作 者 :罗志姣
期 刊 :河南农业大学 2009年 05期 页码:51
关键词:双孢蘑菇;褐变;多酚氧化酶;基因克隆;半定量RT-PCR;原核表达;
摘 要 :多酚氧化酶是催化褐变的关键酶,而褐变是双孢蘑菇采后对商品品质影响最大的品质劣变之一。克隆双孢蘑菇褐变相关基因,是实现蘑菇抗褐变定向育种的一项重要的基础研究工作。本研究用双孢蘑菇2796为试样,采用RT-PCR、RACE法克隆了来自于双孢蘑菇子实体褐化相关的PPO基因,并使其在大肠杆菌中做表达。对其基因进行同源性比较和序列分析。论文包括了三部分实验: (1)双孢蘑菇多酚氧化酶PPO基因的克隆及氨基酸序列测定:设计codehop引物克隆了PPO基因cDNA片段,并根据获得的序列信息,用cDNA末端快速扩增(RACE)方法从双孢蘑菇中克隆到了两个PPO同源基因的cDNA全长,将其命名为AbPP...