全 文 ：书第３７卷　第４期 海　　洋　　学　　报 Ｖｏｌ．３７，Ｎｏ．４
２０１５年４月 Ｈａｉｙａｎｇ　Ｘｕｅｂａｏ　 Ａｐｒｉｌ　２０１５
李海涛，何薇，周鹏，等．伶鼬榧螺（Ｏｌｉｖａ　ｍｕｓｔｅｌｉｎａ）的分子鉴定及其形态变异［Ｊ］．海洋学报，２０１５，３７（４）：１１７—１２３，ｄｏｉ：１０．３９６９／
ｊ．ｉｓｓｎ．０２５３－４１９３．２０１５．０４．０１１
Ｌｉ　Ｈａｉｔａｏ，Ｈｅ　Ｗｅｉ，Ｚｈｏｕ　Ｐｅｎｇ，ｅｔ　ａｌ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｏｌｉｖａ　ｍｕｓｔｅｌｉｎａ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｖａｒｉａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｈａｉｙａｎｇ　Ｘｕｅｂａｏ，
２０１５，３７（４）：１１７—１２３，ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．０２５３－４１９３．２０１５．０４．０１１
伶鼬榧螺（Ｏｌｉｖａ　ｍｕｓｔｅｌｉｎａ）的分子鉴定及其形态变异
李海涛１，何薇１，周鹏１，陈凯彪１，董燕红１
（１．国家海洋局 南海环境监测中心，广东 广州５１０３００）
收稿日期：２０１４－０６－０４；修订日期：２０１５－０１－０３。
基金项目：海洋公益性行业科研专项（２０１３０５０１０，２０１１０５００３）；南海区海洋环境质量综合评价方法（ＤＯＭＥＰ（ＭＥＡ）－０１－０３）。
作者简介：李海涛（１９８１—），男，湖北省沙洋县人，主要从事贝类分类学研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｈａｉｔａｏｌｉ１９８１＠１２６．ｃｏｍ
摘要：根据榧螺螺旋部的差异可将其分为两种不同的形态类型，类型Ⅰ（ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅠ）的个体螺旋部
陷入体螺层中，其壳顶与前部数螺层愈合；类型Ⅱ（ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ）的个体螺旋部高出壳顶，缝合线明
显，此类型可明确鉴定为伶鼬榧螺（Ｏｌｉｖａ　ｍｕｓｔｅｌｉｎａ）。本研究通过线粒体ＣＯⅠ和１６ＳｒＲＮＡ基因序列
的分析对两种形态类型的榧螺进行了分子鉴定。结果表明：两种形态类型的榧螺含有共享的单倍型；
不同形态类型间的遗传距离和同一形态类型内的遗传距离重叠；两者的单系性在系统发育分析中没
有得到显现，而是共同构成一个单系。因此，两种形态类型的个体均为伶鼬榧螺。类型Ⅰ可能是伶鼬
榧螺中一种少见的有别于典型个体的形态变异类型。
关键词：伶鼬榧螺；ＣＯⅠ基因；１６ＳｒＲＮＡ基因；形态变异
中图分类号：Ｑ９５９．２１２ 文献标志码：Ａ 文章编号：０２５３－４１９３（２０１５）０４－０１１７－０７
１　引言
榧螺属（Ｏｌｉｖａ）隶属于新腹足目（Ｎｅｏｇａｓｔｒｏｐｏｄａ）
榧螺科（Ｏｌｉｖｉｄａｅ），是一类具有美丽外壳的贝类。榧
螺属的贝壳具有一定的药用价值，有清燥润肺、平胆
潜阳之功效，主治高血压、青盲内障、骨蒸劳热等［１］。
近年来，由于野生资源衰竭，部分榧螺种类已处于濒
危状态［２］。
伶鼬榧螺（Ｏｌｉｖａ　ｍｕｓｔｅｌｉｎａ）是南海沿岸水域较为
常见的种类，也是榧螺属最主要的入药种类。典型的
伶鼬榧螺其螺旋部高出壳顶，且缝合线明显。但在自
然界中也存在另外一类个体，其贝壳花纹与伶鼬榧螺
相似，但螺旋部陷入体螺层中，壳顶与前部螺层愈合。
这两种形态类型的差别属于种内还是种间变异，尚未
得到其他研究的证实。
由于缺乏肋纹等特征，贝壳的颜色和花纹目前仍
是榧螺属分类最重要的依据。但这类特征也常发生变
异，Ｂｅｒｔ［３］描述了一类壳色发生变异的伶鼬榧螺个体，
其浅棕色的贝壳上伴有纵向的青灰色斑纹，明显有别
于正常个体的“之”字形花纹。形态可塑性为分类学家
带来极大困难，使其难以区分种内和种间变异的界限。
分子生物学的发展提供了一种新的物种鉴定手
段。线粒体细胞色素ｃ氧化酶亚基Ⅰ（ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ　ｃ
ｏｘｉｄａｓｅ　ｓｕｂｕｎｉｔⅠ，ＣＯⅠ）和１６ＳｒＲＮＡ基因已在贝类的
物种鉴定中得到广泛应用［４－７］。本研究旨在通过线
粒体ＣＯⅠ和１６ＳｒＲＮＡ基因序列的分析来鉴别两种
不同形态的榧螺，以期为资源的开发利用和保护，以
及其他学科的研究提供基础资料。
２　材料和方法
２．１　实验材料
实验所用的榧螺标本采自珠江口及汕头南澳岛
海域（表１），腹足肌以９０％酒精或－８０℃冰冻保存。
榧螺标本的壳色和花纹相似，但依据螺旋部的差异可
