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蛹草的研究进展



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(收稿日期: 2002-04-28)
蛹 草 的 研 究 进 展
汤晓 斌贝 ,丁选胜
(南京中医药大学 ,江苏 南京 210029)
    关键词: 蛹草 ;培育技术 ;化学成分 ;药理作用 ;临床应用
    中图分类号: R282. 71    文献标识码: A    文章编号: 1004-2199( 2002) 04-0050-04
  蛹草 ,又名蛹虫草 ,北虫草 ,北冬虫夏草。国内于 1958年
在吉林省首次发现 ,经鉴定它与冬虫夏草 Cordyceps sinensis
( Berk. ) Sacc.为同一属 ,故定名为蛹草 C. militaris ( L. )
Link.。 河北、陕西、安徽、广西、四川、云南等省区亦有分布。
《新华本草纲要》称 ,蛹草“全草:味甘 ,性平。 有益肺肾 ,补精
髓 ,止血化痰的功能” [1]。 可见其功效与冬虫夏草近似 ,故一
些医家将其作为冬虫夏草的替代品入药应用。 近年来 ,就蛹
草的培育技术 、化学成分、药理作用及临床应用方面进行了
大量的研究 ,现综述如下。
1 培育技术
蛹草的自然资源非常有限 ,但人工培育已获成功 ,并已
实现规模化生产。目前蛹草人工培育以培养子座和菌丝体为
主。 可选取新鲜虫体 ,消毒 ,在无菌条件下切去虫体外层 ,取
白色组织置于加有 50μg /mg链霉素的培养基上 ,于 20℃温
箱中培养 10天左右 ,即长出白色绒毛状菌丝 ,有浅黄色色素
生成 ,以此作为母种 [2];或在无菌条件下在蛹草子实体不同
部位切取组织 ,消毒后接种在培养基上生成母种 [3 ]。 母种可
转接于人工培养基上 ,培养基可以大米饭、马铃薯、酵母 ,麦
·50· 基层中药杂志  2002年 第 16卷 第 4期Primary Journal o f Chinese Materia M edicaDOI : 10. 13728 /j . 1673 -6427. 2002. 04. 028
芽等为主 ,改用昆虫蛋白做营养基质 ,有助于特殊养分的富
集 ,可提高产品质量 ,接种后的培养基在适宜的条件下即可
进行菌丝体培养和子实体培养 [4]。也可将母种接种于人工寄
主 ,如表面消过毒的蚕蛹体上 ,培育人工蛹草 ,但成本较
高 [5]。 有文章报道利用瓶载技术培养蛹草子座 ,以罐头瓶为
容器 ,以大米、玉米和高粱米为培养基 ,加 1. 0 g磷酸钾 , 0. 5
g硫酸镁 , 2片维生素 B1 ,并取少量鸡蛋清加入 1 000 ml水中
调匀后拌料。 培养基含水量为 100~ 120% ,常规装瓶 ,灭菌。
接种后在室温 11~ 18℃ ,相对湿度 50~ 60% ,避光或黑暗条
件下培养出蛹草菌丝 ,然后增加光照以形成子座。这种方法 ,
材料易得 ,价格便宜 ,容易实施 [6]。用在罐头瓶内形成的子座
分离母种 ,能再次形成子座 ,并且瓶栽子座较野生的更为粗
壮 ,还能形成二潮子座 [7]。
2 化学成分
研究表明 ,蛹草含蛋白质 ,氨基酸 ,糖类 ,核苷酸 ,甘露醇
(虫草酸 ) ,生物碱 ,超氧化物歧化酶 ( SOD)等化学物质。
2. 1 蛋白质、氨基酸 有报道称蛹草蛋白质含量 33. 44% ,
