全 文 ：食用菌学报 2011.18(1):63 ～ 69
收稿日期:2010-07-28原稿;2010-11-23 修改稿
基金项目:上海市技术标准专项(编号:08DZ 0504000)的部分研究内容
作者简介:白　冰(1977-), 男 , 2005年毕业于南京农业大学土壤学专业 ,硕士 ,助理研究员 ,主要从事农药残留检
测方面的研究。
＊本文通讯作者　E-mail:sissel 1234567@hotmail.com
文章编号:1005-9873(2011)01-0063-07
气相色谱-质谱法检测双孢蘑菇和
香菇中的 67种农药残留
白　冰 , 董茂锋 , 邢增涛 , 赵晓燕＊
(上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究所 , 上海 201403)
摘　要:用气相色谱-质谱法对双孢蘑菇(Agaricus bisporus)和香菇(Lentinula edodes)中 67种农药进行检测 。
样品经乙腈均质提取 , 盐析除水 ,氨基柱净化后用气相色谱-质谱仪分析 , 在选择离子监测模式下以特征离子
的保留时间定性定量测定 67 种农药。在添加农药标准品浓度为 0.05 、0.10 和 0.25 mg/ kg 水平上 ,大多数农
药的平均回收率在 70%～ 120%之间 ,检出限在 0.01～ 0.5 μg/ kg 之间。
关键词:气相色谱-质谱;检测;农药残留;食用菌
　　相对于传统的农药检测方法 ,农药多残留分
析技术以其快速 、简便 、监测项目范围广的特点
已成为今后农药残留量检测的一个发展方向 。
发达国家在这方面已有了一定的研究 ,推出了多
种前处理技术 , 主要有:加速溶剂萃取技术
(accele ra ted solvent ex t raction , ASE)、超临界流
体萃取(supercri tical fluid ex t raction ,SFE)、微波
辅 助 萃 取 (microw ave-assisted ext raction ,
MAE)、膜萃取技术(membrane ext raction ,ME)、
固相萃取(solid phase ex traction , SPE)、胶渗透
色谱(gel permeation chromato graphy , GPC)
等[ 1-3] 。对应这些技术相继出现了一系列公认的
标准分析方法 ,主要有美国分析化学协会方法 ,
美国环保署方法 ,美国食品和药品监督管理局方
法 ,美国加州食品与农业部分析化学方法 ,食品
法典委员会方法 ,联合国粮农组织和世界卫生组
织方法 ,欧盟委员会方法 ,加拿大和日本等国家
注册和颁布的标准方法[ 3] 。
我国食品中农药残留检测技术发展也很快 ,
现行的国标方法为气相色谱-质谱和液相色谱-
串联质谱法 ,可对水果 、蔬菜 、粮谷 、动物肌肉 、蜂
蜜 、果汁和果酒等食品进行全面的农残检测 ,涉
及 644种农药[ 4-7] ,但是我国现阶段尚无针对食
用菌中农药残留的检测方法 ,一般都参考蔬菜中
的方法进行检测。食用菌相对蔬菜来说 ,基质较
为复杂 ,它既含有脂肪 ,又含有多糖 、蛋白质等成
分 ,前处理较为困难。固相萃取(SPE)技术采用
选择性吸附 、选择性洗脱方式对样品进行富集 、
分离 ,适用范围广 ,条件温和 ,操作简单 ,回收率
高 ,克服了乳化现象 。笔者基于 SPE 技术尝试用
氨基柱净化新鲜双孢蘑菇(Agaricus bisporus)和
香菇(Lentinula edodes)样品 ,并应用于 67种农
药的气相色谱-质谱检测 ,取得了良好的效果 ,
现将试验结果报道如下 。
1　材料与方法
1.1 材料
　　新鲜双孢蘑菇(A .bisporus)与香菇(L .
