全 文 ：·科技简报·
［基金项目］黑龙江省卫生厅课题资助项目（编号：２００９－０８８）　［作者简介］陈岩，女，硕士，主管药师，电话：０４５１－８５５５５３７０，Ｅ－ｍａｉｌ：ｓｔｏｎｅｍｏｎ－
ｋｅｙｃｎ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
中药凤尾草不同部位的砷形态分析
陈岩１，王智勇２，杨丽杰１，黄智坤１　（１．哈尔滨医科大
学第一附属医院药学部，黑龙江 哈尔滨１５０００１；２．哈尔滨医
科大学第二附属医院静脉药物配制中心，黑龙江 哈尔滨
１５００８６）
［摘要］　目的：建立凤尾草中砷化合物的分析方法。方法：
用高效液相－原子荧光光谱联用方法，以ＫＨ２ＰＯ４／Ｎａ２ＨＰＯ４
的缓冲溶液为流动相（ｐＨ５．９０），采用等度洗脱方式，用
Ｈａｍｉｌｔｏｎ　ＰＲＰ－Ｘ１００阴离子交换色谱柱（２５０　ｍｍ×４．１　ｍｍ，
１０μｍ），流速１．２　ｍＬ·ｍｉｎ
－１对不同方法提取的凤尾草中的
亚砷酸根（ＡｓＯ３３－）、砷酸根（ＡｓＯ４３－）和一甲基砷（ＭＭＡ）、
二甲基砷（ＤＭＡ）进行分离，进样量１０μＬ，原子荧光光谱仪
在线检测。结果：ＡｓＯ３３－和ＡｓＯ４３－线性范围为２．５～２５　ｎｇ·
ｍＬ－１（ｒ＝０．９９９　８），日内、日间精密度（ＲＳＤ）均小于２．５％，
平均回收率在９６．９２％～１０２．３１％之间。５０％甲醇为提取溶
剂，室温下超声波提取３批凤尾草中的砷化物，叶中含量最
高，根中含量次之，茎中含量最低。结论：本研究改进了中药
中各种形态的砷化合物的提取和分析方法，操作简便，灵敏
度高，结果准确，重现性好，为中药中各种形态的砷化合物分
析方法提供了新的依据和方法。
［关键词］　凤尾草；砷形态分析；高效液相色谱法；原子荧光
光谱法
［中图分类号］Ｒ２８５　　［文献标识码］Ａ　　［文章编号］１００１－５２１３
（２０１２）１２－０９８３－０３
　　凤尾草系凤尾蕨科植物凤尾草（Ｐｔｅｒｉｓ　ｍｕｌｔｉｆｉｄａ　Ｐｏｉｒ．）
始载于唐朝陈藏品的《本草拾遗》。为民间习用药材，四季
可采，在《中药大辞典》、《全国中草药汇编》中均有记载。其
性凉，味淡、微苦，治疳、疔、痔，散毒，敷疮，具有清热利湿，
解毒止痢，凉血止血之功效。近年来用于治疗痢疾、扁桃体
炎、肝炎等，其根茎用于治疗糖尿病、抗肿瘤［１］。凤尾草资
源分布广泛，市场需求量日益增长，是一味极具开发前景的
中药材。
近年来，我国传统的中药材日益受到其他国家的青
睐，然而各国进出口药材质量控制法规和规范对砷的含量
做出了严格规定，严重制约了我国的中药材走向世界。研
究发现［２］，无机砷的毒性最大，有机砷的毒性较小，而砷甜
菜碱和砷糖常被认为是无毒的。因此，研究中药材中砷的
含量，应对砷的形态深入研究。目前，国内外对中药材中砷
形态分析的报道较少［３－４］。本实验利用高效液相色谱
（ＨＰＬＣ）与原子荧光光谱仪（ＡＦＳ）联用技术对中药凤尾草
中的砷形态进行分析，与ＩＣＰ－ＭＳ方法相比，具有经济实
用、操作简单等优点，与传统的药典中砷盐检测法准确、灵
敏度高，为中药材中砷元素的质量控制和毒理学研究提供
可行的检测方法。
１　材料
１．１　仪器　ＸＪＤ－Ｂ微型高速粉碎机（姜堰银河仪器）；ＫＱ
－１００Ｅ超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公司）；ＨＰＬＣ－
ＡＦＳ９８００（北京科创海光仪器有限公司）；Ｒ－２１５　ａｄｖａｎｃｅ旋
转蒸发仪（瑞士 ＢＵＣＨＩ公司）；ＡＧ－２４５电子分析天平
（Ｍｅｔｔｌｅｒ－Ｔｏｌｅｄｏ公司）；低速台式离心机（美国 Ｔｈｅｒｍｏ公
