全 文 ：作者采用这两种抗抑郁动物模型观察缬草醇提物及
水提物各萃取组分对小鼠抑郁状态行为的影响，结
果显示缬草醇提物及水提物的乙酸乙酯相及正丁醇
相均可不同程度缩短小鼠强迫游泳和悬尾不动时
间，具有抗抑郁作用。此外，为了鉴别上述物质是否
具有中枢兴奋性作用，作者同时测定了各组小鼠的
自主活动，结果显示缬草醇提物、缬草水提物的各萃
取组分对小鼠自主活动均无影响，说明它们无中枢
兴奋性作用。
综上所述，缬草醇提物和水提物的乙酸乙酯相
和正丁醇相可能有抗抑郁作用，而无中枢兴奋性作
用，有望从中寻找新型的抗抑郁药。
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(2011-04-11 收稿 责任编辑徐春燕)
doi:10． 3969 / j． issn． 1671-6825． 2012． 01． 016
五味草水提物与醇提物预处理对四氯化碳致小鼠急性肝损伤
的保护作用
王向军△
郑州大学第二附属医院药剂科 郑州 450014
△男，1972 年 6 月生，本科，主管药师，研究方向:临床药学，E-mail:wxj72@ 163． com
关键词 五味草;肝损伤;四氯化碳;小鼠
中图分类号 R965． 1
摘要 目的:观察五味草水提物与醇提物预处理对四氯化碳(CCl4)所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法:
昆明种小鼠 108 只，随机分成 9 组，即正常组，模型组，益肝灵组，五味草醇提物和水提物低、中、高剂量组，均灌胃给
药 7 d，末次给药 1 h后除正常组外，其他 8 组小鼠均腹腔注射体积分数 0． 2%的 CCl4 橄榄油溶液 10 mL /kg，20 h后
眼静脉采血，用以测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、山梨醇脱氢酶(SDH)活性，同时迅速剖取肝脏，观
察肝组织形态变化，测肝组织中还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果:模型
组小鼠血清 ALT、AST和 SDH活性升高;肝组织中 GSH和 SOD水平降低，MDA 水平升高。五味草水提物中、高剂
量组及醇提物高剂量组肝组织变性明显减轻，以上指标较模型组有明显改善(P 均 ＜ 0． 05)。结论:五味草水提物
·94·Journal of Zhengzhou University(Medical Sciences) Jan． 2012 Vol． 47 No． 1
与醇提物预处理对 CCl4 所致小鼠急性肝损伤有保护作用。
Protective effect of water extract and ethanol extract of Corydalis taliensis
Franch． pretreatment on liver injury induced by carbon tetrachloride in
mice
WANG Xiangjun
Department of Pharmacy，the Second Affiliated Hospital，Zhengzhou University，Zhengzhou 450014
Key words Corydalis taliensis Franch．;liver injury;carbon tetrachloride;mouse
Abstract Aim:To study the protective effect of water extract and ethanol extract of Corydalis taliensis Franch． pre-
treatment on acute liver injury induced by carbon tetrachloride(CCl4)in mice． Methods:A total of 108 Kunming mice were
randomly allocated into 9 groups:normal group，model group，Yiganling group，low，medium，and high dose of ethanol ex-
tract of Corydalis taliensis Franch． groups(equivalent drug 1，2，4 g /kg) ，low，medium，and high dose of water extract of
Corydalis taliensis Franch． groups (equivalent drug 1，2，4 g /kg)． The mice in each group were lavaged for 7 d． 1 h after the
last administration，all mice except the normal group were injected with 0． 2%(V /V)CCl4 at 10 mL /kg，after 20 h，the
blood samples from the eye venous vein were obtained to determine ALT，AST，and SDH，at the same time，the left lobe of
the liver was dissected to determine GSH，MDA and SOD． Results:CCl4 could induce liver injury，increase the levels of
