全 文 ：　收稿日期:2008-05-16
　　文章编号:1004-4337(2008)05-0593-02　　　中图分类号:R927.2　　文献标识码:A · 药学研究 ·
紫外分光光度法测定紫云英蜜中总酚的含量
张赛群　　梁　妍　　杨　杰　　彭　佼　　朱　洁
(贵阳医学院药学院　贵阳 550004)
摘　要:　目的:建立紫云英蜜中总酚含量测定方法。方法:采用 Folin-酚法 ,样品经福林试剂显色反应后 ,紫外-可见分光光度计
测定其总酚含量。结果:总酚在 2.03～ 8.04μg·mL-1内线性良好 , r=0.9997 ,且平均回收率为 102.42%, RSD=2.64%(n=5)。结
论:该方法准确 ,简便 ,重现性好 ,专属性强 ,可有效地控制紫云英蜜的质量。
关键词:　肖公蜜;　总酚;　Folin-酚法;　紫外分光光度法
　　紫云英蜜又名红花草蜜或草子蜜 , 具有大自然清新宜人
的草香味 ,甜而不腻 , 鲜洁清甜 , 色泽为浅琥珀色。富含多糖 、
多酚 、氨基酸 、维生素 、微量元素等多种营养成分 , 长期饮用可
补气血 ,健脾胃 , 增强抗病能力 , 强身健体。且其中的多酚酸
具有抗病原微生物 、抗炎症 、抗变态反应 、抗心血管疾病和抗
氧化等作用[ 1 ,2] 。为了控制产品质量 , 我们采用 Fo lin-酚法对
贵州不同产地的紫云英蜜中总多酚含量进行了研究。
1　仪器与试药
1.1　仪器
紫外可见分光光度计(岛津-2401);超声波清洗仪(昆山市
超声仪器有限公司 KQ-2508 型);恒温水浴锅(余姚市亚星仪
器仪表有限公司)。
1.2　试药
原儿茶酸对照品(批号:110809-200503);钨酸钠 , 磷钼酸 ,
85%磷酸 , Na2CO 3 ,以上试剂均为分析纯;水为蒸馏水;
1.3　福林试剂的配制[ 3] :
称取钨酸钠 40 g , 磷钼酸 8 g 和 85%磷酸 20 m L , 溶于
300 ml蒸馏水 ,煮沸加热回流 2 h ,冷却 , 稀释至 400 m L , 置于
棕色瓶中保存。
1.4　Na2CO 3 溶液的配制
称取 15 g Na2CO3 ,溶于 200 mL 蒸馏水中 , 即为 75 g ·
L-1Na2CO3 溶液。
2　方法与结果
2.1　对照品溶液的制备
原儿茶酸对照品的配制:称取原儿茶酸对照品 15.80 mg
于 50 mL 容量瓶中 , 蒸馏水溶解并定容 , 摇匀 , 备用 , 浓度为
316 μg ·mL-1 。
2.2　供试品溶液的制备
取同一批样品 ,精密称定 , 置于 50 m L 容量瓶中 , 超声使
溶 ,过滤 , 取 20 mL 续滤液定容成 50 mL ,摇匀 , 备用。
2.3　测定方法
精密吸取适量样品溶液 1 m L于 10 mL 带塞离心管中 ,加
入 2.5 m L 福林试剂 , 放置 5 min , 再精密加入 Na2CO 3 溶液
2m L , 50℃水浴保持 5 min , 再取出室温放置 2 h , 于 760 nm 左
右测定吸光度值。
2.4　标准曲线的制备
从原儿茶酸标准储备液中分别吸取 1 , 1.5 , 2 , 2.5 , 3 , 3.5
mL 于 25 mL 容量瓶中 , 蒸馏水稀释定容 , 摇匀 , 浓度分别为
12.64μg ·mL-1 , 18.96 μg · mL-1 , 25.28 μg · mL-1 , 31.60
μg·m L-1 , 37.92 μg · mL-1 , 44.24 μg ·m L-1 , 分别从中精
密吸取 1 mL , 按 2.3 测定方法反应 , 测定吸光度值。以终浓
度为横坐标 ,吸光度值为纵坐标 , 得回归方程为 Y =0.0932X
- 0.0315 , r=0.9997。结果表明总酚在 12.64 μg · mL -1 ～
44.24μg ·mL-1范围内线性良好。
2.5　精密度试验
取同一份对照品按上述反应后连续测定 5 次 , 吸光度值
RSD=0.386%。结果表明仪器精密度良好。
2.6　样品吸光度值稳定性试验
按 2.2 供试品溶液制备方法制备样品液 , 并按 2.3 测定
方法反应后 ,每隔5 min 测定一次 ,观察吸光度值变化 , 结果1h
内的吸光度值 RSD=1.42%, 结果见图1。结果表明样品显色
后在 1 h 内较稳定。
2.7　重现性试验
取同一批样品 , 平行 5 份 , 精密称定 , 按供试品溶液法制
备 ,并按 2.3 测定法反应。 结果表明 , 样品的平均含量为
2.154 mg · g-1 , RSD=3.43%。结果表明方法重现性良好。
2.8　加样回收率试验
取同一批样品 , 精密称定 , 精密加入 337 μg ·m L-1原儿
