全 文 ：·1·中国继续医学教育 2013 年 6 月第 5 卷第 2 期　China Cotu Med Edu, Jun 2013, Vol. 5, No.2
·论著·
返魂草是菊科千里光属植物返魂草 (Senecio can-
nabifolius Less). 及其变种单叶返魂草 ［Senecio can-
nabifolius Less. var. integrifolius(Koidz.)Kitam.］的带根
全草 , 又名宽叶返魂草、麻叶千里光等 , 全草可药用 ,
有清热解毒、散血消肿之功效［1, 2］。
目前 , 返魂草中以绿原酸为代表的有机酸成分
含量测定的研究报道较多［3, 4］, 而研究表明 , 除了以
绿原酸为代表的有机酸成分以外 , 以槲皮素为代表
的黄酮类化合物也是返魂草的主要有效成分。返魂
草黄酮类化合物不仅具有抗菌、抗病毒作用 , 而且
还有很好抗氧化作用［5, 6］。故本研究对返魂草提取
物中槲皮素的含量进行测定 , 并对返魂草提取物中
基金项目：吉林省中医药管理局项目 (项目编号：PT092)
作者单位：130012　长春, 吉林修正药业新药开发有限公司
通讯作者 ：徐云　E-mail ：xuyun19847180@163.com
不同提取方法研究返魂草提取物中
槲皮素的含量
徐云　候宝　于艳辉　白冰
【摘要】　 目的　用不同提取方法提取、测定返魂草提取物中槲皮素的含量 , 为返魂草及其制剂中槲皮素的提
取提供依据。方法　用不同浓度的乙醇溶液回流提取、超声提取 , 提取返魂草提取物中的槲皮素 , 并采用高
效液相色谱法检测其含量 , 优化最佳提取工艺并进行工艺验证。结果　槲皮素的含量依次为 70% 乙醇回流提
取 >70% 乙醇超声提取 >50% 乙醇回流提取 >95% 乙醇回流提取。结论　返魂草提取物中槲皮素以 70% 乙醇
回流提取为最佳。
【关键词】　返魂草 ；槲皮素 ；高效液相色谱法 ；提取工艺 ；含量测定
【中图分类号】R284.1　【文献标识码】A　【文章编号】1674-9308(2013)02-0001-03
DOI:10.3969/J.ISSN.1674-9308.2013.02.001
Studies on content of quercetin in senecio cannabifolius less extract by different extracting processes XU Yun, HOU
Bao, YU Yan-hui, et al. Jilin Xiuzheng Pharmaceutical New Drug Development Co., Ltd.,Changchun 130012, China
【Abstract】　Objective Content of quercetin in senecio cannabifolius less extract by different extracting
processes to provide evidence for the extraction of quercetin in senecio cannabifolius less and its preparations.
Methods Quercetin were extracted by enthanol reflux and ehthanol ultrasonic extracting, the best extracting process
was chosen from different extractiong processes based on determining the content of quercetin in senecio canna bifolius
extract by HPLC. Results The content of quercetin were 70% ehthanol reflux >70% ehthanol ultrasonic >50% ehthanol
reflux>95% ehthanol reflux. Conclusion The best extraction for quercetin in senecio cannabifolius less extract from
different extracting processes is 70% ehthanol reflux extracting.
