全 文 ：第二军医大学学报　2009年 10月第 30卷第 10期　 http:// www.a jsmmu.cn
Academic Jou rnal of S econd Mili tary Medical Universi ty , Oct.2009 , Vol.30 , No.10 ·1199　 ·
DOI:10.3724/SP.J.1008.2009.01199 ·研究快报·
覆盆子二氯甲烷萃取物中的化学成分
游孟涛 ,李亚葵 ,郭美丽＊
第二军医大学药学院生药学教研室 ,上海 200433
[ 摘要] 　目的:研究覆盆子二氯甲烷萃取物的化学成分。方法:利用硅胶柱色谱 、Sephadex LH-20柱色谱及重结晶等技术提
取分离覆盆子化学成分 ,用 EI-MS 、ES-MS 、1HNM R、13CNMR、HM QC 及 HMBC 等光谱方法鉴定化合物结构。结果:得到 10
种化合物 ,鉴定其中 9 种化合物 , 分别为二十六烷醇(Ⅰ)、β-谷甾醇(Ⅱ)、4-羟基-3-甲氧基苯甲醛(Ⅲ)、对羟基苯甲醛(Ⅳ)、齐墩
果酸(Ⅴ)、stigmast-5-en-3-o l , olea te(Ⅵ)、1H-2-indenone , 2 , 4 , 5 , 6 , 7 , 7a-hexahydro-3-(1-me thy lethy l)-7a-methyl(Ⅷ)、4-羟基-3-
甲氧基苯甲酸(Ⅸ)、liballinol(Ⅹ)。结论:化合物Ⅰ 、Ⅲ 、Ⅳ、Ⅵ 、Ⅷ 、Ⅹ 均首次从该植物中分离得到。
[ 关键词] 　覆盆子;化学成分;酚;木质素
[ 中图分类号] 　R 931.71　　　[文献标志码] 　A　　　[ 文章编号] 　0258-879X(2009)10-1199-04
Study on chemical constituents of methylene chloride extract of Rubus chingii
YOU Meng-tao , L I Ya-kui , GUO Mei-li ＊
Depa rtment o f Pharmacognosy , School of Pharmacy , Second M ilitary Medica l Unive rsity , Shanghai 200433 , China
[收稿日期] 　2009-05-12　　　　[ 接受日期] 　2009-08-26
[作者简介] 　游孟涛 ,硕士生.E-mai l:manyou82@163.com
＊通讯作者(C orresp onding author).T el:021-81871302 , E-mail:mlguo@smm u.edu.cn
[ ABSTRACT] 　Objective:To study the chemical constituents of the me thy lene chlo ride of Rubus chingii H u..Methods:
Chromatog raphy on silica gel co lumn , Sephadex LH-20 co lumn , and recry stallization technique w ere used to iso late and purify the
compounds.Spectr oscopy methods including EI-MS , ES-M S , 1H-NM R , 13CNMR , HM QC , and HMBC w ere used to elucidate the
structur es o f compounds.Results:Ten compounds w ere obtained and 9 compounds w ere identified as:hexaco sanol(Ⅰ), β-
sitostero l(Ⅱ), 4-hydro-3-methlbenzal acid(Ⅲ), 4-hydrobenzal dehyde(Ⅳ), oleano lic acid(Ⅴ), stigmast-5-en-3-o l , olea te(Ⅵ),
1H-2-indenone , 2 , 4 , 5 , 6 , 7 , 7a-hexahydro-3-(1-me thy lethyl)-7a-methy l(Ⅷ), 4-hydro xy-3-methoxybenzoic acide(Ⅸ ), and
liballino l(Ⅹ).Conclusion:Compounds Ⅰ , Ⅲ , Ⅳ , Ⅵ , Ⅷ , and Ⅹ have been obtained f rom R ubus chingii for the first time.
