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第28卷 第4期
2 0 1 1 年 8 月
医 学 研 究 与 教 育
Medical Research and Education
Vol.28 No.4
Aug.2011
·医药技术与方法·
豨莶风湿片质量研究
张慧娟1，刘丽滨2
（1. 澳诺（中国）制药有限公司，河北 保定 071000；2.河北长天药业有限公司，河北 保定 07100）
摘要：目的 豨莶风湿片是由豨莶草、桑寄生、桑枝、威灵仙、防己、 槐枝提取制成的口服片剂。为了控制其药品的质
量,对其组方成分进行定性和定量控制。方法 薄层色谱法、高效液相色谱法。结果 桑寄生、威灵仙、防己的薄层色谱鉴
别方法质量可控,阴性无干扰。豨莶草中奇壬醇的高效液相色谱含量测定方法经方法学验证, 奇壬醇在4.0~40.0μg/mL范围
内线性关系良好，其回归方程为Y=91.585X-12.845 （r=0.999 7）。结论 本方法能够有效地控制产品质量，可作为豨莶风
湿片质量控制和考察制备工艺稳定性的指标。
关键词: 豨莶风湿片；质量研究；薄层色谱；高效液相色谱
中图分类号：TQ 文献标识码：A 文章编号：1674-490X(2011)04-0087-05
Quality standard for Herba siegesbeckiae rheumatism tablets
ZHANG Huijuan1, LIU Libin2
(1.Aonuo(China) Pharmaceutical Co. Ltd., Baoding071000, China;2. Hebei Changtian Pharmaceutical Co.
Ltd., Baoding071000, China)
Abstract Objective The oral tablets, Herba siegesbeckiae rheumatism tablets are made by extracting the
Herba siegesbeckiae, Loranthaceae, Mulberry, Clematis, Menispermaceae and Cassia sticks. To control the
drugs quality, the identification and determination of the ingredients were made. Methods TLC and HPLC
were applied in this study. Results Loranthaceae, Menispermaceae and Cassia sticks in Herba siegesbeckiae
rheumatism tablets were identifi ed by TLC, which the quality was controllable, negative and non-interference.
The HPLC method for the content determination of odd nonanol in Herba siegesbeckiae was verifi ed by methods
validation. There was a good linear relationship between the peak area and the concentration of odd nonano in
the range of 4.0~40.0μg/mL. The regression equation: Y=91.585X-12.845(r=0.999 7). Conculsion This method
can effectively control the product quality. It can serve as indicators of Herba siegesbeckiae rheumatism tablets
to control product quality and to examine the process stabilization of preparation.
Key words Herba siegesbeckiae rheumatism tablets; quality research; TLC;HPLC
豨莶风湿片是由豨莶草、桑寄生、桑枝、威灵仙、防己、 槐枝六味药材，经适宜的方法提取，加
入防己细粉及适量辅料，混匀，制成颗粒，压制而成的口服片剂，祛风除湿，通络止痛，用于四肢麻
痹、腰膝无力、骨关节疼痛及风湿性关节炎，收载于部颁标准中药成方制剂[1]。该标准仅对豨莶风湿片
作了一项理化反应鉴别，未作更多定性鉴别和定量测定。为了保证药品的安全性、有效性、质量可控
收稿日期：2011-03-22
作者简介：张慧娟（1977—），女，河北保定人，助理工程师。E-mail：zhanghuijuan9697@126.com
