全 文 :2014(5)dible fungi
柞蚕蛹虫草不同部位多糖含量的测定
陈 丹 1* 韩建华 1 杨淑芳 1 孙继红 1 周成利 1 姜振国 1 魏长林 2
(1吉林省蚕业科学研究院,吉林市 132012;2东辽县农业机械局,吉林东辽 136600)
摘 要 采用苯酚-硫酸法测定柞蚕蛹虫草不同部位多糖含量,
结果表明柞蚕蛹虫草多糖百分含量子实体部分高于蛹体,子实
体多糖含量是蛹体的 3.27倍。
关键词 柞蚕蛹虫草 子实体 多糖含量
文章编号 1000-8357(2014)05-0062-02
冬虫夏草系冬虫夏草菌(Cordyceps sinensis)寄生在鳞翅
目虫草蝙蝠蛾(Hepialus amoricanus)幼虫上所形成的子座与
菌核组成的复合体,为名贵中药材。虫草味甘性平,主要功
效为保肺肾、补精髓、化痰止劳咳,多用于肺肾两虚症。由于
天然冬虫夏草生长环境和寄生条件特殊,产量低、价格昂
贵。目前多开发利用蛹虫草为冬虫夏草的替代品。蛹虫草
[Cordycep smilitaris(L.)Link]又称北冬虫夏草,蛹虫草与冬虫
夏草具有相似的活性成分与药理作用 [1],现有的多数文献认
为人工培养的柞蚕(Antheraea pernyi Guerin-Meneville)蛹虫
草其有效成分和含量与冬虫夏草相仿,有的甚至更高。所
以,近年来蛹虫草的研究取得了迅速的发展。虫草多糖作为
虫草中含量最高的生理活性物质,引起了人们对它的极大兴
趣和广泛关注。大量医学实验证实,虫草多糖不仅具有抗肿
瘤、降糖、抗放疗、抗肝纤维化作用,还能活化巨噬细胞刺激
抗体产生,提高人体免疫能力及治疗肝的病毒性感染。因
此,多糖常常作为虫草类药物质量控制的指标之一 [2]。鉴于
多糖重要作用,笔者对柞蚕蛹虫草不同部位的多糖含量进行
比较,为蛹虫草多糖提取、开发利用提供科学依据。
1 材料与方法
1.1 供试材料 ①柞蚕蛹虫草:柞蚕蛹虫草是蛹虫草子实
体和僵化蛹体的复合体,由吉林省蚕业科学研究院虫草研究
所提供。将柞蚕蛹虫草分成三部分即样品 1:蛹虫草子实体;
样品 2:子实体基部的菌膜及蛹皮;样品 3:去掉表皮的僵蛹;
样品 4:为柞蚕蛹虫草全草(图 1~4)。将样品置烘箱中 60℃
烘至恒重,粉碎后过 20目筛。②主要仪器和试剂 电热恒温
水浴锅,721紫外分光光度剂,电子分析天秤等。葡萄糖,硫
酸,重蒸酚,上述药品均为分析纯。
1.2 测定方法
1.2.1 多糖液的提取 按照中华人民共和国农业行业标准
NY/T 1676-2008《食用菌中粗多糖含量测定》样品的提取操
作。称取 0.5~1.0 g柞蚕蛹虫草样品,用 5 mL水浸润样品,缓
慢加入 20 mL无水乙醇,同时使用涡旋振荡器振摇,使混合
均匀,置超声提取器中超声提取 30 min。提取结束后,于
4000 r/min离心 10 min,弃去上清液。不溶物用 10 mL乙醇溶
液洗涤、离心。用水将上述不溶物转移入圆底烧瓶,加入
50 mL蒸馏水,装上麿口的空气冷凝管,于沸水浴中提取
2 h。冷却至室温,过滤,将上清液转移至 100 mL容量瓶中,
残渣洗涤 2~3次,洗涤液转至容量瓶中,加水定容。此溶液
为样品测定液。
1.2.2 柞蚕蛹虫草多糖供试液的制备 将上述样品测定液
摇匀,吸取 1 mL至 10 mL容量瓶中,用蒸馏水定容,摇匀备
用。
1.2.3 标准曲线的建立 精密称取经 105℃干燥至恒重的葡
萄糖 100 mg,置于 1000 mL容量瓶中,加蒸馏水定容至刻度,
摇匀。分别吸取 0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL的标准葡萄糖工作
溶液置 25 mL具塞玻璃试管中,用蒸馏水补至 1.0 mL。向试
液中加入 1.0 mL5%苯酚溶液,然后快速加入 5.0 mL硫酸,静
置 10 min。使用涡旋振荡器使反应液充分混合,将试管放置
于 30℃水浴中反应 20 min,以 1.0 mL蒸馏水按同样显色操作
为空白,490nm测吸光度。以葡聚糖或葡萄糖质量浓度为横
坐标,吸光度值为纵坐标,绘制葡萄糖标准曲线。并得出标
准曲线的回归方程。
1.2.4 多糖含量的测定 将热水抽提得到的柞蚕蛹虫草不
同部位多糖提取液稀释 10倍,得到多糖样品液。吸取 1.0 mL
样品溶液于 25 mL具塞试管中,按照 1.2.3方法操作测定吸光
度,平行测定 3次。同时做空白试验。根据标准曲线的回归
方程计算出多糖液中葡萄糖的质量分数m1,并按下式计算样
品中多糖的质量分数w,单位以克每百克(g/100 g)表示。
W = m1 × v1m2 × v2 × 0.9 × 10-4
式中:m1-从标准曲线上查得样品测定液中含糖量,单位为
微克(μg);v1-样品定容体积,单位为毫升(mL);v2-比色测
定时所移取样品测定液的体积,单位为毫升(mL);m2-样品
质量,单位为克(g);0.9-葡萄糖换算成葡聚糖的校正系数。
2 结果与分析
2.1 葡萄糖标准曲线的建立 葡萄糖标准溶液的浓度及相
应吸光值见表 1,葡萄糖标准曲线见图 1。表明在质量浓度为