[ KEY WORDS] 　R ubus chingii ;chemical constituents;phenol;lig nan
[ Acad J Sec M il Med Univ , 2009 , 30(10):1199-1202]
　　华东覆盆子(Rubus chingi i Hu.)为蔷薇科悬钩
子属植物 ,又名掌叶覆盆子 ,其近成熟果实入药称为
覆盆子 ,收载于《中国药典》2005 年版一部 ,具有益
肾 、固精 、缩尿之功效 ,用于肾虚遗尿 、小便频数 、阳
萎早泄 、遗精 、滑精等[ 1] 。现代药理学研究显示 ,覆
盆子具有温肾助阳[ 2] 、免疫调节[ 3] 、抗炎 、抗氧化[ 4]
和抗衰老[ 5] 等活性。国内外学者对其化学成分进行
一些研究 ,从中分离出 β-谷甾醇 、鞣花酸 、tiliro side 、
fupenzic acid 、乌苏烷型三萜 、齐墩果烷型三萜 、黄酮
类等化合物[ 6-9] 。但是 ,并未找到覆盆子温肾助阳药
效的物质基础。因此 ,继续研究覆盆子的化学成分 ,
并在此基础上寻找具有温肾助阳活性成分 ,对补肾
药物的开发具有重要意义 。本研究对覆盆子的二氯
甲烷萃取物的化学成分进行了较系统地研究 ,从中
得到 10种单体化合物 ,并鉴定其中 9种化合物 。
1　材料和方法
1.1　仪器和材料　柱层析硅胶 H(60 型)为青岛海
洋化工集团公司产品 , T LC 板(HSGF254)为烟台市
化工研究院产品;Sephadex LH-20为 Pharmacia 公
司出品;显色剂 ,10%硫酸乙醇液 ,碘蒸汽 ,ZF-1型三
用紫外分析仪。所用试剂均为分析纯 , 国药试剂。
ZMD83-1型电热熔点测定仪(未校正), 岛津 UV-
265紫外分光光度仪 , Bruker-Spect rospin AC-400P
型核磁共振仪及 Bruker AMX-500 型核磁共振仪 ,
Varian MA T-212型质谱仪 。
　　覆盆子采自浙江省杭州市 ,经第二军医大学药
·1200　 · 第二军医大学学报　2009年 10月 ,第 30卷
学院生药学教研室郭美丽教授鉴定为蔷薇科植物华
东覆盆子未成熟干燥果实 。
1.2　化学成分的提取分离　覆盆子干燥果实 50
kg ,75%乙醇渗漉提取 6 次 ,合并渗漉液 ,减压浓缩
至无醇味 ,得到的混悬液依次用石油醚 、二氯甲烷萃
取 ,合并二氯甲烷萃取液 ,减压浓缩 ,得浸膏 200 g 。
将二氯甲烷浸膏进行硅胶柱层析分离 ,石油醚乙酸
乙酯梯度洗脱 ,薄层板跟踪合并流分 ,共分得 11个
组分 ,组分 2 、3 、4反复重结晶分别得到化合物 Ⅰ(10
mg)、Ⅱ(150 mg)、Ⅲ(20 mg);组分 5过 LH-20 ,氯
仿-甲醇(1∶1)洗脱 ,得化合物Ⅳ(35 mg);组分 6反
复硅胶分离 ,得化合物Ⅴ(30 mg);组分 7反复硅胶
分离 ,洗脱组分用 LH-20纯化 ,氯仿-甲醇(1∶1)洗
脱 ,得化合物Ⅵ(450 mg)、Ⅶ (68 mg);组分 8反复硅
胶纯化得化合物 Ⅷ(50 mg);组分 10 反复 LH-20分
离 ,分别用氯仿-甲醇(1∶1)和甲醇洗脱 ,得化合物
Ⅸ(90 mg)、Ⅹ(10 mg)。化合物结构见图 1。
图 1　化合物Ⅰ ～ Ⅵ 、Ⅷ ～ Ⅹ 结构图
Fig 1 Chemical structures of compounds Ⅰ-Ⅵ , Ⅷ-Ⅹ
2　结　果
2.1　化合物Ⅰ的结构鉴定　白色晶体 ,m.p.:73 ～
75℃,EI-MS m/z(%):43(100), 57(98),71(60),85
(42),55(87), 69(80), 83(86), 97(79), 111(50);
1HNMR(500 MHz ,CDCl3):3.64(2H , t , J =7 Hz ,
H-1),0.88(3H , t , J =7 Hz , H-26);13 CNMR(125
MHz , CDCl3)δ:63.1(C-1), 14.1(C-2), 32.8(C-3),
31.9(C-4)。与文献[ 10] 报道二十六烷醇数据一致 ,鉴
定该化合物为二十六烷醇。
2.2　化合物 Ⅱ的结构鉴定　白色针状结晶 ,m .p.:
140 ～ 142℃, EI-MS 提示相对分子质量为 414 ,
1HNMR(500 MHz , CDCl3)谱具有甾体化合物的普
遍特征 ,δ:0.7 ～ 2.4为甾体骨架上众多的亚甲基和
次甲基信号相互重叠产生。δ:0.66和 1.01的 2 个
甲基峰是 C18和 C19上质子信号 ,δ:5.33为 H-6典型
的烯氢信号。3.53(1H , m , H-3)为连氧叔碳氢信
号。13 CNMR(125 MHz , CDCl3)δ:140.7(C-5), 121.7
(C-6),71.8(C-3), 56.7(C-14), 55.8(C-17), 50.0
(C-9),45.8(C-4), 42.3(C-13), 39.7(C-12), 37.2
(C-1),36.5(C-10), 36.1(C-20), 33.9(C-7), 31.9
(C-8),31.8(C-22), 31.6(C-2), 29.7(C-24), 29.1
(C-25),28.2(C-16),26.0(C-28), 24.3(C-15), 23.0
(C-27),21.1(C-11),19.8(C-26), 19.4(C-19), 19.0
(C-27),18.8(C-21), 12.0(C-29),11.8(C-18), Rf值
与 β-谷甾醇标准品一致 ,混合后熔点不下降 ,确定为
β-谷甾醇 。
2.3　化合物 Ⅲ的结构鉴定　白色针状结晶 ,m .p.:
81 ～ 83℃。质谱显示相对分子质量为 152。EI-MS
m/z (%):151 [ M-H ] + (100), 303 [ 2M-H ] +;
1HNMR(500 MHz , CDCl3):9.83(1H , s , CHO),
7.04(1H , d , H-6), 7.42(2H , t , H-2 and H-5), 3.97
(3H , s , OCH 3);13CNMR(125 MHz , CDCl3)δ:
190.9(CHO), 151.7(C-3), 147.2(C-4), 129.9(C-
1), 127.5(C-6), 114.4(C-5), 108.8(C-2), 56.1
(OCH 3)。经图谱综合解析 ,鉴定该化合物为 4-羟
基-3-甲氧基苯甲醛。
2.4　化合物Ⅳ的结构鉴定　白色针状结晶 ,m .p.:
115 ～ 118℃。EI-MS m/z(%):121[ M-H] +(100),
93(50), 65(63), 39(80);1HNMR(500 MHz ,
CDCl3):9.80(1H , s , CHO), 7.76(2H , d , H-2 , H-
6), 6.93(2H , d , H-3 , H-5);13CNMR(125 MHz ,
CDCl3)δ:191.4(CHO), 163.1(C-4), 132.4(C-2 , C-
6), 128.8(C-1),115.8(C-3 ,C-5)。与文献[ 10]报道一
致 ,鉴定该化合物为对羟基苯甲醛 。
2.5 　化合物 Ⅴ的结构鉴定 　白色粉末 , m.p.:
140 ～ 142℃。EI-MS m/z(%):248(100), 133(48),
203(50), 207(46);1HNMR(500 MHz , py ridine-
d5):5.5(1H , t , H-12), 3.5(1H , t , H-3α), 2.7(1H ,
d , H-18), 2.4(1H , m , H-11), 2.2(1H , m , H-11);
13
CNMR(125 MHz , py ridine-d5)δ:180.1(C-28),
139.4(C-13), 125.8(C-12), 78.3(C-3), 56.0(C-5),
53.7(C-9),48.2(C-17), 42.6(C-19), 40.1(C-14),
39.6(C-18), 39.6(C-8), 39.5(C-4), 39.2(C-1),
第 10期.游孟涛 ,等.覆盆子二氯甲烷萃取物中的化学成分 ·1201　 ·
37.6(C-10), 37.4(C-21), 33.7(C-7), 31.2(C-22),
30.1(C-29),28.9(C-20), 28.8(C-23), 28.2(C-15),
