全 文 ：｛＾Ｃ＾Ｘ２ ０ １ ５ ， ｖ〇 ｉ ． ３ ２Ｎｏ ． １ ２ｗｗｗ ． ｈｘｙｓｗｇｃ ．ｃｏｍ
Ｃｈｅｍ ｉｓｔ ｒ ｙ＆Ｂ ｉｏｅｎｇ ｆｎｅｅｒ ｉ ｎｇ
ｄｏｉ ： １ ０ ．３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓｓｎ ．１ ６ ７ ２－ ５ ４ ２ ５ ．２０ １ ５ ．１ ２ ．００ ８
响应面法优化箬叶总黄酮的大孔树脂纯化工艺
左丽云 ，赵 淳 ， 乐 薇 ，吉瑞冬 ，孙 雯 ， 吴 士筠
（武 汉工 商学 院 ，湖 北 武汉 ４３ ００６ ５ ）
摘 要 ： 采用 大孔树脂 纯化箬叶总黄酮 。 由静 态吸 附 与解 吸 实验 筛 选 出 最佳树脂 ， 在动 态 吸附 与 解吸 单 因 素 实验的
基础上 ，运 用 响 应 面 法实验 优化箬 叶 总黄 酮 的 大孔 树脂 纯化 工 艺 条件 。 结 果 表明 ： ＨＰ ＩＶ８ ００ 树脂 对箬 叶 总 黄 酮 的 吸 附
容量 最 大 ， 上样液 ｐＨ 值为 ９ ， 上样液浓度为 ２ ．３ｍ ｇ？ｍＬ — １， 上 样流速 为 １ ． ０ｍＬ．ｍ ｉ ｒＴ １ ， 用 ４ＢＶ８０％ 乙 醇 以 ３ＢＶ．
ｈ 速度洗脱 ，解吸率 为 ８４ ． ６２ ％ 。
关键词 ： 箬 叶 ； 总 黄 酮 ； 纯 化 ； 大孔树脂 ； 响 应 面 法
中 图 分类号 ： ＴＱ０２ ８Ｒ２８ ４ ． ２文献标识码 ： Ａ文章编号 ： １ ６ ７２－５ ４２ ５ （ ２０ １ ５ ）１ ２－ ００ ３ ３－０ ５
箬叶是禾本科竹亚科箬竹属植物叶 的 总称 ， 它含仪器有限公司 。
有多种生物活 性成分 ，如黄酮 、活性多糖 、 维生素 、微量１ ． ２ 方法
元素 、挥发油 、芳香成分 、茶多酚等？ ２ ］ 。 箬叶总黄酮有１ ． ２ ． １ 大孔树脂预处理
很好的清除体 内 自 由 基 ［ ３ ］ 、抗 氧化和衰老 、 提高 免疫大孔树脂预处理参照文献 ［ １ １］进行 。
力 、抗菌 、抗病毒［ ４ ］ 等作用 。 从植物体 中提取高纯度的１ ． ２ ．２ 箬叶总黄酮提取液的制备
天然黄酮类物质引 起 了研究 者的 广泛 关注 ， 已 成为 药取一定量的箬 叶粉碎后置于石油醚 中浸泡 ２４ｈ ，
物研发与利用的热点 ［ ５ ］ 。 大孔树脂是一种吸附能力很去色素 。 以 ７０ ％ 乙 醇为提取剂 ， 按料液 比 １：２ ０ （ ｇ ：
强 的吸附剂 ，具有吸附选择 性好 、 热稳定性好 、再生处ｍＬ ，下同 ）于 ６ ０Ｘ：提取 ２ｈ ， 抽滤 ，浓缩 至无沉淀 ， 即
理简 便 等 优 点 ［Ｍ ］ ， 尤 其 适 合 黄 酮 类 化 合 物 的 纯得箬叶总黄酮提取液 。
化 ［ ８％ 。 作者在此采 用大孔树脂纯化 箬叶 总黄酮 ， 并１ ． ２ ． ３ 箬叶总黄酮浓度的 测定
通过响应面法实验优化工艺条件 ，拟为 箬叶 的 进一 步准确称取芦丁标准品 １ ５ｍｇ 溶于 ３０ ％ 乙 醇 中 ，并
开发提供参考 。定容至 １００ｍＬ 。 用 移液 管分别 取芦 丁 标 准 品 溶 液
． ０ ？０ｍＬ 、 ０ ．５ｍＬ 、 １ ．０ｍＬ 、 ２ ．０ｍＬ 、 ３ ．０ｍＬ 、 ４ ．０ｍＬ
１买验 ，于 １０ｍＬ 容量瓶中 ；加人 ５％亚 硝酸钠溶液 ０ ．３ｍＬ ，
１ ． １ 材料 、试剂与仪器 混匀 ， 静置 ６ｍ ｉｎ ；再加人 １０ ％硝 酸铝溶液 ０ ． ３ｍＬ ， 摇
箬叶 ，采集于湖北宜 昌 长阳土家族 自 治县 ，洗净晾匀 ，静置 ６ｍ ｉｎ ； 再 加人 ４％ 氢 氧 化钠 溶 液 ４ｍＬ ， 以
干后储藏 备用 ； 大孔树脂 ＡＢ－８ 、 Ｉ＞ １ ０ １ 、 Ｉ＞３ 〇 ｌ 、 Ｈ ＰＩ＞３０ ％乙醇定容 至刻度 ，摇匀 ，静置 １０ｍ ｉｎ ；测定 ５ １０ｎｍ
６００ 、 ＨＰ Ｉ＞８００ ，华南理工大学振华有限公司 。处吸光度 ，参 比为不加芦丁标准 品 的溶液 。 以吸光度