分为２种不同的形态类型：类型Ⅰ（ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅠ）个体
的螺旋部陷入体螺层（图１ａ，１ｂ），螺旋部的所有螺层
愈合（图１ｃ）；类型Ⅱ（ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ）个体的螺旋部高
出壳顶，缝合线明显（图１ｄ，１ｅ），螺旋部的螺层不愈合
（图１ｆ），此类型的个体可鉴定为伶鼬榧螺。共选取两
种形态类型的３１个个体用于形态学测量分析，其中
２４个用于分子生物学分析（表１）。
图１　两种不同形态类型榧螺的贝壳
Ｆｉｇ．１　Ｓｈｅｌｓ　ｏｆ　ｔｗｏ　Ｍｏｒｐｈｏｔｙｐｅｓ　ｏｆ　Ｏｌｉｖａｓｐｅｃｉｅｓ
ａ～ｃ：形态类型Ⅰ；ｄ～ｆ：形态类型Ⅱ
ａ～ｃ：ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅠ；ｄ～ｆ：ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ
表１　用于ＤＮＡ序列分析的榧螺标本信息
Ｔａｂ．１　Ｓｐｅｃｉｍｅｎ　ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｏｌｉｖａｓｐｅｃｉｍｅｎｓ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ＤＮＡ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ａｎａｌｙｓｅｓ
形态类型 标本 采集时间 采集地点
ＧｅｎＢａｎｋ登录号 单倍型
ＣＯⅠ １６ＳｒＲＮＡ　 ＣＯⅠ １６ＳｒＲＮＡ
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅠ ＸＤ－１　 ２０１０年４月 珠江口 ＫＦ１８６６４０ ＫＦ１８６６３１ Ｈ１ Ｌ１
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅠ ＸＤ－２　 ２０１０年４月 珠江口 ＫＦ１８６６３２ Ｌ２
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅠ ＸＤ－３　 ２０１０年４月 珠江口 ＫＦ１８６６４１ ＫＦ１８６６３１ Ｈ２ Ｌ１
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅠ ＸＤ－４　 ２０１３年３月 南澳岛 ＫＦ１８６６４２ ＫＦ１８６６３１ Ｈ３ Ｌ１
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ ＬＹ－２　 ２０１０年４月 珠江口 ＫＦ１８６６３１ Ｌ１
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ ＬＹ－６　 ２０１３年３月 南澳岛 ＫＦ１８６６４３ ＫＦ１８６６３３ Ｈ４ Ｌ３
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ ＬＹ－７　 ２０１３年３月 南澳岛 ＫＦ１８６６４４ ＫＦ１８６６３４ Ｈ５ Ｌ４
８１１ 海洋学报　３７卷
续表１
形态类型 标本 采集时间 采集地点
ＧｅｎＢａｎｋ登录号 单倍型
ＣＯⅠ １６ＳｒＲＮＡ　 ＣＯⅠ １６ＳｒＲＮＡ
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ ＬＹ－８　 ２０１３年３月 南澳岛 ＫＦ１８６６４５ ＫＦ１８６６３５ Ｈ６ Ｌ５
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ ＬＹ－９　 ２０１３年３月 南澳岛 ＫＦ１８６６４６ ＫＦ１８６６３１ Ｈ７ Ｌ１
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ ＬＹ－１０　 ２０１３年３月 南澳岛 ＫＦ１８６６４７ ＫＦ１８６６３６ Ｈ８ Ｌ６
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ ＬＹ－１１　 ２０１３年３月 南澳岛 ＫＦ１８６６４８ ＫＦ１８６６３１ Ｈ９ Ｌ１
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ ＬＹ－１２　 ２０１３年３月 南澳岛 ＫＦ１８６６４９ ＫＦ１８６６３７ Ｈ１０ Ｌ７
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ ＬＹ－１３　 ２０１３年３月 南澳岛 ＫＦ１８６６４１ ＫＦ１８６６３１ Ｈ２ Ｌ１
