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第 1 3 卷 第 6 期
2011 年 6 月
辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 13 No. 6
Jun .，2011
凤尾草提取工艺研究
吕津京
（解放军总医院药品保障中心中药房，北京 100853）
摘 要：目的：采用正交试验考察凤尾草醇水双提最佳工艺。方法：通过L18（2×37）正交试验考察醇提次数、
时间、温度、水提温度、料液比等影响因素，用UV法测定提取液中总黄酮含量，并结合出膏率综合评分，其中两者的
权重系数分别为0.6和0.4，最终获得最佳提取工艺。结果：先用20倍60%乙醇在70℃下提取2次，每次3h，再将药渣
以20倍量水在90℃下提取1.5h，总黄酮提取率可达5.55%，出膏率为38.6%。结论：采用此工艺提取效果佳且稳定性
较好。
关键词：凤尾草；提取工艺；正交试验；方法学考察
中图分类号：R122.11 文献标识码：A 文章编号：1673-842X (2011) 06- 0241- 03
收稿日期：2010-12-12
作者简介：吕津京（1981-），女，药师，研究方向：中药化学成分分析。
凤 尾 草 系 蕨 类 植 物 凤 尾 蕨 科 凤 尾 草（Pteris
multifida Poir）的全草或根茎，又名井栏边草（《中国
高等植物图鉴》），凤尾蕨（《浙江药用植物志》），金鸡
尾、腊肾草（《四川中药志》）等。《履巉岩本草》载有
小金星凤尾草，所附药图即今凤尾蕨科凤尾草 Pteris
multifida Poir。《植物名实图考》云：“凤尾草生山石
及阴湿处，有绿茎、紫茎者。一名井阑草，或谓之石
长生。”所附之图亦系本种。《纲目》石草类所绘的
石长生图也与本种相似。具有清热利湿、止泻止带、
通淋退黄作用，临床常可单用取效，用于湿热所致的
泄泻，痢疾，小便淋浊，女子带下，黄疸诸症 [1]。现代
临床治疗痢疾、扁桃体炎、肝炎、糖尿病以及抗肿瘤
等效果较好。
到目前为止，已有独以醇或水作为溶媒对凤尾
草进行提取的工艺研究，但提取液中以总黄酮为含
量指标的测定结果均较低。另外，凤尾草虽在临床
上治疗效果较好，但其有效部位或有效成分尚未明
了，这就有必要将其中所含的成分尽可能提取出来，
以作进一步研究。因此，文章采用正交试验对凤尾
草醇水双提工艺进行探讨，以期为工业生产及后续
药理学研究等提供更加科学合理的理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
凤尾草，购自成都市荷花池药材市场，除去杂
质，剪碎，烘干。
1.2 仪器与试剂
BP211D 型电子分析天平（德国 Sartorius 公司，
感量 0.01mg），BS200S-W 型电子天平（北京赛多利
斯天平有限公司，感量 1mg），JJ500 型精密电子天平
（美国双杰兄弟有限公司），UV1100 型分光光度计
（上海天美科学仪器有限公司），电热恒温水浴锅（北
京长安科学仪器厂），RE-52A 型旋转蒸发仪（上海
亚荣生化仪器厂），1010-2 型电热鼓风干燥箱（上海
实验仪器厂有限公司）；芦丁对照品（成都市药品检
Study on Extraction Technology of Pteris Multifida Poir
LU Jin-jing
（Dispensary of Traditional Chinese Medicine，PLA General Hospital，Beijing 100853，China）
Abstract：Objective：To investigate the best technology about extracting Pteris multifida Poir with
ethanol and water by orthogonal experimental design. Methods：Several of factors，such as the frequency，
time，and temperature when extracting with ethanol，and the temperature，the ratio of the drug and water
when extracting with water，were investigated by orthogonal experimental design as L18（2×37），and the
content of total flavonoids was determined by UV method，then the best extraction technology was gained by
scoring synthetically associating with drier electuary proportion. The proportion of them were 0.6 and 0.4.
