全 文 ：第 41卷
19 9 2年
第 3期
8月
吉 林 农 业 大 学 学 报
Jo u n r以 of J让 ni A g rci以 t u r目 U瓜 v e r对 t
VLO 14
A u乡
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.
3
19 9 2
柞蚕蛹感温发育阶段蛹体 a一生育酚
与胆 固醇含量的变化 `
范玉林 白秀娟 李跃华 鞠贵春 关友荣
(吉林农业大学 )
摘要 柞蚕蛹在 1 8℃恒温发育阶段 ,蛹体内一生育酚和胆固醇含量有明显变化 . 感渴前 10
夭蛹休 。一生育酚含童提高 2~ 5 倍 , 10 天后明显下降 . 而胆固醉含量随着感温天数显著下降 ,
成蛾时几乎不含胆固醇 。 因此 , 蛹休内一生育酚和胆固醉含量的变化 ,可作为判断茧蛹感温
发育阶段的依据 。
关键词 柞蚕 蛹 a一生育酚 胆固醇
柞蚕蛹的发育在养蚕业和繁殖赤眼蜂的生产中是一个重要环节 。 一般采用计算积温
和观察蛹的各器官发育状况确定发育天数 。但是大量生产时需要分期分批暖茧 ,如何准确 魂
地判断其发育进度 , 又佳度较大 ,尤其是暖茧场地温度变化较大 ,冬贮和运输时更难掌握 。
过去一般只根据发育形态观察 , 不够准确 。 因此 ,我们经过反复预试发现柞蚕蛹感温
发育阶段体内 以一生育酚与胆固醉含量的变化可以用来判断发育天数 , 在生产中具 有实
用石”旋 。
1 柯料和方 法
1
.
1 材料 柞贡茧取自本校生物防治研究所感温不同时期的雄茧和雌茧 .
i
,
2 试验条件 柞工涌发育的起点温度是 9 ℃ ,有效积温为 2 20 日 · ℃ ,相对湿度 70 写
左右 。 址 i玉己度是 } 8一功 C 。
本试验将柞蚕 涌 过于 18 C恒温箱中 ,湿度 70 %条件下进行发育 。
l
·
3 试验柞本制备
}
.
3
.
J 试验样 品取呢茧 5 天 、 10 天 、 15 天 、 20 天 、 25 天 5 个恒温发育期 雌茧 、 雄茧各 d
个 , 井以不加温的休 ilK 茧为对照 。
1
.
3
.
2 将各期暖茧剖开取出蛹称重 ,研碎 , 50 ~ 60 ℃供干后测其水分含量 。
卜 」 l 暖茧恒温发育期其蛹体主要成分提取和含量测定
!
.
1
.
1 生育酚 含虽测定 应用制备型薄层层析法分离蛹体 中生育酚 ,采用 2 , 2 , 一联毗
咙的 E n 、: : : e一 R 一e 。 :飞。 x法 。
, 收稿日欺 : }勺勺之一 。 4 一 2 5
DOI : 10. 13327 /j . j jl au. 1992. 03. 017
第 1月卷 第 3期 范玉林等 :柞蚕蛹感温发育阶段蛹体一生育醋与胆固醉含最的变化
提取 :精密称取不同发育期干制样本 5一 15 0,装入滤纸筒内分别置入索氏抽提器内 ,
乙醚回流提取 2」h , 回收乙醚 ,得油状调膏 。
皂化 : 油状物加 ZN K o H 甲醉液 10m l , 7 0 ~ 8 0℃水浴 加温 3 0un
。 冷却后加 2 0~ 3 0m l
燕馏水并移至分液漏斗 , 用乙醚萃取 3 次 ,每次 20 ~ 30 而 ,合并醚液 , 水洗至中性 ,通过无
水硫酸钠回收乙醚 ,得淡黄色油状物 (非皂化物 ) ,定容 ,备用 。
Q一生育酚薄层制备 : 取 20 x 2 0C m 硅胶 C M C 一 N a 板于 1 05 ℃活化 3 0m in ,每块点样
2 0 0闪 ,并于一侧点 1。川标准维生素 E 乙醇液 。
用苯展开 , 展至 1 c5 m ,取出层析板吹干 , 标准品部位显色 ,样品覆盖 ,根据标准品显色
部位刮取试样相应部位 , 并将试样部位硅胶 C M c 一 N a 用滤纸包好置索氏提取器内 , 乙醚
DS刁320.0.0提取 如 , 回收乙醚 , 残渣用无水乙醇定容 ,备
用 。
比色测定 : 应用三 氯化铁一 2 , 2 ’一联毗
吮显色 ,选择波长 5怕二 测定其吸收值 。
1
. 组. 2 总胆 固醇含量测定 试样 中胆 固醇
的提取 、 皂化同 。一生育酚操作 。
胆固醇标 准曲线的绘制 : 精密吸取胆 固
醇 氯仿液 ( 0 . 2 5 n 飞s / n u ) 1 、 2 、 3 、 4 、 s m l ,分别置
入 2 0ml 比色管中 ,各加醋配一浓硫酸显色剂
3刘 , 用 氯 仿加 至 1加 il , 混 匀 后 , 20 ℃保 温
3 Om in 后取出 ,置冰水浴中 ,选择波长 62 Omn
测定其吸收值 (图 1 ) 。
试样中胆固醇含量测定 : 取皂化后非皂化液
同标准曲线制作 。
0 0
.
