的含量均高于白花蛇舌草 。
关键词 白花蛇舌草 水线草 氨基酸 含量测定
白花蛇舌草来源于茜草科 ( uR ib ac e ae )植物白花
蛇舌草 从为侧 is d沥“ a w il d 的全草〔’ 〕 , 具有清热解
毒 、利湿消肿等功效 , 中医临床常用于治疗咽喉肿
痛 、 湿热黄疽 、 小便不利 、 疮疖肿痛 、急慢性胆囊炎 、
泌尿道感染 、毒蛇咬伤等病症 , 近年更是广泛用于各
种肿瘤的治疗 , 且具有较好的疗效 。 但是多数的地
区都是使用同科同属植物水线草 刀七办〕ist co , bn os a
( L
.
) 1田 r l . 代替 白花 蛇舌 草 人 药或 两 者混 合 使
用〔 2〕。 本文中 ,作者作 了两品种的氨基酸含量测定 ,
为两者的混用提供用药依据 ;同时还作 了白花蛇舌
草与水线草的三个主要产区 : 即广东广州市郊 、 广西
桂林 、海南海口的氨基酸含量测定 , 为扩大药源 , 保
证临床用药的安全 、 高效提供依据 。
, 仪器 、试剂与样品
仪器 : 日立 8 35 一 50 型氨基酸分析仪 ;试剂 : 化学
试剂均为国产分析纯 。 样品 : 白花蛇舌草 自采品 (采
自广 东 广 州 、 广 西桂 林 、 海 南 海 口 ) , 采 集 时间 :
199
.
10
、
2 (XX)
.
10 ;水线草 自采品 (采 自广东广州 、 广
西桂林 、 海南海 口 ) , 采集时间 : l望为 . 1认 2X( X) . 10 。 三
个产区样品均经本文第一作者鉴定 。
2 实验部分
2
.
1 方法 分别取白花蛇舌草与水线草样品粉末
约 0 . 2 9 ,精密称定 ,装入硬质玻璃水解管中 ,加入 6
mo F 耐 盐酸适量 ,搅拌使样品溶解 , 然后封管 , 将封
好的管放人烘箱 , 维持 l or 士 1℃ 24 h , 使其完全水
解 ,最后蒸干 ,放置 , 并加人适量 NaO H 溶液 , 在室温
下的空气中放置 4 h( 使半胧氨酸氧化为胧氨酸 ) ,再
加入 0 . 02 mo F 以 的 HCI 溶液适量并稀释至 10 而 ,
样品溶液 以 1(拟 ) r/ m in 离心 ZOm i n , 稀释 , 用氨基酸
分析仪测定水解氨基酸 。
2
.
2 测定条件 离子交换柱规格 : 2 . 6 x 150 ~ ;
柱温 : 53 ℃ ; 泵流 速 : 0 . 2 5 m 口而 ;n 泵 压力 : 90 k岁
c衬 ;洗脱液 : Ip l l 一 l 、 2 、 3 、 ;4 分析时间 : 72 而 ;n 进样体
积 : 50 拌l 。
2
.
3 样品含量测定 用氨基酸分析仪测定氨基酸
含量 ,结果见表 。
·
4 8 0
·
表 白花蛇舌草与水线草自采品中氨基酸组分和含 ,
含量 (% )
氨基酸 白花蛇舌草
桂林
门冬氨酸 (龙 p )
苏氨酸 (飞卜 r )
丝氨酸 (防 )
谷氨酸 ( lG u)
脯氨酸 (阮 )
甘氨酸 (lG y )
丙氨酸 ( A la )
胧氨酸 ( C ys )
结氨酸 ( V al )
甲硫氨酸 ( Mle )
异亮氨酸 ( Ileu )
亮氨酸 (il , 】)
酪氮酸 ( vsT )
苯丙氨酸 ( 1饭 )
赖氨酸 (场 s)
组氨酸 (伟 s)
精氨酸 (崛 )
氨基酸总量
2
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3 小结
3
.
1 从样品测定结果来看 , 广东广 州 、 广西桂林 、
海南海口三个产区 中 , 水线草 自采品中氨基酸总含
量高于白花蛇舌草 自采品 ,说 明两品种在临床上的
混用是具有其共同的活性物质基础的 。 所以从这一
点出发而言 ,在以白花蛇舌草作为主流商品流通的
同时 ,也可以考虑把水线草列为正品同时流通药品
市场 , 以扩大药源 。
3
.
