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酸浆绿茶体外抗氧化活性研究



全 文 :J.SHANXI AGRIC.UNIV.(Natural Science Edition)
学报(自然科学版)2012,32(4) 002926
收稿日期:2012-05-04   修回日期:2012-05-30
作者简介:刘敏(1986-),女(汉),硕士,研究方向:食品营养与安全。
通讯作者:王晓闻,教授,博士。Tel:13935491825;E-mail:wwxw11@163.com
基金项目:山西省科技攻关项目(20100311073)
酸浆绿茶体外抗氧化活性研究
刘敏,任石涛,王晓闻
(山西农业大学 食品学院,山西 太谷030801)
摘 要:对酸浆绿茶体外抗氧化活性进行研究,结果表明,酸浆绿茶具有一定的还原力;对DPPH·自由基、·OH自
由基、O2-·自由基具有一定的清除能力,对脂质过氧化物有抑制作用,其IC50值分别为0.45g·L-1、0.99g·L-1、
15.43g·L-1、0.83g·L-1;对DPPH·自由基的清除能力较强,对O2-·自由基的清除能力较弱。
关键词:酸浆绿茶;体外;抗氧化
中图分类号:S571.1  文献标识码:A  文章编号:1671-8151(2012)04-0351-04
in vitro Antioxidant Activity of Physalin Green Tea
Liu Min,Ren Shitao,Wang Xiaowen
(College of Food Science and Engineering,Shanxi Agricultural University,Taigu Shanxi 030801,China)
Abstract:The antioxidant activity of physalin green tea were tested in vitro.The results showed that in the physalin
green tea had a deoxidation ability.It can scavenge DPPH·,·OH,O2-·free radicals and lipid peroxides with the
IC50values of 0.44,0.99,15.43and 0.83g·L-1,respectively.The scavenging ability was strong for DPPH·radi-
cals,but weak for O2-radicals.
Key words:Physalins green tea;in vitro;Antioxidant activity
  酸浆[Physalis alkekengi L.var.francheti
(Mast.)Makino],别名红姑娘、泡泡草等,茄科,
酸浆属,为多年生宿根草本植物[1]。酸浆始载于
《神农本草经》,明朝李时珍《本草纲目》中也有记
载[2]。酸浆全草含有许多功能性化学成分,包括甾
体类,生物碱类,脂类,矿物质,色素类,氨基酸类,
糖类及其他成分等[3]。酸浆叶中含有大量的黄酮
类物质,所以它具有消炎,抗肿瘤,抗糖尿病,抗菌
及抗病毒等方面的功能[4]。
酸浆在中国各地均有野生分布,适应性强。目
前有关酸浆的研究也不够深入,尤其是对酸浆叶子
的报道较少,而且以其为原料的食品及药品市场上
还不多见。酸浆有待于进一步的开发利用,是一种
非常有发展前景的经济作物。本实验将酸浆叶子
做成绿茶是发挥酸浆叶功效的最简单、最方便、最
快捷与最有效的方法,可以被人体更好的利用。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 原料
本试验采用大同市阳高县长城镇提供的8月
份酸浆植物的叶子,采用传统工艺。
1.1.2 主要试剂
试验中所用试剂均为分析纯。
无水甲醇、氯化铁、氯化钾、二苯代苦味酰肼自
由基(DPPH·):美国Sigma公司。
丁基羟基甲苯(BHT)、水杨酸、邻苯三酚、硫
酸亚铁(FeSO4·7H2O)、硫代巴比妥酸、铁氰化钾
(K3Fe(CN)6)、Tris:北京瑞尔欣德科技有限公
