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毛郁金乙醇提取物降血脂作用研究



全 文 :收稿日期:2014-10-14
修回日期:2014-11-20
作者简介:吴尤娇(1990-),女,硕士研究生,主要从事中药质量控
制研究。
*国家科技支撑计划项目(2011BAI01B04),广西科学研究与技
术开发计划项目(0992003A-20)和广西自然科学基金项目
(2010GXNSFD013044)资助。
**通讯作者:黄庶识(1964-),男,研究员,硕士研究生导师,主
要从事应用微生物及分子光谱研究。
刘华钢(1956-),女,教授,博士研究生导师,主要从事中药质量控
制研究,E-mail:lhg@gxfda.gov.cn。
广西科学Guangxi Sciences 2015,22(2):130~134
网络优先数字出版时间:2015-05-08
网络优先数字出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/45.1206.G3.20150508.1558.001.html
毛郁金乙醇提取物降血脂作用研究*
Antihyperliposis Effects of Ethanol Extract fromCurcu-
ma aromatica
吴尤娇1,2,黄敏桃3,黄云峰4,赖茂祥4,黄庶识2**,刘华钢5**
WU You-jiao1,2,HUANG Min-tao3,HUANG Yun-feng4,LAI Mao-xiang4,
HUANG Shu-shi 2,LIU Hua-gang5
(1.广西中医药大学药学院,广西南宁 530001;2.广西科学院生物物理实验室,广西南宁 
530007;3.广西生态工程职业技术学院,广西柳州 545004;4.广西中医药研究院,广西南宁 
530022;5.广西医科大学,广西南宁 530021)
(1.Colege of Pharmacy,Guangxi University of Chinese Medicine,Nanning,Guangxi,530001,
China;2.Biophysics Laboratory,Guangxi Academy of Sciences,Nanning,Guangxi,530007,Chi-
na;3.Guangxi Eco-engineering Vocational and Technical Colege,Liuzhou,Guangxi,545004,
China;4.Guangxi Academy of Traditional Chinese Medicine,Nanning,Guangxi,530022,China;
5.Guangxi Medical University,Nanning,Guangxi,530021,China)
摘要:【目的】研究毛郁金(Curcuma aromatica)乙醇提取物降血脂作用,为其综合开发利用提供依据。【方法】
通过高脂饲料喂养及脂肪乳剂灌胃,建立高脂血症大鼠模型,连续3周给予毛郁金乙醇提取物进行治疗,设正常
组、高脂模型组、辛伐他汀组和毛郁金乙醇提取物高、中、低剂量(生药18g·kg-1·d-1,12g·kg-1·d-1,6
g·kg-1·d-1)组,以动物实验研究毛郁金乙醇提取物降血脂的作用。【结果】毛郁金乙醇提取物可降低大鼠血
清总胆固醇(CHOL)、三酰甘油(TG)和低密度脂蛋白(LDL-C)的含量,并提高血清高密度脂蛋白(HDL-C)含
量,对血清CHOL、LDL-C的降低作用:高>中>低剂量组,中剂量组对降低TG、升高 HDL-C含量具有较好作
用,毛郁金各给药组均对大鼠血清LDL-C含量有极显著降低作用。【结论】毛郁金乙醇提取物具有明显的降血
脂作用。
关键词:毛郁金 乙醇提取物 大鼠 降血脂
中图分类号:R285.5  文献标识码:A  文章编号:1005-9164(2015)02-0130-05
Abstract:【Objective】The antihyperliposis function of the ethanol extract from Curcuma
aromatica was studied on rats in order to provide
the basis for its comprehensive development and
utilization.【Methods】High lipid rat model was
prepared by feeding a high-fat diet and gastric
perfusion of intralipid,then delivered with differ-
ent doses of the ethanol extract from Curcuma
aromatica.Al experimental rats were divided
into 6groups:A normal control group,a high
lipid model group,apositive group(Simvastatin)
and three groups of ethanol extract from
Curcuma aromatica with the equivalent weight
of 18g crude drug·kg-1·d-1,12g crude drug
·kg-1·d-1and 6g crude drug·kg-1·d-1,re-
031 Guangxi Sciences,Vol.22No.2,April 2015
spectively.【Results】The ethanol extract fromCurcuma aromatica could decrease the value of
total cholesterol(CHOL),triglyceride(TG)and the low density lipoprotein-cholesterol(LDL-
C)in the blood of rats,and also increase the value of high density lipoprotein-cholesterol(HDL
-C).The CHOL and LDL-C decreasing effects ranked as:high>middle>low dose group.The
middle dose group has a better effect on TG decreasing and HDL-C increasing.Al the dose
groups of Curcuma aromatica have significantly lower levels of LDL-C(P <0.01).【Conclu-
sion】The ethanol extract fromCurcuma aromaticashows clear effects on antihyperliposis.