2
图 1
0
.
4 0
.
6 0
·
8 1
.
C m g
胆固醉标准曲线
3 ~ s m l
,加醋醉一浓硫酸 3m l ,余下操作
结果与分析
不同感温期蛹体内水分
表 l 蛹体水分含 t ( % )
一 5 天 1 0天 1 5天 2 0 天 2 5 天项 目—雌 雄 雌 雄 雌 雄 雌 雄 雌 雄 雌 雄湿重 ( S J 10 . 洲9 7 . 2 1 14 . 4 2 11 . 3 0 10 . 8 4 7 . 7 6 1 2 . 58 7 . 9 6 1 1 . 7 4 6 . 0 9 9 . 69 8 . 1 1干重 ( g ) 2 . 67 1. 69 3 .多2 2 . 7 6 2 . 7 1 1 . 9 0 3 . 0 2 2 . 0 2 2 . 8 4 1 . 5 3 2 . 2 9 2 . 0 4水分 (肠 ) 7 5 . 5 2 7 6 . 5 4 76 . 2 8 7 5 . 5 8 7 5 . 0 0 75 . 5 5 7 5 . 9 9 7 4 . 62 7 5 . 7 9 7 4 . 8 0 7 6 . 39 7 4 . 8 22 . 2 不同感渴期蛹体醚浸出物及其非皂化物
7 4 吉 林 农 业 大 学 学 报 l的 2年
表 2 蛹体含油率及其非皂化物含 . ( % )
5 天 1 0天 1 5天 2 0天 2 5天
雌 雄 雌 雄 雌 ` 堆 雌 雄 帷 雄 雌 堆项 目
含油址 ( g ) 0 . 7 71 7 0 . 8 0 42 0 . 82 5 4 0 . 9 40 0 0 . 9 4 7 0 0 . 8 1 6 8 0 . 81 5 7 0 . 7 3 31 0 . 71 53 0. 7 3 41 0 . 6 7 0 0 . 7 4 1 0
含油率 (绒 ) 2 8 9 0 4 7· 5 2 2 3· 39 3 4· 06 34· 9 5 4 3· 0 7 2 3· 15 36 . 1 7 2 5 . 1 2 4 7 . 9 8 2 9 .必5 36 . 32
非皂化物 ( g ) 0 . 4 6 3 3 0 . 4 71 8 0 . 7 2 8 6 0 . 49 6 0 0 . 5 5 2一 0 . 6 8 1 0 0 . 46 5 0 0 . 49` 5 0 . 5一9 6 0 . 5 09 2 0 . 劝a oo 0 . ` 7 2 0
非皂化物 (% ) 1 7 . 3 7 2 7 . 8 8 2 0 . 6 5 1 7 . 9 7 2 0 . 39 35 . 8 2 1 3 . 19 2 4 . 39 1 8 . 92 33 . 25 2 0 . 9 6 2入 1 3
2
.
3 不同感温期蛹体内 。 一生育酚含量 2 . 4 不同感温期蛹体 内胆固醇含量变化
变化
表 3 蛹体内 。 一生育酚含量 ( % ) 表 4 蛹体内胆固醉含里 ( % )
感进期 (d , 雌 雄 感温期 d( ) 雌 雄
0
.
5 1 0 7 0 一 0 . 2 4 0 . 2 3
2
.
0 2
3
.
3 0
0
.
19
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0
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1 3
510巧加7又né口曰
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5!0比25
3 小 结
3
.
1 雄蛹 、 雌蛹体 内水分含童比较稳定 ,一般在 74 . 62 ~ 7 6 . 5 4% 范围内 。 含油率雄比雌
高 : 雄蛹含油率为 3 4 . , 5一 47 . 98 写 ,雌蛹含油率为 23 . 15 ~ 34 . 95 环 。 非皂化物含量雄蛹为
17
·
9 7一 3 5 . 8 2环 ,雌蛹为 1 3 . 1 ,一 2 0, 9 6写 ,波动范围较大 。
3
.
