全 文 ：第 2 4卷 第 3期
1 988年 7月
南 京 大 学 学 报
J O U RNA LO F A NJ N IUN GN I VE RS IT Y V
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.
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( N A T U R A L S C I E N C E S E D I T I O N ) Ju l y
,
2 9 55
李
裂褶菌的生物有效成分研究
李兆兰
( 生物系
摘 要
本文时裂褶菌南大 8 5 3菌株的有效成分进行 了分析 。 在 黄 豆
粉 萄萄糖液体培养基中以 30 % 的的荀萄糖浓度最有利于多据得率
的提高。 在菌丝体和发酵液 中均含丰富蛋白质和 17 种氛基酸 , 韭
富含 8 种必需氛基酸 、 菌丝体残渣和 多糖中含相 当量的蛋白质 。
菌丝体经等离子尤谱法分析 , 含25 种徽量元素 , 其中含有 8 种必
需微量元素 。
关键词 : 裂褶 菌 , 担子菌 , 真菌多糖 , 真菌蛋 白质 , 很量元素
衣、
材料和方法
i 菌种 裂摺菌 S e il i z o p h l l u m e o m m u n e F r . 南大 5 5 3菌株 。
2 培养基 P D A , 黄豆粉葡萄糖液体培养基 。
3 培养条件 邪℃ , p H 5 . 5一 6 , 振速 10 一 1 0次 /分 。
4 多糖提取 发酵菌液抽滤 , 分开菌丝体与发酵液 , 热水提取菌丝体 , 浸提液浓缩 , 醇
析 , 醇洗 , 热水溶解 , 过滤 , 得多糖溶液 、 喷雾干燥 , 得胞内多糖粗品干粉 。 发酵滤液的处
理与上述菌丝体浸提液相同 , 得胞外多糖粗品干粉 。
5 测定
5
.
1 多糖测定 葱酮法 , S H S 铜试剂法 。
5
。
2 蛋白质测定 微量克氏定 (幻 el d a h” 氮法 。
5
.
3 氨基酸测定 菌丝体或发酵滤液用 6 N H CI 在 1 10 ℃水解 24 小时后用口立 8 35 一 50 型氨
基酸自动分析仪测定 , 由于酸水解故色氨酸未测出 。
5
.
4 微量元素测定 等离子发射无谱 。
收稿日期 : 1 9 8 6一 1 0一 0 9
第 3 期 李兆兰 :裂褶菌的生物有效成分研究
. . . . . . . . . . . . . . .曰 侧 .刹口 . . .口 . . . . . . . . . . . . . .碑 . .曰 ., 户. , . . 臼 . 即. . ~ . . . . . . . . . . ` . . . . . . ` . . 以 , . 明` 口 . . . . . . . . 氏. . , . . 曰 .曰 . , 曰 , . j . , . . , , 州润 . . . .
实 验 结 果
令 1 多糖
每升发酵液含胞外多糖粗品 4 一 6 9 , 其内含纯多糖为 4 0 . 2% , 每 10 0 9 菌 丝体含胞内
多搪粗品 1 . 51 一 2 . 2 9 , 其中含纯多糖为 60 % 。 黄豆粉培养液中使用了不同浓度 的葡萄糖 ,
对多糖形成的效果是 30 % > 25 % > 35 % > 20 % 。 不同浓度的葡萄糖对多糖产 量 的 影 响见表
1
。
裹 1 不同浓度的有萄抽对胞外多璐的影晌
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a b l e 1 T h o
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e e t o f d i f f e r e n t g l
u e o s o e o n s i s t e n e y o n y i e l d s o f P o l y s a e e h a r i d。
葡萄糖浓度 ( % ) 胞 外 多 糖 产 量 g / L
G l
u e o s a e o n s i s t o n e y Y i
e l d s o f e x o e e l l u l a r P o l y s a e e h
a r i d。
2 0% 三。 6 2
声
2 5%
3 0%
3 5%
3
。
4 6
5
。
3 7
2
。
8 2
2 蛋白质
菌丝体含蛋白质是 2 3 . 2 5% , 每 10 m L 发酵液含蛋 白质 为 3 . 5% , 子 实体含蛋自质是
2 5
.