司）；移液器（美国Ｔｈｅｒｍｏ公司）。
１．２　试药　亚砷酸（ＡｓＯ３３－）溶液标准物质（７５．７μｇ·
ｍＬ－１）、砷酸根（ＡｓＯ４３－）溶液标准物质（１７．５μｇ·ｍＬ
－１）、一
甲基砷（ＭＭＡ）溶液标准物质（２５．１μｇ·ｍＬ
－１）、二甲基砷
（ＤＭＡ）溶液标准物质（５２．９μｇ·ｍＬ
－１）均购于中国计量科学
研究院。所用试剂均为分析纯。
１．３　药材　凤尾草药材购自贵州省安顺市。经哈医大一
院药学部杜旭主任药师鉴定为凤尾蕨科植物凤尾草。分离
凤尾草的根，茎，叶，分别粉碎，过药典３号筛（０．６５５　ｍｍ）
待用。
２　方法
２．１　检测条件
２．１．１　高效液相色谱法条件　色谱柱：Ｈａｍｉｌｔｏｎ　ＰＲＰ－Ｘ１００
阴离子交换色谱柱（２５０　ｍｍ×４．１　ｍｍ，１０μｍ）；流动相：ＫＨ２
ＰＯ４／Ｎａ２ＨＰＯ４的缓冲溶液（ｐＨ５．９）；流速：１．２　ｍＬ·ｍｉｎ－１；
进样量：１０μＬ。
２．１．２　原子荧光光谱法条件［５－６］　Ａｓ空心阴极灯；光电
管负高压３００　Ｖ；灯电流６０　ｍＡ；原子化高度８　ｍｍ；原子
化温度２００℃；载气 Ａｒ流量３００　ｍＬ·ｍｉｎ－１；屏蔽气 Ａｒ
流量８００　ｍＬ·ｍｉｎ－１；读数时间１２　ｓ；延迟时间１　ｓ；载流
液：５％盐酸（ｖ／ｖ）；还原液：含０．５％ ＫＯＨ和２％ＫＢＨ４的
水溶液。
２．２　溶液的制备
２．２．１　对照品溶液制备　分别精密吸取适量亚砷酸根、砷
酸根、一甲基砷、二甲基砷溶液标准物质，加去离子水，得１．０
μｇ·ｍＬ
－１单标准溶液，放置４℃保存。临用前放至室温，分
别精密吸取上述４种标准溶液各５００μＬ混匀，得各成分均
为２５０　ｎｇ·ｍＬ－１混合标准品溶液。
２．２．２　供试品溶液制备　精密称量５份１０　ｍｇ的凤尾草
叶，分别置于２５　ｍＬ的纯化水、２５％甲醇、５０％甲醇、７５％甲
醇、甲醇中，于室温下超声波提取３０　ｍｉｎ。
精密称量２份１０　ｍｇ的凤尾草叶，分别置于２５　ｍＬ的
５０％甲醇中，一份置于室温下超声１．０ｈ，另一份热回流
１．０ｈ。
精密称量根、茎、叶各１０　ｍｇ，分别置于２５　ｍＬ的５０％甲
醇中，室温下超声１．０ｈ。
以上各提取液分别转移至离心管中离心（３　５００　ｒ·
ｍｉｎ－１，２０　ｍｉｎ），上清液４０℃减压蒸干，残渣用纯化水少量
多次转移，定容至２５　ｍＬ，室温超声溶解，混匀，过０．２２μｍ
膜，留取续滤液，即得不同比例甲醇－水提取供试液、不同方
法提取供试液及不同药用部位供试液。
２．３　定量方法　采用高效液相色谱法－氢化物发生－原子荧
光光谱发（ＨＰＬＣ－ＨＧ－ＡＦＳ）联用法，精密吸取各样品供试液
１０μＬ，按上述条件进样分析，依据回归方程计算各样品中各
·３８９·中国医院药学杂志２０１２年第３２卷第１２期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１２　Ｊｕｎ，Ｖｏｌ　３２，Ｎｏ．１２
DOI:10.13286/j.cnki.chinhosppharmacyj.2012.12.005
种形态的砷的含量。
３　结果
３．１　ＨＰＬＣ法流动相选择　本研究以磷酸二氢钾／磷酸氢
二钠为流动相，考察不同ｐＨ值（ｐＨ范围从４．０至８．０）流动
相对砷化物的洗脱能力。根据色谱峰形状与分离度，最终确
定ｐＨ 值５．９０。在此条件下，对照品色谱峰峰形良好，分离
度佳，ＡｓＯ３３－ 和 ＡｓＯ４３－ 保 留 时 间 分 别 为２．１１　ｍｉｎ和
５．０６　ｍｉｎ。
３．２　色谱系统适用性试验　各相邻色谱峰分离度大于１．５。