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ ＬＹ－１４　 ２０１３年３月 南澳岛 ＫＦ１８６６５０ ＫＦ１８６６３１ Ｈ１１ Ｌ１
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ ＬＹ－１５　 ２０１３年３月 南澳岛 ＫＦ１８６６５１ ＫＦ１８６６３８ Ｈ１２ Ｌ８
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ ＬＹ－１６　 ２０１３年３月 南澳岛 ＫＦ１８６６５２ ＫＦ１８６６３９ Ｈ１３ Ｌ９
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ ＬＹ－１７　 ２０１３年３月 南澳岛 ＫＦ１８６６５３ ＫＦ１８６６３１ Ｈ１４ Ｌ１
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ ＬＹ－１８　 ２０１３年３月 南澳岛 ＫＦ１８６６５４ ＫＦ１８６６３１ Ｈ１５ Ｌ１
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ ＬＹ－１９　 ２０１３年３月 南澳岛 ＫＦ１８６６４１ Ｈ２
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ ＬＹ－２０　 ２０１３年３月 南澳岛 ＫＦ１８６６４７ Ｈ８
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ ＬＹ－２１　 ２０１３年３月 南澳岛 ＫＦ１８６６５５ Ｈ１６
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ ＬＹ－２２　 ２０１３年３月 南澳岛 ＫＦ１８６６５６ Ｈ１７
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ ＬＹ－２３　 ２０１３年３月 南澳岛 ＫＦ１８６６４７ Ｈ８
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ ＬＹ－２４　 ２０１３年３月 南澳岛 ＫＦ１８６６５７ Ｈ１８
２．２　贝壳形态数据的测量和分析
用游标卡尺（精度０．２ｍｍ）测量两种形态类型榧
螺标本的壳高（ＳＬ）和壳宽（ＳＷ），比较两种形态类型
的ＳＬ及壳高与壳宽之比（ＳＬ／ＳＷ）的差异。
２．３　模板ＤＮＡ制备、ＰＣＲ扩增和序列分析
采用碱裂解法制备模板ＤＮＡ，具体步骤为：剪取
小块腹足肌，去离子水清洗两次，吸干水分后置于１８０
μＬ　０．０５ｍｏｌ／Ｌ　ＮａＯＨ溶液中，９５℃消化１５ｍｉｎ，然后
加入２０μＬ　１ｍｏｌ／Ｌ　Ｔｒｉｓ－Ｃｌ（ｐＨ７．６），混匀后１０　０００
ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，上清液作为模板使用。用于扩增
ＣＯⅠ基因的引物为 ＬＣＯ－１４９０（５′－ＧＧＴ　ＣＡＡ　ＣＡＡ
ＡＴＣ　ＡＴＡ　ＡＡＧ　ＡＴＡ　ＴＴＧ　Ｇ－３′）和ＬＣＯ－２１９８（５′－
ＴＡＡ　ＡＣＴ　ＴＣＡ　ＧＧＧ　ＴＧＡ　ＣＣＡ　ＡＡＡ　ＡＡＴ　ＣＡ－
３′）［８］；扩增１６ＳｒＲＮＡ基因的引物为１６ｓａｒ－Ｌ（５′－ＣＧＣ
ＣＴＧ　ＴＴＴ　ＡＴＣ　ＡＡＡ　ＡＡＣ　ＡＴ－３′）和１６ｓｂｒ－Ｈ（５′－
ＣＣＧ　ＧＴＣ　ＴＧＡ　ＡＣＴ　ＣＡＧ　ＡＴＣ　ＡＣＧ　Ｔ－３′）［９］。ＰＣＲ
反应体系总体积为５０μＬ，其中：２×ｂｕｆｅｒ　２５μＬ，
ｄＮＴＰ　４００μｍｏｌ／Ｌ，引物各０．３μｍｏｌ／Ｌ，ＫＯＤ　ＦＸ高
保真ＰＣＲ酶（ＴＯＹＯＢＯ公司）１．０Ｕ，模板ＤＮＡ１．２
μＬ，加去离子水补足至５０μＬ。ＰＣＲ反应条件为：
９４℃预变性２ｍｉｎ；９８℃变性１５ｓ，５２℃退火３０ｓ，６８℃
延伸４５ｓ，共３５个循环；最后６８℃延伸１０ｍｉｎ。ＰＣＲ
产物经１％琼脂糖凝胶电泳检测后回收纯化，然后进
行双向测序，测序引物与扩增引物相同。
将所测的序列与ＧｅｎＢａｎｋ和国际生命条形码数
据库ＢＯＬＤ　Ｓｙｓｔｅｍｓ中查得的其他榧螺属序列一起
用ＤＡＭＢＥ（Ｖｅｒｓｉｏｎ　５．２．６５）软件进行多序列比对。
使用 ＭＥＧＡ　５．１０软件计算变异位点、碱基组成和基
于Ｋｉｍｕｒａ双参数模型（Ｋｉｍｕｒａ　２－ｐａｒａｍｅｔｅｒ，Ｋ２Ｐ）下
各个类群内部及类群之间的遗传距离，并利用该软件
中的邻接法（Ｎｅｉｇｈｂｏｒ－ｊｏｉｎｉｎｇ，ＮＪ）和非加权配对算术
平均法（Ｕｎｗｅｉｇｈｔｅｄ　Ｐａｉｒ　Ｇｒｏｕｐ　Ｍｅｔｈｏｄ　ｗｉｔｈ　Ａｒｉｔｈ－
ｍｅｔｉｃ　ｍｅａｎ，ＵＰＧＭＡ）构建所有单倍型系统进化树，
可靠性经过１　０００次自展（Ｂｏｏｔｓｔｒａｐ）检验。采用