Results：At first，the Pteris multifida Poir was extracted at the temperature of 70℃，2 times，3 hours per time
with 60% ethanol by 20 times，then at the temperature of 90℃，1.5 hours with water by 20 times. The extraction
rate of total flavonoids was 16.66%，and the drier electuary proportion was 38.6%. Conclusion：The
extraction effect was good by using the best extraction technology and the stabilization was nice.
Key words：Pteris multifida Poir; extraction technology; orthogonal experimental design; methodology
validation
· 方药纵横 ·
DOI：10.13194/j.jlunivtcm.2011.06.243.lvjj.087
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辽 宁 中 医 药 大 学 学 报 1 3 卷
验所，批号：100080-200707）；乙醇、亚硝酸钠、硝酸
铝、氢氧化钠等试剂均为分析纯；实验用水为蒸馏
水。
1.3 方法
1.3.1 方法学考察
（1）标准曲线绘制：采用NaNO2-Al（NO3）3-NaOH
光度法 [2]。精密称取芦丁对照品 10.0mg，置 50mL
容量瓶中，加 60% 乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即
得对照品溶液。精密吸取此对照品溶液 0、1.0、2.0、
4.0、6.0、8.0、10.0mL，分别置 25mL 容量瓶中，各加入
5% 的 NaNO2 溶 液 1mL，摇 匀，放 置 6min，加 10% Al
（NO3）3 溶液 1mL，摇匀，放置 6min，再加入 4% NaOH
溶液 10mL，用 60% 浓度的乙醇稀释至刻度，摇匀后
放置 15min。以第一管作空白，分别在 510nm 波长
处测定吸光度，以吸光度（A）为纵坐标，芦丁标准溶
液的浓度（mg/mL）为横坐标绘制标准曲线。线性
回归方程为：A=13.097C-0.0037，r=0.9999。结果表
明，芦丁质量浓度在 0.0077~0.0773mg/mL 范围内与
吸光度成线性关系。
（2）精密度试验：精密吸取对照品溶液 5mL，
共 5 份，分别置 25mL 量瓶中，按标准曲线项下方法
平行操作显色，于 510nm 波长处测定吸收度，结果
RSD=0.50%，说明仪器精密度较好。
（3）重 复 性 试 验：取 同 批 凤 尾 草 药 材 干 品
10.0g，共 6 份，以最佳工艺提取制备供试品溶液，按
1.3.2 项下方法平行操作显色，于 510nm 波长处测定
吸收度，结果 RSD=1.79%，表明重复性良好。
（4）稳定性试验：精密吸取同批供试品溶液，
按 1.3.2 项下方法平行操作显色，在 10、20、40、60、
80、100min 时 于 510nm 波 长 处 测 定 吸 收 度，结 果
RSD=0.33%，表明供试品溶液在 10~100min 内稳定。
（5）加样回收试验：精密称取 6 份已知总黄酮
含量的凤尾草干品 0.1g，分别加入干燥至恒重的芦
丁对照品适量，以最佳工艺提取制备供试品溶液，按
1.3.2 项下方法测定总黄酮含量，计算总黄酮含量，
见表 1。
表 1 加样回收试验结果（n=6）
取样量
（g）
样品含量
（mg）
加入量
（mg）
测得量
（mg）
回收率
（%）
RSD
（%）
0.1068
0.1005
0.1008
0.1014
0.1003
0.1048
17.79
16.74
16.79
16.89
16.71
17.46
16.85
16.96
16.73
16.77
16.52
16.21
34.38
33.63
33.58
33.24
32.83
33.39
98.44
99.57
100.32
97.47
97.55
98.27
1.15
1.3.2 凤尾草提取液中总黄酮含量的测定
准确称取凤尾草干品 10.0g，按正交试验设计各
项下工艺提取，提取液最终调整为 500mL。准确吸
取待测凤尾草提取液 0.3mL，用蒸馏水稀释至 5mL，
转移至 25mL 容量瓶中，加入 5% 的 NaNO2 溶液 1mL，
摇匀，放置 6min，加 10%Al（NO3）3 溶液 1mL，摇匀，