司;三氯甲烷、三氯乙酸、冰乙酸、30%双氧水
(H2O2)、淀粉。
1.1.3 仪器与设备
BS224S电子天平、台式低速离心机(L-550)
DOI:10.13842/j.cnki.issn1671-8151.2012.04.009
(北京赛多利斯仪器系统有限公司)、756型紫外可
见分光光度计(上海光谱仪器有限公司)、JDG-0.2
真空冻干试验机、电热恒温水浴锅(北京化玻联医
疗器械有限公司)、电热恒温鼓风干燥箱(上海新苗
医疗器械制造有限公司)
1.2 方法
1.2.1 酸浆绿茶还原能力的测定
参照魏金涛等人的方法进行测定[6]。
1.2.2 酸浆绿茶对DPPH·自由基清除能力的测定
DPPH·自由基清除能力的方法参考Yamaguchi
等[7]报道的方法与于继宾[8]的方法进行测定。
1.2.3 酸浆绿茶对·OH自由基清除能力的测定
·OH 自由基清除能力的方法主要参照陈伟
等[9]报道的方法测定。
1.2.4 酸浆绿茶对O2-·自由基清除能力的测定
酸浆绿茶对O2-·自由基清除能力的测定方
法参照徐怀德[10]报道的方法。
1.2.5 酸浆绿茶对脂质过氧化物清除能力的测定
用甲醇将酸浆绿茶粉溶解,配成2g·L-1溶
液,并作一系列的稀释。将0.5mL鸡蛋黄匀浆液
与10%、0.2mol·L-1的PBS溶液(pH=7.4)混
合后加入不同浓度的样液0.5mL混合,再加入
0.07mol·L-1的FeSO4 溶液0.05mL,摇匀,放
在37℃下保温30min后加入20%的三氯乙酸1.5
mL和等体积0.8%的硫代巴比妥酸,反应终止,最
终的混合物在100℃的温度下加热5min后在
3000r·min-1的转速下离心10min,取其上清液,
于532nm处检测上清夜的吸光度。以不加硫代
巴比妥酸的溶液为空白溶液。以BHT作为标准
对照,按下式计算各待测样品对脂质过氧化物的清
除能力。重复3次取平均值。
抑制率/% =1-
(A-A1)
A0 ×
100%
式中:A———样液与反应溶液混合液的吸光值;
A1———样液与空白溶液混合液的吸光值;
A0———不加样液的吸光值。
2 结果与分析
2.1 酸浆绿茶总还原能力的测定
  由图1可看出,酸浆绿茶样品在低浓度下,
A700值较小,随着浓度的增加,A700值也随之增大。
说明酸浆绿茶在一定浓度下具有还原能力。
图1 酸浆绿茶的还原能力
Fig.1 The reducing power of Physalins green tea
2.2 酸浆绿茶对DPPH·自由基清除能力
由图2、图3可看出,酸浆绿茶对DPPH·自
由基有一定的清除能力,清除能力随浓度的增加而
增大。溶液浓度达到1g·L-1时 ,对DPPH·自
由基清除率可以达到90.8%。通过回归方程y=
-28.097x2+117.96x+1.2571,R2=0.9995及
y=-92146x2+3414.7x+11.623,R2=0.978得
出酸浆绿茶、Vc对DPPH·自由基的半抑制浓度
IC50值为0.45g·L-1、0.060g·L-1。结果表明,
一定浓度的酸浆绿茶对DPPH·自由基具有较强
的清除能力,但没有Vc的能力强。
图2 酸浆绿茶清除DPPH·自由基的能力
Fig.2 Scavenging activity of physalins green tea on DP-
PH·radical
2.3 酸浆绿茶对·OH自由基的清除能力
由图4可看出,随着浓度的增加,酸浆绿茶对
Fenton反应体系产生的羟自由基的清除力逐渐上
升,当浓度为2g·L-1时,清除作用最强,其清除
率达到63.8%。实验数据用Excel进行多项式回
归,回 归 方 程 为 y= -5.945x2 +31.157 x
+2 4.9 1 2,R2=0.9 7 6 5,及y=-1 5.5 9 1x2+
253 山 西 农 业 大 学 学 报(自然科学版) 2012
图3 Vc清除DPPH·自由基的能力
Fig.3 Scavenging activity of Vc on DPPH·radical
71.003x+18.941,R2=0.9963,回归方程显著。
通过回归方程得出酸浆绿茶、Vc清除羟自由基的
半抑制浓度IC50值0.99g·L-1、0.22g·L-1。结
果表明,一定浓度酸浆绿茶也有清除羟自由基的能