ＤＮＡＳＰ　５．１０软件计算单倍型多样性指数（Ｈｄ）和核
苷酸多样性指数（Ｐｉ）。
３　结果
３．１　形态测量数据的分析
从贝壳的ＳＬ及ＳＬ／ＳＷ比值来看，两种形态类
型的榧螺是大范围重叠的，通过ＳＬ／ＳＷ比值无法将
两者明确区分（见表２）。
９１１４期　李海涛等：伶鼬榧螺（Ｏｌｉｖａ　ｍｕｓｔｅｌｉｎａ）的分子鉴定及其形态变异
表２　两种不同形态榧螺贝壳的形态测量数据
Ｔａｂ．２　Ｍｏｒｐｈｏｍｅｔｒｉｃ　ｄａｔａ　ｏｆ　ｔｗｏ　ｍｏｒｐｈｏｔｙｐｅｓ　ｏｆ　Ｏｌｉｖａｓｐｅｃｉｅｓ
形态类型 样本数
ＳＬ／ｍｍ　 ＳＬ／ＳＷ
范围 均值 范围 均值
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅠ ６　 ２５．８４～３７．２６　 ３０．４２±４．４９　 １．８８～１．９７　 １．９１±０．０３
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ ２５　 １８．８２～３２．１６　 ２６．１０±４．２５　 １．８８～２．２１　 ２．０２±０．０７
３．２　线粒体基因的序列分析
共成功获得２２条ＣＯⅠ基因序列，各序列长度均
为６５８ｂｐ（不含引物区），无插入／缺失位点，Ａ、Ｔ、Ｇ、
Ｃ的平均含量分别为 ２３．４％、３９．１％、２０．５％和
１７．０％，Ａ＋Ｔ的含量明显高于Ｇ＋Ｃ的含量。２２条
ＣＯⅠ基因序列定义了１８种单倍型（Ｈ１～Ｈ１８，Ｇｅｎ－
Ｂａｎｋ登录号 ＫＦ１８６６４０～ＫＦ１８６６５７）。其中，１个
ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅠ个体（ＸＤ－３）和２个 ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ个体
（ＬＹ－１３和ＬＹ－１９）共享单倍型Ｈ２。
在ＣＯＩ基因序列上共检测到５２个变异位点（２２
个为简约信息位点），占核苷酸总数的７．９％，其中４６
个发生在密码子第三位碱基，６个发生在密码子第一
位碱基。所有核苷酸的变异未导致氨基酸序列的变
化。ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅠ个体间的遗传距离为０．０１９～
０．０２５，ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ个体间的遗传距离为０～０．０２８，
两种形态类型之间的遗传距离为０～０．０２６，同一形态
类型内及两种形态类型间的遗传距离完全重叠，无明
显的界限。上述两种形态的个体与其他榧螺，如
Ｏ．ｓｐｉｃａｔａ（ＧｅｎＢａｎｋ登录号 ＦＭ９９９１６５）、Ｏ．ｓａｙａｎａ
（ＧｅｎＢａｎｋ登录号Ｕ８６３３３）、Ｏ．ａｍａｌｄａ（ＢＯＬＤ序列号
ＮＥＯＧＡ９００－１０、ＮＥＯＧＡ９０１－１０和 ＮＥＯＧＡ９０２－１０）、
Ｏｌｉｖａｓｐ．（ＢＯＬＤ序列号ＮＥＯＧＡ８７９－１０）、Ｏｌｉｖａｓｐ．１
（ＢＯＬＤ序列号 ＮＥＯＧＡ８７７－１０）间的遗传距离较大，
在０．１２９～０．２４１之间。
共成功获得１８条１６ＳｒＲＮＡ基因序列，其长度为
５０８～５１０ｂｐ，存在２个位点的插入／缺失。Ａ、Ｔ、Ｇ、Ｃ
的平均含量分别为３４．５％、２９．５％、１９．９％和１６．１％，Ａ
＋Ｔ的含量显著高于Ｇ＋Ｃ的含量。１８条１６ＳｒＲＮＡ
基因序列共定义了９种单倍型（Ｌ１～Ｌ９，ＧｅｎＢａｎｋ登录
号ＫＦ１８６６３１～ＫＦ１８６６３９）。其中，２个 ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅠ个
体和８个ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡ个体共享单倍型Ｌ１，这一单倍
型序列与来自日本Ｉｓｅ　ｂａｙ的一条伶鼬榧螺序列［１０］
（ＧｅｎＢａｎｋ登录号ＡＢ１２１０３８）完全相同。
在１６ＳｒＲＮＡ基因序列上共检测到１０个变异位
点，占核苷酸总数的２．０％，其中４个为简约信息位
点。两种形态类型内的遗传距离分别为０～０．００８和
０～０．０１２，两种形态类型间的遗传距离为０～０．０１４，
形态类型内和形态类型间的遗传距离完全重叠。而
它们与Ｏ．ｓｐｉｃａｔａ（ＦＭ９９９１１４）间的遗传距离则高达
０．１０４～０．１１２。
基于ＣＯⅠ基因序列计算的单倍型多样性指数
（Ｈｄ）和核苷酸多样性指数（Ｐｉ）分别为Ｈｄ＝（０．９７４
±０．０２４）和Ｐｉ＝（０．０１５　５±０．００１　１）；基于１６ＳｒＲＮＡ
基因序列计算的结果分别为 Ｈｄ＝（０．７０６±０．１２０）和
Ｐｉ＝（０．００３　６±０．００１　０）。单倍型多样性指数高于核
苷酸多样性指数，且ＣＯⅠ基因所反映的单倍型多样性