ＡｓＯ３３－：理论塔板数１　１９６，有效塔板数９１１，拖尾因子１．４２；
ＡｓＯ４３－：理论塔板数３　００４，有效塔板数２　７０８，拖尾因子
１．３３。
３．３　线性关系　精密吸取对照品溶液１０，２０，４０，６０，８０，１００
μＬ进样分析。以含量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准
曲线，ＡｓＯ３３－和 ＡｓＯ４３－在２．５～２５　ｎｇ·ｍＬ－１范围内线性关
系良好。回归方程为：ＡｓＯ３３－：Ｙ＝１６６　６６１　Ｘ－３３６　３７９，ｒ＝
０．９９９　２；ＡｓＯ４３－：Ｙ＝４８　１５７　Ｘ＋１７５　３０２，ｒ＝０．９９９　４。
３．４　精密度试验　分别配制ＡｓＯ３３－低、中、高质量浓度（５，
１０，２０　ｎｇ·ｍＬ－１）对照品溶液，按上述方法于一天内分别进样
测定５次，计算日内精密度，ＲＳＤ 分别为１．３％，０．６％，
１．４％；同法每日考察线性关系，得到回归方程，进样测定一
次，连续测定５　ｄ，计算日间精密度，ＲＳＤ 分别为２．１％，
１．７％，１．２％。
分别配制 ＡｓＯ４３－ 低、中、高质量浓度（５，１０，２０　ｎｇ·
ｍＬ－１）对照品溶液，按上述方法于一天内分别进样测定５
次，计算日内精密度，ＲＳＤ分别为２．１％，１．７％，２．０％；同
法每日考察线性关系，得到回归方程，进样测定一次，连
续测定５　ｄ，计算日间精密度，ＲＳＤ分别为２．６％，２．３％，
１．８％。
３．５　稳定性试验
３．５．１　对照品稳定性　吸取室温下放置的混合对照品储备
液和样品溶液，分别在配制后０，２，４，６，８　ｈ，按上述条件进样
分析，计算各指标成分峰面积相对标准偏差，ＡｓＯ３３－ 和
ＡｓＯ４３－对照品储备液 ＲＳＤ分别为１．３％和１．６％。结果表
明，对照品溶液在８　ｈ内稳定性良好。
３．５．２　样品稳定性　吸取室温下放置的样品溶液，分别在
配制后０，２，４，６，８　ｈ，按上述条件进样分析，ＡｓＯ３３－ 和
ＡｓＯ４３－峰面积ＲＳＤ分别为１．５％和０．９％。结果表明，样品
溶液在８　ｈ内稳定性良好。
３．６　回收率试验　精密称取已知含量的凤尾草叶粉末４．０
ｍｇ，共９份，分别精密加入ＡｓＯ３３－标准溶液３．０３，６．０６，９．０９
ｎｇ和ＡｓＯ４３－标准溶液３．５，７．０，１０．５　ｎｇ，按“２．２．２”项下方
法制备供试液，按“２．１”项下仪器条件依法测定，计算加样回
收率。结果见表１。
３．７　提取条件考察
３．７．１　提取溶剂的确定　选择了不同比例甲醇－水为提取
溶剂进行提取能力的比较，从图１可见，５０％甲醇对凤尾草
中砷化物提取率最高，９５％甲醇对其提取率最低。故本研究
确定以５０％甲醇为提取溶剂。
３．７．２　提取方法的确定　从图２可见，热回流法提取效能
虽略高于室温下超声波法，但热回流导致了部分 ＡｓＯ３３－向
ＡｓＯ４３－转化，故提取方法室温下超声波提取方法。
表１　回收率测定结果
Ｔａｂ　１　Ｒｅｓｕｌｔ　ｏｆ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｔｅｓｔ
加入量／ｎｇ 测得量／％ 回收率／％ 平均回收率／％
ＡｓＯ４３－ ３．０３　 ３．１１　 １０２．６４
３．０３　 ３．１３　 １０３．３０　 １０２．３±１．２
３．０３　 ３．０６　 １００．９９
６．０６　 ６．０９　 １００．５０
６．０６　 ５．８９　 ９７．１９　 ９８．６±１．７
６．０６　 ５．９５　 ９８．１８
９．０９　 ９．２１　 １０１．３２
９．０９　 ９．１４　 １００．５５　 １０１．１±０．５
