全 文 ：氮羞酸杂志 , 2 , 2 一 3 . 1 . 8 .
木瓜蛋白酶水解柞蚕蛹蛋白试验
赵妹华 何 平 孙秀英
( 吉林省蚕业科学研 究所 )
一 、 前 言
酶法水解蛋白质设备简便 , 工艺简单 ,
只是水解不彻底 , 产物为水解蛋白 , 若采用
食品允许的原料及酶制剂 , 则水解产物可直
接应用于食品及医药工业 。
二 、 材料与方法
(一 ) 材料
1
. 脱脂柞蚕蛹蛋 白: 取自本所综合利
用后的蛹蛋 白渣 , 经脱脂 、 粉碎备用 。
2
。 木瓜蛋 白酶 :
来源于中国生物工程开发 中 心 , 酶 活
6 0 0
.
0 0单位 。 紫外法测定 。
(二 ) 工艺路线
脱脂蛹蛋白— 装瓶— 加水— 灭菌— 调 p H— 加防腐剂— 加酶一水解— 过滤— 脱色— 水解液
( 三 ) 检测方法
1
. 氨基氮含量
采用 P X D一 2型通用离子计 (甲醛滴
定法 ) 测定 。
2
。 全氨含量
采用 D O Y型快速定氮仪 (凯氏定氮法 )
四十升树脂柱谷眺甘 试验部份数据表
批 号
压榨酵母
1
上柱液碘值
(公斤 ) 】( 毫升 / 毫升 )
七柱液总碘
(万毫升 )
2 N H ZS O
脱液中总哪
(万 毫升
S亘两夜库摩爵)落蔗杯一- -一一 竹一晶 l } } 备 注克) l (帕 ) } ( 。 C ) }
液积)柱体升上总(
7 5
7一 1 9
7 5
7e 2 5
7 5
8— 2
7 5
8一 8
1
。
9 4 7 7
。
6
1 1 3
8 4
。
3
9 9
。
2
1 9 3一 19 5}
因结晶母液并破裂 , 母
19 0一1 9 3
19 2一 19 4
液滚失故影响总收率
操作不慎 , 用水洗柱时
, 柱内进入 气泡造成洗
脱短路
洗脱液收集时 , 部份洗
脱液倒翻 , 影响收率
19 0一1 9 5
川膝耐
侧|一
|
On山ǐUōOùùó84.J,甘吸口
2
.
6 1
C u : O加量的理 论 值 = G S H 总 量 x
14 3
。
1 4
2 x 3 0 7
。
2 2
废为宝
七 、 压榨鲜酵母抽提 G S H后 的酵母渣
仍含有大量的蛋白质和核酸 , 可用来开辟综
合利用 的新途径 。五 、 结晶时母液的精制和回收都须 倍加
注意以提高总收率
六 、 在压榨鲜酵母的 G S H提取液中同
时存在其它有用的生物化学活性物质 , 如能
在树脂工艺上再作试验有可能回收到多种有
用物质 , 但仍须作严格的小试分析 , 以便变
参考文献
( 1 〕 卓启文等 氨基酸杂志 3 . 1 9 8 8
〔 2 〕 P i r i e N . W . B i o e h e m J 10 3 0 .
〔 3 〕 S e五 r o s d e r E . F . e t a l : i b i d
( 4 〕 矶和 义员 : 发醉七工业 一。 8 2 ` o
1日3分 3 3 : 1 1 08
: 6 3 1
DOI : 10. 14188 /j . ajsh. 1989. 02. 002
测定 。
三 、 结果与分析
对水解2 4 、 3 6 、 48 小时氨基氮含量指标
进行方差分析 , 差异极 显 著 F = 9 . 3 4 > F
。 . 川 = 1 8 . 0 。 对其进 行 L S R检 验结 果 见
(一 ) 不同加酶量水解情况
取克原料加酶量 ,、 。。。 、 6 0 0 。、 8 0 0 。单位
三个处理 、 试验结呆见表 。
表 1 不同晦量水解结 果
表 3 。
表 3 差异显著表
差 异
X t 一 0 . 2 16
勤奄 项 目 氨基 氮含量 }全氮含量
g / 1 o om l
一氨基氮
,生成率
{ %
全氮 利用率
肠
醒量林八 1
9 / l o o m
{
“
}
“ · , 5 2 …。 · 。 , , 二 } 。 , 。 3“ ·” 匕
}
。 · 2 , 6 … 0 · 04 ` ’ }“ 4
} .0 17 “ }
:
!
注 K = 2 . 3时 L 5 R o . o s为 0 . 0 2 1 5 、
L 5 R O
.
o l为 0 . 0 3 5 8 、 :;::
一合48勺J亡U八hQ一、9州…néO….no八曰n目Oó八曰n自846
对不 同酶量水解的氨基氮含量指标进行
统计分析 , 方差分析差异极显著 。
F = 2 3
.
5里> F o . o 生= 18 。 0 0 对 其 进 行
L S R检验结果见表 2 。
表 2 差异显 硕表
} _
, _
、
{ 差 异酶 量 } 平均数 } “
从表 3 结果上看 , 酶解招小时 、 3 6小时
与酶解 2叼 、时差异极显著 , 酶解 4叼 、 时与酶
解 3 6小时差异显著 。
( 三 ) 不同温度水解情况
酶解温度取 47 土 l ℃ 、 52 土 1 ℃两个处
理结果见图 2 。
X t一 0 . 17 9 { X t一 0 . 2 0 1
蛋白利质用率肠
阳20
氨基生成率氮呱
8 0 0 0
6 0 0 0
4 0 0 0
0
.
