全 文 ：一 164 5一 药物分析杂志 h C in J P h n rT a An al2 8 0 0
,
28 ( 10 )
胆木不同部位异长春花普内酞胺的含量研究 ’
张俊清 , 毛彩霓 ,杨卫 丽 , 赖伟勇 , 符乃光 , 盛琳 , 刘明生”
(海南医学院 海南省热带药用植物研究开发重点实验室 , 海口 5 7 1 101 )
摘要 目的 :获得胆木茎木 、皮及叶中有效成分异长春花普 内酸胺含量高低的研究结果 , 为挖掘胆木新的药用部位奠定科学
基础 。 方法 :采用薄层色谱法 , 对胆木的茎木 、皮 、叶中异长春花营内酞胺化学成分进行定性鉴别 ;同时采用高效液相色谱技
术对该 3 个部位中异长春花昔内酞胺含量高低进行检测 。 结果 :胆木茎木 、 皮及叶的薄层色谱图中均出现异长春花昔内酞胺
蓝色荧光斑点 ;且茎木 、皮 、 叶中异长春花着内酞胺含量值分别为 1 . 2 % , 1 08 % , 1. 54 % 。 结论 : 定性鉴别和含量测定的实验
结果均表明 : 胆木茎木 、皮 、 叶中均含有效成分异长春花昔内酞胺 , 且叶中含量相对较高 、皮中含量相对较低 。
关键词 :胆木 ;不同部位 ;质量研究 ;异长春花昔内酞胺
中图分类号 : Rg 17 文献标识码 : A 文章编号 : 0 2 54 一 17 93 (2 00 8 ) 1 0 一 16 54 一 0 4
T h e q u a l i t a it v e r e s e a r c h
d ife
r e n t P a r t s o f 入恤u e le a
o f th e i s o v i n c o s i d e l a c t o n e i n
川养` in a ils p i e r r c e x p e t a r d ’
Z H A N G Ju n 一 q i n g , M A O C a i 一 n i , Y AN G W e i 一 11
,
L A I W
e i 一 y o n g ,
F U N a i 一 g u a n g , SH E N G L i n , L IU M i n g 一 s h e n g ”
H a i
一l a n M e d i e a l C o l l e g e H a in a n P一飞 , v i n ( ia l K o y L a b o la l ( )卿 o f R& D o f T or P i e a l H e r b s , H a i ko u 5 7 110 1 , C } i i n a
A b s t r a c t o bj e e t i v e : T o o b ta i n th e s t u d y r e s u l t s o f th e e o n t e l l t o f i s o v i n e o s i d e l a e t o n e i n d i fe
r e n t p a rt s o f Na
u e le a
雌 e i n a l is P i e r e e x P it a r d . M e t h o d s : T h e i s o v i n e o s id e l a e t o n e i n s te m w o o d , t e g u m e n t a n d l e a v e s o f aN u e l e a 磷e i -
n a l i s P i
e r e e x P i ta r d w a s i d
e n t i if e
a t e d b y T L C
.
T h e e o n t e n t o f i s o
v i n e o s id e l a e t o n e in th e t h
r e e p a rt s o f aN
u e l e a 叻乞-
e i l z a l is P i e r r e e x P i ta
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d w a s d e t e r m i n e d b y H P L C
.
R e s u l t s : T h e r e a r e fl u o er s e e n e e s p o r s i n th e T L C P l a t o f s te m
w o o d
,
t e g u m e n t a n d le a
v e s o f aN
u e l e a q吞艺e i n a li s P i e r cr e x l o e t o n e . hT e e o n t e n t o f 15 ( , v i n e o s id l o e t o n e w e r e 1 . 2 2% ,
1
.
0 8% a n d 1
.
5 4%
.
C o n e l u s i o n : I t w a s fo u n d t h a t th e
r e w a s i s o v i n e o s id e l a e to n e i n t h e th
r e e p a r t s o f N a u e le a t e s t
-
e d b y id e n tiif e a ti o n a n d q u a n ti if e a t io n
.
A n d e
o n te n t o f i s o
v in e o s i d e l a e to n e 15 u p p e
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v e s o f D a n m u a n d lo w e r i n
t e g u m e n t r e v e r s e l y
.