９．０９　 ９．２３　 １０１．５４
ＡｓＯ４４－ ３．５０　 ３．４１　 ９７．４３
３．５０　 ３．３７　 ９６．２９　 ９８．７±３．２
３．５０　 ３．５８　 １０２．２９
７．００　 ６．９１　 ９８．７１
７．００　 ６．８５　 ９７．８６　 ９７．９±０．９
７．００　 ６．７９　 ９７．００
１０．５０　 １０．０２　 ９５．４３
１０．５０　 １０．１３　 ９６．４８　 ９６．９±１．８
１０．５０　 １０．３８　 ９８．８６
图１　不同比例甲醇－水对凤尾草中砷化物提取能力的比较
Ｆｉｇ　１　Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｒｓｅｎｉｃ　ｆｒｏｍ　Ｐｔｅｒｉｓ
ｍｕｌｔｉｆｉｄａ　Ｐｏｉｒ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｓｏｌｖｅｎｔｓ
图２　不同提取方法对凤尾草中砷化物提取能力的比较
Ｆｉｇ　１　Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｒｓｅｎｉｃ　ｆｒｏｍ　Ｐｔｅｒｉｓ
ｍｕｌｔｉｆｉｄａ　Ｐｏｉｒ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｍｅｔｈｏｄｓ
３．８　含量测定结果　以５０％甲醇为提取溶剂，采用室温下
超声波提取方法，按“２．１”项下仪器条件依法分别检测３批
凤尾草根、茎、叶中 ＡｓＯ３３－ 和 ＡｓＯ４３－ 的含量，结果见表２。
混合对照品及各样品色谱图如下见图３。
表２　凤尾草不同部位各种形态砷化合物含量的比较（μｇ·
ｍＬ－１，珚ｘ±ｓ，ｎ＝３）
Ｔａｂ　２　Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ａｒｓｅｎｉｃ　ｓｐｅｃｉａｔｉｏｎ　ｉｎ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐａｒｔｓ　ｏｆ　Ｐｔｅｒｉｓ　ｍｕｌｔｉｆｉｄａ　Ｐｏｉｒ（μｇ·ｍＬ
－１，珚ｘ±ｓ，ｎ＝
３）
部位 ＡｓＯ３３－ ＡｓＯ４３－ 总含量
叶 ２．６３±０．２１　 ３．１４±０．０８　 ５．５０±０．１１
茎 ０．５６±０．０８　 １．０９±０．１４　 １．６５±０．１７
根 ２．０３±０．０４　 １．１０±０．１５　 ３．１３±０．０９
４　讨论
本研究以ＫＨ２ＰＯ４／Ｎａ２ＨＰＯ４为流动相等度洗脱，考察
不同ｐＨ（ｐＨ范围从４．０至８．０）流动相对砷化物的洗脱能力。
结果提示ｐＨ低时，砷化物保留时间长，色谱峰峰形差；ｐＨ
高时，分离度较差。ｐＨ为５．９时，达到最佳分离状态。
·４８９· 中国医院药学杂志２０１２年第３２卷第１２期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１２　Ｊｕｎ，Ｖｏｌ　３２，Ｎｏ．１２
图３　凤尾草不同部位各种形态砷化合物色谱图
Ｆｉｇ　３　ＨＰＬＣ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｒｓｅｎｉｃ　ｓｐｅｃｉａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ
ｐａｒｔｓ　ｏｆ　Ｐｔｅｒｉｓ　ｍｕｌｔｉｆｉｄａ　Ｐｏｉｒ
　　原子荧光光谱仪与高效液相色谱仪联用，ＡｓＯ３３－ 和
ＡｓＯ４３－灵敏度高达到纳克级水平，每个样品检测时间仅６．０
ｍｉｎ，与 ＨＰＬＣ－ＩＣＰ联用技术相比，具有经济实用、操作简单、