无水乙醇 、石 油醚 ， 国药集 团化学试剂有 限公司 ；（ Ａ ） 为纵坐标 、芦丁标准品浓度 Ｏ ） 为横坐标绘制标 准
氢氧化钠 ， 天津风船化学试剂科技有限公司 ；硝酸铝 、曲线 。
亚硝酸钠 ， 天津天力 化学试剂有限公司 ； 以上试剂均为准确移取 １ ．００ｍＬ 箬 叶总黄酮提取液于 １ ０ｍＬ
分析纯 。容量瓶中 ，按上述方法加人各种试剂 ， 以不加箬叶总黄
ＢＳＺ－ １６ ０ 型 自 动部分收集器 ，上海 沪 粤明科 学仪酮提取液 的溶液为参 比 ， 测定 ５ １ ０ｎｍ 处吸光度 。 依
器有限公 司 ； ＲＥ５２ＣＳ 型旋转蒸发器 ，上海五久 自 动化标准曲线计算箬叶总黄酮浓度 。
设备有限公司 ； ７ ５ ２ 型紫外可见分光光度计 ，上海光谱１ ． ２ ． ４ 大孔树脂纯化工艺条件 的优化
基金项 目 ： 湖 北 省 自 然科 学基金资 助 项 目 （ ２０ １ ３ Ｃ １ １ １ ） ，武汉 工 商 学 院 大学 生科技 创 新项 目 （ Ｓ２ ０ １４ １ ５ 〉
收稿 日 期 ： ２０ １ ５ －０ ９－ １ ９
作者简介 ： 左 丽云 ， 女 ， 湖 北 广 水人 ， 研究 方 向 ： 天 然 产 物提取 与 分 离 ；通 讯作者 ： 乐薇 ， 副 教授 ， Ｅ－ ｍａ ｉ ｌ ： ｙｕ ｅｗ ｅ ｉ ｌ ｌ＠ Ｉ ２６ ．ｃｏｍ 。
＾３—     ■ 左 丽云等 ： 响应面 法优 化箬叶 总 黄酮的 大孔树脂纯化工艺 ／２ ０ １ ５ｆ￡第 １ ２ 耶
１ ． ２ ． ４ ．Ｉ 大孔树脂静态吸 附与 解吸的泄漏液体积 按式 （ ３ ）计算树脂 的动 态 吸附容量
（ １ ）静态吸附实验 （ ｍｇ ． ｇ — １ ） ：
称取预处理过的 ５ 种树脂各 １ ．００ｇ ， 加人一定 浓动 ：￡；吸 附 — 上样 液浓度 ａＸ 泄漏液体积 （ ３ ）
度 的箬叶总黄酮提取液 ，待 吸 附饱和后 ，测 定剩余溶液 ＾
中 总黄酮浓 度 ， 按式 （ １ ） 计算树脂的 静态 吸 附容量 （ ｍ ｇ
＿
１
｝将上述吸 附饱 和 的 树脂 用 蒸馏水洗 至 流 出 液无色 ．用不同体积分数的 乙 醇以不 同流速洗脱 ， 每 ３ｍＬ
％＿ ｉｍＦ ｉｆ ｆ（ 仞 始浓度 — 剩余浓度 ＞ ｘ样 液体积ｍ 、吸附合 ｍ 树 脂质 讀⑴收集洗脱液 ， 测定总 黄酮浓度 ，按式 （ ４ ） 计算动 态解吸
（ ２ ）静态解吸实验 率 ：
将吸附饱和的 树脂用 蒸馏 水洗 至流 出 液无色 ， 滤动太解吸 率 ＝ 洗脱液浓 ）変 ｘ ？先脱 液体积％
纸吸干树脂表面残 留 液 ， 加 人 ２ ０ｍ Ｌ９ ０％ 乙 醇溶 液 ．
心 １Ｈ 动，＝容量 Ｘ树 脂质量
置于 ２ ５Ｃ 、 ６０ｒ．ｍ ｉ ｒＴ １ 摇床 中 解 吸 ２０ｈ ． 滤 出树脂 ， ｈ４ ．Ｊ 响 以 面 （ 、
－ 买验
％
测 定解 吸液 中总黄ｓ浓度 ，按式 （ ２ ）计算静态解 吸率 ： ｔ－ ，
＊
？ｊ
ｎ
ｆ＾ ＾？
ｎ
ｆ ｔ
ａ ＃：５ ｊ＾ ＾
，Ｈ 許一 解吸液賴 Ｘ 解吸液 体积 ｘ １ 〇〇 。 ， ⑵
解吸单 因 素 买验 的 基 础 上 ’ 木 用＿面法 头验 优化
静心 丨ｆｒｆ ＆ｗ 静态吸附容量 ｘ 树脂 质Ｍ Ｘ ００ ／°。箬叶总黄酮纯化工艺 。
１ ． ２ ． ４ ． ２ 大孔树脂动态 吸附 与解 吸＿？．
⑴动 态麵魏２
将预处理好的 ＨＰ Ｉ＞８０ ０ 树脂装入层 析柱 中 ，柱床２ ． １ 大孔树脂 的筛选
体积为 １ ６ｍＬ ， 将 箬 叶 总 黄 酮提 取 液 以 １ ．０ｍ Ｌ？比较了５ 种树脂 （ ＡＢ－８ 、 Ｉ＞ １ ０ １ 、 Ｉ＞３０ １ 、 ＨＰ Ｉ＞６００ 、
ｍ ｉ ｎ」 的 流速上样 ． 每 ３ｍＬ 收集流 出 液 ． 测定总黄酮Ｈ Ｐ Ｉ＞ ８００ ） 对箬 叶总黄酮 的静 态吸附 容量与静态解吸
浓度 。 找 出 泄漏液总黄酮浓 度 为上 样液 浓 度 的 １ ／ １０率 ．结果见 图 １ 。