Key words:Curcuma aromatica,ethanol extract,rat,antihyperliposis
0 引言
  【研究意义】毛郁金为姜科植物姜黄属毛郁金
(Curcuma aromatica Salisb.)的干燥根茎,是广西的
常用药材,具有行气解郁、凉血破瘀及利胆的功效,临
床上多用于胸闷胁痛、黄疸、胃腹胀痛、吐血、尿血、月
经不调以及癫痫等病症[1,2]。【前人研究进展】毛郁
金具有镇痛、止血[3]、抗炎[4]及增强机体功能[5]等作
用,其挥发油与叶提取物具抗氧化及氧化自由基清除
能力[6];水提物能诱导人结肠癌细胞LS-174-T凋
亡,并阻止细胞周期于G2/M 期,不受p53基因单独
调节影响[7]。毛郁金的主要有效成分为挥发油和姜
黄素类化合物[1],其根茎挥发油中以桉叶素、新莪术
二酮、β?榄香烯、芳樟醇和樟脑等倍半萜类成分为
主[8],乙醇提取物中含有莪术二酮、莪术烯醇、莪术醇
和去甲氧基姜黄素等17种化合物[9]。研究发现,倍
半萜类化合物能有效降血脂、抗血小板活性[10],姜科
植物姜黄油可降低高脂血症大鼠血脂水平[11],莪术
二酮、吉马酮[12]、莪术醇[13]和去甲氧基姜黄素[14]等
具有明显的降血脂、抗脂质过氧化、抗凝血和抗血栓
作用。【本研究切入点】目前尚未发现毛郁金在降血
脂作用方面的报道。【拟解决的关键问题】采用无水
乙醇回流提取毛郁金药材,观察乙醇提取物对高脂大
鼠的降血脂作用,探讨毛郁金体内降血脂药理活性,
为其综合开发利用提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 毛郁金样品
  2013年10月采自广西横县新福镇,经广西中医
药研究院赖茂祥研究员鉴定为姜科姜黄属毛郁金
(Curcuma aromatica Salisb.)的根茎。
1.1.2 实验动物
  SD大鼠,雄性,48只,体重(160±10)g,广西医
科大学实验动物中心提供(试验动物生产许可证:
SCXK桂2003-0003,试验动物使用许可证:SYXK桂
2003-0005)。
1.1.3 饲料
  基础饲料:广西医科大学实验动物中心提供。
  高脂饲料:配方为77.5%普通饲料、10%猪油、
2%胆固醇、0.5%胆酸钠、10%蛋黄粉,由江苏协同生
物科技有限公司制作,生产批号:20140715。
  高脂乳剂:由30%猪油、20%胆固醇、10%脱氧
胆酸钠、10%吐温80配制而成[15]。
1.1.4 实验药品
  辛伐他汀片(江苏黄河药业股份有限公司,批准
文号:国药准字 H20067793,生产批号:140407,规
格:10mg/片)。胆固醇、脱氧胆酸钠、蛋黄粉(上海
瑞永生物科技有限公司,批号分别为 20140423,
20140312,20140720)。
1.1.5 实验仪器
  AU600全自动生化仪(日本Olympus公司),低
温离 心 机 (Alegra64Rcetrifuge 型,美 国 BECK-
MAN),分析天平(北京赛多利斯仪器系统有限
公司)。
1.2 方法
1.2.1 毛郁金乙醇提取物的制备
  在前期优化基础上,称取毛郁金粗粉,5倍量无
水乙醇为提取溶剂,回流提取3次,每次1.5h,合并
滤液,减压回收乙醇,浸膏以0.5%羧甲基纤维素钠
作为分散提取物,配制成生药浓度为3g·mL-1,2
g·mL-1,1g·mL-1的混悬液,分别为毛郁金高、
中、低给药剂量(18g·kg-1,12g·kg-1,6g·kg-1)
组药液。
1.2.2 脂肪乳剂的制备
  取30g猪油置200mL的烧杯中,在电磁炉上加
热,当温度升到100℃时,加入20g胆固醇,溶化后充
分搅匀,然后加入10mL吐温80,制备成油相。同时
在另一个烧杯中加30mL蒸馏水,于电磁炉上加热
到60℃左右,加入10g脱氧胆酸钠,充分搅拌直至完
全溶解,制备成水相,然后将水相加入油相,混匀,即
制成脂肪乳剂。
131广西科学 2015年4月 第22卷第2期
