全 文 ：一
1 6 0
.沮 州医 学院学报 ( JW e nzh ouM d eC ol )1 95 9年 第 3期
sm i n或后 sm i n分别给予不同剂量 ( 1 9 )。 观察 7天内动
物死亡情况 , 按简化机率单位法计算杀虫单 L sD 。 , 以 u
检验各 L D 50 间的差异 。
W ist ar 大鼠 , 舍性 , 80 只 , 随机分成 4 组 , 每组 20
只 , 各组大鼠 2h4 禁食 . 杀虫单采用 19 , 硫酸铜采用咭 ,
观察 7天 内动物死亡数 .
铜离子能与二琉基沙蚕毒素形成稳定的络合物 , 因此 ,
铜离子可能通过这二个机制对杀虫单起解毒作用 , 一
药两用 , 对杀虫单急性中毒动物显示解救良效 。
表 2 钥离子对杀 虫单急性中毒大民的解救
硫酸铜剂 量
( m g / k g )
给硫酸
铜 时间
动物死
亡率 ( % )
2 结果和讨论 硫酸铜对杀虫单急性中毒有明显的
保护和解救作用 。 (表 1 和表 2) 。
表 1 钥离子对杀 虫单急性中毒小 旦的解救
硫酸铜剂量 给硫酸
( m g z k g ) 钥时 间
对照组 (空 白 ) 一
5 0 杀虫单前 s o i n
1 0 杀虫单前 s m i n
2 0 0 杀虫单后 s m i n
L D s
。
( m g / k g )
9 5士 8
7 1 0士 7 0 2 .
4 资 . 价
l 长 赞 价
1 9 0士 1 6 2 . 0 赞 赞 资
份 份 一 P < 0
.
00 1
硫酸铜是常用的催吐药 , 可用 以排除胃肠道的毒
物 . 此外 , 铜 离子能与琉基化合物形成稳定的络合
物 “ , 。 而杀虫单在机体 内先转化成具有生物活性的二
琉基沙蚕毒素而起毒性作用 。 通过红外光谱 , 我们发现
对照组 (杀虫单 Zs o m g / kg ) 1 0 0
硫酸铜 20 杀虫单前巧 m l n lo , , ,
硫酸铜 5 0 杀虫单前 l s m i。 o , , ,
硫酸钥 1 00 杀虫单后 sm i n 2 0 , , ,
一 , 份 P < 0
.
0 0 1
参 考 文 献
1 程高节 , 李金虎 . 杀虫双急性中毒 巧 例报告 . 中级医
刊 , 1 9 8 4 , 1 9 ( 1 1 ) : 4 1~ 2 .
2 王付发 , 钟丽萍 , 李克信 . 杀虫双急性中毒 20 例报告 .
职业 医学 , 1 9 8 5 . 1 2 ( 5 ) , 2 8 .
3 施亚雄 , 吴景元 . 杀虫双急性中毒 3 例报告 . 中华 内
科杂志 , 1 9 8 6 , 2 5 ( 1 0 ) , 6 0 0 ·
4 胡本荣 , 昊 秀荣 . 解毒药及 防治毒蛇咬伤药 . 见 : 《 医
用药理学 》 编写组编 . 医用药理学 . 北京 : 人民卫生出版社 ,
1 9 8 2 书 9 9 0一 1 0 0 3 .
(收稿 日期 : 1 9 9 5一 0 3一 0 7 ; 修回 日期 : 1 9 9 5一 0 5一 2 1 )
本 文编辑 : 黄熔秋 郑俊海
凤尾草对离体白血病细胞作用的实验研究 ’
附属一院血研室制剂室
陈寿权 俞 康 吴建波 王光汉 张君丽
黄学荪
[关锐词 ] 风尾草 白血病细胞 急性做性 白血病
凤尾草 ( P t e d s m u l t if id a P o i r ) 属凤尾旅科常绿草
本植物 , 为常用中草药 . 有较广谱的抑菌作用 , 且对小
白鼠肉瘤 : 7的抑制率为 30 一 50 % 。 有人曾用 L 。 ,小鼠白
血病模型筛选 多种中药 , 其 中凤尾草的抑制率亦达
20 % 以上 ` , ’ 。 为了探讨该药对白血病细胞的抑制活性 ,
我们于 1 9 9 2 年开始进行了体外实验研究 。 现报告如
下 。
材料和方法
1
.