２０（ ａ ） １ ２０ ｒ （ｂ ）
Ｐ ｌ ｌ ｌ Ｉ ｌ ｌ ｌ Ｊ＂
Ｊ ｉ ｌ ｌＩ１？ＩＩ１Ｉ１ＡＲ － ８Ｄ － ３ ０ １Ｄ － Ｉ ０ １ＨＰＤ－ ８０ ０Ｈ ＰＤ－ ６０ ０ Ａ Ｂ －８Ｄ － ３ ０ １Ｄ－ Ｉ Ｏ ＩＨ Ｐ Ｄ－ ８０ ０ＨＰ Ｄ－ ６ ０ ０
树 脂 类型树脂类塑
图 １５ 种树脂 的静态 吸 附容量 （ ａ ） 和 静 态解吸率 （ ｂ ）
Ｆ ｉｇ ．１Ｓ ｔ ａ ｔ ｉｃ ａｄ ｓｏ ｒｐ ｔ ｉｏｎ ｃａｐａｃ ｉ ｔ ｙ （ ａ ）ａ ｎｄｓ ｔ ａｔ ｉｃｄｅ ｓｏ ｒｐ ｔ ｉｏｎｒａｔｅ （ ｂ ）ｏｆｆｉ ｖｅｋ ｉｎｄ ｓｏｆ ｒｅｓ ｉ ｎ
从图 １ 可 看 出 ， ＋５ 种树脂都可 以吸附箬 叶 总黄酮 ，
其中 Ｈ ＰＤ－ ８００ 的静态吸 附容量最大 ，静态解吸率也相ｒ
Ｈ
对较高 。 因此 ，选择 ＨＰＤ ８ ００ 树脂 纯化箬叶总黄酮 。 ■＞ ．
２ ． ２ 上样液 ｐＨ 值的确定魏 １ ３／
由 于箬叶总黄 酮在 酸性和 中性条件 下溶解 度较｜ １ １ ＿／
小 ．故仅考察其在 碱性 条件 下的影 响 。 比较 了上样液 ／
ｐＨ 值分别 为 ７ 、 ８ 、 ９ 、 １０ ． １ １ 、 １ ２ 时 的静态吸附容量 ， 结＾
果 见图 ２ 。 ５ ７ ８９ １ ０ Ｉ Ｉ １ ２ １ ３
从 图 ２ 可看 出 ， 上样液 ｐＨ 值 为 ９ 时 的静态吸 附Ｊ 句 山 丄 Ｔ ，？． Ｆ ＰＪ图 ２ 不 同 Ｐ 丨 丨 值下 的 静态吸 附 容量Ｍ最大 。 因此 ，选择上样液 ｐＨ 值为 ９ 。邮 ２Ｓ ， ａｕ ｃ▲ｒ＿ｌ ｃａｐ ａｃｕｙ ｕｎ ｃｌｅ ＾
２ ． ３动态吸 附与解吸条件的 确定 ｄ ｉ ｆｆｅ ｒｅｎ ｔｐＨｖａ ｌｕ ｅｓ
２ ． ３ ．１ 上样液浓度
左丽云等 ： 响 应面法优化箬叶 总 黄酮 的 大孔树脂纯化工艺 ／２〇 〗 Ｓ Ｓ留 １ ２ ｆｌ  ＿
取 ２ＢＶ 、 ＰＨ 值为 ９ 的不 同浓度 的箬叶总黄酮提从 图 ３ 可看 出 ， 随 着上样液 （箬叶 总黄 酮提取液 ）
取液 通过 ＨＰＤ－ ８ ００ 树脂床 ， 测 定 动态吸附容量 ， 结果浓 度 的增 大 ，树脂 动态 吸 附 容量逐 渐增大 。 由 于箬叶
见 图 ３ 。总黄酮提取液浓缩至 ２ ．３ｍｇ．ｍＬ － １ 后再进一步浓缩
有沉淀析 出 ， 故选择上样液浓度 为 ２ ．３ｍｇ？ｍ Ｌ １ 。
＾
Ｕ
［
２ ． ３ ． ２ 上样流速
？
＝，取 ２ＢＶ 、 ｐＨ 值为 ９ 、 浓度 为 ２ ．３ｍｇ ．ｍＬ ． 的箬
｜
１ ０ ＇ 叶总黄酮提取液 以不 同流速通过 ＨＰ Ｉ＞８ ００ 树脂床 ？绘
｜ 制泄漏曲 线 ，测 定动 态吸 附容量 ，结果见图 ＋ 。
｜
６ ＇ 从 图 ４ 可看 出 ，随着上样流速 的加快 ，动态 吸附容
Ｉ 量逐渐减小 。 这是 因 为 ， 流速过快 ， 树脂还没有充分吸
ｔｌｔｉｔｉ２ ． ７附 ，箬叶总黄酮就已 经随流 出 液流 出 。 流速为 〇 ？５ｍ Ｌ
． ｍ ｉｎ
—
１ 和 １ ．０ｍＬ．ｍ ｉ ｎ １ 时的 动态吸附容量差别不
图 ３ 不 同上样液浓度 下 的动态吸 附 容》大 ，考虑到 流速慢耗 时不经济 ？ 所 以 选择上 样 流 速 为
Ｆ ｉｓ ． ３Ｄｙｎ ａｍ ｉｃ ａｄｓｏｒｐ ｔ ｉｏｎｃ ａｐａｃ ｉｔ ｙａｔ ｄｉ ｆｆｅ ｒｅｎ ｔ
．ｆ ｉ ｉ ｆ １ ．０ｍ Ｌ
？ｍ ｉｎ
—
１
 ０
ｃｏｎｃｅｎ ｔ ｒａ ｔ ｉ ｏｎｓｏｒ ｓａｍｐ ｌ ｅｓ ｏ ｌｕ ｔ ｉｏｎ
＾ １ ．６ ｒ （ ａ） ， １ ２ 「 ⑷＂
ｐ—？—０ ． ５ｍ Ｌ ？ｉｎ ｉ ｎ ＾
ｔｓｊ—Ｑ—１ ． ０ｍ Ｌ ？ｍ ｉ ｎ 尸＇ｖ
ｉ ５ｍ Ｌ ． ｍ ｊ ｎ ！
＊
＂ ■＼
卜 、
岌００九 ｉ＾ ｇ２ ５ ． ８８ ０＾Ｌ 〇？０ ３ ．０
上样 体积／ｍ Ｌ 上样流速 ／（ｍ Ｌ ？ｍ ｉ ｎ Ｄ
