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水翁花的镇痛和抗内毒素研究



全 文 :第 29 卷 第 7 期
2 0 1 1 年 7 月
中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 29 No. 7
Jul. 2 0 1 1





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水翁花的镇痛和抗内毒素研究
罗清,梅全喜,范文昌
(广州中医药大学附属中医院,广东 中山 528400)
摘 要:目的:观察水翁花的镇痛和抗内毒素作用,为镇痛和抗内毒素药物的临床开发与应用提供可靠的实
验依据。方法:采用醋酸扭体法观察水翁花的镇痛作用,采用内毒素致小鼠休克死亡法观察水翁花的抗内毒素作
用。结果:小鼠连续 7 天灌胃给予水翁花 16、8 和 4g /kg,均能明显减少醋酸所致的扭体反应次数,能明显提高内
毒素血症小鼠生存率(P < 0. 05)。结论:水翁花对外周性疼痛有镇痛作用,对内毒素引起的多器官损伤有保护
作用。
关键词:水翁花;镇痛;内毒素
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1673 - 7717(2011)07 - 1569 - 02
Analgesic Effect and Anti - endotoxic Effects of Cleistocalyx Operculatus
LUO Qing,MEI Quan-xi,FAN Wen-chang
(The Affiliated Traditional Chinese Medical Hospital of Zhongshan,
Guangzhou University of Tradition Chinese Medicine,Zhongshan 528400,Guangdong,China)
Abstract:Objective:To study the analgesic and anti - endotoxic effects of Cleistocalyx operculatus,and to probide
experimental evidences for the clinical development and application. Methods:The analgesic effect was studied with the
writhing test by induced acetic acid and the anti - endotoxic effect was observed by the desth mice induced by endotoxin.
Results:The extract of Cleistocalyx operculatus at diferent doses(16,8,4 g·kg -1)could reduced the stretching times
significantly,improve the survival rate of endotoxemia mice . Conclusion:The extract of C. operculatus has obvious anal-
gesic effects and protective effect on endotoxin induced multiple organ injury.
Key words:Cleistocalyx operculatus;analgesia;endotoxin
收稿日期:2011 - 03 - 07
基金项目:广东省中医药管理局资助项目(2009081) ;中山市科技
基金资助项目(20091A044)
作者简介:罗清(1974 -) ,男,江西丰城人,副主任中药师,学士,研
究方向:中药制剂。
水翁花始载于《岭南采药录》,为桃金娘科水翁属植物
水翁 Cleistocalyx rculatus(Roxb.)Merr. et Perry 的干燥幼嫩
花蕾,又名水雍花、大蛇药、水翁仔、水榕花、水翁、酒翁、水