K e y w o r d s
:肠 u e le a q厅乞e i n a l i s P i e r cr ex P e t a dr ; d i fe r e n t p a rt s ; q u a li t a ti v e er s e a r e h ; i s o v i n e o s id e l a e t o n e
胆木 N a u e l e a 月吞及{i n a l is P i e r e e x P i t a r d , 又名乌
檀 、 药乌檀 、 黄羊木 ,为茜草科乌檀属乔木 ,主要分布
于广东 、 广西和海南等地 。 胆木性味苦 、 寒 , 具有清
热解毒 、消肿止痛之功效 。 文献报道胆木的主要化
学成分为 ljIJ 噪类生物碱成分川 , 且从胆木带皮茎木
中提取 出主要有效成分异 长春花昔内酞胺 !“ · 。 本
文采用薄层 色潜法及高效液相色谱法对胆木 的茎
木 、皮 、 叶中异长春花昔内酞胺含量进行研究 ,获得
胆木茎木 、 皮及叶中异长春花昔内酞胺含量高低的
研究结果 , 为今后 以大量废弃的胆木叶替代日益濒
危的胆木带皮茎木 , 挖掘胆木新 的药用部位奠定科
学基础 。
1 实验材料
1
.
1 材料与试剂 胆木样品 ( 3 批 ,采于海南省万
宁市 ,经中国医科院兴隆分所陈伟平教授鉴定 ) ;异
长春花昔内酞胺对照 品 ( 中国药品生物制品检定
所 , 1 10 5 3一 2 0 0 3 0 2 ) ; 甲醇 、 乙睛为色谱纯 ;其它试
剂为分析纯 。
1
.
2 仪器 日本岛津 L c 一 6A D 型高效液相色谱仪
( S p D 一 I OA v p 紫外检测器 、 C T O 一 10 A SV p 恒温箱 、
N2 0O0 色谱工作站 ) ; B s Z l o 电子天平 : KQ2 2o 0 E 超
声波清洗器 ; UV 一 16 0 紫外分光 光度计 ; H H -
* 海南省重叔科技计划项目川 l苦茶等互种常用黎族药材质量标准研究 ( 0 6 2 0 1)
* * 通讯作者 I’ e ] : ( 0 8 9 8 ) 6 6 8 9 3 4 60 ; E 一 m a i l : r , h arn l a e y l 9 9 9@ h。) tm a i l
.
e o m
DOI : 10. 16155 /j . 0254 -1793. 2008. 10. 016
药物分析杂志 Ch in JPh r a m An al 2 0 0 8, 2 8 ( 10 ) 一 16 5 5 一
w 42 05 三用恒温水箱等 。
2 薄层色谱鉴别
2
.
1 供试品溶液的制备 称取粉碎 、 自然风干燥后
的胆木茎木 1 . 0 9 , 胆木皮 1 . 5 9 ,胆木叶 1 . 0 9 ,分别
置 50 m L 烧杯中 ,加人 25 m L 蒸馏水 ,煎煮 20 m in ,
补足损失的水 , 趁热过滤 , 滤液分别用 乙酸乙醋 巧
m L 萃取两次 ,合并萃取液 ,挥发浓缩至 2 m L 作为供
试品溶液 。
2
.
2 对照品溶液的制备 精密称取异长春花昔内
酞胺对照品 1 m g ,加甲醇制成 1 m g · m L 一 ’ 的对照品
溶液 。
2
.
3 实验方法 照薄层色谱法 ( 2 005 年版中国药
典一部附录 VI B )试验 , 分别吸取胆木茎木供试液 、
胆木皮供试液 、胆木叶供试液 、 异长春花昔内酞胺对
照品溶液 6 , 6 , 8 , 4 林L 点于同一 硅胶 G H 3 6 、 薄层 板
上 , 以乙 酸乙醋 一 乙醇 一 水 ( 9 : l : 0 . 1) 溶液为展开
剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,置紫外光灯 ( 3 65 n m )下检视 。
供试品色谱图中 ,在与对照品色谱相应的位置上 , 显
相同颜色的荧光斑点 其最低检测 限为 0 . 0 5 m g
·
m L
一 } 。 见图 1 。
图 l 月旦木茎木 、皮 、 叶薄层色谱图
F 19 1 C h r
〔〕m一) g lu 一1 1 o f s 一e m w ` ) o ( I , te g u 一1一e n t a l一〔 ! l e a v e 吕 fl( ) n l D a n n l u
l 一 3
. 胆 木药材茎木 、 皮 、 tl l供试 l异, 溶液 ( 、 a m l , l e s ` , l u l i o n ” ` , f ” I e ” ,
` 。 。, ,一, *e四 , , , e n t 。 n d l o a v e s 俪 : , 1 D a n m u ) 4 . 异长春花昔内酞胺对照品
( i、
o v i n e o s i ( l e l a
。 *咬》n o r o fe le n e e s u l ) s一a r飞` e )
含量测定
色谱条件 色谱柱 : D i a m o n s i l e : 、 ( 2 5 0 m m x
瓶中 ,加人流动相超声溶解 , 并用流动相稀释至刻
度 ,摇匀 ,此溶液每 1 m L 含异长春花昔内酞胺 3 . 25
m g
。
3
.