图 ４ 不 同上样流速 下 的泄 漏 曲 线 （ ａ ） 和 动态 吸 附 容量 （ ｂ ）
Ｆ ｉｇ．４Ｌ ｅａ ｋａｇｅｃｕ ｒｖ ｅｓ （ ａ ）ａｎ ｄｄｙｎ ａｍ ｉ ｃａｄｓ ｏｒｐ ｔ ｉｏｎｃａｐａｃ ｉ ｔ ｙ ）ｂ ）ａｔ ｄ ｉｆｆｅ ｒｅ ｎ ｔＨｏｗｒ ａｔｅ ｓ
２ ． ３ ． ３ 洗脱剂 体积分数脱 曲 线 ，结果 见图 ５ 。
箬叶总黄酮难溶 于水 ， 易溶于 乙醇等弱极性溶剂 ，＾１
故选 择 乙 醇作 为 洗 脱 剂 。 用 不 同 体 积分 数 （ ３〇％ 、 ｅ２ ＇ ４＊
， １〇
－
—＇？—４ＢＶ  ？ｈ
５ ０％ 、 ７ ０％ 、 ９ ０％ 、 １ ００ ％ ） 的乙醇水溶液分别进行洗脱 ， Ｋ３Ｂ Ｖ ．１ ，
洗脱效果见 表 Ｕ １
１ ６ＪＵ ２Ｂ Ｖ ？ｈ
Ｉ
１ ＇ ２ ＇Ｍ一 Ｉ ＢＶ ． ｉ ， ’
表 １不 同 乙 醇体 积分数下 的 解 吸 率＝５ ０ ８ １Ｉ ／
Ｔａ ｂ ．１Ｄｅ ｓｏｒ ｐｔ ｉｏ ｎｒ ａ ｔｅ ｏｆｄ ｉｆｆｅｒｅｎ ｔｖｏ ｌｕｍｅｆｒａ ｃｔ ｉｏ ｎｓｏｆｅ ｔｈａ ｎｏ ｌ备 ０ ． ４－１ １／
乙 醇体积分数  ／％ ３ ０５ ０７ ０９ ０１ ００ 另 ２ ４— ５ １６ ０
＾
６ ９
洗 脱剂用量 ／ＢＶ８６４４４ ／ｍ Ｌ图 ５ 不 同 洗 脱流速下 的洗 脱曲 线
动态解吸韦／． ０ ． ２ ７５ ： ． ５ ＾８ ３ ． ７ ４７ ． ． ｎ ５７ １ ． ＾Ｆｉｇ ． ５Ｅ ． ｕ ｔ ｉｏ ｎｃｕｒ ｖｅ ｓａ ｔｄ ｉ ｆｆｅ ｒｅ ｎｔｅ ｌｕｔ ｉｏ ｎｆ ｌｏｗｒａ ｔｅ ｓ
从表 １ 可 知 ， 随着 乙 醇体积分数 的增大 ， 动态解 吸从图 ５ 可 看出 ， 洗脱流 速对 总黄酮 浓 度 的影 响较
率先升高后 降低 ， 在 乙 醇体积分数为 ？〇％ 时 ， 解吸率大 ，流速越慢 ，洗脱峰拖尾越不明 显 。 考虑到经济性与
达到最 高 。 因此 ，选择洗脱剂 乙醇体积分数为 ７０ ％ 。时效性 ． 选择洗 脱流 速为 ３ＢＶ？ｈ １ ， 此 时洗脱效果
２ ．３ ． ４ 洗脱流速好 ，洗脱剂 用量少 。
用 ７ ０％ 乙 醇水溶液以不 同流速洗脱 ｐＨ 值为 ９ 的２ ．４ 响应 面 法实验优化 箬叶 总黄酮 纯化工 艺
箬叶 总黄酮提取液 ，测定洗脱液中 总黄酮浓 度 ，绘制洗２ ．４ ．１ 响 应面法实验结果与分 析
Ｑ左丽云等 ： 响应面法优 化箬叶总黄酮 的大 孔树脂纯化工艺／ ２０ １ ５ＳＢ１２ 期
在单 因 素实验 的基础上 ，选取洗脱剂体积分数 、洗表 ４方差分析
脱流速 、洗脱剂用量 ３ 个因素 的 ３ 个水平进行响应面Ｔａｂ ． ４ Ｖａｒ ｉａｎｃｅａｎａｌｙｓｉ ｓ
法实验 ，优化箬 叶总黄酮纯化工艺 。 响 应面 法实验 的方差来源 平方和 自 由度 均方差 ５■ 值Ｚ３ 值显著性
因素与水平见表 ２ ，结果与 分析见表 ３ ， 方差分析见表模型８ ３６ ． ３ ２９９ ２ ． ９ ２８ ． ２ ２０ ． ０ ０ ５ ５显著
４ 〇Ａ２ ６２ ． ３ ２１２ ６ ２ ．３２２ ３ ．２ ２０ ． ０ ０ １ ９
Ｂ３ １ ． ８ ４１３ １ ． ８ ４２ ． ８ ２ ０．  １ ３ ７ １表 ２响 应面法实验的 因素 与水平
Ｃ７０ ． ２ ７１７ ０ ． ２ ７６ ． ２ ２０ ． ０ ４ １ ４
Ｔａ ｂ．２Ｆａｃ ｔｏｒｓａｎｄ ｌｅｖｅ ｌｓｏｆ ｒｅｓｐｏｎ ｓｅｓｕｒｆａｃｅ ｍｅｔｈ ｏｄｏ ｌ ｏｇｙ
  ＡＢ１ ７． ３ ５１１ ７ ． ３ ５１ ． ５ ４０． ２ ５ ５ ２
，
Ａ ． 洗脱剂体 积分数 Ｂ ． 洗脱流速Ｃ ． 洗脱剂用量ａ水平编码 ＡＣ ３ ７ ． ５ ８ ．１３ ７ ． ５ ８３ ． ３ ３０ ． １ １ １ ０
％ＢＶ －ｈ － １ＢＶ
—

 ＢＣ ２８ ． ８ ９１２ ８ ． ８ ９２ ． ５ ６０ ． １ ５ ３ ８
－
１５ ０ ２ ３