23 2
0
.
20 1
0
`
17 9
0
.
2 5 3 e .
O
`
0 2之 .
0
_
0 3 1 -
注 K = 2 , 3时 L 5 R o . o s 为 0 . 0 2 1 6 、 0 . 0 2 2 0
L 5 R o
.
o l为 0 . 0 3 5 8 、 0 . 0 3 7 4
从表 2检 验结果上看 , 克原 料 加 酶 量
8 0 0 0单位与 4 0 0 0单位差异极显著 , 加酶 8 0 0 0
单位与 6 0 0 0单位 , 6 0 0 0单位与 4 0 0 0单位差异
显著 。
( 二 ) 不同酶解时间水解情况
酶解时间取 ` 4, 卜时 、 3 6小时 、 48 小时 、
64
、
7 2小时其水解氛 终酸含量指标如图 毛。
入 多 A 丑
图 2 不同酶解温 度下水解率情况
A一 52 士 1℃ B一 4 7土 1℃
_ _ - -
-
-一一_一犷一 : 。 `一丽一 -奋一右而
氛基氮含量与水解时间的关系
由图 2 可见 , 酶解温度采用 47 士 1 ℃水
解 , 其氨基氮生成率及全氮利用率都优于 52
℃ 土 l ℃水解 。
(四 ) 不同处理原料水解效果试验
以烘干蛹渣与未经 烘干处理的蛹渣分别
酶解结果见图 3 。
由图 3 可见烘干蛹渣的水解率明显低于
未经烘干过程的蛹渣 , 可能是前者蛋 白过程
变性的结果 。
下止卜!IL
||IL
!可
2洲
氨基氮含量ǎg咨。日岑
图 1
盆基酸杂志 2 , 4一 5 卜 x os 。
糖尿病伴酮症酸中毒纠正前后血浆
游离氨基酸的改变
蒋 谨 黄美英
( 苏州医学院生化教研室 )
何达纯 金权膺
( 附一 院 内科 内分泌组 )
糖尿病患者 , 血浆支链氨基酸水平升高
的报导很多 〔 `一 3 · , 说明蛋 白质代谢依赖胰
岛素 。 糖尿病伴酮症酸中毒 , 提示葡萄糖利
用严重受阻 , 导致脂肪及蛋 白质分解加强 ,
影响血浆更多氨基酸代 谢 紊 乱 。 本文使用
D N S一 C I ( D i o
e t h y l a m i n o 一N a p l t h a l e n e
一 5一 S u l f o n y l e h l o r id e , 丹酞氯 ) 荧光试剂
标记氨基酸 ,经聚酸胺薄膜层析 ,制成 D N S -
氨基酸荧光层析图谱 , 然后选择糖尿病伴酮
症酸中毒患者血浆 9种游离氨基酸分别用洗
脱剂洗脱 , 最后在 日本岛津 R F 一 5 爪0荧光分
光光度计 , 进行定量检测 广 ` 一句 , 结果 ( l)
与正常人比较 ; ( 2 ) 糖尿病酮症酸中毒患
者纠正前后 比较 , 以探索糖尿病酮症酸中毒
前后 , 血浆氨基酸的动态改变及其特点 。
研究对象
患者均经附一院内分泌科确诊的糖尿病
合并酮症酸中毒的住院病人 , 其中男 5 例 ,
女 4 例 , 年龄 15一 16岁 , 平均 3 5 。 6 6岁。 病程
10天 ~ 5 年 , 平均 1。 35 士 2 . 7 3年。 酮症酸中
毒时间为 2 一 3 0天 , 平均 1 0 . 2 2士 8 . 3 2天 。
患者和正常对照均在清晨空腹抽血 , 测定血
浆氨基酸 。
结果
1
。 糖尿病伴酮症酸中毒患者纠正前血
浆 9种氨基酸中异亮氨酸 、 苯丙氨酸水平高
于正常 ( P < O 。 05 和 0 . 0 1) 而酪氨酸和脯氨
酸水平均低于正常人 ( P < 0 。 。5 ) 。 详见表
1
:
蛋白质用率肠利
卿脚肋毋扣加阳
日
知卯拍
氮基生成率帕
人 卫 A 升
图 3 不 同原料水解情况
A一烘干蛹渣 B一未烘干湿蛹
四 、 小 结
1
。 木爪蛋 白酶水解柞蚕蛹蛋白渣 , 加
酶量取 8 0 0 0单位 /克原料 , 酶解时 间取 4 8小
时 , 酶解温度取 47 土 1 ℃ , 底物烘干处理适
度不要使蛋白过度变性 。
2
. 木爪蛋白酶水解柞蚕蛹蛋白渣 , 工
艺简单 , 操作容易 , 生产周期短 , 其氨基氮
生成率达 25 % , 蛋白质利用率达 70 % 。
参考文献
1
. 酶制剂工 业上 、 下册科学 出版社 1 9 8 4年
2
. 氨基酸杂志 83 一 87
王
分析 工作
部大东 张桂荣 同志分别担任本试验的化脸