全 文 ：2014 年 5 月 第 16 卷 第 5 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine May 2014 Vol. 16 No. 5
△［基金项目］ 国家自然科学基金(30960496)
*［通信作者］ 谢一辉，教授，硕士生导师，研究方向:中药活性成分分析，E-mail:243619851@ qq. com;
黄丽萍，教授，硕士生导师，研究方向:中药药理学，E-mail:jxnchlp@ 163. com
覆盆子活性部位化学成分的分离与鉴定
△
刘文琴，龚嘉华，王燕霞，练波，黄丽萍* ，谢一辉*
(江西中医药大学，江西 南昌 330006)
［摘要］ 目的:分离鉴定覆盆子活性部位的化学成分。方法:利用各种色谱技术进行分离，根据化合物的光谱
数据(IＲ，MS，1H-NMＲ，13C-NMＲ)和物理化学方法鉴定其结构。结果:分离并鉴定了 6 个化合物，分别为 β-谷甾醇
(1) ，十六烷酸(2) ，棕榈油酸(3) ，β-谷甾醇棕榈油酸酯(4) ，蔷薇酸(5) ，山柰酚(6)。结论:其中棕榈油酸和 β-
谷甾醇棕榈油酸酯为首次从覆盆子中得到。
［关键词］ 覆盆子;化学成分
Isolation and Identification of Chemical Constituents from the Active Site of Ｒubus chingii Hu
LIU Wenqin，GONG Jiahua，WANG Yanxia，LIAN Bo，HUANG Liping* ，XIE Yihui*
(Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine，Nanchang 33004，China)
［Abstract］ Objective:To isolate and identify the active chemical constituents of Ｒubus chingii
Hu. Methods:Various chromatographic techniques were used to isolate the chemical constituents，and their
structures were identified by IＲ，MS，1HNMＲ，13 CNMＲ，physical and chemical method. Ｒesults:Six
compouds were islolated from Ｒ. chingii and their structures were identified as β-sitosterol(1) ，Sixteen
carbinate(2) ，Gaidic acid(3) ，β-Sitosterol gaidic acid ester(4) ，Euscaphic acid(5) ，Kaempferol(6)．
Conclusion:Compound 3 and 6 were isolated from Ｒ. chingii for the first time。
［Key words］ Ｒaspherry;Ｒubus chingii Hu;Chemical constituents
doi:10． 13313 / j． issn． 1673-4890． 2014． 05． 006
覆盆子为蔷薇科植物华东覆盆子 Ｒubus chingii
Hu的干燥果实，性温，味酸、甘，归肝、肾、膀胱
经。具有益肾固精缩尿，养肝明目的功能，用于遗
精滑精，遗尿尿频，阳痿早泄，目暗昏花［1］。许多
抗衰老古方中均含有覆盆子［2］。近年来有关药理研
究表明覆盆子具有抗诱变［3］、提高免疫［4］、延缓衰
老、改善学习记忆能力等作用。本课题组在前期进
行的药效实验表明，覆盆子具有较强的改善肾阳虚
型衰老动物学习记忆的作用，其中三氯甲烷部位和
乙酸乙酯部位的活性较强。为了进一步探索覆盆子
的活性成分，本课题从三氯甲烷部位和乙酸乙酯部
位分离出 8 个化合物，鉴定了其中 6 个化合物，分