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性，提高检测方法的专属性，故对本品中防己、桑寄生、威灵仙进行薄层色谱鉴别，对豨莶草中的奇壬
醇[2]进行定量控制。本方法能够有效地控制产品质量，可作为豨莶风湿片质量控制和考察制备工艺稳定
性的指标[3]。
1 实验材料和仪器
1.1 材料
1.1.1 样品 豨莶风湿片由河北长天药业有限公司生产，批号100101，规格0.2克/片。
1.1.2 药材 购于安国市光明大药房。
1.1.3 对照品 奇壬醇对照品，批号03-2004（上海中药标准化研究中心）。槲皮素对照品，批号
100081-200501（中国药品生物制品检定所）。齐墩果酸对照品，批号110709-200505（中国药品生物
制品检定所）。粉防己碱对照品，批号110711-200708（中国药品生物制品检定所）。防己诺林碱对照
品，批号110793-200605（中国药品生物制品检定所）。
1.1.4 试剂 乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其他试剂为分析纯。
1.2 仪器
1.2.1 Agilent 1100高效液相色谱仪。
1.2.2 色谱柱 YMC ODS柱，4.6×150mm，5μm。
1.2.3 UV-2550紫外分光光度计。
2 方法与结果
2.1 鉴别
2.1.1 取本品50片，研细，称取细粉7.5g，加甲醇-水（1∶1）60mL，加热回流1h，趁热过滤，滤液
浓缩至约20mL后，加水10mL，再加稀硫酸约0.5mL，煮沸回流1h后，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次
30mL，合并乙酸乙酯液，浓缩至约1mL，作为供试品溶液。另取槲皮素对照品加乙酸乙酯每1mL含0.5mg
的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2005年版一部附录ⅥB），吸取上述两种溶液
各10μL，分别点于同一用0.5%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯（水饱和）-甲酸乙酯-甲酸
（5∶4∶1）为展开剂，展开[4]，取出，晾干，喷以5%三氯化铝乙醇溶液，置紫外灯（365nm）下检视。
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点[5]（图1）。
2.1.2 取本品10片，研细，称取细粉1.75g，加乙醇50mL，加热回流2h，滤过，滤液浓缩至约20mL，加
盐酸3mL，加热回流1h，加水10mL，放冷，加石油醚（60~90℃）振摇提取，石油醚蒸干，残渣用无水
乙醇10mL溶解，作为供试品溶液[6]。另取齐墩果酸对照品，加无水乙醇制成每1mL含0.45mg的溶液，作
为对照品溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2005年版一部附录ⅥB），吸取上述两种溶液各3μL，分
别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（100∶15∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷
以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显
相同颜色的斑点（图2）。
2.1.3 取本品10片，研细，称取细粉1.0g，加乙醇10mL，超声处理20min，过滤，滤液蒸干，残渣加乙
醇5mL使溶解，作为供试品溶液。另取粉防己碱对照品、防己诺林碱对照品，加三氯甲烷制成每1mL各
含0.5mg的溶液，作为对照品溶液[7]。照薄层色谱法（《中国药典》2005年版一部附录ⅥB），吸取上述
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2种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮-甲醇-浓氨溶液（60∶10∶10∶1）
为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，
显相同颜色的斑点（图3）。
2.2 含量测定
2.2.1 色谱条件与系统适用性试验[8-9] 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水（1∶4）为流动
相，检测波长为215nm，理论板数按奇壬醇峰计算应不低于3 000。
2.2.2 对照品溶液制备[10] 精密称取奇壬醇对照品适量，加甲醇制成每1mL含20μg的溶液。
2.2.3 供试品溶液的制备 取本品20片，研细，精密称取1g，置索氏提取器中，加石油醚（60~90℃）
100mL[11]，回流提取3h，取出滤纸筒，挥干溶剂，置锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，加热回
