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紫外-可见光分光光度法测定无梗五加叶与刺五加叶中总黄酮含量



全 文 :紫外 - 可见光分光光度法测定
无梗五加叶与刺五加叶中总黄酮含量
郑颖,张浩,雷秀娟,王英平※
(中国农业科学院特产研究所,吉林 吉林 132109)
摘要:采用分光光度法,以芦丁为对照品,在 500nm处测定无梗五加叶及刺五加叶总黄酮的含量。结果显示,无梗五加干叶的总黄
酮含量为 1.078%;刺五加干叶的总黄酮含量为 4.284%。本试验为更好地开发利用刺五加和无梗五加资源提供了理论参考依据。
关键词:分光光度法;无梗五加叶;刺五加叶;黄酮
中图分类号:R284.2 文献标识码:A
Measurement of the Flavonoids Contents in the Leaves of
Acanthopanax sessiliflorus and Acanthopanacis Senticosus
ZHENGYing,ZHANGHao,LEI Xiu- juan,WANGYing- ping※
Abstract:Provided theoretical references for the better development and utilization of the resources of Acanthopanax sessiliflorus and
Acanthopanacis Senticosus. The flavonoids contents in the leaves of Acanthopanax sessiliflorus and Acanthopanacis Senticosus were
measured at 500nm with Rutin as the reference. The results showed that: the flavonoids contents in Acanthopanax sessiliflorus were
1.078%, and in Acanthopanacis Senticosus were 4.284%.
Key words:Spectrophotometry; Acanthopanax sessiliflorus; Acanthopanacis Senticosus; Flavonoids
无梗五加 [Acanthopanax sessiliflorus(Rupr.et
Maxim.)Seem] 和刺五加 [Acanthopanacis Senticosus
(Rupr.et Maxim. Harms.)]均为五加科五加属植物,
喜阳、喜温、喜湿及喜腐殖质较多的环境,多分布于
中国东北、河北、山西、内蒙古、朝鲜及俄罗斯远东地
区[1]。长期以来,刺五加常被药用,而无梗五加一般作
为果蔬食用。但近年来,随着刺五加药用的快速发
展,野生资源出现相对紧缺的状况,人们开始用无梗
五加代替刺五加药用,并未发现不良反应,这掀起了
广大学者对二者成分差异研究的热潮。研究表明,无
梗五加和刺五加具有抗氧化、抗衰老的功效[2],都含
有黄酮类化合物[3,4],并具有良好的抗氧化作用。为了
更全面、综合地评价这 2种药材,本试验对无梗五加
叶与刺五加叶中黄酮类成分进行含量比对,为更好
地挖掘这 2种传统中药材的药用价值提供参考。
1 仪器与材料
收稿日期:2012- 02- 23
基金项目:吉林省科技基础平台建设项目(20102218)
作者简介:郑颖(1987-),女,山东潍坊人,硕士,主要从事药物化学方面的研究。
※通讯作者:王英平,E- mail:yingpingw@126.com.
(Institute of Special Wild Economic Animals and Plants ,CAAS,Jilin 132109,China)
文章编号:1001- 4721(2012)02- 0048- 03
特 产 研 究Special Wild Economic Animal and Plant Research48
DOI:10.16720/j.cnki.tcyj.2012.02.007
1.1 仪器
TU- 1810紫外可见分光光度计(北京普析通用
仪器有限责任公司);SK8200H超声波清洗器(上海
科导超声仪器有限公司);CPA2250D型电子天平
(Sartorius)。
1.2 试剂与材料
石油醚、乙醇、硝酸铝、氢氧化钠(天津市瑞金特
化学品有限公司);亚硝酸钠(黑龙江省阿城化学试
剂厂);芦丁(国药集团化学试剂有限公司);水为重
蒸馏水。
无梗五加叶、刺五加叶(2011年 9月份采自中
国农业科学院特产研究所资源圃)
2 方法[5]与结果
2.1 标准曲线的绘制
2.1.1 对照溶液的配制 准确称量芦丁对照品
0.20g,置于 1 000mL的容量瓶中,加 65%乙醇室温
溶解后,定容。
2.1.2 标准曲线的绘制 精密量取对照品溶液
1mL、2mL、3mL、4mL、5mL,分别置 10mL容量瓶中,
加入 4%亚硝酸钠溶液 0.2mL,混匀,放置 6min。再
加入 10%硝酸铝溶液 0.2mL,混匀,放置 6min。最后
加入 5%氢氧化钠溶液 4mL,用 65%乙醇定容至刻
度,摇匀,放置 15min。以 65%乙醇及显色剂为空白,
500nm波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度
为横坐标,绘制标准曲线,如图 1。
2.2 供试液的制备
2.2.1 无梗五加叶供试液的制备 无梗五加鲜叶