DOI:10.13656/j.cnki.gxkx.20150508.001
1.2.3 高脂大鼠模型制备与分组
  雄性大鼠48只,将大鼠适应性喂养5d后,随机
分成6组,每组8只,分别为正常组,模型组,阳性药
辛伐他汀组(10mg·kg-1·d-1),毛郁金高、中、低
剂量 (18g·kg-1 ·d-1,12g·kg-1 ·d-1,6
g·kg-1·d-1)组。给药组和模型组分别给予高脂
饲料喂养,同时每天上午给予脂肪乳剂灌胃(10
mL·kg-1),正常对照组大鼠只给予基础饲料。喂养
3周后,眼眶静脉丛采血,自动生化仪检测血清中总
胆固醇(CHOL),三酰甘油(TG),高密度脂蛋白
(HDL-C)和低密度脂蛋白(LDL-C)的水平,以高脂
饲料喂养组大鼠较正常组大鼠血脂明显升高为成模
标准 (P<0.05)。高脂模型建成后,阳性药辛伐他汀
组、毛郁金各给药组均每日灌胃给药,给药容积均为
0.6mL/100g体质量,正常对照组和高脂模型组同
时灌胃等体积蒸馏水,每日1次,连续给药3周。正
常对照组、高脂模型组及各给药组大鼠均喂饲基础饲
料。
1.2.4 测定指标与方法
1.2.4.1 血清指标与测定方法
  每日称重记录大鼠进食量,每周称重记录各组大
鼠体重,便于调整给药剂量。血清指标与测定方法:
大鼠禁食不禁水12h,眼眶静脉丛采血,静置后于
4℃以3500r/min离心10min分离血清。用自动生
化仪检测CHOL、TG、HDL-C和LDL-C指标。
1.2.4.2 数据处理
  各项数据均采用SPSS软件进行检验分析,数据
采用均数±标准差(珚x±SD )表示,两组间比较用t
检验,P <0.05显著差异或P <0.01非常显著差
异,具有统计学意义。
2 结果与分析
  经过高脂饲料喂养同时灌胃高脂乳剂3周后,与
造模前比较,造模后大鼠血清CHOL,TG及LDL-C
指标均显著上升(P<0.01),HDL-C指标显著下降
(P<0.01),说明大鼠已经形成高脂血症,大鼠高脂
模型建立成功(见表1)。
  对正常对照组和高脂模型组大鼠均灌胃等体积
蒸馏水3周后,与造模前相比,正常对照组大鼠的血
清各指标均有不同程度升高,但均无显著性差异。与
造模后相比,高脂模型组大鼠的血清TG降低(P<
0.05),其余各项指标降低均无显著性差异。对给药
组大鼠进行药物治疗后,辛伐他汀组CHOL、LDL-C
的含量均较高脂模型组显著性降低(P <0.01),
HDL-C显著上升(P<0.05),TG下降,但无显著性
差异。毛郁金乙醇提取液各给药组中,降低CHOL、
LDL-C含量的能力为高>中>低剂量组;而中剂量
组对降低TG含量、升高 HDL-C含量的效果优于高
剂量组,且对 HDL-C 含量的升高有显著性差异
(P<0.05);低剂量给药组降血脂效果不及高、中剂
量给药组;高、中、低给药组均对LDL-C的含量非常
显著降低(P<0.01)。表明毛郁金各给药组对大鼠
血清CHOL、TG和LDL-C含量有不同程度的降低,
同时 HDL-C含量表现出升高趋势(见表2)。
表1 建立高脂血症模型前后血脂比较(n=48,珔x±SD)
Table 1 Comparison of lipid level of rats before and after the establishment of high lipid model(mmol/L)
组别Groups 总胆固醇CHOL 三酰甘油TG 高密度脂蛋白 HDL-C 低密度脂蛋白LDL-C
造模前Before establishment  1.354±0.28  0.742±0.30  1.76±0.36  0.318±0.23
造模后After establishment  2.373±0.40** 1.988±0.14** 1.260±0.42** 0.970±0.31**
注:造模后与造模前比较,*P<0.05,**P<0.01。
Note:Comparison of the groups before and after establishment,*P<0.05,**P<0.01.