比冬虫夏草高 11. 6%。蛹草所含 17种氨基酸中 ,除组氨酸和
精氨酸含量与冬虫夏草接近外 ,其余 15种含量均高于冬虫
夏草 [8]。 张显科等证实大米培育的蛹草子实体中 18种氨基
酸齐全 [9]。 另有报道说 ,寄主不同的两种蛹草: 桑蚕蛹草
Cordyceps militaris ( Bombyxmori )和柞蚕蛹草 Cordyceps
militari ( Anther aea Pernyi)和冬虫夏草所含氨基酸比较 ,蛹
草中游离氨基酸的种类与冬虫夏草基本相同 ,但含量差别较
大。 游离氨基酸总含量: 柞蚕蛹草 ≤冬虫夏草 <桑蚕蛹
草 [10]。 通过对人工培育的蛹草和野生蛹草氨基酸的比较分
析 ,发现野生蛹草中含有的氨基酸在人工培育的蛹草中几乎
都含有 ,并且在以蚕蛹为培养基质生长的蛹草中氨基酸总量
及人体必需的八种氨基酸含量均高于野生型及其他人工培
育型的蛹草 [11]。
2. 2 多糖 苯酚 -硫酸法测定野生和人工培育蛹草中多糖
含量证明 ,人工培育蛹草多糖的最大提出量为 9. 84% ,野生
蛹草为 13. 13% ,野生蛹草多糖含量要比人工培育蛹草
高 [12]。 盖新杰等从蛹草菌丝培养液中提取水溶性多糖 ,分离
纯化得到一种含少量蛋白的半乳甘露聚糖 CM-I,分子量 2. 7
× 104 , [α]D19= + 54. 7°,糖组成摩尔比: 半乳糖∶甘露糖= 6
∶ 5。经分析 , CM-I具有高度分枝结构 ,以 β -( 1→ 2)连接的甘
露糖为主干 ,支链由较大量 β -( 1→ 6)半乳糖和较大量的 β -( 1
→ 2)呋喃半乳糖构成 ,分别连接在主干的 0~ 4和 0~ 6上。
CM-I的糖链和蛋白质链之间的结合是通过苏氨酸和丝氨酸
的 O-糖苷链连接的 [13]。 又有学者从人工培养的蛹草中得到
粗多糖 ,产率为 5. 07% ,用 Sephadex G-75分离得到蛹草多
糖 ( CM PS) ,相对分子量为 30 000,纯糖含量为 55. 84% ,糖
醛酸含量为 17. 84% ,多糖样品单糖组成摩尔比为: 鼠李糖 -
木糖-甘露糖 -葡萄糖 -半乳糖依次为 1. 00∶ 0. 50∶ 51. 99∶
2. 38∶ 36. 50,结合蛋白含量为 24. 17%。实验证明 , CM PS是
含甘露半乳糖及半乳糖醛酸聚糖的糖蛋白 [14]。
2. 3 核苷类 刘静明等用薄层扫描法对蛹草菌丝的核苷类
成分作了比较 ,发现蛹草和冬虫夏草有着相同的核苷类成
分 ,其中虫草素含量为冬虫夏草的 2~ 5倍 [15 ]。国外报道从蛹
草人工培养液中分离出了 3’ -氨基-3-去氧腺苷及胍氨酸氨
基腺苷 ,又有学者从人工蛹草干燥子实体的乙醇提取物中分
离得到 3’ -脱氧腺苷 ,腺苷 , N6-甲基腺苷 , D5-酰基虫草素 ,
N6-[β-( 2酰氨甲酰 )氧乙基 ]腺苷 ,虫草环肽 A和麦角甾醇过
氧化物 ,β谷甾醇 ,麦角甾醇 ,腺嘌呤 ,虫草菌素等成分 [16]。人
工蛹草子实体 ,冬虫夏草的薄层层析结果表明 , N6-甲基腺苷
仅在人工蛹草子实体中存在 [17]。
2. 4 甘露醇 (虫草酸 ) 据有关报道 ,蛹草与虫草中 D甘露
醇含量相近 ,冬虫夏草为 3. 0~ 8. 78% ,蛹草为 4. 71~ 8.
73% ,蛹草平均含量高于冬虫夏草 [18] .另有实验证明冬虫夏
草甘露醇含量为 5. 47% ,蛹草菌丝分为四组 ,含量依次为 5.