ALT，AST，SDH in serum，and the content of MDA in liver tissue，and decrease the contents of GSH and SOD in liver tis-
sue，while in high dose of ethanol extract group and medium and high dose of water extract groups，the above parameters im-
proved(P ＜ 0． 05)． Conclusion:The water and ethanol extracts of Corydalis taliensis Franch． have protective effect on a-
cute liver injury induced by CCl4 in mice．
五味草(Corydalis taliensis Franch．)别名地锦苗
(《救荒本草》)、金钩如意草(《滇南本草》)、水金钩
如意(《昆明民间常用草药》)、断肠草(《贵州中草
药名录》)、水黄连、大理紫堇(《全国中草药汇编》)
和水如意(云南)等，为彝医习用药材，主要分布于
四川、贵州和云南等地。五味草味苦，性寒，归肺、肝
经，具有祛风、清热、止痛和清肝明目等作用［1］。
《全国中草药汇编》中记载，其可治肝炎、痢疾、肠
炎、风湿骨痛、肺热咳嗽、牙痛及急性结膜炎等。作
者观察了五味草的醇提物和水提物预处理对四氯化
碳(CCl4)所致小鼠急性肝损伤的保护作用，报道
如下。
1 材料与方法
1． 1 实验药材的来源及处理 五味草购于昆明市
金碧路圣爱中医馆。取全草粉碎，过 80 目筛，用 10
倍量、体积分数 95%乙醇回流提取 3 h，再加 8 倍
量、体积分数 95%乙醇回流提取 3 h，重复 1 次，合
并 3 次滤液回收，得醇提物;另取五味草全草粉碎，
过 80 目筛，用 10 倍量的蒸馏水同上法提取得水
提物。
1． 2 实验动物、试剂与仪器 雄性昆明种小鼠，体
质量(20 ± 2)g，SPF级，许可证号:SYXK(豫)2007-
0009，由郑州大学实验动物中心提供。适应性饲养
1 周后实验。CCl4(天津市光复科技发展有限公司，
分析纯) ，复方益肝灵片(吉林省博威药业有限公
司，批号:20091004) ，谷丙转氨酶(alanine amin-
otransferase，ALT)测定试剂盒、谷草转氨酶(aspar-
tate aminotransferase，AST)测定试剂盒、丙二醛(ma-
londialdehyde，MDA)测定试剂盒、还原性谷胱甘肽
(reduced glutathione hormone，GSH)测定试剂盒及超
氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)测定试剂
盒均购自南京建成生物工程研究所，山梨醇脱氢酶
(sorbitol dehydrogenase，SDH)酶联免疫试剂盒购自
上海逸峰生物科技有限公司。Sartorius BP 211 D型
电子分析天平(北京赛多利斯仪器有限公司) ，
TG16-WS高速离心机(湖南赛特湘仪离心机仪器有
限公司) ，UV-2409 型紫外分光光度计(日本岛津公
司) ，Olympus BX-50 型显微镜，DQP-9010 石蜡冷冻
切片机(上海华岩仪器设备有限公司) ，ZN17-2102A
型全自动酶标仪(北京中诺远东科技有限公司)。
1． 3 动物分组及处理 昆明种小鼠 108 只，采用随
机数字表法分成 9 组，每组 12 只，分别为正常组(灌
胃生理盐水) ，模型组(灌胃生理盐水) ，益肝灵组
·05· 郑州大学学报(医学版) 2012 年 1 月 第 47 卷 第 1 期
(益肝灵 200 mg /kg) ，五味草醇提物低、中、高剂量
组(分别相当于生药 1、2、4 g /kg) ，五味草水提物
低、中、高剂量组(分别相当于生药 1、2、4 g /kg) ，均
灌胃给药 7 d，末次给药 1 h 后除正常组以外，各组
小鼠按文献［2］方法腹腔注射体积分数 0． 2% 的
CCl4 橄榄油溶液 10 mL /kg，禁食不禁水。20 h后眼
静脉采血，常规离心后分离血清备用。同时迅速剖
取肝脏，取小鼠肝左叶，－ 4 ℃下制备肝组织匀浆，
备用。另取肝右叶行病理组织学检查。
1． 4 病理组织学检查 将体积分数 5%甲醛溶液
固定的肝组织石蜡包埋、切片，HE 染色，光镜下观
察病理组织学改变。
1． 5 血清 ALT、AST和 SDH活性及肝组织匀浆中
MDA、GSH和 SOD水平测定 按所购试剂盒说明
进行操作。
1． 6 统计学处理 采用 SPSS 13． 0 进行分析，应用
单因素方差分析和 LSD-t 检验比较各组血清 ALT、
AST 和 SDH 活性及肝组织匀浆中 GSH、MDA 和
SOD水平的差异，检验水准 α = 0． 05。
2 结果
2． 1 各组小鼠肝组织病理观察 光镜下可见，正常
组肝细胞以中央静脉为中心呈放射状排列，细胞核
明显，结构正常;模型组小鼠肝窦及中央静脉明显扩
张，肝细胞明显坏死，胞质连成一片，几乎看不到细
胞膜，周围肝细胞发生不同程度的气球样变及嗜酸
性变，大量炎性细胞浸润;五味草醇提物高剂量组相
对模型组肝细胞稍有改善，而五味草水提物高剂量
组坏死细胞已部分修复，中央静脉周围只有少量的