榕树、水香。性寒,味苦,归脾、胃经。能清热解毒,祛湿消
滞。主用于夏天暑湿食滞所致的发热,咽干,口渴腹胀或呕
吐泄泻[1]。主产于广东、台湾、海南、广西、云南等省区,越
南、印度、马来西亚也有分布。干燥水翁花久贮后色泽加
深,苦味浓,清热作用大。水翁花在民间应用广泛,疗效确
切,属于广东地产药材,夏季常作凉茶以解暑,是“清热凉
茶”等中药的主要原料之一[2]。我院制剂悦康外感凉茶就
是以水翁花为主研制成的复方制剂,具有疏风解表,清热解
毒之功效,远销我国大陆及香港、澳门等地区[3]。有关水
翁花镇痛和抗内毒素作用的研究尚未见报道,为此笔者对
这两方面进行了研究。
1 实验材料
1. 1 实验动物
SPF级昆明种小鼠,体重 18 ~ 22g,广州中医药大学实
验动物中心提供(动物实验合格证号:SCXK(粤)2008 -
0020,粤监证字 2008A002)。实验环境为广州中医药大学
附属中山市中医院 SPF 级动物实验室,环境温度为 18 ~
22℃,相对湿度 70%,动物购进后观察 1 周。
1. 2 药品与试剂
水翁花药材由广东广弘药材有限公司提供(经中山市
中医院药检室曾聪彦主任中药师鉴定为桃金娘科植物水翁
Cleistocalyx rculatus(Roxb.)Merr. et Perry 的干燥幼嫩花
蕾)。制法:取水翁花 1. 0kg,加水煎煮 2 次,分别为 12 倍量
水和 8 倍量水各煎煮 2h,合并滤液,静置过滤,浓缩至
1000mL(1mL相当于原生药 1. 0g) ,临用前配成所需浓度。
吲哚美辛肠溶片(消炎痛,广东华南药业集团有限公司,批
号:080101) ;冰醋酸(AR,汕头市西陇化工厂有限公司,批
号:090606 - 7)。
1. 3 主要仪器
BS224S电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)、
RE - 5299 旋转蒸发仪(巩义市英峪高科仪器厂)、灌胃针、
9651
DOI:10.13193/j.archtcm.2011.07.123.luoq.057
第 29 卷 第 7 期
2 0 1 1 年 7 月
中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 29 No. 7
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注射器、量筒。
1. 4 统计学处理方法
镇痛实验采用 SPSS 13. 0 for Windows 软件处理,数据
用 珋x ± s表示,采用单因素方差分析,进行 Dunnet - t 检验;
抗内毒素实验采用 Stata 11. 1 软件,对数据进行方差分析。
2 实验方法与结果
2. 1 对醋酸致小鼠扭体反应的影响
取昆明种小鼠 50 只,雌雄各半。随机分为 5 组,每组
10 只,ig给药,正常对照组给等容量生理盐水、水翁花高、
中、低组分别给予(16、8、4g生药 /kg)的药物,连续 7 天,消
炎痛(阳性对照)组(0. 02g /kg)组当日给药。末次给药
1. 5h后每只腹腔注射 0. 6%冰醋酸0. 1mL /10g,记录注射后
小鼠 20min内出现的扭体次数,整个室温控制在(20. 0 ±
1)℃,并计算抑制率:抑制率(%)=(对照组平均扭体次数
-给药组平均扭体次数)/对照组平均扭体次数 × 100%,结
果见表 1。
表 1 水翁花水提液对醋酸致小鼠的镇痛作用(珋x ± s)
组别
剂量
(g生药 /kg)
动物数
(只)
扭体次数
(次 /20min)
抑制率
(%)
空白组 - 10 47. 2 ± 14. 3 -
低剂量组 4 10 29. 2 ± 21. 8* 42. 4
中剂量组 8 10 29. 3 ± 17. 2* 42. 2
高剂量组 16 10 26. 0 ± 15. 7** 44. 9
消炎痛组 0. 020 10 13. 5 ± 10. 0** 71. 4
注:与空白组比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01。
实验结果:水翁花水提液低、中、高 3 个剂量组及消炎
痛组对 0. 6%冰醋酸 20min内致小鼠扭体次数的抑制作用
与空白组比较有显著性意义(P < 0. 05 或 0. 01) ,抑制率