力,但是作用不强。
图4 酸浆绿茶及Vc清除·OH自由基的能力
Fig.4 Scavenging activitv of physalins green tea and Vc
on hydroxyl radical
2.4 酸浆绿茶对O2-·的清除能力
由图5可看出,反应体系吸光值随反应时间延
长而稳定增加,在体系反应时间内,吸光值和反应
时间线性关系良好,相关系数达0.9998,说明反应
体系在前3min的反应时间内,稳定积累有色中间
产物,邻苯三酚自氧化速率稳定,根据线性方程y
=0.0342x+0.1146可知,邻苯三酚自氧化速率
V0 为0.0342。
由图6可看出,当样品浓度为2g·L-1时,其
清除率为4.3%,说明酸浆绿茶对O2-·自由基的
清除效果不佳。y=0.1714x2-0.4626x+2.192,
R2=0.9448,回归方程显著。由方程计算得出酸浆
绿茶对清除超氧阴离子自由基的IC50值分别为
15.43g·L-1。试验结果表明,一定浓度的酸浆绿
茶的可清除超氧阴离子自由基,但是作用较弱。
图5 邻苯三酚自氧化速率的测定
Fig.5 Linearity correlation between reaction time and
adsorbancy of reaction system
图6 酸浆绿茶清除超氧阴离子自由基的能力
Fig.6 Scavenging activitv of physalins green tea on su-
peroxide anion radical at different concentrations
2.5 酸浆绿茶对脂质过氧化物的抑制作用
由图7可看出,随着浓度的增加,酸浆绿茶对
脂质过氧化物的清除力逐渐上升,当浓度为2g·
L-1时,清除作用最强,其清除率达到67.9%。实
验数据用Excel进行多项式回归,回归方程显著。
通过回归方程得出酸浆绿茶清除脂质过氧化物的
半抑制浓度IC50值,为0.83g·L-1。结果表明,一
定浓度的酸浆绿茶对脂质过氧化物有较强的清除
作用。
3 结论与讨论
还原力是表示抗氧化物质能够提供电子能力
强弱的重要指标,随着溶液的吸光度增大,还原能
35332(4) 刘敏等:酸浆绿茶体外抗氧化活性研究
图7 酸浆绿茶对脂质过氧化物清除能力
Fig.7 Scavenging Activity of physalins green tea on the
POV
力增强,其抗氧化性亦增强[11~13]。二苯代苦味酰
肼自由基(DPPH·)是一种较稳定的以氮为中心
的自由基,如果受试物能够清除它,便可以评价此
受试物的抗氧化能力[14~17]。O2-·和·OH 等活
性氧自由基诱导的氧化损伤一直被认为是引起衰
老、细胞损伤、死亡和组织伤害、细胞癌变的原因之
一[18]。·OH是最强活性自由基,也是毒性最大
的自由基。它可与活细胞中任何分子发生反应造
成损害,并导致遗传突变、膜损伤、酶失活、线粒体
氧化磷酸化作用等一系列变化[19]。超氧阴离子在
人体内存在的一定数量,不发生化学变化对人体无
害,但是一旦与羟基结合生成的产物就会对细胞
DNA造成损害,从而破坏了人类机体功能。脂质
过氧化过程中发生的ROS氧化生物膜的过程,期
间可能生成脂质过氧化产物如丙二醛 (Malonal-
dehyde, MDA)和 4 - 羟 基 壬 烯 酸 (4 -
hydroxynonenal,HNE),从而改变细胞膜的流动
性和通透,最终使细胞结构和功能得到改变。
试验结果表明酸浆绿茶具有一定的还原力;对
DPPH·自由基、·OH自由基、O2-·自由基具有
一定的清除能力,对脂质过氧化物有抑制作用,其
IC50值分别为0.45g·L-1、0.99g·L-1、15.43g·
L-1、0.83g·L-1;对DPPH·自由基的清除能力较
强,但对O2-·自由基的清除能力较弱。酸浆绿茶
之所以有以上抗氧化作用可能由于所含的黄酮有
关[20],酸浆绿茶的提取物有待于进一步的研究。
参 考 文 献
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(编辑:马荣博)
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