edodes)子实体购于上海江桥农产品批发市场。
1.2 主要仪器与试剂
　　Agilent 7890 -5975 气质联用仪(EI 源 , 美
国安捷伦),工作站:Data Analysis;Supelco 固相
萃取装置(Supelco 公司);C leane rt N H2-SPE 氨
基柱 ,容积 6 mL ,填充物 500 mg(艾杰尔公司);
甲苯 、乙腈(色谱纯 ,DIKMA 公司)。其它试剂均
为分析纯 ,所有用水均为超纯水 。67种农药标准
物质购置于 DIKMA公司 ,纯度≥95%。
1.3 样品处理
　　提取:将新鲜香菇和双孢蘑菇子实体样品用
搅拌机制成浆状备用 ,然后称取 20 g 试样(精确
到 0.01 g)于 100 mL 具塞三角瓶中 ,加入 40 mL
乙腈 ,在匀浆机中高速匀浆 2 min 后 , 抽滤至
食　用　菌　学　报 第 18 卷
100 mL具塞量筒中 ,加入 5 g 氯化钠振荡 ,静置 ,
取有机层 10 mL ,在 40 ℃以下旋转蒸干 ,残留物
中加入 2 mL 乙腈与甲苯的混合液(体积比 3∶1)
溶解 ,备用。
净化:将氨基柱中注入 5 mL 乙腈与甲苯的
混合溶液 ,舍弃流出液。将提取液加入氨基柱 ,
用 50 mL 鸡心瓶接收洗脱液 ,再用 25 mL 乙腈与
甲苯的混合液冲洗烧杯后淋洗固相萃取柱 。将
盛有洗脱液的鸡心瓶置于旋转蒸发仪(<50 ℃)
上旋转蒸发至少于 5 mL ,用乙腈定容至5 .0 mL ,
混匀后用孔径为 0.2 mm 滤膜过滤 ,待测。
1.4 标准溶液配制
　　分别称取 20 ～ 40 mg(精确至 0.1 mg)各农
药标准物于 10 mL 容量瓶中 ,用甲醇定容至刻
度 ,根据每种农药在仪器上的响应灵敏度 ,用丙
酮配制其标准溶液(不同农药标准品的浓度见表
1),同时配制相应浓度的混合标准溶液 。为消除
基质效应对各种农药检测结果的影响 ,将通过相
同前处理得到的不含上述农残的双孢蘑菇和香
菇样品吹干 ,加入标准溶液得到基质标准溶液
(本文所有测定结果均是使用基质标准溶液测定
所得)。
1.5 测定条件
1.5 .1 气相色谱条件
　　色谱柱:DB-5MS毛细管柱 30 m×0.25 mm×
0.25 μm ;色谱柱温度程序:初始温度 80 ℃保持
1 min ,15 ℃/min 升至 260 ℃保持 2 min ,再以
10 ℃/min升至 280 ℃保持10 min ;载气是氦气 ,
纯度≥99 .999%;柱流速:1 .5 mL/min ;进样口
温度:250 ℃;进样量:1 μL;进样方式:无分流进
样 , 1.5 min后打开分流阀和隔垫吹扫阀 。
1.5 .2 质谱条件
　　GC-MS 接口温度:280 ℃;离子源:EI 源;离
子源温度:230 ℃;四级杆质量分析器温度
150 ℃,电子备增器电压:1 024 V;容积延迟
7 min ;扫描方式:选择离子扫描 ,每种化合物按
参考文献[ 4] 分别选择 1个定量离子 , 2 个定性
离子 。
1.6 定性与定量分析
　　通过农药标准溶液特征离子扫描获得每种
农药的保留时间 ,如果检出色谱峰的保留时间与
标准样品一致 ,并且在扣除背景后的样品质谱图
中 ,所选择的离子均出现 ,而且所选择的离子丰
度比与标准样品的离子丰度比相一致 ,则可判断
样品中存在这种农药化合物 。定量采用外标法
(单一浓度定量法)。
1.7 检出限和加标回收率实验
　　在不含农残的香菇和双孢蘑菇试样中添加
67 种农药的混合标样 , 加标量为 0.05 、0.1 、
0.25 mg/kg 3个水平 ,重复 2次。加标样品按上
述方法进行前处理后用 GC-MS 测得各农药的回
收率 。采用基质标准溶液 3倍特征离子信噪比
(S/N)确定不同农药的检出限[ 8] 。
2　结果与分析
　　图 1 、2是 67种农药(0 .1 mg/kg)和空白双
孢蘑菇的总离子流色谱图。每种农药的保留时
间 、定性和定量离子见表 1。
　　67 种农药的加标回收率和检出限见表 1。
结果表明 ,绝大多数农药的平均回收率在 70%～
120 %的范围内 ,其中有机氯类农药加标回收结
果普遍偏低 ,多为 70%～ 100%之间;有机磷类农
药加标回收结果普遍较好 ,为 90%～ 110%之间 ,
拟除虫菊酯类农药由于出峰时间比较靠后 ,导致
基质效应比较明显 ,所以加标回收结果普遍偏
高 ,多为 105%～ 120 %之间。少数农药加标回收
率结果不理想 ,超出 70%～ 120%的范围 ,如:溴
64
第 1 期 白　冰 ,等:气相色谱-质谱法检测双孢蘑菇和香菇中的 67 种农药残留
螨酯 、腈菌唑 、二甲戊乐灵 ,另外有一些农药加标
回收率结果不稳定 ,如:五氯硝基苯 、异丙甲草
胺 、氟虫腈。大多数农药的检出限在 0.01 ～
0.5 μg/kg之间 。
表 1　67 种农药名称 、保留时间 、特征离子 、检出限及样品的回收率