1 病 例 : 各型急性髓细胞性 白血病 ( AM L ) 25 例 ,
诊断分型符合 F A』3标准 。其中男 17 例 ,女 8 例年龄 16
~ 61 岁 , 初发 19 例 , 复发 6 例 。 在化疗开始之前采取
骨髓血标本 . 如取静脉血标本 , 要求外周血 w B C 数>
10
.
0 火 10 , / L 且幼稚细胞数> 50 % 。
1
.
2 凤尾草药液 : 新鲜凤尾草洗净风干 , 取全草切成
细末 , 以蒸馏水浸泡 、 煎煮 、 浓缩 , 得凤尾草药液 (l m l
含干生药 1 9 ) 。 用无菌正压膜滤器 (膜孔 < 0 . 4拌m ) 过
滤 , 分装安瓶备用 。
夸 本课题受浙江省教委自然科学基金资助
DOI : 10. 13771 /j . cnki . 33 -1386 /r . 1995. 03. 018
盈 州医 学院学报 ( JWe z nbo uM e do C l l)9 9 1 5年 第3 期
1
.
3 阿据胞等 (r Aa一C ) 稀释液: 上海第十二制药厂
出品 Ar a一C , 以生理盐水 ( N )S 配制成 20 拜 g /ml 稀释
液备用 。
1
.
4 白血病细胞培养方法 : 取上述病人肝素抗凝骨份
血 3m l 或静脉血 s m l , 加 H a n k s 液稀释后加入 F i e o ll液
中离心 ( Zo o or p m , 1 5` ) , 吸取单个核细胞层 , 用 H a n k s
液清洗离心 (1 5 0 0印m , 5’ ) 3 次 , 以含 20 %小牛血清
的 P RM I 培养液稀释 ,使细胞数为 1 . 0 X I。“ /m l . 设 A 、
B
、
C
、
D
、
E S 管 , 分别加凤尾草药液 l ml 、 0 . sm l ( +
N S O
.
5川 l ) 、 0 . 2 5词 ( + N S o . 7 5m l ) 、 iA a 一 C 药液 l m l 、
N S l m l
。 然后各管加入上述细胞悬液 3m l 。 置 CO : 培养
箱 ( eC ll S t a r , U S A ) 培养 ( 3 7℃ 、 5% CO : 、 饱和湿
度 ) , 4 8 小时后观察结果 。
1
.
5 台盼 兰拒染试脸 : 各培养管取 1 滴细胞悬液进行
台盼兰染色 , 计数活细胞百分率 , 并以下列分式求出各
加药管对白血病细胞的抑制率 :
抑制率 (纬 ) 一 1 0 0 ( 1 一 A
、
B
、
C 或 D 管拒染率
E 管拒染率
1
.
6 细地数和形态观察 : 各管细胞计数 , 并将细胞悬
液离心 ( s o 0P mr , 5’ ) 后制作细胞徐片 , 以瑞氏染色观
察幼稚细胞和退变细胞 (包括核固缩 、 碎裂或溶解 ) 百
分率 。
2 结 果见附表 .
附表 风尾草对 25 例 AM L 白血病细胞抑制活性的实验结果 (又士 s)
组 别 活 细胞数 ( % ) 抑制率 (% ) 细胞 总数 ( x l 。` / m l) 幼稚细胞数 ( % )
A 6 6
.
2 0士 1 2 . 7 3 . △
B 6 6
.
4 4士 1 4 . 12 . △
C 67
.
34士 2 0 . 6 0 “ △
D 2 1
.
0 0士 1 2 . 6 6二
E 7 4
.