25.0(C-2),24.0(C-27), 23.8(C-11), 21.5(C-16),
18.9(C-30),17.7(C-6), 17.6 (C-26),16.7(C-24),
15.8(C-25)。与文献[ 11] 报道一致 ,鉴定该化合物为
齐墩果酸 。
2.6 　化合物 Ⅵ 的结构鉴定 　白色粉末 , m.p.:
156 ～ 159℃, EI-MS m/z(%):397(82), 396(100),
381(19), 288(12), 275(13), 255(18), 213(15), 161
(22),147(28), 133(19), 107(21), 95(29), 81(29),
69(28),44(42);1HNMR(500 MHz ,CDCl3)谱具有
β-谷甾醇的普遍特征 ,δ:0.7 ～ 2.4为甾体骨架上众
多的亚甲基和次甲基信号相互重叠产生 。δ:0.66和
1.01的两个甲基峰是 C18和 C19上质子信号 ,δ:5.33
为 6-H 典型的烯氢信号 , 3.99(1H , m , H-3), 5.46
(2H ,m ,H-9 ,H-10 )。13C-NMR(125 MHz ,CDC l3)
δ:39.4(C-1),29.4(C-2), 79.7(C-3),38.5(C-4),β-
谷甾醇上其余碳信号与化合物 Ⅱβ-谷甾醇一致 ,
175.1(C-1′), 130.6(C-9′,C-10′), 35.4(C-2′),34.7
(C-16′), 33.8(C-7′, C-12′), 33.5(C-6′, C-13′, C-
14′),33.1(C-5′),33.0(C-15′), 29.5(C-4′),28.2(C-
8′),26.1(C-3′), 23.9(C-17′), 14.1(C-18′)与文
献[ 12] 报道一致 ,鉴定该化合物为 Stigmast-5-en-3-
ol , o leate。
2.7　化合物Ⅷ的结构鉴定　黄色针状结晶 , m.p.:
171 ～ 173℃,质谱显示相对分子质量为 192 ,分子式
为 C13H 20O ,EI-MS m/z(%):192[ M] + ,(100), 177
(70),164(40), 149(58), 121(33), 79(32), 69(55),
51(34)。1HNMR(500 MHz , CD3OD)δ:1.11(6H ,
d ,2×CH 3), 1.28(3H , s ,7a-CH3), 1.18(1H ,m , H-
7), 1.27(1H , m , H-6), 1.41(2H , m , H-5 , H-6),
1.45(1H , m , H-6), 1.50(1H , m , H-7), 1.95(1H ,
dd , H-4), 2.07(1H , dd , H-4), 2.57(1H , m , CH);
1 3CNMR(125 MHz , CD3OD):202.7(C-2), 162.9
(C-8), 138.9(C-3), 55.5(C-1), 48.4(C-7a), 38.1
(C-7),32.1(C-4),29.7(C-5), 23.5(C-6), 25.9(7a-
CH3),26.1(3-CH),22.7(2×3-CH 3)。与文献[ 13] 报
道一致 ,鉴定该化合物为 1H-2-indenone , 2 , 4 , 5 , 6 ,
7 ,7a-hexahydro-3-(1-methy lethy l)-7a-methy l。
2.8　化合物Ⅸ的结构鉴定　白色针状结晶 , m.p.:
210 ～ 213℃, EI-MS m/z(%):168[ M] +(100), 153
(73),97(38);1HNMR(500 MHz , CD3OD)δ:7.53
(2H ,m ,H-2 ,H-6),6.82(1H , d , J =8.7 Hz , H-5),
3.88(3H , s , H-8);13CNMR(125 MHz , CD3 OD):
170.3(C-7),152.9(C-3), 148.9(C-4), 125.5(C-6),
123.4(C-1), 116.1(C-5), 114.1(C-2), 56.7(C-8)。
与文献[ 14] 报道一致 ,鉴定该化合物为 4-羟基-3甲氧