Table 1　Retention times , characteristic ions , method detection limits and mean recoveries of 67 pesticides residues
农药名称
Pes ticide
标准品浓度
Standard
concentration
(μg/mL)
保留时间
Retention
time
(min)
定性离子
Qualitative
ion
定量离子
Quantitative
ion
检出限
Detection
limit
(μg/kg)
加标量
Amount of added s tandard
solution(mg/kg)
0.05 0.1 0.25 0.05 0.1 0.25
香菇中回收率
Recovery rate
in L .edodes(%)
双孢蘑菇中回收率
Recovery rate
in A .bisporus (%)
烯丙酰草胺
Dich lormid
0.25 11.59 124 166 172 0.5 111.2 97.8 91.2 101.2 103.6 96.1
苯胺灵
Propham
0.1 12.94 137 120 179 0.1 84.9 73.8 87.3 75.8 73.5 82.5
氟乐灵
Trifluralin
0.1 15.44 264 335 306 0.1 110.0 132.1 157.2 105.4 112.0 116.9
α-六六六
α-HCH 0.05 16.26 183 221 219 0.01 84.8 88.5 90.6 84.1 98.0 100.3
六氯苯
Hexachlor obenzene
0.05 16.42 286 282 284 0.01 70.7 77.8 73.0 80.2 68.5 79.4
氯硝胺
Dicloran
0.25 16.82 206 124 176 0.5 96.7 120.4 111.1 102.1 110.0 107.3
炔苯酰草胺
Pronamide
0.1 16.98 175 255 173 0.1 105.8 121.5 130.1 107.2 111.7 107.6
γ-六六六
γ-HCH 0.05 17.02 219 217 181 0.01 82.4 85.8 88.6 77.8 79.3 85.7
五氯硝基苯
Quintozene
0.05 17.06 249 295 237 0.01 89.4 105.6 118.2 92.8 100.7 116.3
七氟菊酯
Teflu thr in
0.1 17.12 197 161 177 0.1 100.6 100.7 103.1 100.3 98.2 101.9
δ-六六六
δ-HCH 0.05 17.78 217 181 219 0.05 78.1 77.9 81.4 72.0 81.3 85.2
三氯杀虫酯
Plifenate
0.1 17.94 175 242 217 0.1 82.5 99.5 105.1 72.6 96.1 108.4
乙烯菌核利
Vinclozol in
0.25 18.08 212 198 285 0.5 92.0 100.9 99.0 86.4 108.7 93.6
甲基毒死蜱
Chlorpyrifos-methyl 0.1 18.12 288 197 286 0.05 82.3 82.0 83.5 87.6 83.6 80.8
四氟苯菊酯
Transfluth rin
0.05 18.13 165 335 163 0.01 96.3 115.9 118.2 103.9 110.9 113.1
敌稗
Propan il
0.1 18.24 163 217 161 0.05 90.0 95.1 101.7 92.5 92.2 100.2
δ-六六六
δ-HCH 0.05 18.28 217 181 219 0.01 79.3 77.9 79.7 87.0 74.6 77.5
七氯
Heptachlor
0.05 18.3 237 337 272 0.01 75.2 73.0 79.7 77.9 76.5 78.4
65
食　用　菌　学　报 第 18 卷
续表
农药名称
Pesticide
标准品浓度
Standard
concentration
(μg/mL)
保留时间
Retention
time
(min)
定性离子
Qualitative
ion
定量离子
Quantitative
ion
检出限
Detection
limit
(μg/kg)
加标量
Amount of added standard
solution(mg/kg)
0.05 0.1 0.25 0.05 0.1 0.25
香菇中回收率
Recovery rate
in L .edodes(%)
双孢蘑菇中回收率
Recovery rate
in A .bisporus (%)
甲基对硫磷