炎性细胞(图 1)。
图 1 各组小鼠肝组织病理变化(HE，× 200)
A:正常组;B:模型组;C:益肝灵组;D、E、F:分别为五味草醇提物低、中、高剂量组;G、H、I:分别为五味草水提物低、中、高剂量组。
2． 2 各组小鼠血清 ALT、AST和 SDH活性比较
见表 1。
2． 3 各组小鼠肝组织匀浆中 GSH、MDA 和 SOD
水平比较 见表 2。
·15·Journal of Zhengzhou University(Medical Sciences) Jan． 2012 Vol． 47 No． 1
表 1 各组小鼠血清
ALT、AST和 SDH活性比较(n = 12) IU /L
组别 ALT AST SDH
正常组 49． 24 ± 4． 56 41． 13 ± 6． 67 3． 12 ± 0． 32
模型组 237． 43 ± 35． 32# 222． 65 ± 31． 42# 23． 32 ± 1． 78#
益肝灵组 112． 62 ± 17． 83* 103． 02 ± 27． 34* 15． 32 ± 1． 91*
五味草醇提物低剂量组 226． 54 ± 38． 76# 202． 89 ± 40． 15# 22． 89 ± 0． 94#
五味草醇提物中剂量组 194． 64 ± 23． 97# 190． 22 ± 16． 73# 20． 78 ± 3． 21#
五味草醇提物高剂量组 179． 57 ± 7． 35 189． 11 ± 28． 16# 17． 69 ± 1． 09*
五味草水提物低剂量组 209． 76 ± 8． 96# 213． 63 ± 30． 89# 21． 03 ± 1． 98#
五味草水提物中剂量组 149． 76 ± 23． 09* 140． 64 ± 9． 07* 15． 87 ± 2． 76*
五味草水提物高剂量组 99． 76 ± 19． 80* 91． 23 ± 8． 12* 8． 76 ± 0． 68*
F 8． 332 9． 428 8． 234
P 0． 002 0． 001 0． 002
#与正常组相比，P ＜ 0． 05;* 与模型组相比，P ＜ 0． 05。
表 2 各组小鼠肝
组织匀浆中 GSH、MDA和 SOD水平比较(n = 12)
组别 GSH/(10 － 3) MDA/(μmol·g － 1) SOD/(kU·g － 1)
正常组 2． 34 ± 0． 32 0． 57 ± 0． 14 259． 59 ± 30． 42
模型组 1． 51 ± 0． 18# 1． 18 ± 0． 33# 102． 45 ± 12． 09#
益肝灵组 1． 85 ± 0． 43* 0． 82 ± 0． 08* 200． 45 ± 20． 46*
五味草醇提物低剂量组 1． 51 ± 0． 19# 1． 03 ± 0． 18# 120． 34 ± 12． 06#
五味草醇提物中剂量组 1． 69 ± 0． 28# 0． 92 ± 0． 09# 128． 23 ± 9． 98#
五味草醇提物高剂量组 1． 81 ± 0． 22* 0． 81 ± 0． 12* 156． 78 ± 12． 59*
五味草水提物低剂量组 1． 53 ± 0． 22# 0． 99 ± 0． 21# 124． 67 ± 7． 89#
五味草水提物中剂量组 1． 85 ± 0． 20* 0． 78 ± 0． 16* 160． 29 ± 23． 87*
五味草水提物高剂量组 2． 19 ± 0． 31* 0． 62 ± 0． 05* 218． 30 ± 34． 71*
F 15． 279 8． 873 22． 983
P ＜ 0． 001 0． 002 ＜ 0． 001
#与正常组相比，P ＜ 0． 05;* 与模型组相比，P ＜ 0． 05。
3 讨论
肝脏氧化损伤是一种非常常见和严重的损伤，
可加重机体的衰老和病变。目前，市场上有许多抗
肝脏氧化损伤的产品，但是大多数都有不易提取获
得、纯度不高、有效成分不明确、价格高等缺点，给应
用带来了很大的困难。开发一种来源广、纯度高、成
分明确、效果好、安全的抗肝脏氧化损伤的产品非常
迫切且具有重大的意义。
现有研究表明，在肝细胞的病变过程中，自由
基、酶以及脂质过氧化反应等均发挥重要的作用。
CCl4 致小鼠肝损伤的机制
［3］为:CCl4 在肝内经微粒
体细胞色素分解活化，形成三氯甲基自由基和氯自
由基，导致肝微粒体的脂质过氧化。三氯甲基自由
基通过破坏肝细胞及其内膜机构，损坏或杀死肝细
胞，致使胞质中的酶如 ALT、AST等溢至血中。因此，
血清中 ALT和 AST活性可敏感地反映肝脏损害的程
度。另有文献［4］报道，血清 SDH 的活性增高与肝病
发病的特异性高，可作为肝功能检测的特异性指标。
该研究结果显示，中、高剂量五味草水提物及高
剂量五味草醇提物预处理可减轻 CCl4 所致的小鼠
肝损伤，显著降低 CCl4 引起的血清 ALT、AST 和
SDH升高，降低损伤肝组织中 MDA 水平，升高 GSH
和 SOD水平，显著改善肝组织病理损伤，且以高剂量
五味草水提物为佳。据此推测，五味草抗急性肝损伤
作用可能与其清除自由基相关，具体作用机制有待于
进一步研究。目前对五味草的研究还很少，应对其做
进一步研究，以找到其明确的活性部位和单体。
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(2011-05-18 收稿 责任编辑徐春燕)
·25· 郑州大学学报(医学版) 2012 年 1 月 第 47 卷 第 1 期