Ａ ０ ，Ａ ２１ １ ０ ． ２ ５１１ １ ０ ． ２ ５９ ． ７ ６０ ． ０ １ ６ ８Ｕ ／ ０３ ４
１９ ０ ４５ Ｂ
！１ ６ １ ＇ ３ ０ １１ ６Ｌ ３ ° １ ４ ＇ ２ Ｓ° － ° ０ ６ ９
￣
Ｃ２７６ ．  ８４１７ ６ ． ８ ４６ ． ８００ ． ０ ３ ５ ０
表 ３响应面法实验结果与分析 残差７ ９．  ０ ９７１ １ ． ３ ０
Ｔａｂ． ３Ｒｅｓ ｕ ｌｔｓ ａｎｄａｎａ ｌｙｓｉｓ ｏｆｒｅｓｐｏｎｓｅｓｕｒｆａｃｅｍｅ ｔｈｏｄｏｌｏｇ ｙ失拟项７６ ． ５ ２３２ ５ ＿ ５ １３ ９ ． ７ ８０ ． ００２ ０显著
洗脱 剂体 积分数 洗脱流速洗脱 剂用量解 吸率绝对误差２ ． ５ ６４０ ． ６ ４实验 号
；
  

％ ＢＶ ． ｈ １ＢＶ％ 总离差９ １ ５ ． ４ １ １ ６
１ ７０２３７５ ． ５ ７
２９ ０ ３ ３８ ３９ ２２ ．４ ．２ 响应 曲 面和等高线
３９０４４７９ ，２ 〇 解吸率对应于洗脱剂体积分数 、洗脱流速 、洗脱剂
４７０ ３４８ ５ ． 〇 ２用量所形成 的三维空 间 曲 面图 以及在二维平面上的等
５９〇２ ４７ ５ 。 ３高线图 可直观反映洗脱剂体积分数 、洗脱流速 、洗脱剂
６７〇３ ４８ ３
＇
９ ４用量以及它们之间的交互作用对解吸率的影响
７７０ ４ ５７ ７２ １ 利用 Ｄｅ ｓ ｉ ｇｎＥｘｐｅ ｒ ｔ８．０ ？６ ．１ 软件分析 得到 的 响
８ ５ ０３５ ７ １
＇
７ ６应 曲面和等高线如 图 ６ 所示 。
９５ ０ ３ ｓｎ ｎ 由 图 ６ ３ 可 以 看出 ， 洗脱剂体积分数曲 面较 陡 ， 表
１０７ ０４３ ６ ２
＇
６ １明洗脱剂 体积分数对箬叶 总 黄酮的 解吸率影响 显著 ；
ｎ７ ０ ２ ５ 而洗脱流速 曲面平缓 ， 说明 洗脱流速对解吸率影响 不
１ ２７ 〇３４ ８ ２
＇
９ Ｊ太显著 。 从等 高线 图上可 看 出 ，沿洗脱剂体积分数轴
１ ３５ ０ ４ ４ ６ ６
＇
５ ２向 等高线变化密集 ， 而洗脱流速轴 向 等高线稀疏 ，说明
， ，＂ ，， Ｑ 洗脱剂体积分数对解吸率的峰值影响 比洗脱流速大 。１ ４ ／ ０ ３ ４ ８ ４ ． ／ ３
］ ５５ 〇 ？４ ７ 〇６８由 图 ６ｂ 可 以看出 ，洗脱剂体积分数和洗脱剂用量
，
＇
的 曲 面都较陡 ， 表 明洗脱剂体积分数和洗脱剂 用量对
１ ０／ 〇３ ４ ８ ４ ． １ ５
１ ７ ９〇 ３ｃＭ （） ２箬叶 总黄酮 的 解 吸率影响显 著 。 从等 高线 图 上可看
 一 出 ，沿洗脱剂 体积分数轴 向等 高线变化密集 ，而洗脱剂
运用 Ｄｅ ｓ ｉ ｇｎＥｘｐ ｅｒ ｔ８ ．０ ？６ ．１ 软件对表 ３ 数据进用量轴 向等高线相对稀疏 ，说 明洗 脱剂体积分数对解
行统计分析 ， 可得 出 ３ 个 因 素 和解 吸率之间 的 回 归关吸率峰值影响较洗脱剂用量大 ， 等高线呈椭圆形 ， 说明
系式 ： 解吸率 ＝ 一 １ １ ７ ．２ ８２ ３ ７＋２ ．３ ７ ７８ ９Ａ ＋ １ ７ ．１ ０３ ２ ５Ｂ洗脱 剂 体 积 分数 和 洗 脱 剂 用 量 间 的 交 互 作 用 较
＋ ３ ９ ．８０４ ７ ５Ｃ＋ ０ ．１０４ １３ＡＢ— ０ ．１ ５３ ２５ＡＣ＋ ２ ． ６８７ ５ ０ＢＣ强 。
— ０ ．０１ ２７ ９ ３Ａ ２— ６ ．１ ８ ９ ５ ０Ｂ ２ — ４ ．２ ７ ２０ ０Ｃ２ 。由 图 ６ ｃ 可 以看出 ， 洗脱剂 用量 曲面较陡 ，表 明洗
从表 ４ 可知 ，该方程 Ｐ＜〇 ．〇 １ ，表 明响应 回 归模型脱剂用量对箬 叶总黄酮的解吸率影响显著 ， 而洗脱流
显著 ，均方差 记 ＝ 〇 ．９ ２ ９ ２ ， 表明 ９ ２ ．９ ２ ％ 的数据可 以速对解吸率 的 影 响 则不太显著 。 从等高线 图 上可 看
用 此方程来解释 。 所以可 以用此方程来分析和预测 大出 ，沿洗脱剂用量和洗脱流速轴 向 等高线变化都不太