【Key words】　Senecio cannabifolius less; Quercetin; HPLC; Extracting processes; Content determination
槲皮素的提取方法进行研究。
本研究选用超声、回流两种提取方法对返魂草
提取物中的有效成分进行提取 , 并采用高效液相色
谱法对提取物中的槲皮素含量进行了测定［7, 8］。
1　材料
高效液相色谱仪 ：① UItimate3000 紫外检测器
( 德国戴安 ) ；②安捷伦 1200 紫外检测器 ( 美国安捷
伦 ) ；Meltter AE240 双量程电子天平 ( 梅特勒 - 托利
多仪器有限公司 ), AB204-E 电子天平 ( 梅特勒 - 托
利多仪器有限公司)；SB2200一T型超声波清洗器(上
海必能信公司 )。
返魂草提取物由吉林修正药业新药开发有限公
司提供 ；槲皮素对照品 ( 批号 ：100081-200406 供含
量测定用 , 中国食品药品检定研究院提供 )。甲醇为
色谱纯 , 水为超纯水 , 其他试剂均为分析纯。
·2· 中国继续医学教育 2013 年 6 月第 5 卷第 2 期　China Cotu Med Edu, Jun 2013, Vol. 5, No.2
2　方法与结果
2. 1　色谱条件与系统适用性　以十八烷基硅烷键合
硅胶为填充剂 ；以甲醇 -0.4% 磷酸溶液 (50:50) 为流
动相 ；检测波长为 373 nm ；流速 1.0 ml/min ；柱温
25℃ ；理论板数按槲皮素峰计算应不低于 2000。
2. 2　对照品溶液的制备　精密称取槲皮素对照品
10.56 mg, 置 100 ml 量瓶中 , 加甲醇溶解并稀释至刻
度 , 摇匀 , 精密量取 5 ml, 置 25 ml 量瓶中 , 用甲醇稀释
至刻度 , 摇匀 , 即得 (每 1 ml含槲皮素 0.02113 mg)。
2. 3　供试品溶液的制备
2. 3. 1　50% 乙醇回流提取供试品制备　取返魂草
提取物约 5 g, 精密称定 , 置具塞锥形瓶中 , 精密加入
50% 乙醇 40 ml, 回流提取 1 h, 放冷 , 滤过 , 滤液转移
至 50 ml 容量瓶中 , 滤器及滤渣用 70% 乙醇洗涤 , 洗
涤液并入同一容量瓶中 , 加 70% 乙醇至刻度 , 摇匀。
精密量取 25 ml, 加入 5 ml 浓盐酸 , 在 95℃下加热回
流 2 h, 立即冷却 , 转移至 50 ml 容量瓶中 , 用乙醇定
容至刻度 , 用 0.45 μm 滤膜滤过 , 取续滤液 , 即得。
2. 3. 2　70% 乙醇回流提取供试品制备　取返魂草
提取物约 5 g, 精密称定 , 置具塞锥形瓶中 , 精密加入
70% 乙醇 40 ml, 回流提取 1 h, 放冷 , 滤过 , 滤液转移
至 50 ml 容量瓶中 , 滤器及滤渣用 70% 乙醇洗涤 , 洗
涤液并入同一容量瓶中 , 加 70% 乙醇至刻度 , 摇匀。
精密量取 25 ml, 加入 5 ml 浓盐酸 , 在 95℃下加热回
流 2 h, 立即冷却 , 转移至 50 ml 容量瓶中 , 用乙醇定
容至刻度 , 用 0.45 μm 滤膜滤过 , 取续滤液 , 即得。
2. 3. 3　95% 乙醇回流提取供试品制备　取返魂草
提取物约 5 g, 精密称定 , 置具塞锥形瓶中 , 精密加
入 95% 乙醇 40 ml, 回流提取 1 h, 放冷 , 滤过 , 滤液
转移至 50 ml 容量瓶中 , 滤器及滤渣用 70% 乙醇洗
涤 , 洗涤液并入同一容量瓶中 , 加 70%乙醇至刻度 ,
摇匀。精密量取 25 ml, 加入 5 ml 浓盐酸 , 在 95℃
下加热回流 2 h, 立即冷却 , 转移至 50 ml 容量瓶中 ,
用乙醇定容至刻度 , 用 0.45 μm 滤膜滤过 , 取续滤
液 , 即得。
2. 3. 4　70% 乙醇超声提取供试品制备　取返魂草
提取物约 5 g, 精密称定 , 置具塞锥形瓶中 , 精密加