指数和核苷酸多样性指数均高于１６ＳｒＲＮＡ基因。
３．３　系统发育关系
基于ＣＯⅠ和１６ＳｒＲＮＡ基因序列分别构建了ＮＪ
树和ＵＰＧＭＡ树，两种树的拓扑结构基本一致。因
此本文仅给出ＮＪ树，其自展支持率（仅大于７０％的
列出）标注在节点斜线左侧，ＵＰＧＭＡ树的自展支持
率标注在节点斜线右侧。
基于ＣＯⅠ基因序列构建的ＮＪ树（见图２）显示，
１８个单倍型合在一起形成一个单系，支持率为９９％，
在系统树中处于较为进化的位置。两种形态类型榧
螺的单系性在系统树上均没有得到显现，相互间无法
明确区分。
在基于１６ＳｒＲＮＡ基因序列构建的ＮＪ树（见图
３）中，９个单倍型与ＧｅｎＢａｎｋ中的一条伶鼬榧螺序列
（ＧｅｎＢａｎｋ登录号ＡＢ１２１０３８）共同形成一个单系群，
支持率为９９％。两种形态类型的单系性也未在系统
树上得到显现。
４　讨论
贝壳的形态受多种生物和非生物因素的影响，因
此仅依据贝壳形态来进行分类学和系统学研究越来
越有争议性［１１］。腹足类的个体差异、性别差异和以
及发育阶段的不同均可能导致贝壳形态特征的变
化［７］。
０２１ 海洋学报　３７卷
　　基于线粒体ＣＯⅠ和１６ＳｒＲＮＡ基因序列的分析
结果表明两种形态类型的榧螺之间没有明显的遗传
差异：两者享有共同的单倍型；遗传距离完全重叠；各
自无法形成单系，而是共同形成一个单系群，且获得
很高的支持率。因此，两种类型的个体为同一物种，
即伶鼬榧螺。ＣＯⅠ基因为蛋白质编码序列，在种内没
有发生碱基的插入／缺失，其变异也未造成氨基酸序
列的改变。ＣＯⅠ基因的进化速率较１６ＳｒＲＮＡ基因更
快，本文的研究结果与其他研究结论［４，１２］是一致的。
ＣＯⅠ基因所揭示的伶鼬榧螺单倍型多样性指数和核
苷酸多样性指数均明显高于１６ＳｒＲＮＡ基因。
榧螺属的分类问题由来已久，其现生种的拉丁学
名达５００多个，远远超过实际的种类数，同种异名现
象十分严重［１３］。壳顶是否陷入体螺层是伶鼬榧螺与
１２１４期　李海涛等：伶鼬榧螺（Ｏｌｉｖａ　ｍｕｓｔｅｌｉｎａ）的分子鉴定及其形态变异
陷顶榧螺（Ｏ．ｃｏｎｃａｖｏｓｐｉｒａ）的形态区别之一，但伶鼬
榧螺中也存在螺旋部陷入体螺层的个体，且其螺旋部
的螺层常愈合在一起。因此，这些特征在用于属下种
间的鉴别时需要十分慎重，也不宜作为亚种区分的依
据。Ｂｅｒｔ［３］描述的有别于典型伶鼬榧螺形态的个体
除颜色和花纹不同之外，其螺旋部也明显低矮。本研
究中的 ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅠ个体也可能是伶鼬榧螺中一种较
为少见的形态变异类型，这类个体在采集标本中的数
量不多。
参考文献：
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Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ　Ｇｒｏｕｐ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ　Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　Ａｎｉｍａｌ　Ｆａｕｎａ．Ｃｈｉｎａ　Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　Ａｎｉｍａｌ　Ｆａｕｎａ［Ｍ］．Ｔｉａｎｊｉｎ：Ｔｉａｎｊｉｎ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　Ｐｒｅｓｓ，１９８３：
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Ｆｕ　Ｘｉｕｍｅｉ，Ｗａｎｇ　Ｃｈａｎｇｙｕｎ，Ｓｈａｏ　Ｃｈａｎｇｌｕｎ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｎｄａｎｇｅｒｅｄ　ａｎｄ　ｒａｒｅ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｏｆ　ｍａｒｉｎｅ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｏｒｇａｎｉｓｍｓ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ　ｉｎ　Ｃｈｉｎａ［Ｊ］．Ｐｅ－
ｒｉｏｄｉｃａｌ　ｏｆ　Ｏｃｅａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ（Ｎａｔｒｕａｌ　Ｓｉｅｎｃｅ），２００９，３９（４）：７１９－７２８．
［３］　Ｂｅｒｔ　Ｃ．Ｎｅｗ　ｆｏｒｍ　ｏｆ　Ｏｌｉｖａ　ｍｕｓｔｅｌｉｎａ　Ｌａｍａｒｃｋ，１８１１ｆｏｒｍ　ＳＷ　Ｔａｉｗａｎ［Ｊ］．Ｂｕｌｅｔｉｎ　ｏｆ　Ｍａｌａｃｏｌｏｇｙ　Ｒ．Ｏ．Ｃ．，１９８４，１０：７－８．