Parathion-methyl 0.05 18.35 233 246 263 0.01 92 .6 98.4 95.0 95.0 98.8 100.5
百菌清
Chlorothalonil
0.1 18.48 264 268 266 0.05 112.5 105.0 107.2 105.6 109.4 111.3
杀螟硫磷
Fenitrothion
0.25 18.77 260 247 277 0.5 76 .1 86.3 88.3 80.2 89.3 89.6
艾氏剂
Aldrin
0.05 18.96 265 293 263 0.01 70 .7 81.1 83.1 73.9 86.9 82.1
异丙甲草胺
Metolachlor
0.1 18.98 162 240 238 0.1 126.2 107.9 74.6 119.1 104.0 65.5
毒死蜱
Chlorpyrifos
0.1 19.01 258 286 314 0.05 87 .1 85.1 87.8 86.2 83.0 78.0
三唑酮
Triadimefon
0.1 19.23 208 210 57 0.1 95 .1 93.2 97.7 101.7 97.6 96.9
对硫磷
Par athion
0.05 19.28 186 235 291 0.01 117.7 113.5 110.2 111.3 119.1 105.8
水胺硫磷
Isocarbophos
0.1 19 .3 289 230 136 0.05 98 .1 94.3 92.4 92.7 103.0 89.8
甲基异柳磷
Isof enphos-methyl 0.1 19.48 231 241 199 0.05 88 .7 89.1 91.3 82.5 82.0 95.2
三氯杀螨醇
Dicofol
0.1 19.62 141 250 139 0.05 104.0 106.5 108.1 106.6 102.8 103.9
二甲戊乐灵
Pendimethalin
0.1 19.92 220 162 252 0.05 154.3 148.1 122.6 159.3 148.3 121.3
氟虫腈
F ipr onil
0.1 20.18 369 351 367 0.1 85 .7 93.1 102.3 76.8 94.4 94.7
P ,P-DDE 0.05 21.78 318 248 246 0.01 93 .0 75.8 95.6 92.2 91.7 90.8
狄氏剂
Dieldr in
0.05 21.96 277 380 263 0.01 85 .4 86.9 89.9 86.5 82.3 87.6
乙氧氟草醚
Oxyf luorfen
0.1 21.98 361 300 252 0.1 95 .9 109.5 113.0 89.3 105.1 118.1
吡氟禾草灵
F luazif op-butyl 0.1 22 .3 383 254 282 0.1 116.4 115.8 112.2 125.7 118.0 118.9
腈菌唑
Myclobutanil
0.1 22 .5 150 288 179 0.1 156.8 135.0 122.6 161.9 135.7 128.1
溴虫腈
Chlorfenapyr
0.1 22.63 247 328 59 0.1 80 .9 80.3 84.9 75.2 86.9 84.9
异狄氏剂
Endrin
0.05 22.76 317 345 263 0.01 111.2 107.9 113.3 116.8 106.9 122.9
P , P-DDD 0.05 23.23 237 165 235 0.01 71 .0 77.0 72.3 77.2 83.6 78.7
66
第 1 期 白　冰 ,等:气相色谱-质谱法检测双孢蘑菇和香菇中的 67 种农药残留
续表
农药名称
Pesticide
标准品浓度
Standard
concentration
(μg/mL)
保留时间
Retention
time
(min)
定性离子
Qualitative
ion
定量离子
Quantitative
ion
检出限
Detection
limit
(μg/kg)
加标量
Amount of added standard
solution(mg/kg)
0.05 0.1 0.25 0.05 0.1 0.25
香菇中回收率
Recovery rate
in L .edodes(%)
双孢蘑菇中回收率
Recovery rate
in A .bisporus (%)
甲苯氟磺胺
Tolylfluanid
0.1 23.45 240 137 238 0.1 98 .8 94.4 96.2 97.5 86.2 88.2
O , P-DDT 0.05 23.87 237 165 235 0.01 86 .2 72.2 77.3 79.4 76.0 70.1
腐霉利
Procymidone