方法准确、灵敏度高、分析快速等优点，为凤尾草中不同形态
的砷的分离和检测，及中药材中砷元素的质量控制和毒理学
研究提供了科学的检测方法。
本研究结果表明，提取凤尾草中各形态砷化合物时，不
同比例的甲醇－水混合溶剂对砷化合物的提取效率不同，另
外温度对各种形态的砷化合物间的转化存在影响。热回流
法提取效能虽略高于超声波提取法，但会导致部分 ＡｓＯ３３－
转化为ＡｓＯ４３－，故本实验确定５０％甲醇室温下超声波提取
法为最佳提取方法。
［作者简介］刘世军，男，本科，主任药师，电话：１３７９１０８８８７８，Ｅ－ｍａｉｌ：Ｌｓｊ６０ｊ＠１２６．ｃｏｍ
　　凤尾草根、茎、叶中均未检出有机砷化合物 ＭＭＡ 和
ＤＭＡ，只检出了无机砷离子 ＡｓＯ３３－ 和 ＡｓＯ４３－。叶中总砷
含量最高（５．５０μｇ·ｇ
－１），ＡｓＯ３３－占总砷含量的４３％；根中
总砷含量次之（３．１３μｇ·ｇ
－１），ＡｓＯ３３－ 所占比例也最高
（６５％）；茎中总砷含量最低（１．６５μｇ·ｇ
－１），ＡｓＯ３３－所占比例
也最低（３４％）。《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》中
砷的限量标准Ａｓ不超过２．０ｍｇ·ｋｇ－１。以上结果提示，凤尾
草不同药用部位砷化物含量存在较大差异，并已超出砷的限
量标准。本结果为改进凤尾草生药的炮制方法提供了科学
依据，以期提高其中药现代化进程。
参考文献：
［１］　欧莉．中药凤尾草的研究进展［Ｊ］．中医药导报，２００８，１４（３）：
９２－９３．
［２］　Ｙａｍａｕｃｈ　ＩＨ，Ｆｏｗｅｒ　ＢＡ．Ａｒｓｅｎｉｃ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ［Ｍ］．
ＰａｒｔⅡ，（ｅｄ．Ｎｒｉａｇｕ　ＪＯ）．Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ：ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆ Ｓｏｎ，
１９９４：３５．
［３］　邓天龙，廖梦霞，贾敏如．中药材ＧＡＰ基地土壤和中药材中重
金属研究［Ｍ］．成都：四川科学技术出版社，２００５：７－８．
［４］　郝春莉，王庚，余晶晶，等．１５种中药材中砷的形态分析［Ｊ］．分
析测试学报，２００９，２８（８）：９１８－９２１．
［５］　刘春涛，侯海鸽，范乃英，等．原子荧光法测定刺五加不同部位
中的砷、锑、汞、硒［Ｊ］．光谱学与光谱分析，２０１０，３０（４）：１１２３－
１１２５．
［６］　边疆，张丽薇，张冠英，等．氢化物发生原子荧光法测定硅藻土
中砷［Ｊ］．中国卫生检验杂志，２０１０，２０（１）：７０－７１．
［收稿日期］２０１１－１２－０７
高效液相－质谱联用法不同色谱柱测定
马钱苷和芍药苷的比较分析
刘世军１，刘宪勇１，魏春敏２，王本杰２，郭瑞臣２　（１．
武警山东总队医院药剂科，山东 济南２５００１４；２．山东大学齐
鲁医院临床药理研究所，山东 济南２５００１２）
［摘要］　目的：ＨＰＬＣ－ＭＳ法比较Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ　Ｋｉｎｅｔｅｘ　Ｃ１８
（１５０　ｍｍ×４．６　ｍｍ，２．６μｍ）色谱柱、Ｗｏｎｄａｓｉｌ　Ｃ１８（１５０　ｍｍ
×４．６　ｍｍ，５μｍ）色谱柱对马钱苷和芍药苷分离效果。方
法：以甲醇－０．０２％甲酸（２８∶７２）为流动相；流速为０．７　ｍＬ·
ｍｉｎ－１；柱温３０℃。先后采用２种不同色谱柱，对马钱苷和