［４］　Ｙｕ　Ｚ　Ｎ，Ｋｏｎｇ　Ｘ　Ｙ，Ｚｈａｎｇ　Ｌ　Ｓ，ｅｔ　ａｌ．Ｔａｘｏｎｏｍｉｃ　ｓｔａｔｕｓ　ｏｆ　ｆｏｕｒ　Ｃｒａｓｓｏｓｔｒｅａｏｙｓｔｅｒｓ　ｆｒｏｍ　Ｃｈｉｎａ　ａｓ　ｉｎｆｅｒｒｅｄ　ｆｒｏｍ　ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ　ＤＮＡ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ［Ｊ］．
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｓｈｅｌｆｉｓｈ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００３，２２（１）：３１－３８．
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Ｚｈａｎｇ　Ｌｉａｎｇ，Ｈｕａｎｇ　Ｙａｎｙａｎ，Ｌｉｕ　Ｈｕａｎｚｈａｎｇ．Ｔｈｅ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｍｕｓｓｅｌｓ　ｉｎ　Ｑｉｎｇｌａｎ　Ｌａｋｅ（Ｊｉａｎｇｘｉ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ）ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ
ｏｆ　ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ　１６ＳｒＲＮＡ　ｇｅｎｅ［Ｊ］．Ａｃｔａ　Ｈｙｄｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａ　Ｓｉｎｉｃａ，２００４，２８（３）：２９４－２９８．
［６］　Ｄｕｄａ　Ｔ　Ｆ，Ｂｏｌｉｎ　Ｍ　Ｂ，Ｍｅｙｅｒ　Ｃ　Ｐ，ｅｔ　ａｌ．Ｈｉｄｄｅｎ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｉｎ　ａ　ｈｙｐｅｒｄｉｖｅｒｓｅ　ｇａｓｔｒｏｐｏｄ　ｇｅｎｕｓ：ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ　ｏｆ　ｐｒｅｖｉｏｕｓｌｙ　ｕｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ｍｅｍｂｅｒｓ　ｏｆ　ａ　Ｃｏｎｕｓ
ｓｐｅｃｉｅｓ　ｃｏｍｐｌｅｘ［Ｊ］．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃｓ　ａｎｄ　Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ，２００８，４９：８６７－８７６．
［７］　班绍君，薛东秀，张涛，等．三种壳口颜色脉红螺（Ｒａｐａｎａ　ｖｅｎｏｓａ）形态学和线粒体１６ＳｒＲＮＡ与ＣＯⅠ基因片段差异比较分析［Ｊ］．海洋与湖沼，
２０１２，４３（６）：１２０９－１２１７．
Ｂａｎ　Ｓｈａｏｊｕｎ，Ｘｕｅ　Ｄｏｎｇｘｉｕ，Ｚｈａｎｇ　Ｔａｏ，ｅｔ　ａｌ．Ｖａｒｉａｎｃｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｔｈｒｅｅ　ｃｏｌｏｒ　ｍｏｒｐｈｓ　ｏｆ　Ｒａｐａｎａ　ｖｅｎｏｓａ　ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｔｒａｉｔｓ　ａｎｄ　ｍｔ１６Ｓ
ｒＲＮＡ　ａｎｄ　ＣＯＩ　ｐａｒｔｉａｌ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ［Ｊ］．Ｏｃｅａｎｏｌｏｇｉａ　ｅｔ　Ｌｉｍｎｏｌｏｇｉａ　Ｓｉｎｉｃａ，２０１２，４３（６）：１２０９－１２１７．
［８］　Ｆｏｌｍｅｒ　Ｏ，Ｂｌａｃｋ　Ｍ，Ｈｏｅｈ　Ｗ，ｅｔ　ａｌ．ＤＮＡ　ｐｒｉｍｅｒｓ　ｆｏｒ　ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ　ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ　ｃ　ｏｘｉｄａｓｅ　ｓｕｂｕｎｉｔ　１ｆｒｏｍ　ｄｉｖｅｒｓｅ　ｍｅｔａｚｏａｎ　ｉｎｖｅｒｔｅ－
ｂｒａｔｅｓ［Ｊ］．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｍａｒｉｎｅ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１９９４，３：２９４－２９９．
