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木豆叶提取物对小白鼠的急性毒性试验
范 颖，张继瑜，周绪正，李 冰，李金善
(中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 /农业部兽用药物创制重点实验室 /甘肃省新兽药工程重点实验室，甘肃兰州 730050)
摘要:为了评价木豆叶提取物的安全性，对其进行小鼠的急性毒性试验。预试验初步确定给药剂量的范围，正式
试验取 60 只小白鼠灌胃给药，给药后连续观察 7d，记录小白鼠的中毒反应及死亡情况，采用改良寇氏法计算 LD50及
LD50的 95%可信限。结果表明，高剂量给药组小白鼠出现中毒反应并死亡，解剖后检查发现，主要原因是消化系统的
病变，测得木豆叶提取物的 LD50及 LD50的 95%可信限分别为 62． 647 g /kg、53． 488 ～ 73． 528 g /kg，表明木豆叶提取物
可以被认为是无毒物质。
关键词:木豆叶提取物;急性毒性;小白鼠;安全性
中图分类号:S859． 8 文献标志码:A 文章编号:1002 － 1302(2013)03 － 0170 － 02
收稿日期:2012 － 07 － 24
基金项目:国家现代农业肉牛牦牛产业技术体系建设专项资金(编
号:CARS － 38) ;中央级科研院所基本科研业务经费(编号:
1610322011005)。
作者简介:范 颖(1987—) ，女，河南驻马店人，硕士研究生，研究方
向为兽医药理学与毒理学。E － mail:fanying206@ yahoo． cn。
通信作者:张继瑜，研究员，博士生导师，从事兽医药理与毒理学的研
究。E － mail:infzjy@ sina． com。
木豆(Cajanus cajan L．)是豆科木豆属植物，又名柳豆、豆
蓉、扭豆，为世界第 6 大食用豆类，也是唯一的木本食用豆类。
主要分布于东南亚、印度、缅甸以及我国的云南、四川、江苏、
广东、广西、海南等地，在海南岛各地有野生和栽培种，具有广
泛的药用价值［1］。木豆叶是木豆的干燥叶及嫩枝，中医认为
木豆叶性甘、平，归肝、脾及肾经，能活血化瘀、消肿止痛、补肾
健骨、祛腐生肌，可用于瘀血肿痛，股骨头缺血性坏死治疗;外
治水痘、痈肿及各种创面感染［2］。木豆叶提取物的成分较
多，田润等曾经从木豆叶中提取得到 12 种化合物［3］，其主要
活性成分是芪类提取物，其中含量较高、活性较强的是木豆
素［4］。近年来的研究发现，木豆叶提取物具有多种药理活
性，如抗骨质疏松［5］、治疗高血脂［6］、抗脑缺血缺氧损伤
等［7］。因此木豆叶提取物在人类医学及兽类医学的临床应
用也越来越广泛。为了评价木豆叶提取物的安全性，为今后
系统地研究其药理作用、临床安全用药提供试验依据，特进行
了木豆叶提取物对小白鼠的急性毒性试验。
1 材料与方法
1． 1 试验材料
1． 1． 1 试验动物 昆明系清洁级小白鼠 90 只，购自兰州大
学试验动物中心，体重 18 ～ 22 g，雌性小鼠未产未孕，自由饮
水采食，连续观察 1 周，临床健康即可用于试验，试验期间按
常规饲养。
1． 1． 2 供试药品 木豆叶提取物，为淡黄色粉末状物质，含
量 10%，批号为 110801，由浙江海正药业股份有限公司提供。
试验前称取适量药物，用纯化水配制成浓度为 1 g /mL 的混
悬液。
1． 2 试验方法
1． 2． 1 预试验 在预试验中将 24 只小白鼠随机分成 4 组，
—071— 江苏农业科学 2013 年第 41 卷第 3 期
DOI:10.15889/j.issn.1002-1302.2013.03.049
每组 6 只，雌雄各半。各组以等浓度木豆叶提取物灌胃给药，
确定 LD0、LD100。
1． 2． 2 正式试验 在正式试验中将 60 只小白鼠随机分成 6
组(5 个试验组 + 1 个对照组) ，每组各 10 只，雌、雄各半。试
验前禁食 12 h，自由饮水。按照小白鼠的体重计算给药量，低