55℃烘干。称取约 20.0g干样粉碎,从中称取 1.00g
样品,4次重复。每个样品先用乙醚浸提 1次后,用
75%乙醇提取至无色,分别合并回收乙醇提取液,然
后用 60%乙醇溶解在 50mL的容量瓶中,室温定容。
分别得到无梗五加叶供试液 A、B、C、D、E。
2.2.2 刺五加叶供试液的制备 方法同 2.2.1项。得
到刺五加叶供试液 A、B、C、D、E。
2.3 供试液的范围测定
从 A 中分别取 0.5mL、1mL、2mL、3mL、4mL 样
品,按照 2.1.2项的方法显色后定容,测定各供试液
的吸光度,发现当取 2mL供试液时所得的吸光度值
在 0.2~0.8范围中间,因此,从无梗五加叶的供试液
中取 2mL样品时可在线性关系内。
按上述方法从刺五加叶 A中取样测定,发现当
从刺五加叶的供试液中取 0.5mL样品时可在线性关
系内。
2.4 供试液含量测定
从无梗五加叶 A、B、C、D、E中分别吸取 2mL样
品,从刺五加叶 A、B、C、D、E 中分别吸取 0.5mL
样品,按照 2.1.2项的方法显色,测得样品的吸光度。
每个样品设置 3个重复,结果见表 1。
2.5 精密度试验
吸取无梗五加叶供试液 0.5mL,按 2.1.2项方法
显色后,重复测定 5次吸光度,总黄酮含量的 RSD
为 0.70%,表明仪器精密度良好。
2.6 稳定性试验
吸取无梗五加叶供试液 0.5mL,按 2.1.2项方法
显色后,分别在 0min、10min、20min、30min、40min、
50min、60min后测定吸光度。结果显示,供试液在
60min内基本稳定,RSD为 1.47%。表明仪器稳定性
良好。
2.7 重复性试验
取无梗五加叶样品 5份,按 2.2.1项方法制备供
试液,测得总黄酮 RSD为 1.37%,说明本法的重复
性良好。
2.8 加样回收率试验
精密称取已知总黄酮含量的无梗五加叶 1.00g,
按 2.2.1项方法制得供试液,加入 5mg对照品溶液,
测定吸光度,得总黄酮含量,结果平均回收率为
97.5%,RSD为 1.3%。
3 小结
无梗五加叶的总黄酮含量为 1.078%,刺五加干
叶的总黄酮含量为 4.284%,由此可见,刺五加叶中
黄酮含量是无梗五加叶的近 4倍。黄酮类物质具有
良好的抗氧化功效,有助于血液循环、提高免疫力[6]。




A)
1.2
1.0
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.10
图 1 标准曲线 Standard curve
浓度 C(mg/mL)
郑颖,等:紫外 - 可见光分光光度法测定无梗五加叶与刺五加叶中总黄酮含量第 2期 49
样品
Samples
表 1 无 梗 五 加 叶 和 刺 五 加 叶 的 总 黄 酮 含 量
Table 1. The cotents of the flavonids in the leaves of Acanthopanax sessiliflorus and Acanthopanacis Senticosus
供试液
The test solutions
序号
Serial number
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
浓度
concentrations
0.042 4
0.040 8
0.041 3
0.041 4
0.044 3
0.041 2
0.057 0
0.052 7
0.053 3
0.046 7
0.042 4
0.043 7
0.044 0
0.044 7
0.044 6
0.048 9
0.049 1
0.048 2
0.046 5
0.043 2
0.044 4
0.039 8
0.041 3
0.038 8
0.041 9
0.042 4
0.040 6
0.039 8
0.038 8
0.038 9
各样品浓度
Concentrationsofthesamples
总黄酮含量(%)
Flavonid contents
无梗五加叶
Acanthopanax sessiliflorus
刺五加叶
Acanthopanacis Senticosus
1.078A
B
E
D
C
B
A
E
D
C
0.207 5
0.211 5
0.271 5
0.783 3
0.832 7
0.799 3
0.894 0
0.974 7
0.222 0
0.221 5
4.137
本试验检测出刺五加叶中黄酮含量较高,应对刺五
加中的黄酮类成分进一步研究,以充分利用我国丰
富的刺五加资源。
参 考 文 献
[1]高凤兰,孙振方,哈永年,等.无梗五加原植物及其生态分布[J].
中国中医药科技, 1997, 4(2): 106.
[2]王晶晶,冯颖,孟宪军,等.无梗五加果实多糖抗氧化活性研
究[J].安徽农业科学, 2009, 37(31): 15405- 15406,15409.
[3]陈貌连,宋凤瑞,郭明全,等.刺五加叶中黄酮类化合物的分
析[J].分析化学研究简报, 2002, 30(6): 690- 694.
[4]郭丽娜,江黎明,吴立军,等.无梗五加茎叶化学成分的研究[J].
沈阳药科大学学报, 2002, 19(3): 180- 182.
[5]冯颖,孟宪军.无梗五加果黄酮的测定及提取方法的研究[J].
安徽农业科学, 2006, 34(12): 2642- 2643.
[6]冯颖,王建国,孟宪军,等.无梗五加果黄酮类化合物生物活
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特 产 研 究 2012年第 2期50