2
.
2 异长春花昔内酞胺对照品溶液 精密量取
异长春花昔内酞胺对照品储备液 1 . 0 m L , 置 10 : n L
量瓶中 , 用 流动相稀释至刻度 , 摇匀 , 即得 浓度为
32
.
50 林g
·
m L
一 ’ 的异长春花昔内酞胺对照品溶液 。
3
.
2
.
3 供试品溶液 精密称取胆木药材 粗粉约
1
.
0 9
, 加人 7 0 % 乙醇 ( V/ V) 热 回流提取 3 次 , 第 1
次加人 3 0 m L ,第 2 、 3 次均加人 2 0 , n L , 每次提取时
间均为 4 0 m in , 过滤 ,滤液收集于 10 0 m L 量瓶 中 , 用
7 0% 乙 醇 ( V/ V) 分多 次洗涤 , 最 后定容至刻度 , 摇
匀 ,精密吸取 1 . 0 m L 于 10 InI J 量瓶中 ,用 流动相定
容至刻度 ,摇匀 , 即得
3
.
3 线性关系考察 精密吸取异长春花昔内酞胺
对照 fI[ 溶液 0 . 2 5 , 0 . 5 0 , 0 . 7 5 , 1 . 0 0 , 1 . 5 0 ; n L , 于 10
m L 量瓶中 ,加流动相制成系列溶液 , 取 L述各溶液
20 林L 注人液相色谱仪 , 按选定 的色谱条件进行测
定 , 以浓度对峰面积进行回归 ,得 回归方程 :
Y = 4
.
7 8 8 x I O
4
X 一 1
.
6 2 4 x 10
4 r = 1
.
0 0 0
表明异长春花昔内酞胺浓度在 8 . 13 一 65 . 0 协g ·
m L
一 ’范围内线性关系 良好 。
3
.
4 检测限与定量 限 取异长春花昔内酞胺对照
品溶液逐步稀释进样 ,测得异长春花昔内酞胺最低
检钡l限为 0 . 0 4 n g ( s / N = 3 ) :定量限为 0 . 6 4 , 19 ( s /刀
= 10 )
〕
3
.
5 精密度试验 取浓度为 32 . 50 林g · m L 一 ’ 的异
长春花昔内酞胺对 照品溶液 20 协L 注人液相色谱
仪 ,按上述测定方法测定 , 连续进样 5 次 , 测得异长
春花昔内酞胺峰 面积 R S D 为 1 . 5% , 表明仪器精密
度良好 。
3
.
6 重复性试验 取同批胆木药材粗粉 6 份 , 每份
1 9
, 精密称定 , 依 “ 3 . 2 . 3 ” 项下方法制成供试品溶
液 。 按上述色谱条件进行测定 ,计算得异长春花背
内酞胺含量为 1 . 18 % , R s D 为 1 . 7% 。
3
.
7 稳定性试验 取同一供试品溶液 , 于 l , 3 , 8 ,
24
,
4 8
,
7 2 h 分别测定 ,计算得异长 春花着 内酞胺峰
面积 R SD 为 1 . 0% ,表明供试品溶液在 72 h 内稳定
性良好 。
3
.
8 回收率试验 精密称取胆 木药材粗粉 9 份 , 每
份 0 . 5 0 0 9 , 均分为 3 组 , 每组分别加人异 长春花昔
内酞胺对照品溶液 ( 3 2 . 5 0 林g · n 1 L 一 ’ ) 0 . 5 , 1 . 0 , 2 . 5
m L
,依法制备溶液并测定 , 讨一算平均回收率 ( n = 9)
为 10 0 .1 % , 回收率较 好 , 能满 足方法学验证的要
3
4
.