2 4士 1 6 . 0 1△
12
.
3 2士 6 . 9 1 △
1 1
.
8 9士 10 . 7 6△
9
.
7 0士 8 . 0 1△
7 2
.
1 4士 1 3 . 9 3
0
.
9 3 6士 0 . 1 8 0 . △ 7 1 . 5 2士 14 . 8 3 . △
73
.
4 8士 17 . 7 4 “ △
7 7
.
12士 18 . 3 7 . △
3 6
.
8 4士 19 . 5 9二
7 7
.
52士 1 1 . 5 6 0
退变细胞数 ( % )
14
.
0 0士 8 . 4 1 ` . “ △
0
.
9 2 8士 0 . 3 2 4 “ △ 13 . 0 8士 7 . 5 0
0
.
9 6 0士 0 . 2 4 9 . △ 1 1 . 9 2士 8 . 5 8
… △
. … △
0
.
19 6士 0 . 0 9 6二 38 . 8 8士 1 1 . 7 7 ’ .
1
.
0 3 2士 0 . 1 9 4△ 8 . 1 2士 3 . 5 4△
与 E 比较 : . P > 0 . 05
与 D 比较 : △ P < 0 . 0 1
. 价 P < 0
.
0 0 1 赞 赞 份 P < 0
.
0 1 . 价 二 P < 0 . 0 5
A
、
B
、
C 相互比较 : P > 0 . 0 5
3 讨 论
本研究应用体外白血病细胞液体悬浮培养法并结
合细胞形态学的观察 , 探讨凤尾草药液对离体 白血病
细胞的抑制活性 . 我们应用台盼兰拒染法测定药物组
对 白血病细胞的抑制率 , 该法被认为对多肿瘤的药敏
试验结果与体内效果呈良好的相关性 ` 2) 。 本实验设定
白血病细胞培养时间为 48 小时 . aS gr en t 等在研究药物
对 A M L 的敏感性时认为药物作用 2 天时检测其活细
胞数 , 有较好的实验重复性 且骨健与外周血结果一
致 (3) 。 本研究结果表明 , 梯度浓度的凤尾草药液组对白
血病细胞的抑制率 、 对白细胞总数和幼稚细胞数的影
响与阴性对照组 (N S 组 ) 比较差异均不明显 (P > .0
05 )
, 与阳性对照组 ( iA a 一 C 组 ) 相比则呈非常显著差
异 (P < 0 . 。。 1 ) . 风尾草各组中退变细胞数比阴性对照
组高 (P < 。 . 01 及 P < 0 . 0 5 ) , 但与阳性对照组相比仍
呈更显著差别 (P < 。 . 0 0 1 ) . 另外 , 凤尾草各管组之间
随着药物浓度的梯度改变 , 其对白血病细胞的抑制活
性并不呈规律性的变化 , A 、 B 、 C 各管组之间各指标均
不呈显著性差别 (P > 0 . 0 5 ) 。 上述研究初步表明 , 凤
尾草全草煎液对于 AM L 的离体培养 白血病细胞无明
显的特异性杀伤作用 。
参 考 文 献
l 陈文杰 , 陆道培主编 , 血液学进展 . 第一版 , 北京 : 科
学 出版社 , 1 97 8 : 32
2 W d se n t h a l L M
, e t a l
.
A n o v e l d y e e x c lu s i o n m e t h记 fo r
h u m a n t u m o
r s .
C a n e e
r
R es 19 8 5
, 4 5 : 7 4 9
3 S a r罗 n r JM , T a y l a r C G . A p少 ia sal of t h e M T T a sa y as
a r a p id t e s t o f C h e m ose
n s i t iv i t y i n a e u t e m y e i1O d le u k a e m ia
.
B r J
C a n e e r
, 1 9 8 9
, 60 : 2 0 6
(收稿日期 : 1 9 9曦一 1 2一 0 5 , 修回日期 : 19 9 5一 0 4一 0 1 )
本文编辑 : 郑俊海