［９］　Ｓｉｍｏｎ　Ｃ，Ｆｒａｔｉ　Ｆ，Ｂｅｃｋｅｎｂａｃｈ　Ａ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ，ｗｅｉｇｈｔｉｎｇ　ａｎｄ　ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ　ｕｔｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ　ｇｅｎｅ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ａｎｄ　ａ　ｃｏｍｐｉｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ
ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ　ｃｈａｉｎ　ｒｅａｃｔｉｏｎ　ｐｒｉｍｅｒｓ［Ｊ］．Ａｎｎａｌｓ　Ｅｎｔｏｍｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｓｏｃｉｅｔｙ　ｏｆ　Ａｍｅｒｉｃａ，１９９４，８７：６５１－７０１．
［１０］　Ｈａｙａｓｈｉ　Ｓ．Ｔｈｅ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｐｈｙｌｏｇｅｎｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｂｕｃｃｉｎｉｄａｅ（Ｃａｅｎｏｇａｓｔｒｏｐｏｄａ：Ｎｅｏｇａｓｔｒｏｐｏｄａ）ａｓ　ｉｎｆｅｒｒｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｃｏｍｐｌｅｔｅ　ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ　１６ＳｒＲＮＡ
ｇｅｎｅ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｏｆ　ｓｅｌｅｃｔｅｄ　ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｖｅｓ［Ｊ］．Ｍｏｌｕｓｃａｎ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００５，２５（２）：８５－９８．
［１１］　Ｗｉｌｋｅ　Ｔ，Ｆａｌｎｉｏｗｓｋｉ　Ａ．Ｔｈｅ　ｇｅｎｕｓ　Ａｄｒｉｏｈｙｄｒｏｂｉａ（Ｈｙｄｒｏｂｉｄａｅ：Ｇａｓｔｒｏｐｏｄａ）：ｐｏｌｙｔｙｐｉｃ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｏｒ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ？［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｚｏ－
ｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃｓ　ａｎｄ　Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００１，３９：２２７－２３４．
［１２］　苏天凤，黄建华，吴进锋，等．２种东风螺线粒体基因序列多态性研究［Ｊ］．中国水产科学，２００７，１４（３）：３６９－３７６．
Ｓｕ　Ｔｉａｎｆｅｎｇ，Ｈｕａｎｇ　Ｊｉａｎｈｕａ，Ｗｕ　Ｊｉｎｆｅｎｇ，ｅｔ　ａｌ．Ｇｅｎｅｔｉｃ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ｏｆ　ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ　ＤＮＡ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｉｎ　Ｂａｂｙｌｏｎｉａ　ａｒｅｏｌａｔａａｎｄ　Ｂａｂｙｌｏｎｉａ　ｆｏｒ－
ｍｏｓａｅ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｆｉｓｈｅｒｙ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ，２００７，１４（３）：３６９－３７６．
［１３］　Ｔｕｒｓｃｈ　Ｂ，Ｇｅｒｍａｉｎ　Ｌ．Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｎ　Ｏｌｉｖｉｄａｅ．Ⅰ：Ａ　ｍｏｒｐｈｏｍｅｔｒｉｃ　ａｐｐｒｏａｃｈ　ｔｏ　ｔｈｅ　Ｏｌｉｖａｐｒｏｂｌｅｍ［Ｊ］．Ｉｎｄｏ－Ｍａｌａｙａｎ　Ｚｏｏｌｏｇｙ，１９８５，２：３３１－３５２．
２２１ 海洋学报　３７卷
Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｏｌｉｖａ　ｍｕｓｔｅｌｉｎａ　ａｎｄ　ｉｔｓ
ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｖａｒｉａｔｉｏｎ
Ｌｉ　Ｈａｉｔａｏ１，Ｈｅ　Ｗｅｉ　１，Ｚｈｏｕ　Ｐｅｎｇ１，Ｃｈｅｎ　Ｋａｉｂｉａｏ１，Ｄｏｎｇ　Ｙａｎｈｏｎｇ１
（１．Ｓｏｕｔｈ　Ｃｈｉｎａ　Ｓｅａ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ　Ｃｅｎｔｅｒ，Ｓｔａｔｅ　Ｏｃｅａｎｉｃ　Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０３００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃ　ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ　ｏｆ　ｓｐｉｒｅ，Ｏｌｉｖａｓｎａｉｌｓ　ｗｉｔｈ　ｓｉｍｉｌａｒ　ｓｈｅｌ　ｃｏｌｏｒｓ　ａｎｄ　ｐａｔｔｅｒｎｓ　ｃａｎ　ｂｅ　ｄｉ－
ｖｉｄｅｄ　ｉｎｔｏ　ｔｗｏ　ｍｏｒｐｈｏｔｙｐｅｓ．ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅠｉｓ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｓｕｎｋ　ｓｐｉｒｅ　ｉｎ　ｉｔｓ　ｃｏｎｃａｖｉｔｙ　ｂｅｌｏｗ　ｔｈｅ　ｓｈｏｕｌｄｅｒ　ｏｆ
ｔｈｅ　ｂｏｄｙ　ｗｈｏｒｌ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｗｈｏｒｌｓ　ｏｆ　ｓｐｉｒｅ　ｆｕｓｅｄ　ｔｏｇｅｔｈｅｒ．ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅡｓｈｏｗｓ　ｔｈｅ　ｉｄｅｎｔｉｃａｌ　ｃｏｎｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓ－
ｔｉｃｓ　ｏｆ　ｔｙｐｉｃａｌ　ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ　ｏｆ　Ｏ．ｍｕｓｔｅｌｉｎａ．Ｔｈｅ　ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ　ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ　ｃ　ｏｘｉｄａｓｅ　ｓｕｂｕｎｉｔⅠ（ＣＯⅠ）ａｎｄ　１６ＳｒＲＮＡ
ｇｅｎｅ　ｓｅｇｍｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅｓｅ　ｔｗｏ　ｍｏｒｐｈｏｔｙｐｅｓ　ｗｅｒｅ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｄ．Ｇｅｎｅｔｉｃ　ａｎａｌｙｓｅｓ　ｃｌｅａｒｌｙ　ｓｈｏｗｅｄ　ｍａｎｙ　ｃｏｍｍｏｎ　ｈａｐｌｏ－
ｔｙｐｅｓ　ａｎｄ　ｌａｃｋ　ｏｆ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｔｗｏ　ｍｏｒｐｈｏｔｙｐｅｓ．Ｉｎ　ａｄｄｉｔｉｏｎ，ｆｕｒｔｈｅｒ　ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ
ａｎａｌｙｓｅｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ａｌ　ｈａｐｌｏｔｙｐｅｓ　ｗｅｒｅ　ｇｒｏｕｐｅｄ　ｉｎ　ａ　ｍｏｎｏｐｈｙｌｅｔｉｃ　ｃｌａｄｅ．Ｔｈｕｓ，ｔｈｅ　ｔｗｏ　ｍｏｒｐｈｏｔｙｐｅｓ　ａｒｅ　ｎｏｔ　ｇｅ－
ｎｅｔｉｃａｌｙ　ｄｉａｇｎｏｓａｂｌｅ，ａｎｄ　ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ　ｓｈｏｕｌｄ　ｂｅ　ａｓｓｉｇｎｅｄ　ｔｏ　ｓｐｅｃｉｅｓ　Ｏ．ｍｕｓｔｅｌｉｎａ．ＭｏｒｐｈｏｔｙｐｅⅠｍａｙ　ｂｅ　ａ　ｎｅｗ　ｆｏｒｍ
ｏｆ　Ｏ．ｍｕｓｔｅｌｉｎａｔｈａｔ　ｄｉｆｅｒ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｔｙｐｉｃａｌ　ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｏｌｉｖａ　ｍｕｓｔｅｌｉｎａ；ＣＯⅠｇｅｎｅ；１６ＳｒＲＮＡ　ｇｅｎｅ；ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｖａｒｉａｔｉｏｎ
３２１４期　李海涛等：伶鼬榧螺（Ｏｌｉｖａ　ｍｕｓｔｅｌｉｎａ）的分子鉴定及其形态变异