孔树脂纯化箬 叶总黄酮的工艺条件 。密集 ，等高线呈椭圆形 ，说明洗脱剂用量和洗脱流速 间
左丽云等 ： 响应面 法优化箬叶总黄酮 的 大 孔树脂纯化 工艺 ／ ２０ １ ５ 氐第 １ ２ 朋Ｓ３
斛吸 率 ／％解 吸 宰 ／％ 綷吸率 ／％
蒙 １ ： ：＿
２ ． ０ ０ ；， 〇ｕ

 １—ｚ—－乙
５ ０ ．０ ０５ ８ ． ００ ６６ ． ０ ０ ７ ４００８２ ． ００９ ０ ．００５ ０ ． ０ ０＞ ８ ． ０ ０６６ ．０ ０７ ４０ ０８２ ． ００９ ０ ． ００２００２ ．５ ０ＴＯ Ｏ３５ ０４ ． ０ ０
洸脱 剂体积 分数／ ％ 洗脱刺 体 枳分 数／ ％ 洗脱流速八 １＾ ＊ 丨１ ）
丨 丨 ｆ
４ ． ００＂＾—＾＾＾＾＞ ９０ ．０ ０５ ． ００ ５ ． ０ ０
一 丨 ＊
、＇、
－
－＾２００ ｄ＼— ４ ． ５０—－． ＾＾Ｔ＾Ｔ ４ ００
２ ００５ ０ ． ０ ０ ３ ． ００５ ０ ． ００ ３ ．０ ０２ ． ０ ０ ＂
ｉ ；Ｕ ｉｄ ｉＡｄ ；ａ ／ ＜ Ｂ Ｖ － ｈ  ？ ）洗 脱 别 涔 ｆｅ ！ 分 数 ／％－Ｈ Ｖ ． ． ， 《 ．洗 脱糾 Ｗ 投 ／ Ｂ Ｖ ， ： ：＾ｄ ｉ ； ； ！  Ｊ ａｉ ｉ Ｂ Ｖ － ｈ＇ ）
（ ａ ） 洗 脱流速 洗脱 剂 体ｍ 分数 交 Ａ／ ．作用 （ｂ ）洗脱 剂ｆｌＭ￣洗 脱 剂 体枳 分数 交／丄作 用 （ Ｃ ） 洗脱 剂 用 ＿ＳＷ 洗脱 流速交 化 作用
图 ６ 响 应 曲面和等 局 线图
Ｆｉ ｇ． ６Ｒｅ ｓｐ ｏｎ ｓｅｓ ｕｒｆａｃｅａ ｎｄｃｏｎ ｔｏ ｕ ｒｍａｐ ｓ
的交互作用较强 。 ［ １ ］ 陆志科 ， 谢碧霞 ． 近十年 我国竹 叶研 究论 文的 调查 与分析 ［门 ． 竹
２ ． ４ ．３ 回 归方程及验证实验子 研究汇刊 ， ２ ００ ３ ’ ２ ２ （ ２ ） ： ４ ９ －５ ２ ．
对回 归方程取－阶 偏 导数等于 〇 ， 整 理 可得如 了［２ ］ 林产化 工通
ｉｆｌ ． ， ２００ ３ ，３ ７ （ ６ ） ： １ ５ － １ ９ ．
方程 ：［ ３ ］ＢＯＲ ＳＷ ， ｖａｎＢＥＥ ＫＴＡ． Ｓｃ ｒｅ ｅ ｎ ｉ ｎｇｏ ｆｐｌ ａ ｎ ｔ ｅ ｘ ｔ ｒａ ｃ ｔｓ ｆｏ ｒａｎ ｔ ｉ ｏｘ ｉ －
２ ．３ ７ ７ ８ ９＋ ０ ．１ ０ ４ １ ３ Ｂ— ０ ．１ ５ ３２ ５ Ｃ一 ０ ．０ ２ ５ ５ ８ ６Ａ— ０ｄａ ｎ ｔ ａｃ ｔ ｉ ｖｉ ｔ ｙ ： Ａｃ ｏｍｐａ ｒａ ｔｉ ｖｅ ｓｓｔ ｕｄｙ ｏｎｔ ｈ ｒｅｅ ｔｅ ｓｔ ｉｎｇｍｅ ｔｈ ｏｄｓ［ Ｊ ］ ，
１ ７ ． １０ ３ ２ ５＋ ０ ． １ ０４ １ ３ Ａ＋ ２ ． ６ ８ ７ ５０Ｃ— １ ２ ．３ ７ ９ ００Ｂ ＝ ０ Ｐｈ ｙｔｏｃ ｈｅｍ ｉ ｃａ ｌＡ ｎａ ｌｙ ｓ ｉ ｓ ， ２ ００２ ， １３ （１ ） ： ８ － １ ７ ．
３ ９ ．８０ ４ ７ ５—０ ． １ ５３ ２５Ａ＋２ ． ６８７ ５０ Ｂ— ８ ．５ ４４０ ０Ｃ＝ ０［ ４ ］ＷＵ ＪＡ ．ＡＴＴＥ ＬＥＡＳ ．Ｚ ＨＡＮＧＬ ， ｅｔ ａｌ ．Ａ ｎ ｔ ｉ －Ｈ ＩＶａ ｃｔ ｉ ｖｉ ｔ ｙｏｆ
联立 以 上方程组解得Ａ＝８０ ．８３ 、 ５ ＝ ２ ．９ ３ 、 Ｃ：ｍｅｄ ｉ ｃ ｉ ｎａ ｌｈ ｅｒ ｂｓ ： Ｕ ｓａｇｅ ａ ｎ ｄｐｏ ｔ ｅｎ ｔ ｉ ａ ｌ ｄｅｖｅ ｌ ｏｐｍｅ ｎ ｔ［Ｊ ｌ ． Ｔ ｈ ｅＡｍｅｎ－
４ ．０ １ ，对应的实验条件为 ： 洗脱剂体积分数８０ ．８３ ％ 、洗ｃａｎＭ？ １ Ｃｈ ｉｎｅ ｓｅ
邮 士 、由 〇ａ 。 ｌ － 丨 、斗 邮 知 丨 ｍ 旦 ｚ＾曰［ ５ ］ 张纪林 ，杨洁 ． 黄酮类 化合物 生物 活性 的研 究进 展 ［ Ｊ ］ ？ 伊＿ 师范脱流速 ２ ． ９ ３ ＢＶ ． ｈＶ冼脱剂用量 ４ ． ０ １ ＢＶ 。 米臟 学 院学 报 （ 自 然科学版ＵＯＯＷ扎