入 70% 乙醇 40 ml, 超声提取 1 h, 放冷 , 滤过 , 滤液
转移至 50 ml 容量瓶中 , 滤器及滤渣用 70% 乙醇洗
涤 , 洗涤液并入同一容量瓶中 , 加 70%乙醇至刻度 ,
摇匀。精密量取 25 ml, 加入 5 ml 浓盐酸 , 在 95℃
下加热回流 2 h, 立即冷却 , 转移至 50 ml 容量瓶中 ,
用乙醇定容至刻度 , 用 0.45 μm 滤膜滤过 , 取续滤
液 , 即得。
2. 4　槲皮素含量测定　分别精密对照品溶液与供试
品溶液各 10 μl, 注入液相色谱仪 , 测定 , 即得。测定
结果见表 1。
表 1　返魂草提取物中槲皮素含量测定
提取方法 槲皮素含量 (mg/g)
50% 乙醇回流 0.250
70% 乙醇回流 0.382
95% 乙醇回流 0.331
70% 乙醇超声 0.359
结果表明 , 70% 乙醇回流提取供试品中槲皮素
含量最高。
2. 5　工艺验证试验　按 2.3.2 项下工艺条件 , 制备 3
批 70% 乙醇回流提取供试品 , 按含量测定项下方法
测定槲皮素含量 , 见图 1。验证结果表明 , 3批 70% 乙
醇回流提取供试品中槲皮素平均含量为 0.378 mg/g,
与表 1 中 70% 乙醇回流提取供试品中槲皮素含量数
据相接近 , 且高于其他提取方法供试品中槲皮素含
量 , 表明返魂草提取物中槲皮素提取物 70% 乙醇回
流提取方法为佳。
3　讨论
3. 1　检测波长的选择　取 0.1 mg/ml 槲皮素对照品
进行全波长扫描 , 结果槲皮素在 209 nm、256 nm、
373 nm有最大吸收, 本文选择 373 nm 作为吸收波长,
见图 2。
图 2　槲皮素对照品紫
外 - 可见吸收光谱曲线
图 1　70% 乙醇回流提取槲皮素含量
高效液相色谱图
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3. 2　不同提取方法的选择　本研究采用不同浓度的
乙醇回流提取和超声提取制备返魂草供试品 , 结果
回流提取供试品中槲皮素含量高于超声提取中供试
品槲皮素含量 , 且与本试验所得出的结论与王晖等
人在进行透骨草中槲皮素含量测定的实验［9］中的结
论基本一致。
4　结论
试验结果及验证试验表明返魂草提取物中槲皮
素提取以 70% 乙醇回流提取最佳 , 本研究为返魂草、
返魂草制剂及含有槲皮素的中草药提取物中槲皮素
的提取参数提供了一定的理论依据。
参 考 文 献
［1］ 魏建华 , 董 宇 , 彭亮亮 , 等 . 返魂草的药理作用及人
工栽培技术 . 人参研究 , 2006(4):30.
［2］ 朱俊义 , 周繇 , 于俊林 , 等 . 单叶返魂草人工栽培技
术 . 中药材 , 2005, 25(9):624-625.
［3］ 南敏伦 , 赫玉芳 , 赵全成 , 等 . HPLC 法测定不同产地
返魂草中绿原酸的含量 . 沈阳药科大学学报 , 2008,
25(2):119-121.
［4］ 王吉彦 , 李丽静 , 张连珠 , 等 . HPLC 法测定返魂草及
其注射剂中绿原酸 . 中草药 , 2005, 36(8):1166-1167.
［5］ 马鸿雁 , 杨莉 , 王长虹 , 等 . 返魂草药材的 HPLC 指
纹图谱研究 . 中国实验方剂学 , 2012,18(13):101-104.
［6］ 李丽静 , 王继彦 , 王本祥 , 等 . 返魂草提取物及其有
效成分抗病毒机制的研究 . 陕西中医学院学报 , 2004,
27(6):65.
［7］ 吴一飞 , 巩 江 , 令恒莉 , 等 . 返魂草的药学研究进展 .
山东中医杂志 , 2009, 28(6):436-437.
［8］ 薛珺 , 李凤仪 . 中草药中槲皮素测定方法的研究 . 江
西化工 , 2006(4):9-14.
［9］ 王晖 , 刘良玉 , 王林江 , 等 . 高效液相色谱法测定
透骨草中槲皮素的含量 . 江西中医学院学报 , 2005,
17(4):41.