芍药苷标准溶液及含药血浆样品进行分析测定，比较其保留
时间ｔＲ、理论塔板数Ｎ、拖尾因子Ｔｆ。结果：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ　Ｋｉ－
ｎｅｔｅｘ　Ｃ１８色谱柱和 Ｗｏｎｄａｓｉｌ　Ｃ１８色谱柱测定血浆样品马钱苷
和芍药苷，保留时间分别为１９．６５２、１６．８９３　ｍｉｎ（马钱苷）和
１８．４６７、１９．４５９　ｍｉｎ（芍药苷），理论塔板数分别为８６　０３３、
１６　８８６（马钱苷）和８１　３４２、１７　５２３（芍药苷），拖尾因子分别为
１．０３、１．１（马钱苷）和１．０２、１．１３（芍药苷），２种色谱柱最低定
量限分别为２．５　ｎｇ·ｍＬ－１和５　ｎｇ·ｍＬ－１。结论：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ
Ｋｉｎｅｔｅｘ　Ｃ１８色谱柱，峰形尖锐，灵敏度较高，理论塔板数较
大，但保留时间与 Ｗｏｎｄａｓｉｌ色谱柱相近。
［关键词］　马钱苷；芍药苷；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ　Ｋｉｎｅｔｅｘ　Ｃ１８色谱
柱；Ｗｏｎｄａｓｉｌ　Ｃ１８色谱柱
［中图分类号］Ｒ９２７　　［文献标识码］Ａ　　［文章编号］１００１－５２１３
（２０１２）１２－０９８５－０３
　　六味地黄丸最早记载于宋代钱乙《小儿药证直诀·卷
下》，为滋阴补肾的传统名方，临床上用于多种疾病的治疗和
保健［１］。六味地黄丸有效成分主要有苷类，如芍药苷、马钱
苷等，酚性成分，如丹皮酚等，萜类，如泽泻醇Ａ、Ｂ、Ｃ等，以
及有机酸类，如没食子酸、熊果酸等［２］。其中马钱苷为２００５
年版中国药典收载的六味地黄丸的指标成分之一，能够促进
大鼠前脂肪细胞的增殖，抑制分化过程中 ＧＰＤＨ 的升高和
脂肪的积聚［３］。芍药苷具有抑制肿瘤细胞、降低血糖的作
用，并且对中枢神经系统、免疫系统具有一定调节作用［４－５］。
本文采用 ＨＰＬＣ－ＭＳ法，以Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ　Ｋｉｎｅｔｅｘ　Ｃ１８色谱柱
和 Ｗｏｎｄａｓｉｌ　Ｃ１８色谱柱为固定相，比较研究２种色谱柱对马
钱苷和芍药苷标准溶液及大鼠血浆样品马钱苷和芍药苷分
离效果的影响，为六味地黄丸的质量控制及血药浓度测定分
析方法的选择提供依据。
１　仪器和试药
Ａｇｉｌｅｎｔ　６４１０　ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ，１２００ｓｅｒｉｅｓ　ＨＰＬＣ，Ｈｉｐ－ＡＬＳ
ＳＬ自动进样器，ＤＡＤ　ＳＬ检测器（美国安捷伦科学技术公
司）；ＡＢＯＴＴ高速离心机（美国雅培公司）；ＰＫ５１４ＢＰ超声
清洗器（德国ＢＡＮＤＥＬ公司）；梅特勒－托利多 ＡＸ－２０５　Ｄｅｌｔａ
Ｒａｎｇｅ电子天平（瑞士梅特勒公司）。六味地黄丸（浓缩
丸），北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂，批号
７０７３６１５；马钱苷、芍药苷均由中国药品生物制品检定所提
供，批号分别为１１１６４０－２００５０３、１１０７３６－２００７３２，含量分别
为９９．９％、９９．８％；甲醇、醋酸乙酯为色谱纯，甲酸为分析
·５８９·中国医院药学杂志２０１２年第３２卷第１２期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１２　Ｊｕｎ，Ｖｏｌ　３２，Ｎｏ．１２