23% , 5. 96% , 5. 07% , 5. 26% [19]。
3 药理作用
3. 1 抗 肿瘤作用  艾氏腹 水瘤小鼠 ip 虫 草菌素
Co rdycepin,每日 15~ 200 mg /kg ,连续 7 d,能延长小鼠的存
活时间 [20 ] ,在组织培养中对人鼻咽癌细胞 ( KB)的生长有抑
制作用 [21]。把甲基甲烷磺酸酯 ( MM S)所致 BALB /C的小鼠
脾脏制成细胞悬液 ,加蛹草提取液培养后进行 DN A修复合
成实验 ( UDS) ,发现蛹草能拮抗癌诱变剂 MM S对 BALB /C
小鼠脾淋巴细胞 DN A的损伤 [22 ]。 在 Swiss小鼠皮下接种
S180癌细胞 50万 ,在 C57BL小鼠皮下接种 lewis肺癌细胞
160万 ,给予蛹草水溶液 5 g· kg- 1· d- 1× 10 d, ig ,发现蛹草
能明显抑制移植性肿瘤 S180和 lewis肺癌的生长 ,延长荷瘤
小鼠的存活时间 ,并减少 lewis肺癌肺部转移的灶数 ,对肺转
移有明显的抑制作用 ,且延长荷瘤小鼠的寿命 ,降低其荷瘤
率 [23]。 刘凤安等报道通过体外药敏实验 ,测定蛹草水煎剂对
人喉癌细胞 ( Hep-2)的作用 ,证明蛹草能抑制喉癌细胞的增
殖性生长 ,对于培养 48 h后将指数生长期的喉癌细胞制成
单细胞悬液 ,加蛹草水煎液 ,给药组癌细胞集落形成率远低
于对照组 ,且效应随药物浓度增大而增大 [24 ]。
3. 2 对免疫功能的影响 实验证明蛹草子实体制剂 300
mg· kg- 1· d- 1和 600 mg· kg- 1· d- 1对荷瘤小鼠连续灌胃
10 d,可使荷瘤小鼠合成抗绵羊红细胞 ( SRBC)抗体 (血清溶
素 )及其抗体形成细胞的速度加快 , N K细胞活性网状内皮和
单核 -巨噬细胞系统的吞噬功能 ,及 TN F-β和 IL-2的分泌水
平均有显著提高 [25]。
3. 3 对心脏的作用 腹腔注射蛹草 ( 5 g /kg )可延长异丙肾
上腺素诱发心肌耗氧量增加小鼠的存活时间 ,对异丙肾上腺
素诱发小鼠心肌耗氧量增加有明显的保护作用 [26] ,还可抑制
异丙肾上腺素刺激后心肌细胞培养液中乳酸脱氢酶的增
加 [27]。 对氯化钡诱发心率失常的大鼠静注蛹草水浸液 2 ml
· kg- 1及生理盐水 ,可在给药后 5 min内转为窦性节律 ,且
能维持 10 min以上 ,将腹腔注射蛹草水溶液 20 ml· kg- 1小
鼠吸入氯仿 ,迅速开胸观察 ,并用 ECG和示波器检测 ,发现
其室颤发生率明显低于对照组 [28]。
3. 4 对中枢的作用 腹腔注射蛹草水浸液 20 ml· kg- 1可
·51·基层中药杂志  2002年 第 16卷 第 4期Primary Journal of Chinese M ateria M edica
明显抑制小鼠自主活动 ,还能与戊巴比妥产生明显的协同催
眠作用 ,提高入睡率 ,显著延长入睡时间 ,可延长戊四氮致惊
厥的潜伏期 ,明显降低惊厥发生率 ;可抑制咖啡因所致惊厥 ,
同时也提高咖啡因对小鼠毒性 ,使死亡率升高 ;还可抗戊四
唑型惊厥 ,降低惊厥率。 蛹草与氯氨酮合用有明显的协同作
用 ,不仅可提高抑制率 ,而且明显延长氯氨酮的抑制时间 ,随
剂量增加而作用增强 ,也能减轻氯氨酮麻醉醒转时的躁动不
安 [28]。
3. 5 抗菌作用 试管稀释法实验证明 ,虫草菌素 1 mg·
ml- 1对枯草杆菌有抑制作用 [29] ,对鸟型结核杆菌也有抑制作
用 [21]。
3. 6 抗疟作用 有报道称小剂量蛹草 ( 1 /20LD50 )即可表现
出较强的抗疟活性 ,与氯奎活性相当 [28 ]。