优纯化条件进行验 ｉ正实验 ， 为便于实验进行 将纯化条Ｍ 于智 峰 ，王敏 ． 大孔 吸附树脂 在黄 銅类 化合 物分 离中 的应 用 ［ Ｊ ］ ．
件修改为 ： 洗 脱剂 体积分 数 ８０％ 、 洗聪 流速 ３ＢＶ？ 中 药材 ． ２Ｕ ０ ６ ． ２９ （ １ ２ ） ： Ｉ ３８ （Ｍ ３ ８４ ．
ｈ
一
１
、洗脱剂用量 ４ＢＶ ， ３ 次平行实验得 到 的吸附容量［ ７ ］ 赵 江琼 ． 易以 木 ，徐査 ． 香草醛 比 色法 测定葱 Ａ 提取物 中总 ＇：１ ＆ 含
为 ｉ ｌ ． ０ ９ｍｇ ．ｇ １  ， 解吸率为 ８ ４ ．６ ２％ ， 与 响应 面法实量 Ｃ Ｉ ］ ． 医药导报 ’謂 ， ２ ６ （ ９ ） ：ｌｍｍ ； ．
验所得解吸率 ８５ ．７ ５ ％相差不大 。Ｍ 大学学报 ， ２ ００５ ， ２ １ （ ２ ） ， １ ３ ４－ １ ３ ６ ．
３［ ９ ］ 屠鹏 飞 ，贾存 勤 ． 张洪全 ． 大孔吸附树 脂在 中 药新药研 究和生 产中＂
的应用 ［ Ｊ ］ ． 世界科学技术 ， ２０Ｍ ， ６ （ ３ ） ： ２２ －２８ ， ８５ ．
ＨＰ Ｉ＞８ ００ 树脂对箬叶总黄酮 的 吸附容量 大 ， 易 于 ［ １ 〇 ］ 李＃３ ？宋 ．筐 ． 竹叶蛋白 的分离提取 及其副 产物 的 利 用 ［ Ｊ ］ ． 食 品 与
解吸 ，适合于对箬 叶总黄酮 的分离纯化 。 响应 面 法实
验得到的 最优纯 化工艺条 件为 ： 吸 附过程 ： 常 温 ， ｐ Ｈ ＾１ １  ］ 丨雜 ’雜 良 ， 何械 ． 人孔 吸附 树脂分 尚 纯 化 ｗ ｉ 人 掌 中 总 Ｋ
．
．、 、 ＿酮的 研究 ［ Ｊ］ ． 离子交换与 吸附 ， ２ ０ １ ０ ． ２ ６ （ １ ） ： ４ ７－ ５ ２ ．值 ９ ， 流速 １ ．０ｍＬ．ｍ ｉｎ ’ 上样 液浓 度 ２ ．３ｍｇ．［ １ ２］ 周 桃英 ． 罗登宏 ？糊 庆 ， 等 ． ＡＢ －８ 大孔 树 脂纯化 荷 叶总 黄酮的
ｍ Ｌ— １ ：解吸过程 ： ４ ．ＢＶ 的 ８０ ％ 乙醇以 ３ＢＶ．ｈ １ 流速 工艺研究Ｄ — 中 Ｉ 食品添加剂 ＿ ２ 〇〇９ ， （ ５ ） ： １ １ ３－ １ １ ９ ．
进行洗脱 ＝ 在上述条件下 ＨＰｒ＞ ８００ 树脂对箬 叶总 黄 ［ １ ３］ 杨文 雄 ， 高彦祥 ． 响应 面法及其在食 品 工 业中 的 应用 ［ Ｊ ］ ． 中 国ｆｒ
酮 的 吸附容量为 １ １ ．０９ｍｇ．ｇ — １ ？解 吸率 为 ８４ ．６ ２ ％ 。 品添加剂 ． ２〇〇５ ， （ ２ ） ： ６ ８ －７ ］ ．
表 明 ，采用 ＨＰＤ －８０ ０ 树脂对箬 叶 总黄酮 的 纯 化效果 ［ ｉ ‘ｉ ］ 徐 响 ？ 孙Ｗ萍 ． 董捷 ． 响应 面法优 化蜂 胶超 临 界 ： 氧化 碳萃 取Ｘ
＾＾＾＾＾艺 的研 究 ［Ｊ ］ ． 食 品科学 ， ２０ ０９ ， ３ ０ （ ８ ） ： ８Ｓ －８９ ．好 ，可以考虑应用到 工业生产 中 。 ａ、
参考文献 ：
（ Ｔ ＇＾ ４ ６ ＾ ＞
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研 究［ Ｊ ］ ． 化学 工程 ， ２ ０ １ ２ ， ４ ０ （ １ １ ） ： １ － ３ ． （ Ｃａｍｂ ｒ ｉ ｄｇ ｅ ， Ｅｎｇ ｌ ａ ｎｄ） ， ２ ００５ ， ３ ６ （ ５ ０ ）： ３ ５ ６ ２－ ３ ５ ６ ４ ．
「 ６ ］ 郭燕燕 ，尹 卫平 ，刘 普 ，等 ． 离 子 液体提 取 分离鹿 说 中 异 黄酮化 合［ １ ０ ］ 梁升 ，纪 欢欢 ， 李露 ？ 等 ． 氨基酸离 子液 体对壳 聚 搪溶解性能 的影
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［ ７ ］Ｗ ＥＬＬＳＡＳ ． ＣＯＯＭＢＥＶＴ ．Ｏｎｔ ｈ ｅｆ ｒｅｓ ｈｗａ ｔｅ ｒｅ ｃｏｔ ｏｘ ｉ ｃｉ ｔ ｙ ａ ｎｄ［ １ １ ］ 赵 明泽 ， 赵荣祥 ？李秀萍 ，等 ． 氨基酸离子液体氧化 萃取脱硫工艺