表2 毛郁金乙醇提取物对大鼠血脂水平的影响(n=8,珔x±SD)
Table 2 Effects of ethanol extract fromCurcuma aromatica on lipid level in the serum of rats(mmol/L)
组别Groups 总胆固醇CHOL 三酰甘油TG 高密度脂蛋白 HDL-C 低密度脂蛋白LDL-C
正常对照组Normal group  1.572±0.28  0.890±0.16  1.818±0.41  0.348±0.13
高脂模型组 High lipid model group  2.104±0.57** 1.840±0.44** 1.218±0.42** 0.912±0.26**
辛伐他汀组Simvastatin group  1.42±0.31## 1.832±0.51  1.603±0.65## 0.458±0.42##
高剂量组 High dose group  1.616±0.41# 1.477±0.49# 1.407±0.43  0.480±0.33##
中剂量组 Middle dose group  1.742±0.29# 1.410±0.52# 1.593±0.52# 0.518±0.27##
低剂量组Low dose group  1.855±0.64  1.792±0.36  1.362±0.39  0.577±0.22##
注:与正常组相比,*P<0.05,**P<0.01;与模型组相比,#P<0.05,##P<0.01。
Note:Compared with the normal group,*P<0.05,**P<0.01;compared with the high lipid model group,#P<0.05,##P<0.01.
231 Guangxi Sciences,Vol.22No.2,April 2015
3 讨论
  本实验以现代医学理论作为指导原则,通过对大
鼠喂饲高脂饲料同时灌胃脂肪乳剂的方法,成功建立
高脂血症模型,该模型与人类因膳食结构改变而形成
的高脂血症相似,可研究环境因素对高脂血症形成的
影响,并可评价调血脂药物的药理作用[16]。高脂动
物在停止高脂饲料干预后,由于自身调节作用,可能
会有改善血脂症状并达到自愈水平的情况,而根据文
献,大鼠给予高脂饲料喂养3周形成非常明显的高脂
血症后,停止高脂饲料干预的第22天,高脂模型组动
物仍出现高脂血症及脂肪肝,在此期间给药,仍能说
明药物对高血脂的治疗作用[17]。本实验中高脂模型
组大鼠在停止高脂饲料干预3周后,与造模后相比,
血脂指标CHOL、HDL-C和LDL-C的含量有不同程
度下降,但均无显著性差异,尽管 TG 水平降低
(P<0.05),但与同期正常对照组相比仍然是升高
的水平,且具有非常显著性差异(P<0.01),说明大
鼠高脂模型仍然成立。本实验通过喂饲高脂饲料同
时灌胃高脂乳剂的方法,结合比较成熟的饲料配方,
可能是高脂大鼠保持血脂稳定的因素之一。
  现代药理学认为,血浆LDL的水平和动脉粥样
硬化疾病呈明显正相关,判定是引起动脉粥样硬化的
因素之一。HDL-C可以阻止胆固醇在动脉壁的沉
积,能拮抗动脉粥样硬化的产生,降低冠心病的发病
率,因此将 HDL-C胆固醇称为好的胆固醇;LDL-C
的氧化修饰可转换为泡沫细胞,这被判定为动脉粥样
硬化的早期重要特征,所以LDL-C胆固醇被称为坏
的胆固醇[18]。根据本实验可知,毛郁金乙醇提取物
各给药组对大鼠血清CHOL、TG均有降低能力,并
可升高 HDL-C的含量,对降低高脂大鼠血清中LDL-
C的含量均具有非常显著性差异(P <0.01),说明
毛郁金对动脉粥样硬化有一定的预防及治疗作用,对
高脂血症大鼠有降血脂作用。
4 结论
  本实验通过建立高脂血症大鼠模型,分别给予
高、中、低剂量的毛郁金乙醇提取物,研究表明毛郁金
乙醇提取物可有效降低大鼠CHOL、TG和LDL-C
的含量,并提高 HDL-C含量,对高脂大鼠有降血脂
作用。毛郁金发挥降血脂作用的活性物质及作用机
制尚未明确,后期还需进行相关活性部位筛选和活性
成分研究,以及降血脂作用机理研究,为进一步开发
利用毛郁金药材提供依据。
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(责任编辑:陆 雁)  
431 Guangxi Sciences,Vol.22No.2,April 2015