0.1 24.36 285 255 283 0.05 118.0 106.7 109.0 109.2 112.4 104.0
噻嗪酮
Buprofezin
0.1 24.87 172 305 105 0.1 78 .1 108.2 146.9 73.1 110.3 148.7
P ,P-DDT 0.05 25.15 237 165 235 0.01 7 .8 73.8 77.6 79.4 79.7 77.0
吡氟酰草胺
Picolinaf en
0.1 25.74 394 246 266 0.05 115.2 111.7 108.7 115.2 102.2 102.3
联苯菊酯
Bifenazate
0.1 26.38 166 165 181 0.05 101.8 125.1 104.0 94.7 113.7 103.3
溴螨酯
Bromopr opylate
0.25 26.66 183 339 341 0.5 81 .5 105.6 114.6 79.5 109.9 117.8
甲氰菊酯
Fenpropathr in
0.1 26.84 265 208 181 0.1 109.0 107.3 103.4 101.0 106.3 101.1
胺菊酯
Tetramethrin
0.1 26.60/26.94 123 165 164 0.1 87 .5 97.2 92.0 88.4 104.3 93.0
异菌脲
I prodione
0.1 26.98 187 245 314 0.1 80 .4 87.6 88.6 73.1 91.9 90.4
苯醚菊酯
Phenothrin
0.1 27.18/27.35 183 350 123 0.1 100.3 108.8 113.0 105.7 107.0 114.6
三氯杀螨砜
Tetradifon
0.1 27.95 356 159 227 0.05 114.4 121.1 101.8 113.8 122.9 110.0
功夫菊酯
Cyhalothrin
0.05 28.22/28.32 197 141 181 0.01 112.1 127.1 125.4 121.6 122.9 120.5
氟丙菊酯
Acrinathrin
0.25 28 .3 289 208 181 0.4 112.1 122.4 117.9 110.8 115.9 120.4
氰氟草酯
Cyhalofop-butyl 0.05 28.33 229 357 256 0.01 127.0 124.0 121.4 125.5 126.4 121.0
苯氰菊酯
Cyphenothr in
0.1 28.75/29.0 181 167 123 0.1 99 .5 94.5 91.2 90.7 99.8 95.2
氯菊酯
Permethrin
0.1 29.33/29.57 163 184 183 0.1 99 .5 94.4 98.8 90.0 91.7 96.9
哒螨灵
Pyridaben
0.1 29.81 117 364 147 0.1 91 .0 123.1 101.8 89.3 124.7 102.6
氟氯氰菊酯 0.1 30.36/30.57 199 226
Cyfluthr in 0.1 30.67/30.77 206 0.05 99 .8 103.6 105.3 99.5 104.7 98.2
氯氰菊酯 0.1 30.92/31.16 181 209
Cypermethr in 0.1 31.25/31.36 163 0.1 105.9 104.7 100.1 98.5 99.4 90.5
67
食　用　菌　学　报 第 18 卷
续表
农药名称
Pesticide
标准品浓度
Standard
concentration
(μg/mL)
保留时间
Retention
time
(min)
定性离子
Qualitative
ion
定量离子
Quantitative
ion
检出限
Detection
limit
(μg/kg)
加标量
Amount of added standard
solution(mg/kg)
0.05 0.1 0.25 0.05 0.1 0.25
香菇中回收率
Recovery rate
in L .edodes(%)
双孢蘑菇中回收率
Recovery rate
in A .bisporus (%)
醚菊酯
Etofenpr ox
0.1 31.54 376 183 163 0.1 100.8 98.8 111.6 100.3 94.4 119.0
氟硅菊酯
Salif luofen
0.1 31.64 287 258 286 0.1 101.3 104.9 103.7 102.2 102.1 104.8
氟氰戊菊酯
Flucythrinate
0.1 31.46/31.83 157 451 199 0.05 104.2 117.9 103.9 102.4 126.8 106.5
氰戊菊酯
Fenvalerate