ｂ ｉｏｄｅｇｒ ａｄａ ｔ ｉｏｎｐｒｏｐｅ ｒｔ ｉｅ ｓｏｆｓｏｍ ｅｃｏｍｍｏｎ ｉｎｏｉｃ ｌ ｉｑｕ ｉｄｓ ［ Ｊ ］ ．Ｏ ｒ研究 ［Ｊ ］ ． 石化技术 与应用 ， ２０ １ ３ ， ３ １ （ ５ ） ： ３ ８ ４ － ３ ８ ７ ．
ｇ ａｎ ｉ ｃＰ ｒｏｃ ｅｓ ｓＲ ｅｓｅ ａ ｒｃｈＤｅ ｖｅ ｌｏ ｐｍｅｎ ｔ ， ２ ００ ６ ？ １ ０ （ ４ ）： ７ ９ ４－ ７ ９ ８ ．
Ｒｅｓ ｅａｒｃｈｏｎＥｘｔ ｒａｃ ｔ ｉ ｏｎｏｆＰ ｉｇｍｅｎｔｆｒｏｍＰｕｒｐｌｅＳｗｅｅ ｔＰｏ ｔａｔｏｂｙ
Ｌ －Ｌｙ ｓｉｎｅＰ ｈｏｓｐｈａ ｔｅＡｑ ｕｅｏｕｓＳｏ ｌ ｕ ｔｉｏｎ
ＬＩＵＷｅ ｉ ， ＷＡＮＧＨ ｕａ－ ｐ ｉ ｎｇ ， Ｌ ＩＸ ｉ ａ ， ＤＯＮＧＸｉ ｎ－ ｒｏｎｇ
（．Ｃｏ ｌ ｌｅｇｅｏｆＳ ｃ ｉｅｎｃｅ． Ｈ ｕｎａ ｎＡｇ ｒ ｉｃｕ ｌ ｔ ｕｒａ ｌＵｎ ｉｖｅ ｒｓ ｉ ｔ ｙ＾ Ｃｈａ ｎ ｇｓｈａ４ １ ０ １ ２ ８ ，Ｃ／ ｚ ｚ ／？ａ ）
Ａｂｓ ｔ ｒａｃｔ ．－ Ｔｗ ｅｎｔ ｙｋ ｉ ｎｄ ｓｏｆａｍ ｉ ｎｏａｃ ｉｄ ｉｏ ｎ ｉｃ ｌ ｉ ｑ ｕ ｉ ｄｓｗ ｅ ｒｅｓ ｙｎ ｔ ｈ ｅ ｓ ｉ ｚｅｄ ．Ａ ｎｄＬ－ ｌ ｙ ｓ ｉｎｅｐｈｏ ｓｐ ｈ ａ ｔｅ ｉｏ ｎｉ ｃｌ ｉｑ ｕ ｉ ｄ
ｗ ａ ｓｓ ｃｒｅ ｅｎ ｅｄａ ｎｄｕ ｓｅｄｔ ｏｅｘ ｔｒａ ｃｔｐ ｉ ｇｍ ｅｎｔｆ ｒｏｍｐ ｕ ｒｐ ｌ ｅｓｗ ｅ ｅｔｐｏｔ ａ ｔｏ ．Ｔｈ ｅｅ ｆ ｆｅ ｃｔｏ ｆｃｏ ｎ ｃｅｎ ｔ ｒａ ｔ ｉ ｏｎｏ ｆＬ － ｌ ｙｓ ｉｎｅ
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ｅｘ ｐｅ ｒ ｉｍ ｅｎ ｔａｎｄｏ ｒ ｔ ｈｏｇ ｏｎ ａ ｌｅｘｐｅ ｒ ｉｍ ｅ ｎｔ ．Ｒｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ｉ ｎｄ ｉｃ ａ ｔ ｅｄｔ ｈａ ｔ ， ｔｈ ｅｅｘ ｔｒ ａ ｃｔ ｉ ｏｎｅ ｆ ｆｅ ｃ ｔｗａｓ ｔｈ ｅｂｅ ｓ ｔｗ ｈ ｅ ｎｃｏｎ ｃ ｅｎ？
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（上接 第 ３ ７ 页 ）
［ １ ５ ］ＬＩＵＧＭ ， ＸＵＸ ， Ｈ Ａ （ ）ＱＦ ． ｅ ｔａｌ ．Ｏｐｔ ｉｍ ｉ ｚ ａ ｔ ｉ ｏ ｎｏｆ ｓｕ ｐ ｅｒｃｒ ｉ ｔ ｉ ｃａ ｌＦｏｏｄＳ ｃｉ ｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃ ｈｎｏ ｌｏｇｙ ， ２ ００８ ， ４ １ （ ７ ） ： １ ２ ２ ３ － １ ２ ３ １ ．
ｃ ａ ｒｂｏ ｎｄ ｉ ｏｘ ｉｄｅｅ ｘ ｔ ｒａ ｃｔ ｉｏｎｏ ｆｓｅ ａｂｕ ｃｋｔ ｈｏｒｎ （Ｈ ｉｐｐ ｏｐｈａ ｅ ｔｈａ ｍ［ １ ６ ］陈海华 ，鲁军 ． 响应 曲 面法 优化狭鳕■色皮明 胶 的 微波辅 助提取工
ｎｏ ｉｄｅ ｓＬ ．）ｏ ｉ ｌｕ ｓ ｉ ｎｇｒ ｅ ｓｐｏ ｎｓｅ ｓ ｕ ｒ ｆａ ｃｅ ｍ ｅ ｔ ｈｏｄ ｏ ｌｏｇ ｙ ［ Ｊ ３ ．ＬＷＴ 艺 ［ Ｊ ］ ？ 食品与发酵工业 ， ２００９ ， ３ ５ （ ８ ） ：１ ６ ８－ １ ７ ４ ．
Ｏｐ ｔ ｉｍ ｉ ｚａ ｔ ｉｏｎｏｎＰｕｒ ｉ ｆｉ ｃａ ｔ ｉｏｎＰｒｏｃｅｓｓｏｆＴｏｔａ ｌＦ ｌａｖｏｎｏ ｉｄｓｆｒｏｍＩｎｄｏｃａ ｌ ａｍｕｓ
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