分别为 42. 4%、42. 2%、44. 9%、71. 4%。结果表明,水翁花
水提液能显著降低醋酸所致小鼠扭体反应次数,有显著的
镇痛作用。
2. 2 抗内毒素休克死亡作用
取昆明种小鼠 60 只,雌雄各半。随机分为 6 组,每组
10 只,ig给药,水翁花水提液高、中、低 3 个剂量组分别给
予(16、8、4g生药 /kg)的药物,空白对照组、模型组给等容
量生理盐水,连续 7 天,地塞米松组(阳性对照) (0. 02g·
kg -1)当日给药。于末次给药后 1. 5h,除空白对照组 ip 等
量的生理盐水外,其余各组小鼠均 ip 大肠杆菌 O55 B5内毒
素 60mg /kg,观察并记录各组小鼠在注射内毒素或生理盐
水后 3h内的形态变化和 72h内的生存状况,结果见表 2。
表 2 水翁花水提液抗内毒素休克死亡作用
组别 n
死亡数
(只)
死亡率
(%)
模型组(生理盐水) 10 8 80
高剂量组 10 2* 20
中剂量组 10 2* 20
低剂量组 10 3 30
空白组 10 0** 0
阳性组 10 0** 0
注:与模型组比较,P < 0. 05,P < 0. 01。
实验结果:空白组为注射生理盐水,小鼠活动自如。药
物组、模型组、阳性组腹腔注射内毒素 1h内,小鼠均活动自
如。12h 后药物低剂量组、模型组有部分小鼠死亡,模型
组、药物组、阳性组小鼠均出现耸毛、烦躁不安、颤抖、蜷缩
及眼睑充血等现象,其中地塞米松组多数小鼠症状较药物
组及模型组轻。注射后的第 3 天,药物组存活小鼠状态均
有好转,模型组小鼠还是烦躁不安、颤抖、蜷缩等症状,阳性
组小鼠活动自如。
由表 2 可知,空白组与模型组比较,对减少 ip 注射内
毒素所致动物死亡数有非常显著性意义(P < 0. 01) ,提示
此模型可用于考察水翁花水提液抗内毒素作用。水翁花水
提液高、中剂量组和阳性组与模型组比较,对减少 ip 注射
内毒素所致动物死亡数有显著性意义(P < 0. 05 或0. 01) ,
其死亡率分别为 20%、20%、0%。由此可知,水翁花水提
液具有抗内毒素休克死亡作用。
3 讨 论
内毒素(endotoxin,ET)是革兰氏阴性细菌细胞壁外膜
的组成成分,细菌死亡胞壁裂解后释放。内毒素主要成分
为脂多糖(1ipopolysaccharide,LPS) ,是细菌致病的主要物
质,在多种危急重症中起着重要作用,如发热反应、感染性
休克、白细胞反应,多器官功能衰竭、弥漫性血管内凝血等。
内毒素还有免疫激活作用,可引起免疫损伤。近年来,已经
发现许多中药具有抗内毒素作用。其作用机制有:清除或
灭活内毒素,减弱或消除内毒素诱发的活性因子的损伤及
对脏器组织细胞的保护作用[4]。本实验研究表明,水翁花
水提液可显著减少内毒素所致动物死亡数,表现出良好的
抗内毒素休克死亡作用。另有研究表明,本品水提物对膜
脂氧化和神经细胞氧化损伤有较好的保护作用[5]。由此
提示,本品抗内毒素作用机制可能与减弱或消除内毒素诱
发的活性因子的损伤及对脏器组织细胞的保护作用有关,
有待于进一步研究。
我院以水翁花为主要原料研制成悦康外感凉茶,具有
疏风解表、清热解毒的功效,经多年临床验证,其对外感风
热感冒,发热头痛,咽喉肿痛,上呼吸道炎,扁桃体炎有较好
的疗效。本实验研究表明本品具有较好的镇痛和抗内毒素
作用,进一步验证本品在治疗咽喉肿痛等方面的作用,为临
床合理应用本品提供科学依据。
参考文献
[1] 广东中药志编委会. 广东中药志[M]. 广州:广东科技出版
社,1996:412 - 413.
[2] 梅全喜,范文昌,曾聪彦.论广东地产药材的研究与开发[J].
今日药学,2009,19(2) :14 - 17.
[3] 罗清,梅全喜.广东省地产药材水翁花的研究概述[J]. 亚太
传统医药,2009,5(2) :130 - 132.
[4] 孙耀光. 中药抗内毒素的作用及其机制[J]. 现代中医药,
2004(6) :40 - 42.
[5] 卢艳花,杜长斌,吴子斌,等.水翁花对微粒体和神经细胞氧
化损伤的保护作用[J].中国中药杂志,2003,28(10) :964 -
966.
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