基苯甲酸 。
2.9 　化合物 Ⅹ 的结构鉴定 　白色结晶 , m.p.:
124 ～ 126℃, EI-MS m/z(%):297[ M-H ] +(100),
298[ M] +(13);1HNMR(500 MHz ,py ridine-d5)δ:
7.19(4H , d , J =10 Hz , H-2 , 6 , 2′,6′), 6.75(4H , d ,
J =10 Hz ,H-3 ,5 , 3′,5′), 4.68(2H , d , J =5 Hz , H-
7 ,7′), 4.19(2H ,dd , J =10 Hz , J =10 Hz , H-9 ,9′),
3.8(2H , dd , J =10 Hz , J =5 Hz , H-9 , 9′), 3.11
(2H , m , H-8 , 8′);13CNMR(125 MHz , py ridine-
d5):158.5(C-4 , 4′), 133.3(C-1 , 1′), 129.0(C-2 , 6 ,
2′,6′),116.5(C-3 ,5 ,3′,5′),87.7(C-7 , 7′),72.8(C-
9 ,9′), 55.7(C-8 , 8′)。与文献[ 15] 报道一致 ,鉴定该
化合物为 Liballino l。
3　讨　论
　　覆盆子是我国重要的悬钩子属植物 ,分布于浙
江 、江苏 、安徽 、江西 、福建 、广西等地 。覆盆子药食
两用 ,含有多种有效成分 ,具有多种药理作用 ,在保
健和临床应用广泛 ,尤其是在温肾助阳方面应用很
广 ,但其有效物质及作用机制尚未明确 。因此 ,对覆
盆子进行深入系统的研究 ,有助于阐明其药理活性
基础 。本研究对覆盆子果实的 75%乙醇提取物的二
氯甲烷萃取部位进行分离 ,得到 10种化合物 ,鉴定
了其中 9种化合物 ,化合物 Ⅰ 、Ⅲ 、Ⅳ、Ⅵ 、Ⅷ 、Ⅹ均首
次从该植物中分离得到 ,为覆盆子的深入研究积累
了新资料 。
　　研究[ 16] 显示 ,长链脂肪醇具有增强免疫活性 ,而
且 ,二十六烷醇具有很好的抗胆固醇和神经保护活
性。长链脂肪醇在一定程度上阐明了覆盆子的免疫
调节 、血管活性基础 。呋喃骈呋喃木质素显示具有
很好的抗肿瘤活性[ 17] 。酚类成分具有很好的抗氧化
活性 ,酚类和酚苷类化合物有植物雌激素样活性[ 18] ,
可能与覆盆子的温肾助阳活性有关。本研究分离得
到的 3种苯取代物皆带有酚羟基 。关于这些化合物
的温肾助阳的活性与机制 ,我们正在进一步研究
之中 。
[参 考 文 献]
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·1202　 · 第二军医大学学报　2009年 10月 ,第 30卷
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[ 本文编辑] 　尹　茶
第二军医大学历年获国家级科技成果奖励项目一览(Ⅷ)
2000 年 3 项
　　国家科技进步奖二等奖 3 项
　　危重心脏瓣膜病外科治疗的基础与临床研究
　　(张宝仁　梅　举　徐志云　于伟勇　王志农　邹良建　朱家麟　韩　林　郎希龙　王连才)
　　真菌病的基础与临床系列研究
　　(廖万清　吴绍熙　郭宁如　温　海　吴建华　姚志荣　顾菊林　陈江汉　刘维达　吕桂霞)
　　颅脑战创伤发病机理与临床救治研究
　　(江基尧　卢亦成　朱　诚　于明琨　雷　鹏　钱锁开　丁学华　张光霁　梁玉敏)
2002 年 1 项
　　国家科技进步奖二等奖 1 项
　　军队卫生资源利用评价与合理配置研究
　　(张鹭鹭　扈长茂　张罗漫　陈盛新　郭　强　任真年　毛常学　李捷伟　许　苹)
2003 年 2 项
　　国家自然科学奖二等奖 1 项
　　树突状细胞的抗原提呈 、功能调控及其来源的新基因的功能研究　(曹雪涛　章卫平　于益芝　万　涛　李　楠)
　　国家科技进步奖二等奖 1 项
　　镧系元素时间分辨荧光分析技术及仪器的配套研究
　　(韩　玲　吴寇英　李振甲　陈　杞　赵启仁　戴长生　李美佳　唐晓燕　陈泮藻　游冬青)
2004 年 1 项
　　国家科技进步奖二等奖 1 项
　　四种经血感染病毒的变异 、筛查与特异防治基础研究
　　(戚中田　曹广文　沈倍奋　缪晓辉　任　浩　柯　屾　潘　卫　赵　平　赵兰娟)