2 柞蚕蛹滞育期 ,体 内 。一生育酚含量较低 , 约在 0 . 5一 0 . 7 %之间 ,感温 5一 l如 含量
明显增加达 1 . 洲 一 3 . 3 0环 ,感温 1 d0 后又 明显下降 ,至 2 d5 时为 0 . 3~ 0 . 4写 (图 2) 。
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图 之 茧蛹感温期体内 。一生育酚含量变化 图 3 茧蛹感温期体内胆固醉含呈变化
3
.
3
化
柞蚕捅感况期 . 体内胆固醇含量随着感温天数而下降 , 至成蛾时 ,含量较低 ,这一变
雌涌更为明显 (图 3 ) 。 (下转第 78 页 )
吉 林 农 业 大 学 学 报 1 9 92 年
E L IS A
。
3
.
2 由于结核分枝杆菌感染时 ,机体的细胞免疫与体液免疫是消长分离的 。 因而不能单
纯地用某一种方法来诊断结核病 。 有研究表 明 , 不论在人工感染还是 自然感染的牛中 ,
P P D 制剂会激发机体中结核抗体的产生 。 因此 ,在牛结核病诊断 中 ,先以 P P D 进行变反试
验后 . 再进行血清俭测 ,对提高俭出率有一定意义 。
3
.
3 关于非特异反应 : 克服斑点试验中的非特异性反应 ,首先必须有高度纯化的抗原 ,本
试验选用 P P D 做抗原 , 主要是由于其达到一定的纯度 , 并且具有适合于现场应用于大批
祥不检测等优点 。 但山于 P P D 中仍有一些复杂的抗原组分 . 因而在今后的研究中 ,仍需寻
找一种更加纯化的抗原 , 以彻底排除非待异性反应的发生 , 比如与副结核的交又反应 。 另
外 , 在克服非特异性 反应方面 ,本试验优 选 了封 闭剂 , 在洗涤液中加入 了非离子去污剂
\T 二 。 ;飞2 0 ,还在二抗的纯 化 匕下了功夫 , 从而减少了非特异性 反应的发生 。
3
.
1 B A 一 D o t一 E L洛 A 除敏感性高以外 , 还有节省材料 , 反应快速 , 结果判定不需特殊仪
器 , 且客观 , 标本结果可长期保存等优点 , 因而它不失为一种适于基层单位应用的好方法 。
参 考 文 献
i 章谷生 . 生物工程学报 , ! 9 85 . 1( ! , : 75
2 郭春祥 . 上海兔疫学杂志 , 19 8 7 , 32 ( 2 ) : 9 7一 0 0
3 递魁 奋. 吉林农业大学 顽士研究生论文集 , 19 8 8
4 朱兴全 . 甘不畜仪件派 . 土介吕 , 交6 J 3 1~ 3 2
5 比 一飞二 x飞: L R o r : 。 h P 。 : l d R。 王t o u L . Q 一J、 . 三 x p . z n价 l u l: 0 1. 1日7 7 , 2 7 ( 2 ) : 2 3 0
七 十注j 了〕 戈 入1 、 H江了。 : 弓 C o r 往 l . J . (切 1 , 涌心 r o 19 5 0 , 2 8 ( 5 ) : 9 13 ~ 9 2 1
匕接第 71 页 )
3
.
4 柞蚕蛹 感温发育期庄小体内 。一生育酚和胆固醇 含里变化作为检测蚕蛹加温发育的
有效指标 。 根据 一含虽变化 . 可以判断和鉴定发育进度 ,为 人工控温 、 自动化控制发育进程提
供科学依据 , 对大批童工厂 化生产具有重要的实用价值 。
参 考 文 献
日本食品工业学全 . 食品分 析 方法 . 四川科学技术吊版社 , l洲 5
上 J、 上 . 门延森 . 见么学报 , 19目 , 2 7 ( 3 ) 3 4 8
炎佩坳 . 汗廷森 . 昆上学报 . !日而 . 2已( 3) : 2 08
(、 、 卫I J 工一15认 c i , }工口、 且r {5 2 人了 , , 、 . 、 1 , 【c e以 1盯 A` 伴e st o f I n v e r t c br a r e l m打 l u l l o l。助 巧以沙 ( ’ ` ) r、 f e r e r、代 , 夜 r l王n . 19 8 6 、 9 1一 9 2
V么 1 4 N沁 . 3 E N G U旧 H 人理打习冉口沼 97
加n A N N 声J N IN G (MN N )
B si C k E沁a r— A N七w A n 留 t he ti C U碗刃 F roA n d B r o , v n a 班 r
J U C过 c h l lO e t 目 .