茶酸对照品 2 mL , 按供试品溶液法操作 , 并按2.3 测定样品中
总酚的含量 ,结果表明 ,其回收率为 102.42%, RSD=2.64%,
数据见表 1。
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数理医药学杂志 2008 年第 21 卷第 5 期
图 1　样品显色稳定性试验结果
表 1　总酚加样回收率试验结果(n=5)
称样量
(g)
样品中多
酚平均含
量(mg· g -1)
加入对
照品量
(mg)
测定量
(g)
回收率
(%)
平均回
收率
(%)
RSD
(%)
0.6700 0.674 1.249 99.59
0.7022 0.674 1.282 100.37
0.6512 2.15 0.674 1.254 102.81 102.42 2.64
0.6541 0.674 1.282 106.52
0.6953 0.674 1.254 102.81
2.9　样品含量测定
分别精密称取贵州不同产地的样品 ,每批平行取 5 份 , 按
2.3 测定方法操作 , 测定每批样品中总酚平均含量。 结果见
表 2。
表 2　不同批次样品总酚含量(n=5)
样品名称 总酚平均含量(mg· g -1) RSD(%)
紫云英蜜(安顺) 0.492 3.01
紫云英蜜(贵阳) 1.208 2.13
紫云英蜜(兴义) 1.275 2.63
紫云英蜜(遵义) 0.713 1.66
紫云英蜜(都匀) 0.475 3.22
紫云英蜜(凯里) 1.932 3.12
3　讨论
植物多酚的测定方法有多种[ 3 , 4] , 曾考察普鲁士蓝法[ 5] 、
重氮比色法[ 6]等 , 均因为方法显色不稳定或方法步骤复杂而
未采用。而 Folin-酚法实验操作较简单 , 且结果稳定可靠 , 故
选用该方法作为紫云英蜜中总酚含量测定方法。
参　考　文　献
1　徐铮奎.植物多酚———有待开发的医药新产品“金矿” .中国制药
信息 , 2003 , 19(8):15～ 17.
2　曹炜 ,索志荣.Folin-Ciocal teu比色法测定蜂蜜中总酚酸的含量.
食品与发酵工业 , 29(12):80～ 82.
3　石碧 , 狄莹.植物多酚.北京:科学出版社 , 2000:19～ 21.
4　田文礼 ,孙丽萍 ,董捷 ,等.Folin-Ciocalteu 比色法测定蜂花粉中的
总酚.食品科学 , 2007 , 28(2):258～ 260.
5　刘清 ,李俊清 , 廖蓉苏.普鲁士兰法测定胡杨中植物多酚含量.林
业科技开发 ,2007 , 21(2):42～ 44.
6　李楠 , 秦学孔 , 彭辉.茶多酚含量重氮化-偶合分光光度法测定.
大连理工大学学报 , 2000 , 40(4):425～ 427.
Determination of the Content of Total Hydroxybenzene for Ziyunyingmi by UV
Zhang Saiqun , et al
(School o f Pharmacology ,Guiyang Medical Col lege ,Guiyang 550004)
Abstract　Objective :To establish a UV method fo r dete rminat ion of the content of to tal hydroxybenzene
fo r Ziyunyingmi.Method:Folin-Denis w as adopted of determining the content of total hydroxybenzene by
UV.Result:The to tal hydroxybenzene show ed a good linear relationship at 2.03 ～ 8.04 μg · mL-1 , r =
0.9997 , the average recovery w as 102.42 %, RSD =2.64 %(n=5).Conclusions:The method is accurate
and simple w ith good reproducibi li ty , and can contro l the quali ty of this preparat ion effectively .
Key words　 ziyunyingmi;to tal hydro xybenzene;Folin-Denis;UV
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Journal o f Mathematical Medicine Vo l.21　　 No.5　　 2008