3. 7 抗疲劳作用 蛹草提取液灌胃可显著延长小鼠游泳时
间 ,有抗疲劳作用 [30]。
3. 8 抗氧化作用 蛹草对小鼠肝组织匀浆有明显的抗脂质
过氧化作用 ,同时亦可抑制心、肾、脑组织匀浆的脂质过氧化
水品 ,以心肌中抑制率最高。 20%蛹草水煎液可抑制亚铁离
子和维生素 C产生的自由基反应所致的大鼠肝线粒体肿胀
和脂质过氧化反应 (体外 ) ,其浓度在 0. 05~ 0. 42 mg· ml- 1
呈量效关系 ,并可以防止丙二醛诱导的呼吸控制率 ( RCR)下
降。 用邻苯二酚自氧化产生超氧化阴离子 ( O2- . ) ,该体系可
被 0. 33 g· L- 1蛹草制剂所抑制 ,说明蛹草有拮抗自由基的
作用 [27] [31 ]。
3. 9 抗炎作用 采用耳部二甲苯诱发致炎和足趾蛋清诱发
炎症的小鼠腹腔注射蛹草 ( 1. 25、 2. 5、 5 g· kg- 1 ) ,结果显示
蛹草有明显的抗炎效果 [26]。
3. 10 耐缺氧作用 将小鼠腹腔注射蛹草水浸液 ( 20 ml·
kg- 1 )可使密闭广口瓶内小鼠存活时间延长 ,有提高小鼠常
压耐缺氧能力 ,作用较心得安 20 mg· kg- 1强 [28]。
3. 11 性激素样作用 蛹草灌胃 5 g· kg- 1或 10 g· kg·
d- 1连续 14 d,可使正常大鼠血浆睾丸酮和血浆皮质醇含量
增高 ,可增加大鼠体重 ,增加包皮腺 ,精囊 ,前列腺的重量及
去势大鼠的精囊、前列腺重量 [32 ]。
4 临床应用
沈均等报道以蛹草治疗老年性痴呆 ,观察组以单一蛹草
治疗 , 6 g /d- 1分三次服用 ,对照组以单一维生素 E治疗 , 30
mg· d- 1分三次服用 ,疗程为 16周 ,期间不服用其他健脑益
智药。 观察组显效率为 25. 72% ,总有效率 57. 14% ;对照组
显效率 11. 43% ,总有效率 34. 28% [33 ]。
杨企震等将蛹草试用于 49例不同癌症病人 ,初步表明
蛹草在临床上对鼻咽癌、贲门癌、胃癌、肺癌等确有一定疗
效。 有效 (症状改善 ) 13例 ,显效 (症状明显改善或癌肿缩小 )
23例 ,无效 13例 ,总有效率 73. 5%。 坚持服用 2~ 3个疗程
后患者症状和体征有改善 ,特别对脾胃阳虚者疗效更佳 ,未
见明显毒副反应 [34]。
5 讨论
蛹草与冬虫夏草为同属真菌植物 ,其化学成分和药理作
用基本相同 ,所以临床上常将蛹草作为冬虫夏草的替代品入
药。但蛹草与冬虫夏草虽属同属植物 ,由于种的不同 ,其化学
成分和药理作用常有某些差异之处 ,所以临床上所治病症可
能有所差异。且蛹草大多为人工培育品 ,由于生长条件 ,寄主
及吸收营养的不同 ,成分及作用可能与野生品有差异。 野生
品寄主较杂 ,蛹草中寄生的幼小昆虫及杂菌有可能对其成分
及作用产生影响 ,而人工培育品比较稳定。可见 ,蛹草是否可
以作为冬虫夏草的替代品仍需做大量研究工作。
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芦荟多糖的研究进展
王俊玲 1 ,冉延涛 2 ,宗志敏1 ,魏贤勇 1
( 1.中国矿业大学化学工程学院 ,江苏 徐州 221008;
2.河南神火煤电股份有限公司运销部化验室 ,河南 永城 476600)
    关键词: 芦荟 ;多糖 ;提取 ;鉴定 ;药理学
    中图分类号: R284. 1    文献标识码: A    文章编号: 1004-2199( 2004) -0053-03
  芦荟 ,百合科多年生草本植物 ,大约有 300多个品种 ,且
分布极广 [1]。其中我国的特有品种—中华芦荟 (Aloe vera L.