6 m m
,
5 林m ) ; 柱温 : 30 ℃ ; 流动相 : 乙睛 一 0 . 1%
磷酸水溶液 ( 30 : 70 ) ;流速 : 1 . 0 m L · ; in n 一 ’ ;检测波
长 : 2 2 6 n m 。
3
.
2 溶液配制
3
.
2
.
1 异长春花昔内酞胺对照品储备液 精密称
取异长春花昔内酞胺对照品 0 . 0 8 3 0 9 , 置 25 ;nI 量
一 16 56 一 药物分析杂志 C h i n J Ph a rm An a l 200 8 , 28 ( 1 0 )
求 。 见表 1 。
表 1
T a b l
回收率试验结果 ( n = 3)
T ll e r e s u lst of er e o v e r y ar et
序号
( N
o
.
)
含量
(
、、 , ,I Le n L) /
,1 19
加人量
(
。 d d o d ) /
n lg
测定值
; n e a s u er v a l u e ) /
, , 19
回收率
(
r e e .〕v e琢 ) /%
平均回收率
(
a v e r a g e r e o u v e 巧 ) / %
R只D
/ %
4
.
06 3
8
.
12 5
] 0 2
.
7
99
.
7
98 2
103
. 】
1 03
.
8
10 1
.
9
98
.
5
97
.
4
96
.
0
10
.
2
10 2
.
9
9 7
.
3
八ēù衬0哎JO1036928O0C
é门、内、
1 3
.
7 20
3
.
9 样品测定 精密称取胆木茎木 、 皮 、 叶供试品 液并测定 , 色谱图见图 2 ,其结果见表 2 。
各 3 批 ,每批 3 份 ,每份各 1 . 0 9 ,依法制备供试品溶
r es we , 尸- - , 尸 - - , - - - , 一 - - , - - - , - - -一 一, - 一 ,飞- - -〕 叫 - - - 飞- - - 飞 - - -飞 - - - -下- -一 8 1 2 16 20 2 4 28A r - - -甲- - - - r - - - , - -0 4 8 1 2 16 2 0 24 2 8B
r we ~ ~ 一 ,尸 ~ 一- 一下 - - - - ,广 - - - - 1 - - - - - r - - - - , 尸- - - - 丫- - - - - r es es es , 一 1 ~ ~ - , 一 1 1
] 4 8 12 16 2 0 2 4 2 8
C
0 4 16 2 0 2 4
图 2
F ig Z
异长春花昔内酞胺对照品 ( A ) 、 胆木茎木 ( )B
C hro m at
o g l飞1 1 1 15 o f i s o v i n e o s id e l a e t o n e r e fe re n e e
、 胆木皮 ( C ) 、 胆木叶 ( D )色谱图
s u b s t a n e e ( A )
,
s t e m w o o d ( B )
, t e剖 m e n r ( C ) a n d l e a v e s ( D )
1
. 异长春花昔内酞胺 ( i , o 、 i n e o s id e l a e t o n e )
表 2 胆木茎木 、 皮 、 叶中异长春花普内酞胺含量测定结果
T a b 2 T h e r e s ul t s o f d e et r m i n at io n ( % )
样品名称
(
s a , , l p l。 )
第一批
( N
o
.
l )
第二批
( N
o
.
2 )
第三批
( N
o
.
3 )
平均
a v e ar 吕.
18507965141620855
130297685
茎木 ( s *e n l * 。、。,《 I)
皮 ( te g u :: : e n t )
叶 ( le a v e , )
1
.
22
1
.
08
1
.
54
4 1
.
5 7
5 结果与结论
胆木茎木 、 皮及 叶的薄层色谱图中均出现异长
春花昔内酞胺蓝色荧光斑点 , 茎木 、皮 、 叶中异长春
花昔内酞胺含量分别为 1 . 2 % , 1 . 08 % , 1 . 54 % ;定
性鉴别和定量检测 的实验结果表明 : 胆木茎木 、 皮 、
叶中均含有异长春花昔内酞胺 , 且叶中含量相对较
高 ,皮中含量相对较低 。 过去我们仅利用胆木带皮
茎木 ,将叶废弃 ,现已明确异长春花昔内酞胺为其主
要有效成分 ,通过此次试验可 以考虑将废弃的胆木
叶作为胆木的新药用部位 。
药物分析杂志 h C in J Ph ar m An al2 008 , 28 ( 10 ) 一 1 65 7 一
6 讨论
6
.