剂量组 1 次给药，高剂量组由于给药体积较大，在 24 h 内分
2 ～ 3 次给药。给药后的前 3 h 每隔 20 min 观察 1 次小白鼠
的采食、饮水、被毛、活动、精神、症状起始时间和持续时间、死
亡情况;之后每隔 2 h观察 1 次;2 d后，每天观察 3 次。对死
亡小鼠及时解剖记录病变情况，在第 8 天将所有存活的小白
鼠处死并解剖，观察腹腔内的液体状况和实质性器官的病理
变化。
2 试验结果
2． 1 预试验结果
预试验结果(表 1)表明:木豆叶提取物的致死剂量范围
占体重的 28 ～ 109 g /kg，根据公式 r = n － 1槡a /b(r 为相邻 2
组剂量的比值;a 为最大剂量，109． 00 g /kg;b 为最小剂量，
28． 00 g /kg;n为预分组数) ，计算得 r = 1. 404 6。
表 1 木豆叶提取物的预试验结果
组别
动物数
(只)
剂量
(g /kg)
死亡数
(只)
1 6 28． 00 0
2 6 56． 00 1
3 6 84． 00 4
4 6 109． 00 6
根据预试验的结果，由 r = 1． 404 6 确定分别以体重的
28． 00、39． 33、55． 24、77． 59、109． 00 g /kg 给药，按照改良寇氏
法计算 LD50及其 95%可信限。
LD50 = Lg
－1［Xm － i(∑p － 0． 5) ］
式中:Xm 为最大剂量组剂量的对数值;i为剂量间比值的对数
值;∑p为各组死亡率之和。
可以算出 LD50的 95%可信限 = lg
－1［lgLD50 ±1． 96Sx50］。
2． 2 正式试验结果
正式试验结果如表 2 所示。根据试验所得数据，计算得
LD50 =62． 647 g /kg，LD50的 95%可信限是 53． 488 ～73． 528 g /kg。
判定木豆叶提取物对小鼠的经口 LD50大于体重的 15 g /kg，根
据外源化学物急性毒性分级标准［8］，木豆叶提取物属于无毒
物质。
表 2 木豆叶提取物的急性毒性试验结果
组别
剂量
(g /kg) 剂量对数
动物数
(只)
死亡数
(只)
死亡率
(%)
1 28． 00 1． 447 2 10 0 0
2 39． 33 1． 594 7 10 1 10
3 55． 24 1． 742 3 10 2 20
4 77． 59 1． 889 8 10 8 80
5 109． 00 2． 037 4 10 10 100
2． 3 小白鼠中毒症状及死亡小白鼠的解剖病理变化
灌胃后，低剂量组小鼠呼吸急促，闭眼，活动量减少，偶有
轻微腹泻，3h后恢复采食，精神正常。高剂量组小鼠灌胃后
喜卧，懒动，精神不济，喜转木屑，有明显的腹泻，并有恶臭味;
第 2 次灌胃后被毛凌乱，给药 40 min 后开始死亡，解剖可见
皮下、胸腔、肠系膜出血，肺脏呈粉白色，肠道臌气，肠壁变薄，
十二指肠内出血，肝脏有出血点，尾静脉发黑。胃部膨大，有
气体，内部有黑色物质。脾、肾脏未见明显可眼观的病变。
3 结论与讨论
木豆是一种药理作用很广泛的中药材，其种子、根、茎、叶
均可入药。木豆叶在抗骨质疏松［5］、抗心脑血管疾病［7］、抗
肿瘤［9］、抗炎［10］、抗病毒等［11］方面均有一定的作用。但是其
成分复杂。郑元元等的研究表明，木豆叶中抗骨质疏松的活
性成分主要是芪类提取物，而其中又以木豆素最为重要［4］。
陈迪华等发明了一种抗骨质疏松的药物组合［12］，从主要活性
成分重量比可看出，木豆叶芪类提取物尤其是木豆素对抗骨
质疏松药的药效是不可或缺的成分。但是在此次急性毒性试
验中发现，给予高剂量的木豆叶提取物，小白鼠有明显腹泻现
象，而低剂量组只有个别的有轻微腹泻，在临床试验中也发现
用高剂量的木豆叶提取物拌料饲喂蛋鸡，也有明显的腹泻现
象。这也提示了腹泻可能是木豆叶提取物用于预防骨质疏松
症的一种副作用，其具体原因及作用机理有待进一步研究。
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