放置 6min，再加入 4%NaOH 溶液 10mL，用 60% 浓度
的乙醇稀释至刻度，摇匀后放置 15min。平行空白，
在 510nm 波长处测定吸光度，计算凤尾草中总黄酮
含量。
总黄酮含量（%）＝ 总黄酮质量 ×100%
凤尾草干品质量
1.3.3 出膏率测定
准确量取 50mL 提取液于坩埚内，挥干，105℃
下烘至恒重，称重，通过体积换算得干膏总重，计算
凤尾草的出膏率。
出膏率（%）＝ 干膏净重 ×100%
凤尾草干品质量
2 结 果
2.1 正交设计方案与结果
根据文献报道 [3-4] 并结合前期实际考察，醇
提部分的影响因素有提取次数、醇浓度、提取时间、
提取温度及料液比，水提部分的影响因素有提取时
间、提取温度、料液比，为此选择 L18（2×37）混合水
平表安排试验，见表 2。以总黄酮含量及出膏率作
为衡量提取效率的双重客观指标，优选最佳工艺。
根据总黄酮含量（x）和出膏率（y）的作用，确定两
者的权重系数分别为 0.6 和 0.4，对两项指标进行加
权求和，通过公式 z ＝ 0.6x ＋ 0.4y，就得到综合评分
（z），结果见表 3。
表 2 因素水平表
水平提取次数A（次）
醇浓度
B（%）
醇提提取
时间 C（h）
料液
比 D
提取温度
E（℃）
提取时
间 F（h）
水提料
液比 G
提取温
度 H（℃）
1
2
3
1
2
50
60
70
1
2
3
1：10
1：15
1：20
50
60
70
1.5
2
2.5
1：10
1：20
1：30
70
80
90
表 3 正交试验表
试验号 A B C D E F G H 总黄酮含量（%）
出膏率
（%） 综合评分
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
1
1
1
1
1
1
1
1
1
2
2
2
2
2
2
2
2
2
1
1
1
2
2
2
3
3
3
1
1
1
2
2
2
3
3
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
2
3
1
3
1
2
2
3
1
3
1
2
1
2
3
2
3
1
1
2
3
3
1
2
3
1
2
2
3
1
1
2
3
2
3
1
3
1
2
2
3
1
1
2
3
3
1
2
1
2
3
3
1
2
2
3
1
2
3
1
3
1
2
1
2
3
1
2
3
3
1
2
3
1
2
1
2
3
2
3
1
2
3
1
2.37
3.83
5.12
3.87
4.36
4.11
3.77
3.93
3.62
5.02
3.98
4.60
4.41
4.10
4.15
3.33
4.51
4.05
21.7
31.8
34.8
31.2
28.6
34.8
29.0
28.4
27.9
31.5
33.3
33.9
35.2
29.7
33.6
30.8
34.2
31.0
52.40
81.02
99.53
80.84
83.54
87.73
77.10
78.34
74.11
94.66
84.53
92.48
91.66
81.81
86.80
80.57
91.77
82.72
K1 79.40 84.10 79.54 78.41 77.72 82.40 77.48 79.74
K2 87.44 85.40 83.50 84.75 83.34 82.53 86.51 83.27
K3 80.77 87.22 87.11 89.21 85.34 86.27 87.26
R 8.04 4.63 7.68 8.70 11.49 2.94 9.03 7.52
2.2 正交试验结果分析
由表 4 分析可知，各因素对提取结果的影响程
度依次为：A>E>G>D>C>H>B>F。即醇提次数影响
最大，其次是醇提温度和水提料液比；而水提时间
的影响程度是最低的，为次要因素，因此，考虑到生
产的成本、水提时间选择 1.5h。由此得出最佳工艺
为 A2B2C3D3E3F1G2H3，即先用 20 倍 60% 乙醇在 70℃
下提取 2 次，每次 3h，再将药渣以 20 倍量水在 90℃
下提取 1.5h。按此理论最佳工艺进行扩大验证试验，
总黄酮提取率可达 5.55%，出膏率为 38.6%，试验结
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花类原色植物浸制标本不仅在教学科研中
有着很重要的作用，而且在标本陈列、展示和艺
术观赏等方面也有着重要的价值。由于植物体
内含有的化学成分复杂，其化学变化规律难以掌
握，给研究果实类植物浸制标本的制作方法带来
了很大的困难，所以在这方面的研制方法进展比
较缓慢。目前，在国内外公开发表的刊物上尚未
查找到系统研究的文字报道。我们对药用植物紫
色花类和药用植物红色花原植物浸制标本制作
方法进行了研究，取得了一定的近展。现将结果
报道如下。
1 仪器与试剂