va r. chinensis( Haw . ) Berg er)含有较高的活性成分 ,是一种极
具开发潜力的芦荟品种。 作为天然药用植物 ,芦荟已有几千
年的药用历史。 在日本 ,人们称之为“家庭医生”和 “不用大
夫” [2]。 我国早在唐代的《本草拾遗》就记载了芦荟的药用价
值 [3, 4] ,被誉为世界标准药典的《英国药典》对其也有入药记
载 [1]。 芦荟多糖是芦荟的主要药用成分之一 ,它可以提高生
物体的免疫力 ,具有抗肿瘤、抗癌和抗爱滋病 ( AIDS)等功
效 ,这已经引起了医学界的极大重视 [5~ 7] ,且其药效在理论
和实际中都得到了广泛验证 [8 ]。 随着社会的进步 ,人们生活
水平和思想意识的提高 ,全天然无任何副作用的药品、化妆
品和保健品满足了人们渴望健康长寿的要求。本文仅对芦荟
的活性成分 -芦荟多糖进行研究讨论 ,以期为芦荟的深加工
提供科学依据。
1 多糖类物质的性能及功效
多糖类物质是生命代谢不可缺少的重要物质 ,是由多个
单糖或其衍生物聚合而成的大分子活性化合物 [9 ]。多糖入药
始于 1943年 [10 ] ,六十年代人们开始发现多糖复杂的生物活
性和功能: 它可作为一种广谱免疫促进剂调节免疫功能 ,能
够促进蛋白质和核酸的生物合成 ,调节细胞的生长 [11 ]。 又因
多糖毒性极小 ,所以在生命科学领域中 ,多糖类物质将成为
继蛋白质和核酸之后的探索生命奥秘的第三里程碑。
2 芦荟多糖的提取与鉴定
我国天然多糖资源丰富 ,目前对多种多糖已有较深入的
研究 ,如植物多糖中的人参多糖、当归多糖和枸杞多糖等 ;动
物多糖中的壳多糖、硫酸多糖和肝素等 ;微生物多糖中的香
菇多糖、灵芝多糖和茯苓多糖等。芦荟多糖研究相对较少 ,但
至今也有一些报道。
2. 1 芦荟多糖的提取
关于芦荟多糖的提取 ,美国的 Car ring ton实验室经过多
年研究 ,总结出了 McAnalley冷处理法 [8 ] ,该工艺包括去皮
磨浆、除杂醇沉、离心过滤和冷冻干燥四部分。另外 Coats在
总结前人经验的基础上 ,为提高多糖得率 ,提出了 Coa ts冷
处理法。目前多糖的一般提取方式为原料脱脂后用低级醇沉
淀多糖。
2. 2 芦荟多糖的鉴定
多糖的分析鉴定一般借助于气相色谱 ( GC)、高效液相
色谱 ( HPLC)、红外光谱 ( IR)和紫外光谱 ( UV )等技术 ,气相
(液相 )色谱 -质谱 ( GC / HPLC-M S)联用技术成为分析多糖更
为有效的手段。
2. 2. 1  GC和 HPLC在多糖分析上的应用  GC或 HPLC
一般用来分析多糖的单糖组成 ,气相色谱分析糖类 ,具有选
择性好、分辨力强和灵敏度高等优点 [12, 13] ,但由于糖类本身
没有足够的挥发性 ,所以在 GC色谱测定前 ,必须进行衍生
化处理。 HPLC测定糖时虽不需衍生化 ,但由于示差折光检
测器灵敏度低而受限制 [14] ,所以用 GC分析糖类应用较为普
遍。 郑荣珍等人提取的番拉芦荟多糖经 GC分析后 ,主要由
葡萄糖和甘露糖组成 [17]。 而笔者所研究的中华芦荟多糖 ,除
甘露糖和葡萄糖外 ,还存在少量的半乳糖。
2. 2. 2 红外光谱在多糖分析上的应用 多糖类物质的官能
团在红外谱图上表现为相应的特征吸收峰 ,我们可以根据其
特征吸收来鉴定糖类物质。 下图是笔者所测定的中华芦荟
(苏北地区 )的红外光谱图 ,其中 3 440 cm- 1处为 O-H的吸收
·53·基层中药杂志  2002年 第 16卷 第 4期Primary Journal of Chinese M ateria M edica