别为 β-谷甾醇(β-sitosterol，1) ，十六烷酸(Sixteen
Carbinate，2) ，棕榈油酸(Gaidic acid，3) ，β-谷甾
醇棕榈油酸酯(β-Sitosterol gaidic acid ester，4) ，蔷
薇酸(Euscaphic acid，5) ，山柰酚(Kaempferol，6)。
药效实验证实，3 ～ 6 为覆盆子防治老年痴呆的活性
成分。
1 仪器与试药
1. 1 仪器
INOVA-500 型核磁共振仪(内标 TMS) ，VGZAB-
HS型质谱仪，X4 型显微熔点测定仪(北京泰克仪器
有限公司) ，IＲ 红外，DU-650 紫外可见光谱仪(美
国贝克曼公司)。
1. 2 试药
硅胶(青岛海洋化工厂) ，聚酰胺(浙江台州路
桥 四 甲 生 化 塑 料 厂) ，SephadexLH-20 凝 胶
(Pharmacia公司) ，其他试剂均为分析纯。覆盆子药
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材购于樟树，经江西中医药大学刘庆华老师鉴定为
悬钩子属植物华东覆盆子 Ｒubus chingii Hu的果实。
2 提取与分离
覆盆子药材粉碎后，用 80%乙醇渗漉，直至药
液基本无色，回收乙醇得浸膏。浸膏用水混悬，分
别用三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取。
2. 1 三氯甲烷部分的分离与精制
取三氯甲烷部分上硅胶柱，三氯甲烷 －甲酸乙酯
梯度洗脱。用紫外检测器监测流出峰，每个峰为 1 个
流分，共收集洗脱液 40 个流分。浓缩各流分，用
TLC比较，合并相似组分。流分 18 ～ 22 回收溶剂后
重结晶得化合物 1。流分 6 ～ 17 回收溶剂后，再用硅
胶柱细分，三氯甲烷 －甲酸乙酯梯度洗脱得化合物 2。
流分 23 ～26 回收溶剂后，再用硅胶柱细分，甲苯 －
甲酸乙酯梯度洗脱，分别得化合物 3、化合物 4。
2. 2 乙酸乙酯部分的分离与精制
取乙酸乙酯部分上硅胶柱，分别用三氯甲烷 －
甲酸乙酯梯度和甲酸乙酯 －丙酮梯度洗脱。用紫外
检测器监测流出峰，每个峰为 1 个流分，共收集洗
脱液 30 份。浓缩各流分，用 TLC比较，合并相似组
分。流分 17 ～ 27 回收溶剂后，再用 C18柱细分，甲
醇 －水梯度洗脱，流分 3 ～ 4 回收溶剂后得化合物 5，
流分 6 ～ 8 再过 SephadexLH-20 凝胶柱 20%甲醇 －水
洗脱得化合物 6。
3 结构鉴定
化合物 1:白色针状结晶(乙酸乙酯) ，mp 136 ～
138 ℃，Liebermann-Burchard 反应显绿色，Molish 反
应阴性，表示有甾类化合物。将化合物与已知对照
品混合，测熔点不下降，经已知对照品共薄层，在
3 种溶剂系统下展开，Ｒf 值一致。
13C-NMＲ 所得数据
与文献［5-6］中报道 β-谷甾醇基本一致。所以化合物 1
鉴定为 β-谷甾醇(β-sitosterol)。
化合物 2:白色粉末(三氯甲烷) ，mp 68 ～70 ℃。
易溶于三氯甲烷、乙醚，微溶于甲醇。从1H-NMＲ 可
看出，1个活泼氢 δ 11. 95，1个甲基 δ 0. 84，14 个亚
甲基 1. 22 和 δ 2. 16。13 C-NMＲ 显示 16 个碳信号，
δ 179. 803为羧基，δ 14. 143 为甲基，其他碳信号依
次 为 34. 046， 31. 966， 29. 732， 29. 721， 29. 706，
29. 693，29. 628，29. 267，29. 397，29. 277，29. 105，
24. 727，22. 728。将其13C-NMＲ的数据与文献报道的
十六烷酸数据一致［7］。因此化合物 2 为十六烷酸
(Exadecanioc acid)。
化合物 3:白色无定型粉末(三氯甲烷)，mp 45 ～
47 ℃。可溶于乙醚、三氯甲烷、乙酸乙酯，微溶于
甲醇。从1H-NMＲ 可以看出，3 个活泼氢，1 个甲
