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柞蚕蛹虫草不同部位多糖含量的测定



全 文 :2014(5)dible fungi
柞蚕蛹虫草不同部位多糖含量的测定
陈 丹 1* 韩建华 1 杨淑芳 1 孙继红 1 周成利 1 姜振国 1 魏长林 2
(1吉林省蚕业科学研究院,吉林市 132012;2东辽县农业机械局,吉林东辽 136600)
摘 要 采用苯酚-硫酸法测定柞蚕蛹虫草不同部位多糖含量,
结果表明柞蚕蛹虫草多糖百分含量子实体部分高于蛹体,子实
体多糖含量是蛹体的 3.27倍。
关键词 柞蚕蛹虫草 子实体 多糖含量
文章编号 1000-8357(2014)05-0062-02
冬虫夏草系冬虫夏草菌(Cordyceps sinensis)寄生在鳞翅
目虫草蝙蝠蛾(Hepialus amoricanus)幼虫上所形成的子座与
菌核组成的复合体,为名贵中药材。虫草味甘性平,主要功
效为保肺肾、补精髓、化痰止劳咳,多用于肺肾两虚症。由于
天然冬虫夏草生长环境和寄生条件特殊,产量低、价格昂
贵。目前多开发利用蛹虫草为冬虫夏草的替代品。蛹虫草
[Cordycep smilitaris(L.)Link]又称北冬虫夏草,蛹虫草与冬虫
夏草具有相似的活性成分与药理作用 [1],现有的多数文献认
为人工培养的柞蚕(Antheraea pernyi Guerin-Meneville)蛹虫
草其有效成分和含量与冬虫夏草相仿,有的甚至更高。所
以,近年来蛹虫草的研究取得了迅速的发展。虫草多糖作为
虫草中含量最高的生理活性物质,引起了人们对它的极大兴
趣和广泛关注。大量医学实验证实,虫草多糖不仅具有抗肿
瘤、降糖、抗放疗、抗肝纤维化作用,还能活化巨噬细胞刺激
抗体产生,提高人体免疫能力及治疗肝的病毒性感染。因
此,多糖常常作为虫草类药物质量控制的指标之一 [2]。鉴于
多糖重要作用,笔者对柞蚕蛹虫草不同部位的多糖含量进行
比较,为蛹虫草多糖提取、开发利用提供科学依据。
1 材料与方法
1.1 供试材料 ①柞蚕蛹虫草:柞蚕蛹虫草是蛹虫草子实
体和僵化蛹体的复合体,由吉林省蚕业科学研究院虫草研究
所提供。将柞蚕蛹虫草分成三部分即样品 1:蛹虫草子实体;
样品 2:子实体基部的菌膜及蛹皮;样品 3:去掉表皮的僵蛹;
样品 4:为柞蚕蛹虫草全草(图 1~4)。将样品置烘箱中 60℃
烘至恒重,粉碎后过 20目筛。②主要仪器和试剂 电热恒温
水浴锅,721紫外分光光度剂,电子分析天秤等。葡萄糖,硫
酸,重蒸酚,上述药品均为分析纯。
1.2 测定方法
1.2.1 多糖液的提取 按照中华人民共和国农业行业标准
NY/T 1676-2008《食用菌中粗多糖含量测定》样品的提取操
作。称取 0.5~1.0 g柞蚕蛹虫草样品,用 5 mL水浸润样品,缓
慢加入 20 mL无水乙醇,同时使用涡旋振荡器振摇,使混合
均匀,置超声提取器中超声提取 30 min。提取结束后,于
4000 r/min离心 10 min,弃去上清液。不溶物用 10 mL乙醇溶
液洗涤、离心。用水将上述不溶物转移入圆底烧瓶,加入
50 mL蒸馏水,装上麿口的空气冷凝管,于沸水浴中提取
2 h。冷却至室温,过滤,将上清液转移至 100 mL容量瓶中,
残渣洗涤 2~3次,洗涤液转至容量瓶中,加水定容。此溶液
为样品测定液。
1.2.2 柞蚕蛹虫草多糖供试液的制备 将上述样品测定液
摇匀,吸取 1 mL至 10 mL容量瓶中,用蒸馏水定容,摇匀备
用。
1.2.3 标准曲线的建立 精密称取经 105℃干燥至恒重的葡
萄糖 100 mg,置于 1000 mL容量瓶中,加蒸馏水定容至刻度,
摇匀。分别吸取 0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL的标准葡萄糖工作
溶液置 25 mL具塞玻璃试管中,用蒸馏水补至 1.0 mL。向试
液中加入 1.0 mL5%苯酚溶液,然后快速加入 5.0 mL硫酸,静
置 10 min。使用涡旋振荡器使反应液充分混合,将试管放置
于 30℃水浴中反应 20 min,以 1.0 mL蒸馏水按同样显色操作
为空白,490nm测吸光度。以葡聚糖或葡萄糖质量浓度为横
坐标,吸光度值为纵坐标,绘制葡萄糖标准曲线。并得出标
准曲线的回归方程。
1.2.4 多糖含量的测定 将热水抽提得到的柞蚕蛹虫草不
同部位多糖提取液稀释 10倍,得到多糖样品液。吸取 1.0 mL
样品溶液于 25 mL具塞试管中,按照 1.2.3方法操作测定吸光
度,平行测定 3次。同时做空白试验。根据标准曲线的回归
方程计算出多糖液中葡萄糖的质量分数m1,并按下式计算样
品中多糖的质量分数w,单位以克每百克(g/100 g)表示。
W = m1 × v1m2 × v2 × 0.9 × 10-4
式中:m1-从标准曲线上查得样品测定液中含糖量,单位为
微克(μg);v1-样品定容体积,单位为毫升(mL);v2-比色测
定时所移取样品测定液的体积,单位为毫升(mL);m2-样品
质量,单位为克(g);0.9-葡萄糖换算成葡聚糖的校正系数。
2 结果与分析
2.1 葡萄糖标准曲线的建立 葡萄糖标准溶液的浓度及相
应吸光值见表 1,葡萄糖标准曲线见图 1。表明在质量浓度为
20~100 μg/mL时,葡萄糖质量浓度与吸光值之间呈现出良
好的线性关系,很好地符合了郎伯-比尔定律。
工作方程:浓度=104.020×ABS+0.522
相关系数:0.9995。
收稿日期:2014-01-22一稿;2014-08-04修改稿。
基金项目:吉林市科技局,蛹虫草多糖提取与纯化关键技术研究。
作者简介:陈丹,研究员,主要从事食用菌育种、栽培技术、成分分
析等。联系电话:0432-64811500。*通讯作者。
营 养 成 分
62
dible fungi2014(5)
2.2 不同样品多糖含量测定结果 多糖含量测定结果见表2。
表2 蚕蛹虫草不同部位(样品)多糖含量
样品
名称
样品 1
样品 2
样品 3
样品 4
多糖含量/%
I
8.00
3.05
2.43
3.88
II
7.90
3.10
2.41
3.95
III
8.09
3.14
2.50
4.01
Tt
23.99
9.29
7.34
11.84
Xt
8.00
3.1
2.45
3.95
RSD/%
0.79
0.97
1.63
1.01
由上表 2可见,子实体多糖含量最高,是柞蚕蛹虫草全草
多糖含量的 2.06倍,多糖含量最低的是去皮后的僵蛹部分。
方差分析结果见表 3。
变异来源
区组间
部位间
误差
总变异
DF
2
4
8
14
SS
0.006
79.65
0.034
79.69
MS
0.003
19.91
0.004
F
0.75
4977.5
F0.05
4.46
3.84
表3 方差分析
由表 3可见,重复间无显著差异;对不同部位间 F=
4977.5>F0.05,说明柞蚕蛹虫草不同部位多糖含量是有显著差
异。
3 小 结
研究通过以柞蚕蛹为寄主的柞蚕蛹虫草不同部位多糖
含量的测定,试验结果有显著差异。4个柞蚕蛹虫草样品中,
多糖含量由高到低依次为:柞蚕蛹虫草子实体>柞蚕蛹虫草
全草>子实体基部的菌膜及蛹皮>去掉表皮的僵蛹。研究结
果与来永斌[3]等试验结果相同。因此,开发、利用蛹虫草多糖
应以子实体为原料进行深加工。蛹虫草不同菌株或不同寄
主及不同的栽培条件对多糖含量是否存在显著差异,有待进
一步研究。
参考文献
[1] 王飞,陈柳萌,肖婧,等.北虫草液体发酵产多糖培养基优化研
究[J].江西农业学报,2007,19(5):86-87.
[2] 王建壮,安洁,吕华冲.蛹虫草子实体中多糖含量测定方法的研
究[J].中国现代药物应用,2008,152(215):19-20.
[3] 来永斌,王琦,孙月.蛹虫草多糖含量的测定与分析[J].中成药 ,
2001,23(7):517-518.
试验