0.1 33.57/33.14 225 419 167 0.1 122.4 116.3 109.5 129.9 125.6 99.9
吡唑醚菊酯
Ovraclostrobin
0.1 33.84 325 283 132 0.1 116.8 109.3 111.5 123.2 112.8 117.0
溴氰菊酯
Deltamethr in
0.1 34.92 253 172 181 0.1 105.4 110.0 114.8 103.3 109.4 107.3
嘧菌酯
Azoxystrobin
0.1 35.55 388 372 344 0.05 94 .1 96.4 90.5 91.3 93.1 99.3
3　小结
　　农药残留检测中样品前处理技术是检测过程
中耗时最长最容易出现误差的步骤 ,影响到农药检
测的效率和准确率[ 9] 。食用菌样品中各种物质的
存在对样品的处理提出很高的要求 ,由于香菇和双
孢蘑菇中色素含量很少 ,因此在固相萃取时不采用
国内蔬菜多农残分析中常用的石墨化炭黑-串联
氨基柱来净化 ,我们尝试采用氨基柱净化 ,取得了
较好的净化效果(各项农药的回收率都与使用石墨
化炭黑-串联氨基柱净化的结果接近 ,数据未发
表),简化了样品处理环节 ,同时大大降低了检测成
本。实验中采用基质标准工作液最大限度的减少
了基质的干扰 ,虽然有几个农药的加标回收率不理
想 ,但文中的实验方法可以应用于食用菌中多种农
药残留的快速检测。
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68
第 1 期 白　冰 ,等:气相色谱-质谱法检测双孢蘑菇和香菇中的 67 种农药残留
Determination of 67 Dif ferent Pesticide Residues in
Agaricus bisporus and Lentinus edodes Fruit Bodies by
Gas Chromatography-Mass Spectrometry
BAI Bing , DONG Maofeng , XING Zengtao , ZHAO Xiaoyan＊
(Institute for Agri-food Standards and Testing Technology , Shangha i Academy of Agricultur al Sciences ,
Shanghai 201403 , China)
Abstract:Gas chromatography-mass spectrome try(GC-MS)was used to determine the levels of 67 pesticide
residues in fruit bodies of Agaricus bisporus and Lentinula edodes .F resh mushroom f ruit bodies for GC-MS
analysis we re first homogenized , and a solution containing standard amounts of 67 pesticides at thr ee
dif fer ent concentr ations (0.05 , 0.10 and 0.25 mg/kg)were added.After thorough mixing , the homogena tes
we re extr acted with ace tonitrile and purified using a Cleaner t NH2-SPE column.Pesticides were determined
using the selected ion monitoring mode and identif ied according to the r etention times and the char acter istics
of the qualita tive and quantitative ions.The aver age r ecovery r ates of most pesticides r anged be tween 70%-
120% over the three added pesticide concentr ations , and the detection limits for most pesticides r anged
between 0.01～ 0.5 μg/ kg.
Key words:Gas chromatography-mass spec trometry;pestic ide residue de term ination;edible fungi
[本文编辑] 　朱丽娜
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