基，12 个亚甲基。将其13 C-NMＲ 的数据跟十六烷酸
比较，除显示有双键外，其他基本一致。IＲ 1 660
cm －1显示有烯烃双键峰，IＲ 650 cm －1显示有烯氢。将
该物质的碳谱数据与油酸(十八碳 －顺-9-烯酸)的碳谱
数据比较，除少了 2个碳信号外，其他信号皆一致。综
上所述，推断化合物 3 为棕榈油酸(Gadic acid)，为首
次从覆盆子中得到。
化合物 4:为白色无定型粉末(三氯甲烷) ，mp
52 ～ 54 ℃。易溶于三氯甲烷、乙醚，微溶于甲醇，
乙酸乙酯，不溶于丙酮。Liebermann-Burchard 反应
显阳性，Molish 反应阴性，表示有甾类化合物。IＲ
1 738 cm －1处显示有酯基，推断该物质为酯类。碳
谱数据显示有 45 个碳原子，分别为 179. 87，34. 17，
29. 88， 29. 47， 29. 58， 29. 66， 29. 66， 32. 15，
130. 23， 129. 94， 32. 15， 29. 82， 29. 88， 29. 82，
24. 79， 14. 34， 140. 9， 121. 97， 72. 10， 56. 99，
56. 28， 50. 35， 46. 06， 42. 54， 42. 37， 40. 00，
37. 46， 36. 72， 36. 37， 34. 26， 32. 13， 29. 92，
29. 88， 29. 82， 28. 47， 26. 30， 24. 79， 24. 79，
22. 91， 21. 31， 19. 61， 19. 26， 19. 00， 14. 34，
12. 08。该化合物碳谱信息为 β-谷甾醇和棕榈油酸碳
谱信息的叠加。所以推断化合物 4 为 β-谷甾醇与棕
榈油酸所成的酯，即 β-谷甾醇棕榈油酸酯(β-
Sitosterol gaidic acid ester) ，为首次从覆盆子中得到。
该化合物的结构如图 1 所示。
图 1 β-谷甾醇棕榈油酸酯化学结构
化合物 5:为黄色粉末(甲醇)，mp 275 ～ 277 ℃。
可溶于甲醇，盐酸镁粉反应阳性，示为黄酮类化合
物:三氯化铁 －铁氰化钾反应阳性，示有酚羟基存
在。该物质在甲醇溶液中的紫外最大吸收波长 λmax
为:209，254(带 II) ，373(带 I)。根据带 I 波长位
置，提示可能为黄酮醇类物质。加入诊断剂 AlCl3 /
HCl后带 I红移 56 nm提示有 3 位和 5 位羟基。将化
(下转第 379 页)
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檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿
)
(上接第 373 页)
合物与已知对照品混合，测熔点不下降，经已知对
照品共薄层，在 3 种溶剂系统下展开，Ｒf 值一
致。1H-NMＲ和13C-NMＲ所得数据与文献报道的山柰
酚数据基本一致［8］。所以推断化合物 5 为山柰酚
(KaemPefrol)。
化合物 6:为白色无定型粉末(甲醇) ，mp 268 ～
270 ℃。可溶于吡啶、三氯甲烷 －甲醇、丙酮。在预
制硅胶 G 板上点样展开，30% 硫酸加热后显红
色。1H-NMＲ、13 C-NMＲ 数据与文献报道的蔷薇酸一
致［9-10］，数据如下:41. 75，65. 49，78. 74，38. 18，
48. 15，17. 99，32. 91，39. 98，47. 02，38. 06，23. 47，
127. 39， 139. 34， 42. 27， 28. 63， 26. 311， 47. 66，
53. 98， 72. 08， 41. 57， 26. 33， 37. 88， 28. 83，
22. 261， 16. 831， 16. 66， 24. 02， 180. 04， 26. 47，
16. 02。故推断化合物 6为蔷薇酸(Euscaphic acid)。
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