20~100 μg/mL时,葡萄糖质量浓度与吸光值之间呈现出良
好的线性关系,很好地符合了郎伯-比尔定律。
工作方程:浓度=104.020×ABS+0.522
相关系数:0.9995。
收稿日期:2014-01-22一稿;2014-08-04修改稿。
基金项目:吉林市科技局,蛹虫草多糖提取与纯化关键技术研究。
作者简介:陈丹,研究员,主要从事食用菌育种、栽培技术、成分分
析等。联系电话:0432-64811500。*通讯作者。
营 养 成 分
62
dible fungi2014(5)
2.2 不同样品多糖含量测定结果 多糖含量测定结果见表2。
表2 蚕蛹虫草不同部位(样品)多糖含量
样品
名称
样品 1
样品 2
样品 3
样品 4
多糖含量/%
I
8.00
3.05
2.43
3.88
II
7.90
3.10
2.41
3.95
III
8.09
3.14
2.50
4.01
Tt
23.99
9.29
7.34
11.84
Xt
8.00
3.1
2.45
3.95
RSD/%
0.79
0.97
1.63
1.01
由上表 2可见,子实体多糖含量最高,是柞蚕蛹虫草全草
多糖含量的 2.06倍,多糖含量最低的是去皮后的僵蛹部分。
方差分析结果见表 3。
变异来源
区组间
部位间
误差
总变异
DF
2
4
8
14
SS
0.006
79.65
0.034
79.69
MS
0.003
19.91
0.004
F
0.75
4977.5
F0.05
4.46
3.84
表3 方差分析
由表 3可见,重复间无显著差异;对不同部位间 F=
4977.5>F0.05,说明柞蚕蛹虫草不同部位多糖含量是有显著差
异。
3 小 结
研究通过以柞蚕蛹为寄主的柞蚕蛹虫草不同部位多糖
含量的测定,试验结果有显著差异。4个柞蚕蛹虫草样品中,
多糖含量由高到低依次为:柞蚕蛹虫草子实体>柞蚕蛹虫草
全草>子实体基部的菌膜及蛹皮>去掉表皮的僵蛹。研究结
果与来永斌[3]等试验结果相同。因此,开发、利用蛹虫草多糖
应以子实体为原料进行深加工。蛹虫草不同菌株或不同寄
主及不同的栽培条件对多糖含量是否存在显著差异,有待进
一步研究。
参考文献
[1] 王飞,陈柳萌,肖婧,等.北虫草液体发酵产多糖培养基优化研
究[J].江西农业学报,2007,19(5):86-87.
[2] 王建壮,安洁,吕华冲.蛹虫草子实体中多糖含量测定方法的研
究[J].中国现代药物应用,2008,152(215):19-20.
[3] 来永斌,王琦,孙月.蛹虫草多糖含量的测定与分析[J].中成药 ,
2001,23(7):517-518.
试验
号
1
2
3
4
5
6
葡萄糖溶液
加入体积/mL
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
葡萄糖溶液质量
浓度/(μg·mL-1)
0
20.00
40.00
60.00
80.00
100.00
吸光
值A
0
0.181
0.380
0.565
0.778
0.950
表1 葡萄糖标准溶液的浓度及相应吸光值
图1 葡萄糖标准曲线
营 养 成 分
上海菇粮时代即将来临 百城万店抢占社区终端
近日,“中国菇粮时代高峰论坛暨大山合‘百城万店’创新商业
模式战略研讨会”在上海成功举办。会上,专家们对菇粮时代的健
康理念和营销模式进行热烈探讨。
据了解,目前全球有机食品市场每年都在以高速率增长,而国
内的有机食品还处于发展阶段,供不应求。在众多的有机食品中,
菌菇类产品营养丰富,口感甚好,加上符合世界卫生组织提出的一
荤一素一菌膳食理念,菌菇类产品备受消费者推崇。饮食行业正从
粗粮时代过渡到杂粮时代,即将迈进菇粮时代。
针对中国食用菌产业巨大的发展空间,中国菇菌全产业链领跑者
——大山合集团的“百城万店”计划旨在解决菌菇培育基地到厨房餐
桌的最后半公里难题。据上海大山合菌物科技股份有限公司董事长、
菇粮时代的倡导者毛传福介绍,“百城”就是在全国各主要城市各设一
个城市发展商(经销商),销售大山合全品项产品,全面覆盖当地有代
表性的商超、餐饮、农贸、特产店、团购礼品及流通等渠道。“万店”就是
城市发展商在当地农贸批发市场或城市次商圈开设大山合“菇粮时
代”专卖店作为旗舰店,以旗舰店为样板,开发“菇粮时代”社区专卖
店,真正让广大消费者能听得到、看得到、闻得到、买得到。
菇粮时代摧生了菇菌热,大山合创建的中国菇菌博物馆正成为
成为人们旅游休闲的新去处。此外,大山合还创建了体验式休闲农
场——百菇园,通过自采自摘的销售模式,不断提升消费者购买体
验,迎合了大众需求,深受消费者欢迎。
(连静荐自中国食用菌商务网)
·信息·
图2 子实体 图3 菌膜及蛹皮 图4 去皮后的僵蛹 图5 蛹虫草全草
浓度/(μg·mL-1)
1.0
0.9
0.8
0.7
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0 20 40 60 80 100
0.778
0.95
0.565
0.380
0.181
0
吸
光
值
A
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