1
2
3
4
5
6
葡萄糖溶液
加入体积/mL
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
葡萄糖溶液质量
浓度/(μg·mL-1)
0
20.00
40.00
60.00
80.00
100.00
吸光
值A
0
0.181
0.380
0.565
0.778
0.950
表1 葡萄糖标准溶液的浓度及相应吸光值
图1 葡萄糖标准曲线
营 养 成 分
上海菇粮时代即将来临 百城万店抢占社区终端
近日,“中国菇粮时代高峰论坛暨大山合‘百城万店’创新商业
模式战略研讨会”在上海成功举办。会上,专家们对菇粮时代的健
康理念和营销模式进行热烈探讨。
据了解,目前全球有机食品市场每年都在以高速率增长,而国
内的有机食品还处于发展阶段,供不应求。在众多的有机食品中,
菌菇类产品营养丰富,口感甚好,加上符合世界卫生组织提出的一
荤一素一菌膳食理念,菌菇类产品备受消费者推崇。饮食行业正从
粗粮时代过渡到杂粮时代,即将迈进菇粮时代。
针对中国食用菌产业巨大的发展空间,中国菇菌全产业链领跑者
——大山合集团的“百城万店”计划旨在解决菌菇培育基地到厨房餐
桌的最后半公里难题。据上海大山合菌物科技股份有限公司董事长、
菇粮时代的倡导者毛传福介绍,“百城”就是在全国各主要城市各设一
个城市发展商(经销商),销售大山合全品项产品,全面覆盖当地有代
表性的商超、餐饮、农贸、特产店、团购礼品及流通等渠道。“万店”就是
城市发展商在当地农贸批发市场或城市次商圈开设大山合“菇粮时
代”专卖店作为旗舰店,以旗舰店为样板,开发“菇粮时代”社区专卖
店,真正让广大消费者能听得到、看得到、闻得到、买得到。
菇粮时代摧生了菇菌热,大山合创建的中国菇菌博物馆正成为
成为人们旅游休闲的新去处。此外,大山合还创建了体验式休闲农
场——百菇园,通过自采自摘的销售模式,不断提升消费者购买体
验,迎合了大众需求,深受消费者欢迎。
(连静荐自中国食用菌商务网)
􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅􀤅
·信息·
图2 子实体 图3 菌膜及蛹皮 图4 去皮后的僵蛹 图5 蛹虫草全草
浓度/(μg·mL-1)
1.0
0.9
0.8
0.7
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0 20 40 60 80 100
0.778
0.95
0.565
0.380
0.181
0



A
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