流2h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.2.4 吸收波长的确定 取奇壬醇对照品溶液20μg/mL适量，用UV-2550紫外分光光度计在紫外光区进
行扫描，奇壬醇在215nm处有最大吸收，因此确定检测波长为215nm。
2.2.5 专属性试验
2.2.5.1 阴性样品溶液的制备 按豨莶风湿片的处方称取除豨莶草外的5味药材，按制法制备阴性样
品。按2.2.3制备阴性样品溶液。
2.2.5.2 测定法 依据上述色谱条件分别取对照品溶液、供试品溶液和阴性样品溶液各20μL，进样，
结果奇壬醇与其他相邻组分色谱峰能达到很好的基线分离，且阴性样品在奇壬醇对照品色谱峰相应位置
无吸收峰。
2.2.6 线性关系 精密称取奇壬醇对照品20.04mg，置100mL量瓶中，加甲醇溶解至刻度作为储备液，
分别取储备液0.2、0.4、0.8、1.0、1.2、2.0mL置10mL量瓶中，加甲醇溶解至刻度制成不同浓度的对照品
溶液，分别吸取20μL注入液相色谱仪，测定峰面积。以峰面积为纵坐标，以对照品浓度为横坐标，进
行线性回归，得回归方程为Y=91.585X-12.845（r=0.999 7），结果表明奇壬醇在4.0~40.0μg/mL范围内
线性关系良好。
2.2.7 精密度试验 取对照品溶液（20.04μg/mL）20μL，注入高效液相色谱仪，连续进样7次，奇壬
醇峰面积的RSD为0.74%（n=7），符合定量分析要求。
图1 鉴别方法1 图2 鉴别方法2 图3 鉴别方法3
张慧娟等：豨莶风湿片质量研究
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2.2.8 稳定性试验 取供试品（批号100101），按2.2.3制备供试品溶液，分别在0、1、2、4、6、8、
24、48h进样，奇壬醇峰面积的RSD为2.2%（n=8）， 结果表明该供试品溶液在48h内稳定。
2.2.9 重复性试验 精密称取供试品（批号100101）的细粉7份，依含量测定项下方法测定，记录色谱
峰面积，计算奇壬醇的含量，结果供试品奇壬醇含量的RSD为1.47%（n=7），说明本方法的重现性好。
2.2.10 加样回收试验 取已知含量的豨莶风湿片样品（含奇壬醇0.551 6mg/g）1g，精密称取6份，并分
别精密加入5mL奇壬醇对照品溶液（20.04μg/mL），挥干甲醇，依含量测定项下方法制备供试品溶液并
依法测定，计算回收率。奇壬醇的平均加样回收率为99.77%，RSD为0.90%，见表1。
表1 奇壬醇的加样回收试验
取样量/g 样品中量/mg 加入量/mg 测得量/mg 回收率/%
1.037 4 0.572 2 0.100 2 0.673 4 101.0
0.994 7 0.548 7 0.100 2 0.647 5 98.60
1.010 6 0.557 4 0.100 2 0.657 4 99.80
1.000 1 0.551 7 0.100 2 0.651 1 99.20
1.006 8 0.555 4 0.100 2 0.655 0 99.40
1.012 5 0.558 5 0.100 2 0.659 3 100.60
注：平均回收率99.77%；RSD=0.90%。
2.3 含量限度的制定
按含量测定项下的方法，测定9批豨莶风湿片样品中奇壬醇的含量，得平均含量为0.130mg。见表
2、图4、图5。
表2 9批豨莶风湿片中奇壬醇的含量测定结果
批号 含量/mg 均值/mg
100101 0.139 0.131 0.135
100102 0.126 0.124 0.125
100103 0.116 0.112 0.114
100201 0.135 0.133 0.134
100202 0.131 0.133 0.132
100203 0.131 0.137 0.134
100401 0.143 0.145 0.144
100402 0.124 0.121 0.122
100503 0.133 0.127 0.130
图4 奇壬醇对照品 图5 豨莶风湿片样品
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根据以上结果，以测得9批样品奇壬醇含量平均值的80%定为含量限度，故确定每片含奇壬醇，不
得少于0.10mg。
3 讨 论
本文采用HPLC法测定制剂中的奇壬醇含量，有效成分分离较好，制剂中的其它成分不干扰主成分
测定。该方法稳定、准确、重现性好，专属性强，可作为该制剂含量测定的检测方法。
本文采用HPLC法测定制剂中的奇壬醇含量时，对乙腈和水的比例进行调整，最后确定乙腈与水的
比例为1∶4。
制备含量测定供试溶液时，供试溶液以石油醚回流1h，脱去脂溶性成分，再用甲醇为提取溶液，能
有效地除去干扰杂质。
制备含量测定供试溶液时，选用回流提取比超声提取更完全，回流时间为2h。
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（本栏目责任编辑：裘永强）
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