州囚 N 15 a co m op un d a n e s th e t ie 讨 e P a r de w i th d r u gs r 以 d e in o 山砚 , w hi hc ac st a t a 一 r ec e卜
ot r an d m or hP in e r心 P t o r o f ce n t r a l n e r v o us yS s t e m . M入N has a lo n g e r an e s th es 达 til n e to b l a e k
卜级 r an d br o 、 甘n 伙坦 r ht an o ht er an es ht e it cs d o 比 s曰 on t hi n e n a P P l ica t i on . T卜e r e a c t o c c u r ed in
伶be3 t o 5 m i n .
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co r e认 t es 卜沼 l t iv e ly t o ht e an e s t h肠纽 t im e . MN N 15 a id ea l an es t h e ti e to an l n l a is .
加石a n a加此 , B纽全 , A n e s t h e t ic
P h ar ma
e od ” 川 n l cs of “ uL 对 a o y an b a o ” On E x讲 r i , 犯 n alt A n im山
G u a n iT a n y加 9 et al .
“ L xu 比 O班川 ab o ” 1甘` 加 e n u别川 in v e et r i n ar y e l让山班】 tr ae tm e n t in r e c e n t y e a r s . I t c a l l
11 5司 t o 仕 ae t助 s tr oe n t er i e id os r d e sr in r u m in a n st aJ 】d d肠沈旧 s e s o f u P pe r r es irP a ot yr tar e t o f e h i e k -
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L u x 这 o y an 恤 o e an s沐 ed u P ep r is at l血 o f g . s tr oe fnL e r i n e an d u f er m e . I t Ca Jl a l so
如详o v e In u 刀 u n a l fu cn t io n in e x ep r而 e n at l an in 飞a ls .
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: L u x ia o y an 恤 。 , 8那 tr 沈 n t e r ie d i印r d e r , d l别戈幼姆 o f u P ep r r es P ir a ot 灯 tr a e t , ep r is at ls is ,
I l u 刀 u n a l f u n e it o n , e x ep r im e n at l a l
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D a y b y d a y d u r i n s ht e te m ep ar t ur e 一 se sn i此 P r o i d , e h o les t e r o l co n比 n t
d e cr ea s司 5 1岁 11f i e e n t l y , an d b y ht e t im e th e uP 琳 m a ut r ed , ht e r e w as a lm侣 t on e h o l e s t e r o l in i t .
98 E NGI Jg l人困汀卫人 TS l的 2
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a sa ba s治 fr ode te n叭 i九山 8 w he h te r h te P u件 1 5 i nh te e pr id o of te he tme pa r t ue r一 se n` i飞 r on ot·
Ke yWO “ 妇 : t以翻山 ( 刁川人阶俐 洲甲 .妙 ), aJ Ph a t` ` 。 ph eor l , c h ol es t e r o l
A B A 一 D O T一 E U S A F o r eS r od ia gn 喊5 Of B心v in e T u be r e ul os is
W a n g C公 p in g e t a ] ·
B A 一 r加〕t一 琶 11朋 w as c a r r ied o u t ot d e t e c t th e a n t i饮川 ies in ht e s e r a o f ca t t l e in f ec t ed w i ht
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v in e M y co 比e t e r认 , an d ht e 户万 it i v e ar t e o f 7 2 se r a o f ca t U e r es op n“ d 详万 l t iv e ly w i th OB v in e
ut 忱 r e u一讯 P P D s k i n tes t ` 6 9 . 5% , w 衍 e h ` h ihg e r t ll a n t ha t o f th e co un
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it o n o f 4 k i〕北 o f se ar o f ca t d e d扭 8n “ 曰 as B lu e e l l os is , M u c O ` a e d汤级se , a l川 2 k in ds o f se ar o f
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u n加川 w i山 M . K a l址益资SL “ 仙 d M . F o r t u i tum , 如 d 5 0 se 该 of ca t le r es op 几鱿泪 户` ti鸭 ly
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曰 J IS A I甘 15 be t et r er ep a at t io n an d 15 a s如 P l e an d ar P id m e t h od . I t n e d n o t an y s p戈达 1 eq u i Pm e nt
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I s o la t i o n
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O r g a n i e A e i d一 P r de u e i n g aB e t e r ia
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T ll远 件pe r 歇 u d ies i匆 la t l o n , i d e n t i f ie a t io n an d gr o w in s o f o r参山 I c a 口 d 一 P r od u c i sn b ac t e r达 :
S tr e P toc oc e u s f a e d u m
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. 劝 l e th r e s ep c闭
ba e t e r 该 c a l l gr o w i n d i f f e r e n t P H e o n d i t io n an d r e q u ir e id f f e r e n t e o n e e n t r a t i o n o f o x儿 e n . T h e y
a l l c a JI be u se d as b i o l o s `ca l an t宜se P ti e ba e t e r i u m s atr isn f` t h e y aer
e o m b in 司 an d gr o w n in th e
S U l e C o n d it i o n
.
K e y W o r d s
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