6 3%胞内多糖含蛋白质是 1 9 . 75 % , 胞外多糖含蛋白质是 1 4 . 0 % 。
3 氨基酸
表 2 菌丝休和发醉液中的氮基酸含 t
T a b l e 2 T il
o e o n t e n t o f a m i n o a e i d s i n m 了e e l i 住m a n d f e r m e n t a t i o n b r o t h
菌丝体氨基酸发酵液氨基酸 · 氨 基 酸 菌丝体氨基酸
A m i n o a e id s A m i n o a e i d s A m i n o a e i d s A m i n o a e i d s
o f m y e e l i u m o f f e r m e n t a
- o f m y e e l i u m
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谷氨酸 G hi
甘氨酸 G ly
丙氮酸 A la
脱氨酸 C y s
撷氮酸 V al
蛋氮酸 M et
2
。
3 3
1
。
2 2
1
。
2 9
3
。
8 2
1
。
1 3
1
。
6 5
0
。
2 3 8
1
。
3 7
0
。
3 9 6
8
。
9 9
3
。
9 4
2
。
6 2
1 1
。
0
2
。
7 2
2
。
0 7
1
。
2 6
4
。
5 9
0
。
2 5 2
异亮氨酸 I le u
亮氨酸 L e 住
酪氨酸 T y r
苯丙氨酸 P h e
争 赖氨酸 L
y s
组氨酸 H i s
精脯氨 人 gr
脯氨酸 P r o
窗京大李学报 ( 自活科学 》 第24 卷
菌丝体及发酵液均含17 种氨基酸 , 其中谷氨酸 、 撷氨酸 、 亮氨酸 、 异亮氨酸 、 赖氨酸 、
精氨酸等含量较多 , 而蛋氨酸 、 酪氨酸 、 组氨酸 、 脯氨酸含量较低 。 菌丝体 氨基 酸 总量为
2 4
.
4 6%
, 必需氨基酸总量为 10 . 71 % , 占菌丝体氨基 酸 总 量 41 . 9 % 。 发酵氨基酸总量是
0
.
0 6 0 7 %
, 必需氨基酸总量是 0 . 0 2 3 9% , 占发酵酵液氨基酸总量的 3 9 . 36 % 。
4
. 微量元素
裂摺菌南大 85 3菌株的菌丝体经等离子发射光谱分析含 2 5种微量元素 , 其中有 8种是必需
微量元素 : Z n 、 F e 、 M n 、 M o 、 C u 、 C o 、 C r 、 S 。 , 其中 Z 。 、 F e 、 C a 的含量均很高 。
寺
表 3 裂摺菌菌丝体中微且元素含且 ( P M )
T a b l
o 3 T h
e e o n t e n t o f t r a e e e l e m e n t i n m y e e l i住 m o f S e h . e o m m u n 。
一导’ 一 ’场;谕扮” ` e , e n , { “ o n ` e n t ) “ ` e m e n t 含量 ( P P M ) 元 素 ! 含量 ( P P M )C o l t e n t e l e m e n t e o n t e n t
硅银钦钒钨锌硒51rSiTvWnz跳钾锉镁锰钥镍钠磷铅KiL毗MnoaNipbPA l 铝
B a 钡
B e 披
C
a 钙
C d 福
C
o 钻
C
r 铬
C
u 铜
F e 铁
9 4 1
。
2 5
1 2
。
8 7
0
。
0 5 0
2 2 4 5
。
0
0
。
1 7
1
。
8 2
6
。
6 1
5 9
。
8 7
8 3 5
。
0
2
。
1 7%
0
。
2 7
2 6 5 7
。
5
1 5
。
9
1
。
9 2
3 8 4
。
0
1
。
4 9
1
。
9 0%
2 4
。
7 5
2 1 5
。
6
8
。
0
4 5
。
0
2
。
3 2
5
。
5 0
1 7 4
。
7 5
5
。
6 5
人
参 考 文 献
北京大学生物系化学教研室 。 生物花学实验指导 。 北京 : 人民教 育 出 版 社 。 1 9 8 2
3 0一 3 6 。
菊本昭一 、 宫岛彻 。 日本农芸化学会瑟 。 1 9 7 0 ; 4 4 ( 8 ) : 3 3 7一 3 4 2。
菊本昭一 、 宫岛彻 。 日本农芸化学会盏 。 1 9 7 2 ; 4 5 ( 4 ) : 1 6 3一 2 6 8。
P ih m er
,
D
.
T
. , 昊翠等译 。 实 用 生 物化学导论 。 北京 : 科学出版社 。 1 9 7 8 :
1 7 5一 1 8 5。
sc hr oe d er
,
H
. 人 . , 陈荣三 、 张祖喧译 。 痕量元素与人 。 北京 : 科 学 出 版 社 。
1 9 7 9
:
2 0一7 4 。
张龙翔 。 生化实验方法和技术 。 北京 : 高等教育出版社 。 1 9 8 1 : 1一 5 。
284
第 3 期 李兆兰 : 裂褶菌的生物有效成分研究 58 1
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S e il i
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u m e o m m u n e t h a n t h o o t h
e r e o n s i s t e n e i e s
.
T h o m y e e l i u m a n d f e
r m e r
t a t i o n b r o t h b o t h e o n t a i n fa r m o r a P r o t a i n a n d 1 7 a m i n o a e id s
, o f w h i
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a r e n e e e s s a r y
。
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o m y e e l i u m e o n t a i n s 2 5 t r a e o e l e m e n t s
, o f w h i e h 8 a r o n e e e s
·
S a r y
.
K e y w o r d s
:
S e h i
z o p h了11以 m e o m m u n a F r . , B a s i d i o m y e o t e s , f u n g a l
P o l y
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h a
r id e
, p r o t e i n o f f吐n g i , t r a e e e l e m o n t s
嘴
斗
奋
、 .