实验工具：标本瓶，烧杯，量筒，玻璃棒，剪刀，
镊子，不锈钢盆，三脚架，石棉网，裁纸刀，2~3mm 厚
的透明玻璃片，玻璃刀。
实验试剂：醋酸铜，硫酸铜，甘油，亚硫酸，氯化
铜，酒精，甲醛，硼酸，95% 乙醇，硼酸，固体氯化钠，
石蜡，蒸馏水（或冷开水）。
2 方法与结果
2.1 红色花类原植物浸制标本的制作方法[1-2]
2.1.1 标本的采集
采集标本的花要新鲜、无病虫危害和机械损
药用植物紫色和红色花保色技术研究
徐秋阳 1，许亮 2，翟延君 2，王荣祥 2
（1.辽宁省药品检验所，辽宁 沈阳 110023；2.辽宁中医药大学，辽宁 大连 116600）
摘 要：文章对药用植物紫色花和药用植物红色花原色植物浸制标本制作方法进行了研究，结果表明红色刺梅
花原色浸制标本和紫色甘草花原色浸制标本取得了成功。这一研究成果对提高教学质量、科学研究、标本陈列与展
示，以及艺术观赏等方面都将起到重要的作用。
关键词：花类标本；保色技术；药用植物
中图分类号：R282.71 文献标识码：A 文章编号：1673-842X (2011) 06- 0243- 02
收稿日期：2010-12-22
基金项目：辽宁中医药大学青年药学人才基金项目（YXRC0920）
作者简介：徐秋阳（1978-），女，辽宁沈阳人，主管药师，研究方向：中药质量研究。
通讯作者：王荣祥（1951-），男，辽宁沈阳人，教授，研究方向：中药鉴定学教学与科研。
Study on Keeping Color Technology in Purple and Red Flowers Medicinal Plants Specimen
XU Qiu-yang1，XU Liang2，ZHAI Yan-jun2，WANG Rong-xiang2
（1. Liaoning Drug Inspection Office，Shenyang 110023，Liaoning，China；2. Liaoning
University of Traditional Chinese Medicine，Dalian 116600，Liaoning，China）
Abstract：The keeping color technology about purple and red flowers of medicinal plants specimen
have been studied. The results show that red and purple flower specimens was successful. This research
results to improve the quality of teaching，scientific research and specimens，and art exhibition and display
ornamental all aspects will play an important role.
Key words：flowers specimen；protect color technology；medicinal plants
果一致。
表 4 方差分析表
变异来源 平方和 自由度 均方 F 值 显著性
A
B
C
D
E
F
G
H
误差
291.128
68.433
177.464
242.916
396.579
33.305
317.492
169.485
78.302
1
2
2
2
2
2
2
2
2
291.128
34.216
88.732
121.458
198.290
16.653
158.746
84.743
39.151
7.436
0.874
2.266
3.102
5.065
0.425
4.055
2.165
显著
显著
显著
3 讨 论
采用此正交试验得出的最佳工艺，能使凤尾草
提取后总黄酮含量达到 5.55%，出膏率达到 38.6%，
与已见相关文献报道中单用醇或水作为溶媒提取
之总黄酮含量比较，有极大的提高。同时，凤尾草
中所含成分以此工艺被更充分地提取出来，对于之
后药效学研究的科学性、准确性有着十分重要的意
义。◆
参考文献
[ 1 ] 国家中医药管理局《中华本草》编委会 . 中华本草 [ M ] .2 册 . 上
海：上海科学技术出版社，1999：122-123.
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2008，17 ( 16 )：28-29.
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[ J ] . 中成药，2007，29 ( 11 )：1683-1685.
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件研究 [ J ] . 食品科学，2008，29 ( 8 )：286-288.