2 白花蛇舌草和水线草的产区分布于长江以南
各省区 ,而主产区应为广东 、广西 、 海南三省 ,故本文
特作了两品种的三个主要产区 的氨基酸含量测定 ,
实验发现三个主产区中两个品种均为广东广州产区
所含氨基酸含量最高 ,而广西桂林含量次之 ,海南海
口最低 。 氨基酸在中西医临床应用中均为人体所必
须的营养物质 ,尤其是 当身体患病期间 ,这类活性物
质可补充体能 , 并协同其它活性物质治疗疾病 ,加速
身体康复 ,从而体现了中医药标本同治的特色 ;若要
保持清热解毒类药物在临床应用 中的高效性 , 或特
中药材第 25 卷第 7 期 么以)2 年 7 月
DOI : 10. 13863 /j . i ssn1001 -4454. 2002. 07. 013
别需要氨基酸含量高的品种时 , 我们建议应采集广 197 : 754东广州地区的两个品种为佳 。 2 杨兆起 ,等 · 中药鉴别手册 (第三册 ) . 北京 : 科技 出版
社 , 1义科 : 9 1
参 考 文 献 ( 2X() 2 一 0 3 一 19 收稿 )
江苏新医学院 . 中药大辞典 . 上海 : 上海科技出版社 ,
·药理 ·
血府逐癖汤对心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响
浙江中医学院分子医学研究所 (杭州 31 0 53 ) 丁志山 高承 贤 吉瑞瑞 沃兴德
摘要 目的 : 探讨血府逐疲汤对心肌成纤维细胞增殖与胶原合成的影响 , 为血府逐寮汤防治多种由于 心肌成
纤维细胞增殖而导致的心脏疾病提供理论依据 。 方法 :采用直接加药和血清药理学方法观察血府逐癖汤对心肌成
纤维细胞增殖与胶原合成的影响 。 结果 : 1 : so 稀释的 1 岁d 血府逐癖汤与含 10 % 血府逐疲汤鼠血清 已经对心肌成
纤维细胞增殖有抑制作用 ,同对照组 比较具有显著性差异 ( P < 0 . 05 ) ;l : so 稀释的 1 酬d 血府逐痕汤能显著抑制心
肌成纤维细胞分泌胶原 ,达 17 . 9% 。 结论 :血府逐癖汤不仅能够抑制心肌成纤维细胞增殖 , 而且具有抑制心肌成纤
维细胞分泌胶原的作用 ,血府逐痕汤具有抗心肌纤维化的作用 。
关键词 血府逐癖汤 心肌成纤维细胞 胶原 增殖
大量的临床与实验文献证明血府逐痪汤对心血
管系统疾病具有较好的防治作用 , 如冠心病 、 肺心
病 、 高血压〔` 一 4 〕等 ,这些疾病均伴随着心肌成纤维细
胞增殖与胶原合成分泌 。 预防与逆转心肌纤维化是
治疗心肌成纤维细胞增殖疾病的重要 目标 。 笔者利
用体外培养的心肌成纤维细胞 ,采用培养细胞直接
给药及血清药理学的实验方法探讨血府逐痪汤对心
肌成纤维细胞增殖与胶原合成的影响 ,探讨血府逐
疲汤防治多种由于心肌成纤维细胞增殖而导致心脏
疾病的机理 。
1 材料
1
.
1 主要试剂 无酚红 R P M I一 16粼) 干粉培养基 ,
胰蛋 白酶 , 美国 iG bc o 公司产品 ; 超级新 生小生血
清 ,杭州四 季青生物工程材料研究所产 品 ; 塞哇蓝
( MTT )
,
is 邵 l l a 公司生产 ;汗 了r dR 为 中国科学 院上海
原子核研究所产品 ;轻脯氨酸测试药盒 ,南京建成生
物技术公司生产 。
1
.
2 仪器 eH , us C仇 培养箱 ,场 c a 倒置相差显
微镜 ,苏州净化设备厂超净工作台 , D y n e thc 酶标仪 ,
以 CK人DR 液闪仪 。
1
.
3 中药 当归 9 9 ,生地 9 9 ,桃仁 12 9 ,红花 9 9 ,
积壳 6 9 ,赤芍 6 9 , 柴胡 3 9 ,桔梗 5 9 ,川芍 5 9 , 牛膝
9 9
,甘草 3 9 , 由浙江中医学 院实验药厂提供 。 经三
蒸水 3 次漂洗后 ,于烧杯中煎煮 30 而 n 去渣 , 浓缩离
心 , 每毫升含生药 1 9 ,调声 值至 7 . 0 一 7 . 2 , 0 . 2 脚
中药材第 25 卷第 7 期 2X() 2 年 7 月
滤膜过滤除菌 , 4℃保存备用 。
2 方法
2
.
1 心肌成纤维细胞培养 参照 sc ho ht 方法囚取
新生 SD 乳鼠 ( 1 一 3 d 龄 ,浙江医学科学院实验动物
中心提供 ) , 无菌 开胸取 心脏 , 剪碎 , D 一H出 I ks 液 清
洗 , 0 . 08 %胰蛋白酶消化 ( 37 ℃ , or 而n) ,直到心脏碎
块消化完全 ,分别收集各次 消化上清液 , 离心 ( 1(联〕
r/ 而 n , 5而n) 取沉淀制成细胞悬液 , 用加人青霉素与
氯霉素的含 10 %超级新生小生血清的 R P M I一 16 《 ) 培
养基 ,于 37 ℃ , 5% C仇 培养箱内培养 3 h , 晃动细胞
培养瓶 ,使贴壁速度慢的心肌细胞脱落 ,去除心肌细
胞 。 实验采用第 2 一 5 代细胞 。
2
.
2 含血府逐瘫汤 鼠血清的制备 选择成年雄性
SD 大 鼠 3 0 只 (浙 江 医学 科学 院实验 动物 中心提
供 ) ,体重为 0 . 2 土 0 . 1 kg , 分为两组 , 一组每 日给予
生理盐水灌 胃作为对 照 , 另 一组给 予血府逐疲 汤
6
.
4 岁 k g ,每 日 2 次 ,连续 7 d ,末次灌胃 (禁食不禁水
12 h ) l h 后 ,摘除眼球取血 , 分离血清 , 56 ℃灭 活 30
而 n , 0 . 2 脚 微孔滤膜过滤除菌 , 置 一 20 ℃ 保存备
用 。
2
.
3 血府逐疥汤对心肌成纤维细胞增 殖的影响
取第三代心肌成纤维细胞以 1 x l护/ 孔接种于 24 孔
板内 ,正常培养 24 h 后 ,弃 or % 牛血清培养基 ,换成
0
.
4% 牛血清培养液继续培养 24 h ,将细胞分为对照
组及血府逐癖汤组 ,血府逐癖汤用 10 % 牛血清培养
.
4 8 1