1 在薄层色谱实验中发现 ,展开后的薄层板放置
l h 后 ,异长春花普内酞胺斑点颜色由原来的蓝色
荧光渐变为清晰可见的亮黄色荧光 , 此现象可能是
异长春花昔内酞胺在空气中放置被氧化的缘故 。
6
.
2 本文对异长春花昔内酚胺含量测定中供试品
提取溶剂进行了筛选 : 分别选用纯乙醇 、 70 % 乙醇 、
5 0% 乙醇 、 70 % 甲醇 、 50 % 甲醇对供试品进行回流提
取 ,结果表明 : 供试品中异长春花昔内酞胺在 70 %
乙醇介质的提取率最大 ,故选用 7 0 % 乙醇作为提取
溶剂 。
6
.
3 本文对异长春花昔 内酞胺含量测定中供试品
提取时间进行筛选 : 分别选用 20 , 30 , 4 0 , 50 m in ,进
行回流提取 。 结果表明 : 供试品在回流提取 40 m in
时异长春花昔 内酞胺提取率最大 ,故 选用 回流 4 0
m in 来提取供试品 。
6
.
4 经查阅文献「3 ] ,选择 3 种流动相进行筛选 :
乙睛 一 0 . 1% 磷酸水溶液 ( 3 0 : 70 ) ; 乙睛 一 0 . 1% 磷
酸水溶液 ( 25 : 75 ) ; 甲醇 一 0 . 1% 磷酸水溶液 ( 5:0
50 )
。 结果表明 , 流动相为 乙睛 一 0 . 1% 磷酸水溶液
( 30
:
70 )时 , 异长春花昔内酞胺峰形 没有拖尾 , 且能
与相邻杂质峰很好分离 , 故选用此流动相作为该分
析方法的流动相条件 。
参考文献
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(本文于 2 0 0 6 年 6 Jl 2 6 日收到 )
月卜 门卜 巾 门卜 一月卜 曰 月卜 月卜 匡月卜 一 月卜 闷卜 一 阅卜 月卜 一月卜 川 门卜 一卜门卜 一 阅卜 月卜 月卜 匡月卜 月卜 引 月卜 月 , 一 门卜 一 月卜 一 月卜 一 月卜 一月卜 一阅卜 卜 月卜 引 月卜 一卜月卜 一 月卜 一, 司卜 川 月卜 卜一月卜 月卜
《中国药学》英文版 2 0 09 年征订启事
《中国药学》 (英文版 ) 为中国科协主管 , 中国药学会主办 , 北京大学药学院承 办的综合性英文药学
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士 。 《中国药学》 (英文版 )是药学会所属 19 种刊物 中惟一的英文版杂志 ,具有鲜明的特 色 ,在学会中承
担着对外宣传我国药学最新研究成果和进展 , 开展国 际 交流的任务 。 本刊为 中国英 文版科技期刊数据
库统计源期刊 ,被 C A《化学文摘》 、 CAJ 一 C D 《中国学术期刊 (光盘版 ) 》 、 《万方数据库》 、 《C N KI 》收录 。
本刊主要报道我国药学领域的科研成果和 国际药学研究进展 , 具体包括天然药物化学、 合成药物化
学、 药物分析学、 生药学、 药剂学 、 药理学、 药事管理与临床药学等方 面的 内容 , 主要栏 目有研究论文 、 研
究简报 、 综述 、研究生论文摘要 、 学术动态和新药介绍等 。 本刊现为季刊 ,在国 内外公开发行 。 2 007 年 1
月进行了第三届编委会的换届 工作 。 主编 : 张礼和 院士 ;编辑部主任 : 黄河清 。
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x : 8 6 一 10 一 8 2 80 17 13 ; 8 2 80 54 9 6 ; H t tp : / / w o
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e n ; 干,」号 : IS SN 10 0 3 一 10 5 7 , C N 1 1 一 2 8 6 3 / R 。
本刊为季刊 , 大 16 开本 , 国内外公开发行 ,每期定价 巧 元 ,年定价 60 元 ( 包括邮费 ) 。 可在全国非
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